毛细管电泳法测定阿霉素脂质体药物中的微量硫酸根离子
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达 到 最 大 。 因 此 本 实 验 选 用 ０ ４ ｍｍｏ／ ． ｌＬ作 为
Ｃ Ａ 的最佳 浓度 。 Ｔ Ｃ
２ ２ 背 景 电 解 质 ｐ Ｉ的 选 择 ． ｔ
１ 实 验 部 分
１ １ 仪 器 与 试 剂 ．
在 ｐ ９内考 察 了 溶 液 ｐ 对 分 离 的影 响 ． Ｈ ５～ Ｈ 结 果 发 现 ， ； 溶 液 的 ｐ 变 化 对 分 离 的 影 响 不 ＮＯ Ｈ
Ｕ ） 弹性 石英 毛细 管柱 （ ０ＣＩ ５ ｍ ． ． ７ Ｓ； ６ Ｉ ｌ× ０ ｉｄ ，３ ０
ｍ ． ． （ 效 长 度 ５ ． ｍ ） Ｐ ｌｍｉｒ ｅ ｈ Ｏｄ ） 有 １５ ｃ （ ｏｙ ｃｏ Ｔ ｃ —
ｎ ｌｇ ｅ ，ＡＺ，ＵＳ ｏｏ ｉ ｓ Ａ）；Ｍｉ ｉｏ ｅ ｌｐ ｒ ＵＶ 超 纯 水 系 统 ｌ
验选 用 ２ ０ｍｍｏ／ ｌＬ硝酸钾 溶液 作为 背景 电解质 。
由 于 阴 离 子 的 电 泳 迁 移 与 电 渗 流 的 方 向相 反 ， 因 此 电 泳 分 离 时 ， 离 子 出峰 时 间 很 长 。 为此 ， 要 阴 需
Ｓ ： 含 量 的方法 尚未 见文 献报 道 。 Ｏ
１ ２ 实 验 方 法 ．
１ Ｖ 时 ， 离 效 果 良 好 ， 此 本 实 验 选 用 一１ ｋ ５ 分 因 ５
配制 ２ ０ｍｍｏ／ ｌＬ的硝酸 钾溶 液作 背 景 电解 质 ， 使用前 用 氦气脱 气 ５ ｍｉ 。毛 细管 初 次使 用 前 依 次 ｎ 用 ｌｍｏ／ Ｏ 溶 液 和去 离子 水 冲洗 各 １ ｉ 。 ｌＬＮａ Ｈ ０ｒ ｎ ａ
利 用硝 酸盐代 替传 统毛 细管 电泳 中使 用 的背景 电解
质 铬 酸 盐 ， 除 了 六 价 铬 对 环 境 的 污 染 ， 且 消 而
响 。 结 果 发 现 ， 着 Ｃ ＡＣ 浓 度 的 增 大 ， 移 时 间 随 Ｔ 迁 缩 短 ， 浓 度 大 于 ０ ４ｍｍｏ／ 当 ． ｌＬ时 ， 移 时 间 不 再 缩 迁 短 ， 明 毛 细 管 柱 表 面 的 Ｃ Ａ 达 到 饱 和 ， 渗 流 表 Ｔ Ｃ 电
向背 景 电解质 溶液 中加 入 一 定量 的 电渗 流 改性 剂 ， 使 电渗流 反转 ， 快 阴 离 子 的 出峰 时 间 。本 实验 选 加 用 Ｃ ＡＣ作 为 电渗 流改 性 剂 。通 过 表 面 修饰 ， 变 Ｔ 改
毛 细 管 内壁 电 荷 ， 而 使 电 渗 流 反 转 。 实 验 中 考 察 从
大 。这 主要 是 因为 Ｎ ； 和 Ｓ Ｏ Ｏ 一都 是 强 电解 质 离
子 ， 液 ｐ 对 它 们 的 电 离 影 响 较 小 。 因 此 实 验 选 溶 Ｈ 定 ＮＯ／ 自身 的 ｐ ． 即 背 景 电 解 质 中 不 需 添 加 Ｈ ７ ０，
任 何 酸碱调 节 ｐ Ｈ。 ２ ３ 分 离 电 压 的 选 择 ．
ＮＯ ／的 电 泳 淌 度 与 Ｓ ： Ｏ 一相 近 ， 得 Ｓ ： 使 Ｏ 一的分 离
