病毒检测技术及应用ppt课件

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计算机病毒的检测方法(共19张PPT)

1.4 比较法
比较法是用原始的或正常的文件与被检测的文件进行比较。
长度比较法
一般对磁盘进行病毒检测时，要求内存中不带病毒，因为某些计算机病毒会向检测者报告假情况。
内容比较法如果检索5000种病毒，必须对5000个病毒特征代码逐一检查。
例如4096病毒在内存中时，查看被它感染的文件长度时，不会发现该文件的长度已发生变化，而当在内存中没有病毒时，才会发现文件长度已经增加了4096字节。
计算机病毒的检测方法
计算机病毒进行传染，必然会留下痕迹
。检测计算机病毒，就是要到病毒寄生场所去检查，发现异常情况，并进而验明“ 正身”，确认计算机病毒的存在。病毒静态时存储于磁盘中，激活时驻留在内存中。
因此对计算机病毒的检测分为对内存的检测和对磁盘的检测。
一般对磁盘进行病毒检测时，要求内存中不带病毒，因为某些计算机病毒会向检测者报告假情况。
可以发现那些尚不能被现有的查病毒程序发
现的计算机病毒。因为病毒传播得很快，新病
毒层出不穷，由于目前还没有做出通用的能查
出一切病毒，或通过代码分析，可以判定某个一般对磁盘进行病毒检测时，要求内存中不带病毒，因为某些计算机病毒会向检测者报告假情况。
可以发现那些尚不能被现有的查病毒程序发现的计算机病毒。
缺点
不能识非文件内容改变的惟一的排他性原因，文件内容的改变有可能是正常程序引起的，所以校验和法常常误报警。
会影响文件的运行速度
当已有软件版本更新、变更口令或修改运行参数时，校验和法都会误报警。
校验和法对隐蔽性病毒无效:
隐蔽性病毒进驻内存后，会自动剥去染毒程序中的病毒代码，使校验和法受骗，对一个有毒文件算出正常校验和。
有的特征搜集在一个病毒码资料库中，简称“病毒库”

(精品)新发呼吸道传染病的病原体检测技术及应用课件

定量值的计算
1、确定未知样品德CT值 2、通过标准曲线由未知样品的CT值算出其初始量
多重（RT-）PCR或多重荧光（RT-）PCR
RV15 OneStep ACE Detection （Seegene）
• 原理：扩增不同片段大小的目的产物对应着不同靶点（病毒）。
病原体组合
多重Real-time (RT-)PCR
•Addition to the previous reported two patients with drug-resistant mutation, 292K
mutant was also found in the sputa from other two patients, case No.8 and No.10 after
抗病毒治疗过程中咽拭子病毒载量：ECMO组患者阳性时间比其他两组持续更长
ECMO组
Mechanical Ventilation组
Pneumonia组
NA基因多位点变异和遗传多态性
野生株和耐药株 Reads数为K: R=5:1
建立针对NA R292K耐药突变的检测方法
单基因位点多态性（SNP） Taqman探针法
对已知传染病要尽快明确诊断对未知新发传染病要查病因
2020/11/19
呼吸道病毒实验室诊断技术的发展
模糊非扩增不敏感慢定性单一已知
明确扩增敏感快定量高通量未知
• 医疗需求---原动力 • 技术革命---推动力 • 跨学科交叉---加速力
诊断病毒学 Diagnostic Virology
• Highest number of deaths were in people in their late teens through mid 30’s

新冠病毒实验室检测+课件

抗体检测是通过检测人体内是否产生针对病毒的抗体来判断是否感染过病毒。抗体检测通常在病毒感染后2-3周内出现阳性结果，可以用于回顾性诊断和流行病学调查。抗体检测可以通过采集静脉血液标本进行检测。优缺点：抗体检测的优点是操作简便、检测时间短、样本易获取。但是抗体检测不能用于早期感染的诊断，因为抗体产生需要一定的时间。此外，抗体检测也有一定的假阳性率和假阴性率，需要结合临床症状和其他检查结果进行综合判断。应用场景：抗体检测主要用于确诊病例的回顾性诊断、流行病学调查和人群免疫水平的评估等场景。
新冠病毒实验室检测课件
汇报人：
202X-12-27
CATALOGUE
目录
新冠病毒概述新冠病毒实验室检测方法新冠病毒检测的流程与注意事项新冠病毒检测的挑战与未来展望新冠病毒检测的伦理与法规问题
01
新冠病毒概述
2019年12月，中国武汉出现不明原因肺炎病例。经过后续调查，科学家们从病例样本中检测到了新型冠状病毒。
发现
世界卫生组织将其命名为“严重急性呼吸综合征冠状病毒2”，简称新冠病毒。
命名
新冠病毒属于冠状病毒科，其形态为圆形或椭圆形，表面有凸起的冠状结构。
形态
基因组
宿主范围
新冠病毒基因组为单链RNA，长度约为30,000个核苷酸。
新冠病毒主要感染人类，但也有可能感染其他哺乳动物和鸟类。
03
02
01
人对人传播
假阳性与假阴性问题
由于检测方法的敏感性和特异性限制，可能会出现误报或漏报的情况。
03
降低成本
通过规模化生产和技术创新，降低检测试剂的成本，使其更易于在贫困地区和国家推广应用。
01
研发更快速、准确的检测试剂
通过改进技术手段和优化试剂配方，提高检测的敏感性和特异性，缩短检测时间。

诺如病毒标本处理和实验室检测技术方案PPT课件

• 1.2.1 设备和材料
• DEPC 水、新配制次氯酸盐（至少1%）或等效消毒剂、
MilliporeHA filter（孔径0.45um、）、换膜过滤器、真空
泵、计时器、PH 值酸度计、磁力搅拌器及转子、低温冰
箱（-20℃、-70℃）、Microsep 100K columns（PALL
公司）、Centriprep YM-50（Millipore 公司）、洗脱液
9
1 标本前处理
• 1.2.2.2 水样品的过滤
• （1）向玻璃漏斗里倒水样，当水样完全滤过立刻关闭真空泵。
• （2）用不锈钢的滤器夹，小心移开滤膜上的刻度漏斗。
• 1.2.2.3 用酸漂洗滤膜
• 将膜用无菌的镊子夹放在有200ml 0.05mM H膜2去SO除4（Mgp2H+3。.0）的无菌500ml 烧杯中进行漂洗滤
5
1 标本前处理
离心5 分钟，使得固体沉淀。澄清上清液可以直接用于病毒核酸提取或贮存于-70℃。 • （3）取澄清的上清液200ul 进行RNA 提取。
6
1 标本前处理
• 1.2 水
• 通过阴离子滤膜过滤水样品。用牛肉膏（1.5%w/v）含 0.05M 甘氨酸（pH9.0）缓冲液洗脱附在膜上的病毒。使用Microsep 100TM 或CentriconTM columns 离心管进一步浓缩便、呕吐物
1.2 水
1.3 环境涂抹样
1.4 食品
1.4.1贝类
1.4.2三文鱼
1.4.3草莓、蓝莓
1.4.4生菜和苗芽菜
4
1 标本前处理
• 1.1 粪便、呕吐物 • 1.1.1 设备和材料
微量移液器、无菌过滤器、漩涡振荡器、微量离心机、1.5ml 无菌离心管、磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）10mM pH7.0-7.4。 • 1.1.2 操作方法 • （1）离心管每管分装0.5mlPBS。用一次性移液管（或无菌棒）添加豌豆大小的粪便（约0.1 克），稀释成约10％至20％（重量/体积）的粪便悬浮液。当粪便样品是液态时，不必在PBS 中稀释，直接使用500ul 的样品。 • （2）漩涡振荡每个样品1 分钟。在5000 rpm 下

EB病毒感染的实验室诊断方法及合理运用PPT课件

3
EB病毒持续感染示意图
• 原发感染后， EBV 在人体B淋巴细胞建立潜伏感染，只表达潜伏抗原，受感染者成为终生病毒携带者
• EBV健康携带者咽部不定时排毒
• 在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的 EBV 可以被再激活，引起病毒复制及临床症状
Rev. Med. Virol. 2008; 18: 305–319
在罕见的病例中抗CA 抗体(IgM)会持续阳性
20-30% 的EBV新近感染抗 EA抗体（IgG）阴性
抗EBNA抗体(IgG)阴性
14
实验室指标四：EBV病毒核酸检测
• Real-time PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法，可以指导治疗和判断疗效，如PTLD/EBV-HLH/CAEBV等
• 人群感染率高，终身潜伏感染，具有感染-潜伏-活化的特性
• 肿瘤相关病毒，每年EBV相关肿瘤死亡病例达15-20万
• 与很多疾病相关，几乎可引起所有脏器和组织的相关疾病
• 细胞免疫非常重要
Khan G et al. Infectious Agents and Cancer, 2014, 9:38.
6
临床实践诊断EBV感染时需要回答的问题
• 是否感染EBV? • EBV感染的时相？ • 是否EBV活动性感染？ • 组织或器官中EBV感染的细胞定位如何？
7
EBV感染相关的实验室指标
• 血常规：淋巴细胞比例＞50%（学龄以上儿童）
• 嗜异凝集抗体 • 异型淋巴细胞
非特异性指标
• EBV特异性抗体
• 荧光定量PCR检测EBV核酸 • EBERs原位杂交实验：EBV感染受累的组织学证据
特异性指标