柱效 可 以达 到 ３４ ． ２×ｌ 理 论 塔 板 ／ ， 大 提 高 了 ０ ｍ 大 检 测 灵 敏 度 ， 此 非 常 适 合 作 为 阿 霉 素 脂 质 体 中 微 因
量 Ｓ 一的 测 定 Ｏ
察 了 电压 对 分 离 的 影 响 ， 果 发 现 ， 分 离 电 压 为 结 当
一
（ ｌｐ ｒ ， Ｍｉｉｏ ｅ ＭＡ，Ｕ Ａ） 十 六 烷 基 三 甲 基 氯 化 铵 ｌ Ｓ 。
（ Ｔ Ｃ） 硝 酸 钾 （ 析 纯 ， 药 集 团 ） 阿 霉 素 脂 质 Ｃ Ａ 与 分 国 ； 体 破 乳 液 （ 江 生 物 医 药 有 限公 司 提 供 ） 张 。
物制 剂 的组成 。 阿霉 素脂 质体 在 生产过 程 中使用 了
硫酸 铵 ， 因此 脂 质体 微球 中含有 一定 量 的 Ｓ ： 。测 Ｏ一
定其 中 的 Ｓ 含 量对 于保 证 阿霉 素脂 质体 制 剂 的 Ｏ 质量 非 常 关 键 ， 门 用 来 测 定 阿 霉 素 脂 质 体 中 专
Ａ ｉ ｎ 毛 细 管 电泳 仪 （ ｌｂ ｏ ｎ ｇ ｅｔ ｌ Ｗａｄ ｒｎ ，Ｇ ｒ — ｅｍａ
ｎ ） 配 备 二 极 管 阵 列 检 测 器 和 Ａｇｌ ｔＣ ｅ ｔ— ｙ ， ｉ ｎ ｈ ｍＳａ ｅ
ｔ ｎ １ ２ 数 据 处 理 工 作 站 ； Ｂ一０ ｐ 计 （Ｓ ｒｏ ｉ ｉ ． ｏ Ｐ ２ Ｈ ａ ｔ ｒ—
两 次 电 泳 之 间 依 次 用 １ｍｏ／ Ｏ 溶 液 、 离 子 ｌＬ Ｎａ Ｈ 去 水 和 背 景 电 解 质 溶 液 冲 洗 毛 细 管 各 ２ｍｉ 。 样 品 采 ｎ 用 压 力 ０ ０ ａ进 样 １ 。柱 温 设 定 在 ２ ℃ 。 检 ．４Ｐ ５Ｓ ５ 测 波 长 设 定 为 ２ ２ｎ 。 由 于 采 用 间 接 紫 外 检 测 ， ０ ｍ 样 品 峰 为 倒 峰 ， 此 检 测 时 设 定 参 比波 长 为 ３ ０ｎ ］ 因 ６ ｉ 。 ｌ
毛 细管 电泳 分 离 过程 中 ， 大 电压 会 使拄 效 提 增 高， 分离 度增 加 ， 电泳 及 电渗 速 度 提 高 ， 迁移 时 间缩 短， 有利 于快 速分 析 。但 电压过 高会增 加焦 耳热 ， 引 起 热扩散 ， 效 反 而 下 降 。在 一８～ 一２ Ｖ 内 ， 柱 ５ｋ 考
了 ＣＴ ＡＣ 在 浓 度 ０ ２～０ ８ ｍｍｏ／ 内 对 分 离 的 影 ． ． ｌＬ
本 文建 立 了阿霉 素脂 质 体 中 Ｓ ｊ 的毛 细 管 电 Ｏ
泳 分 析 法 ， 用 毛 细 管 电 泳 间 接 紫 外 检 测 技 术 一 利
对Ｓｉ Ｏ 一和 ｃ ｌ成 功实 现 了分 离 和定 量 测 定 。该 法
第 ４期
展学强 ， ： 等 毛细管 电泳 法测定 阿霉 素脂 质体药 物 中的微量 硫酸 根离 子
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阿霉 素 的靶 向性 ， 降低 了阿霉 素 的毒副 作用 ， 从而 提 高 了治疗 指数 各 国药 典均 要 求 准确 给 出其 药
迁 移 时 间 和 检 测 灵 敏 度 的 影 响。 结 果 表 明 ， 当 ＮＯ 浓 度 为 １ ～ ２ ／ ５ ５ ｍｍｏ／ ｌＬ时 ， 景 基 线 平 稳 ， 噪 比 最 大 ， 此 本 实 背 信 因