冠状病毒实验室检测ppt课件

A
1
ORF 1a
5,000
10,000
15,000
ORF 1b
20,000
E MN
S
25,000
30,000
B
20,001
8.3 kb
SARS-CoV
C
25,000
30,000
12 3 kB
X1 E
X3
9.0
M
N
6.0
5.0
S
X2
X4 X5
4.0
3.0
2.5
2.0
RNA 2
1.5
4.5 kb
RNA 3
H
17
A model of coronavirus evolution
CoVs in bats are the hypothesized gene pool of group 1 and group 2 CoVs and CoVs in birds are the hypothesized gene pool of group 3 CoVs.
•核酸检测：快速敏感
H
20
实验室检测在SARS诊断中的重要作用
• 潜伏期 1-12 天,平均 5-6 天,潜伏期内无传染性, 发病即有传染性 • 若将一个传染周期定在 5-6 天(平均潜伏期), 发病 5 天内能确诊病人, 则可能将疫情有效控制在 2 代病人以内
BSL-3
H
21
SARS的诊断标准
➢ 1951 年，Gledhill等分离出鼠肝炎病毒(Murine hepatitis virus,MHV)；
➢ 1965年，Tyrrell和 Bynoe首次在体外用人胎鼻和气管培养方法，从普通感冒病人鼻洗液中分离出一株病毒，命名为B814病毒。

《elisa检测技术》ppt课件(2024)

拓展ELISA检测技术在生物医学、环境监测、食品安全等领域的应用，推动相关产业的发展。
2024/1/28
22
06 ELISA实验操作技巧与注意事项
2024/1/28
23
实验前准备工作建议
01
仔细阅读试剂盒说明书，了解实验原理、操作步骤和注意事项。
2024/1/28
02
准备好所需的试剂、耗材和仪器，确保它们的质量和性能符合要求。
去除异常值、缺失值等，保证数据质量。
2024/1/28
数据转换
对数据进行对数转换、归一化等处理，以满足后续分析需求。
统计分析
采用t检验、方差分析等统计方法，对实验组和对照组数据进行比较，评估差异显著性。
13
结果解读与报告撰写
结果解读
根据统计分析结果，结合专业知识对实验数据进行解读，如判断样品中目标物质的含量是否超标
《elisa检测技术》ppt课件
2024/1/28
1
目录
2024/1/28
• ELISA检测技术概述 • ELISA实验方法与步骤 • ELISA实验数据分析与解读 • ELISA技术在生物医学领域应用 • ELISA技术挑战与发展趋势 • ELISA实验操作技巧与注意事项
2
01 ELISA检测技术概述
发展多重ELISA检测技术，实现对多个目标物的同时检测，提高检测效率。
20
新型ELISA技术发展趋势
数字化ELISA
利用微流控、微阵列等技术，实现ELISA检测的数字化、自动化和智能化。
免疫荧光ELISA
结合免疫荧光技术，提高ELISA检测的灵敏度和特异性。
化学发光ELISA

肝炎病毒的检测及其意义ppt课件

23
.
丙型肝炎病毒
传播途径检测方法
24
.
传播途径
丙型肝炎病毒主要经血液或血液制品传播，也可以通过皮下、黏膜或母婴传播。潜伏期为226周。
25
.
检测方法
抗体检测：丙型肝炎IgM型抗体主要用于预示HCV 感染病情的严重化和慢性化，不用于早期诊断。
丙型肝炎IgG型抗体一般于9-22周开始出现阳性，可持续数年。但也可见于一过性感染，抗-IgG始终阴性。
2.急性HBV感染趋向恢复
3+
-
+-
-
早期HBV感染或慢性携带者，传染力强
4+
-
+++
1.急性HBV感染，趋向恢复 2.慢性携带者
5+
+
-
-
-
1.亚临床型HBV感染早期 2.不同亚型HBV二次感染
乙肝五项结果分析少见模式
模表面表面 E E 核心式抗原抗体抗原抗体抗体
临床意义
6-
+
+-
6-
789-
表面抗体 +
-
+ +
E 抗原-ຫໍສະໝຸດ E 抗体-核心抗体
+
-
+
+
-
-
+
-
-
-
-
+
+
机率临床意义
5-15 1既往感染，仍有免疫力（IgG） 2非典型恢复型，急性HBV感染（IgM）
2-10 1.既往感染过 2.急性感染恢复 3.少数标本仍有传染性
5-10 1.既往感染过 2.急性感染窗口期

病毒运用到实例ppt课件

3
疫苗的临床应用
病毒作为载体的疫苗已经在一些传染病预防和治疗中得到应用，如埃博拉出血热、登革热等。
05
未来展望与挑战
未来病毒研究的展望
病毒基因编辑技术
随着CRISPR等基因编辑技术的发展，未来可能实现对病毒基因的精确编辑，为抗病毒治疗和疫苗研发提供新途径。
病毒进化研究
深入探究病毒的进化历程和变异机制，有助于预测病毒的传播趋势和制定有效的防控策略。
病毒的生命周期
总结词
病毒的生命周期包括吸附、侵入、复制、释放等阶段，对宿主细胞具有破坏作用。
详细描述
病毒通过吸附和侵入宿主细胞，利用宿主细胞的资源进行复制和繁殖，最终释放出新的病毒粒子。在这个过程中，宿主细胞会受到不同程度的破坏，严重时可能导致细胞死亡或疾病发生。
02
病毒的传播方式与影响
病毒的传播方式
以防数据被病毒感染或损坏时能及时恢复。
提高网络安全意识
不轻信陌生链接、邮件附件，不随意下载不明来源的文件。
限制网络访问权限
对计算机的网络访问权限进行合理配置，以减少病毒入侵的
风险。
检测和清除病毒的方法
定期全盘扫描
使用防病毒软件的全盘扫描功能，检测和清除
病毒。
隔离受感染文件
对于疑似受感染的文件，可以使用防病毒软件的隔离功能，防止病毒
加强疫苗和药物研发
加大投入力度，加速疫苗和抗病毒药物的研发进程，提高应对新发、突发病毒威胁的能力。
THANKS
感谢观看
病毒与宿主相互作用机制
研究病毒与宿主细胞之间的相互作用机制，有助于发现新的药物靶点，为抗病毒药物研发提供理论支持。
新兴技术对病毒研究的影响

(2024年)信息技术计算机病毒ppt课件

2024/3/26
不随意打开未知来源的邮件和附件，不访问可疑网站。
安装可靠的杀毒软件和防火墙，定期进行全面扫描和实时监控。
定期备份重要数据，以防数据被加密或破坏。
22
06
未来趋势预测与挑战应对
2024/3/26
23
新型威胁形态预测
2024/3/26
高级持续性威胁（APT）
利用零日漏洞，长期潜伏并窃取敏感信息，难以被传统安全软件发现。
9
宏病毒和脚本病毒
宏病毒
利用宏语言编写的病毒，寄生于文档或模板的宏中，在打开或关闭文档时运行。
脚本病毒
通过脚本语言（如VBScript、 JavaScript等）编写的病毒，在浏览网页或执行脚本时运行。
传播方式
通过文档交换、电子邮件附件、恶意网站等途径传播。
典型代表
Melissa病毒、ILOVEYOU病毒等。
区块链技术
提供不可篡改的数据记录和分布式信任机制，增强系统安全性。
2024/3/26
25
行业合作共同应对挑战
2024/3/26
跨行业合作
政府、企业和研究机构应加强合作，共同应对计算机病毒威胁。
信息共享与威胁情报
建立信息共享机制，及时分享威胁情报和最佳实践，提高整体防御水平。
国际合作与交流
加强国际间的合作与交流，共同应对跨国界的计算机病毒威胁。
Nimda蠕虫、灰鸽子木马等。
2024/3/26
11
03
传播途径与防范措施
2024/3/26
12
传播途径分析
01
02
03
网络传播
通过电子邮件、恶意网站、下载的文件等方式进行传播。

HPV的检测及其临床应用PPT课件

HPV病毒持续感染
环境因素
宫颈癌变
自身免疫因素
第16页/共43页
HPV致宫颈癌机理
<30
>30
5--10years
HPV感染
持续HPV感染
免疫因素
细胞分化异常CIN
高度 CIN

宫颈癌
辅助 — 致癌剂
第17页/共43页
HPV E6癌蛋白与宫颈恶性病变的关系
第18页/共43页
HPV E7癌蛋白的分子生物学特性
第32页/共43页
宫颈癌的筛查
第33页/共43页
筛查对象
• 21岁以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何妇女。
• 高危人群：有多个性伴侣、性生活过早、HIV / HPV感染、机体免疫功能低下、卫生条件差/性保健知识缺乏。
• 某些情况无需进行筛查，如因良性疾病摘除子宫的妇女。
第34页/共43页
HPV
乳头瘤病毒科属小DNA病毒
乳头瘤病毒的基因组主要编码三组基因
三个癌基因，包括E5、E6和E7，负责调节癌细胞转化过程；
两个调节基因，包括E1和E2，负责调节转录和病毒基因组的复制；
两个结构蛋白基因，包括L1和
L2，组成病毒颗粒
第1页/共43页
HPV感染
• 属于常见的性传播感染 • 直接的皮肤-皮肤接触是传播的最有效途径 • 病毒不通过血液或体液传播（例如精液）
• 2、连续2次HPV（-），细胞学检查（-）可5～8年一次
• 3、高危人群：最好每年一次
（CIN及以上、特殊职业、30岁以上高危HPV感染者）
第36页/共43页
根据《中国癌症预防与控制规划纲要（2004-2010）》推荐，一般可以选择下面两种筛查方案。

新冠病毒实验室检测ppt课件

用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。血清可在4℃存放3天，-20℃以下可长期保存。应设立专库或专柜单独保存标本。标本运送期间应避免反复冻融。
标本采集后应尽快u 咽拭子：被采集人员先用生理盐水漱口，采集人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏），被采集人员头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，将拭子头浸入含2-3ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。咽拭子也可与鼻咽拭子放置于同一管中。
鼻拭子采集：采样人员一手轻扶被采集人员头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含 2-3ml病毒保存液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。
标本，建议采用干冰等制冷方式进行保藏。
谢谢！
一标本种类二采样准备三医生防护四咽拭子的采集方法五鼻咽拭子的采集方法六下呼吸道样本七血液标本采集八粪便标本的采集九尸检标本的采集十不合格样本的处理临床样本种类血液体液分泌物排泄物组织病原微生物现场采集的样本全血血清鼻咽分泌液鼻咽拭子痰液唾液鼻咽洗液粪便肛拭子疱疹液活检组织尸检组织咽拭子标本从咽部和扁桃体取分泌物样本
二、准备物品
无菌采样拭子和采样管个人防护装备（专门的部分）新型冠状病毒检测标本采样登记表新型冠状病毒检测标本送检表带盖废物箱签字笔生物安全垃圾袋锐器盒（如何采血）

《朊病毒及其检测》课件

朊病毒防治的伦理问题
保护隐私
在朊病毒的防治过程中，应尊重患者的隐私权和个人信息保密。
人道关怀
对于感染朊病毒的患者，应提供人道关怀和心理支持，减轻他们的痛苦和恐惧。
05
朊病毒相关实验及案例分析
实验一：朊病毒的分离和纯化
总结词
朊病毒的分离和纯化是研究朊病毒的基础步骤，涉及到病毒的提取、离心、过滤和纯化等过程。
总结词
要点二
详细描述
体外感染实验是研究朊病毒致病机制的重要手段，可以模拟病毒在体外环境中的感染过程。
首先，将纯化的朊病毒与敏感细胞进行共培养，观察病毒对细胞的感染情况。通过荧光染色、免疫学检测等方法检测病毒感染后细胞内病毒抗原的表达情况。此外，还可以通过测定细胞病变、细胞死亡等情况来评估病毒感染的严重程度。这些实验结果有助于深入了解朊病毒的致病机制和传播途径，为预防和治疗朊病毒感染提供科学依据。
02
朊病毒的致病机理
朊病毒的感染机制
朊病毒通过与宿主细胞表面的受体结合，进入细胞内。
朊病毒的感染机制还包括对细胞膜的破坏和细胞骨架的改变等。
在细胞内，朊病毒经过一系列的生物化学反应，最终导致细胞死亡。
朊病毒对宿主细胞的影响
朊病毒可以导致宿主细胞的结构和功能发生变化，如细胞膜的通透性增加、细胞骨架的紊乱等。
朊病毒的生物学特性
传播方式
致病机制
朊病毒可通过接触、消化道、血液等途径传播，如食用感染朊病毒的动物器官或血液等。
朊病毒进入宿主细胞后，会诱导正常朊蛋白错误折叠，形成淀粉样沉淀，导致细胞功能紊乱和死亡。
疾病类型
诊断与防治
朊病毒可引起多种致命性疾病，如疯牛病、克-雅病等。

肠道腺病毒检测及临床意义ppt课件

18
❖ 阻止MHC-I类分子在病毒感染细胞上表达以阻止CTL的攻击。
❖ 腺病毒合成RID蛋白结合病毒感染细胞的死亡受体以逃避天然杀伤细胞的攻击。
❖ 病毒利用自身的聚合酶进行基因组复制，增加了抗原漂移的机会。
19
❖ 腺病毒对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染，人腺病毒约1/3 的已知血清型通常与人类疾病相关，但一种血清型可引起不同的临床疾患；相反，不同血清型也可引起同一种疾患。
6
➢流行性
腺病毒胃肠炎广泛分布于世界各地，在小儿，发病情况仅次于轮状病毒性肠炎。最小发病年龄为1月，绝大多数发生于3岁以下的婴幼儿。Ad-40主要感染 1岁左右婴儿，Ad-41则感染稍大的幼儿，全年均可发病，但腺病毒性胃肠炎一般呈散发性。
7
➢ 流行性
❖ 肠道腺病毒通过消化道传播，主要原因是因为树突状细胞缺乏腺病毒受体，不能感染附近淋巴结。
微生物学检查法
血清学诊断
采取患者早期和恢复期双份血清做CF试验、HI 试验及NT试验。恢复期血清抗体滴度比早期增长4倍以上有诊断意义。其中CF试验最为常用。
28
ELISA方法
检测ADV抗原、抗体操作简单、快速、特异性强，有助于临床对疾病的早期明确诊断，结果判定用简单的分光光度计，客观准确，3 ～ 4h即可出结果，可大批检测，阳性率远优于病毒分离，亦优于血清学技术，适用于流行病学调查。IgM 产生早于IgG，有利于早期诊断，IgG产生稍晚，虽不能早期诊断，但相当一部分在7一14天内检测单份血IgG阳性再结合临床也可诊断。
❖ 优点：法分辨率高、重复性好、简单快速
31
浙江萧山医院目前检测方法
❖ 腺病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）阳性率 3.7% （12/322）平均年龄：8月龄，最大15 月龄，最小4月龄。北京万泰

医学病毒学PPT课件

02 保持社交距离避免近距离接触有症状的人，尽量保持至少1米的安全距离。
03
佩戴口罩
在公共场所、尤其是室内环境佩戴医用口罩或N95口罩，以阻挡含有病毒的飞沫进入呼吸道。
04
增强免疫力
保持充足的睡眠、均衡的饮食、适当的锻炼，以提高身体免疫力，抵抗病毒侵袭。
05
接种疫苗
根据当地卫生部门的建议，及时接种相关疫苗，以降低感染风险。
播的风险。
疫苗研发与使用
疫苗研发
通过科研机构和制药公司的合作，加速针对新型病毒的疫苗
研发进程。
临床试验
确保疫苗在投入使用前经过严格的临床试验，确保安全性和有效性。
分阶段使用
疫苗上市后，根据疫情情况和接种计划，分阶段、分人群进行接种。
监测与评估
在疫苗使用过程中，持续监测其安全性和有效性，并根据实
药物设计与筛选
03
基于病毒结构信息，设计和筛选能够抑制病毒复制或破坏病毒
颗粒的药物分子。
THANK YOU
感谢聆听
病毒基因组每天约产生 10^-5~10^-8个突变，其中大部分为负突变（降低生存能力的突变）。
病毒进化的规律与趋势
适应性进化
病毒在传播过程中逐渐适应宿主环境的过程，表现为毒力增强或减弱。
协同进化
病毒与宿主之间相互影响、共同进化的过程，如病毒抗原变异与宿主免疫应答之间的协同进化。
定向进化
在选择压力下，病毒基因组朝着特定方向进化的过程，如抗药性病毒的出现。
血液传播
病毒通过血液、体液等途径传播，如丙肝病毒、乙肝病毒等。
接触传播
病毒通过接触口、鼻、眼等黏膜或破损皮肤进入人体，如HIV病毒、HBV病毒等。

乙肝病毒五项检测 ppt课件

乙型肝炎病毒表面抗原
乙型肝炎病毒表面抗原
注意事项
本样品仅用于体外诊断，操作应按说明说严格进行。封板膜不能重复使用，不同批号、酶标试剂和阴性对照不可混用，不能与其它厂家试剂混用。
避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒液（如84消毒液）的环境下操作。使用前请将试剂平稳至室温（平衡30分钟以上），实验前将试剂轻轻振荡混匀，使用后立即回放2~8℃。未用完的微孔板条与干燥剂一起用自封袋密封2~8℃保存。过期试剂请勿使用。加液时必须用加样器，并经常校对加样器的准确性。加入不同样品或不同试剂组份时，应更换加样器的吸头和加样槽，以防止出现交叉污染。洗涤时各孔均匀需加满洗液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机应设定 30~60秒浸泡时间。在洗版结束后，必须立即进行下一步，不可使用酶标板干燥。避免长时间的中断实验步骤，以确保每孔实验条件的均一。结果判定必须以酶标仪读数为准。读取结果时，应擦干酶标板底部，且孔内不能有气泡。不要触碰孔底部的外壁，指引或划痕可能影响板孔的读值。所有样品、废液和废弃物都应按照传染物处理。终止液为硫酸，使用时必须注意
乙型肝炎病毒e抗体
检验方法：
配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照2孔和空白对照1孔（用双波长检测，可不设空白对照孔）。
加样：分别在相应孔中加入待测样品及阴、阳性对照各50µl。
加酶：每孔加人酶标试剂50ul，空白孔除外，轻轻振荡混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30min。洗涤：小心撕掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。显色：每孔加人显色剂A、B液各50µl，轻轻振荡混匀，37℃避光显色15min。测定：每孔加终止液 50µl ，轻轻振荡混匀， 10min 内测定结果。

病毒的纯化和检测.ppt

• 3.血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后各取血清，以便对比双份血清抗体效价的动态变化。
三、病毒和病毒成份的提纯
• 病毒纯度的判定依据：
➢物理均一性； ➢病毒滴度与蛋白含量的比例； ➢免疫反应单一而无非特异反应； ➢结晶形成
• 病毒提纯的主要原则：
• 在病毒不失活的前提下，从宿主细胞中释放出来；
② 有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等作用于细胞膜，可使邻近的细胞相互融合，形成多核巨细胞或称融合细胞。
③ 有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培养细胞中形成胞浆或核内的包涵体。
病毒培养时出现的CPE
• 2.红细胞吸附 (hemadsorption,HAd)
• 流感或副流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素(haemagglutinin,HA)，具有吸附脊椎动物 (豚鼠、鸡、猴等) 红细胞的能力，这一现象称红细胞吸附，常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖。若有相应的抗血清，则能中和细胞膜上的HA，HAd不再发生，称红细胞吸附抑制试验。
双抗体夹心法
此法常用于测定抗原, 将已知抗体吸附于固相载体, 加入待检标本(含相应抗原)与之结合。温育后洗涤，加入酶标抗体和底物进行测定。
间接法
此法是测定抗体最常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体，加入待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后，加入酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。
• 病毒的纯化可以应用提纯蛋白质的技术方法；
• 对大小、形状和密度高度一致的病毒粒子，可以采用分级分离的技术。
四、病毒萃取液的分级纯化
• 沉淀法 ➢中性盐沉淀法
➢聚乙二醇沉淀法
➢有机溶剂沉淀法 ➢等电点沉淀法

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扫描电子显微镜
用于观察病毒和细菌表面结构和附属结构等。
透射电子显微镜
用于观察病毒的大小、形态与结构及细胞内的超微结构等。
空斑形成试验
是一种检查和准确测定病毒滴度的方法。
将稀释的病毒悬液加入单层细胞培养瓶中。病毒吸附后，再覆盖一层融化的半固体营养琼脂，使病毒在单层细胞培养中有限扩散。
一般选用9～14d的鸡胚
优点: 来源充足、组织分化程度低、本身很少携带病毒和细菌、对接种病毒不产生抗体及病毒较易增殖等
尿囊腔接种：常用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养
动物接种常用的实验动物有小白鼠、乳鼠、豚鼠、家兔、猴和鸡等；
常用的接种途径包括皮下、皮内、腹腔、静脉、角膜、鼻腔及脑内接种等方式；
病毒检验技术流程
02
PART
病毒的分离与培养
主要有细胞培养法、鸡胚培养法、动物接种法等,而对细胞、鸡胚不敏感,又没有合适动物模型的病毒,可采用基因克隆的方法。
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6
细胞培养法
二倍体细胞株来源于正常人胎儿组织，主要用于培养病毒制备疫苗等；原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞，原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养；传代细胞来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞。
相对于免疫学方法或其他基因检测法，NASBA速度快，特异性强，敏感性高，检测范围广泛，缺点在于成本较高。
杂交链式反应HCR
杂交链式反应（Hybridization Chain Reaction, HCR）是由 Dirks 与 Pierce于 2004 年提出的一种高效的核酸扩增方法，根据核酸探针竞争性杂交形成长度不等的亚稳态核酸双链实现输出信号的放大。HCR 反应在室温下即可，无需变温调节、酶的辅助及其它试剂的参与，在核酸信号扩增方面得到广泛应用。HCR 反应体系由一段启动探针 I，两段发夹环结构探针 H1、H2 构成，H1 与 H2 发夹环探针结构相似，分为环部、茎部以及粘性末端三个部分，启动探针引发两段功能性核酸探针竞争性结合，形成亚稳态的核酸双链，从而实现 HCR 反应。
病毒悬液中的感染性病毒量的滴度可用PFU／ml表示。
03
PART
免疫学方法
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13
ELISA
酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
病毒增殖的观察
病毒在细胞内增殖的鉴定指标 1．细胞形态的改变 2．红细胞吸附 3．细胞培养液pH值改变
病毒数量及病毒感染性测定 1．血凝试验 2．中和试验 3．空斑形成试验 4．半数感染量（ID50）
和组织培养半数感染量（TCID50）
细胞形态改变包涵体
红细胞吸附
形态学检查及诊断
光学显微镜
直接观察到较大的病毒体（如痘病毒）、包涵体狂犬病毒感染—— 嗜酸性包涵体。
实时荧光定量 PCR
目前最有效、最灵敏的方法就是实时荧光定量 PCR（real time RT-PCR），根据目标核酸基因来设计引物实现对靶标的检测，已广泛应用在临床样品的检测。 real time RT-PCR 是将荧光能量传递技术应用于 PCR 仪中，在PCR 的反应体系中加入荧光基团，利用获取的荧光信号积累来实时监测整个 PCR 进程，最终通过得到的标准曲线对未知得模板进行定量分析的方法。
04
PART
病毒核酸分子检测
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基因芯片
基因芯片(gene chip)又称基因微矩阵(DNA microarry)具有微型化、高通量、并行处理易于自动化等优越性,它将大量的靶基因片段有序、高密度地排列在玻片、硅等载体上, 用荧光检测后 , 通过计算机软件进行数据比较和分析 ,一次试验就可对上万种基因进行快速、准确、高效的检测。
结果是每一个有感染性的病毒在单层细胞中可产生一个局限性的感染灶。用活性染料 (如中性红) 染色，则活细胞着色，受病毒感染而破坏的细胞不着色，形成肉眼可见的空斑/蚀斑(plaque)。
每个蚀斑是由一个感染性病毒颗粒形成的，称作空斑形成单位 (plaque forming unit, PFU)。
细胞培养瓶
鸡成纤维细胞
鸡胚培养
鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的一种培养方法，此方法可用以进行多种病毒的分离、培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制备等。
不同病毒在鸡胚的不同部位的生长特性差异很大，选择不同的接种部位是病毒分离成功的关键：尿囊腔接种、羊膜腔接种、卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种
05
PART
新型核酸扩增检测技术
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NASBA
NASBA（Nuclear acid sequence-based amplification，核酸依赖性扩增检测技术）是一项以RNA模板进行等温核酸扩增并能实时观测结果的检测方法。该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体 T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。
病毒检测技术反映病毒的核酸水平、感染的状态、传染性和评定治疗效果，对病情的诊断、治疗和用药上起着关键性的作用，可根据检查结果判断和选择患者适宜的抗病毒药物种类，并制定适宜的最佳治疗方案；可根据病毒核酸量的动态变化对患者用药的剂量、时间及是否需要联合用药等提供重要的参考依据。病毒检测技术在评价和观察抗病毒药物治疗的疗效、免疫增强药物的疗效及判定预后效果都有重要应用。
病毒检பைடு நூலகம்技术
Virus Detection Technology
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1
目录
CONTENTS
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01 前言 02 病毒的分离与培养 03 免疫学方法 04 病毒核酸分子检测 05 新型核酸扩增检测技术
2
01
PART
前言
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3
病毒检验技术
病毒学检验技术是用实验室检验方法对临床和流行病学现场送检的标本（如人或宿主的血液、组织、尿、粪便和组织液等）进行病毒学的定性和定量分析，为病毒感染和病毒性疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据。