５８６· 临床误诊误治２０１０年６月第２３卷第６期Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｓｄｉａ￣ｎｏｓｉｓ＆ＭｉｓｔｈｅｍＤｖ，Ｖｏ１．２３ Ｎｏ．６，Ｊｕｎｅ ２０１０
药品无菌检查的影响因素分析
杨 静，王文习，李 翔，苗爱东
［关键词］ 药品检查；安全管理；综合预防
［中国图书资料分类号］ Ｒ９５４ ［文献标志码】 Ｂ ［文章编号】 １００２—３４２９（２０１０）０６—０５８６—０２
无菌检查是对临床要求无菌的药品及其他物品是否 染有活菌的一种检测方法 ｊ。“欣弗事件”涉及的“欣弗”
系安徽华源生产的克林霉素膦酸酯葡萄糖注射液，经中国 药品生物制品检定所抽样检验表明，其无菌检查和热原检
查均不符合规定，致使患者出现寒战、高热、呼吸困难、发
绀等症状，而“欣弗”事件也使无菌制剂的无菌保障问题
成为公众关注的焦点 。。保证药品无菌制剂达到无菌要
求，确保临床用药安全，是药品生产企业和药品监管部门
需要认真思考的问题 。由于无菌检查的所有操作均需
在严格控制微生物污染的环境下进行，环境条件要求严
格，许多干扰因素都会造成检验结果误差。本文结合工作
实践，就影响药品无菌检查的各种因素进行文献综述，以
期引起同道的关注。
１关于药品的无菌检查 我国的药品检验制度是伴随着药品抽查检验工作的
开展而不断完善的。建国之初各地即建立了药政机构和
药检机构，药品抽查检验制度和药品标准都逐步建立起
来，至１９５３年全国已建立ｌ３个药品检验所和ｌ４个药品
检验室，同时颁布了一系列的药政法规。由于特殊的历史
原因，１９６６～１９７６年我国的药政、药检机构遭到严重破坏，
工作停滞，并出现了一系列的“药害”悲剧＂ 。经过一段
时期的恢复，１９８４年后我国的药品检验工作得到了空前
的发展和进步。多次完善后的《药品管理法》确立了药品
抽查检验制度的法律地位。近年随着临床药品检验方法
的不断改进，检验水平亦日趋提高。
２药品无菌检查的影响因素
中国药典2020版无菌检查法
中国药典（2020版）是中华人民共和国国家药品监督管理局发布的一部重要药学法规，其中涵盖了药品质量控制的各个方面。无菌检查法是药品生产过程中至关重要的环节之一，下面是相关参考内容（不包含链接）。
无菌检查是一种评估药品无菌状态的方法，对于注射剂、眼用制剂、口服液等非口服制剂等其它无菌制剂，都需要进行无菌检查。
1. 测试样品的选择：
无菌检查的样品应根据药品特点进行选择。例如，对于注射剂和眼用制剂，往往需要每种药品样品至少选择20个，对于其他制剂需要至少选择5个样品。每个样品应从不同的批次中随机选择，以确保整个生产过程的无菌性。
2. 检查设备：
无菌检查需要使用无菌操作台、无菌器具和应无菌化的培养基等设备。检查设备要定期进行校验和维护，以保证其正常工作状态和准确性。
3. 环境要求：
无菌检查需要在无菌环境下进行。检查人员应穿戴无菌操作衣、戴无菌手套，确保检查操作不受外界微生物的污染。
4. 检查方法：
常用的无菌检查方法包括培养法和观察法。培养法是指将样品接种到培养基上进行培养，观察是否有微生物生长。观察法是通过目视观察、显微镜观察等手段，直接检查样品中是否有微生物存在。
5. 结果判定：
对于培养法，通常需要在相应的培养条件下培养一定的时间，观察培养基是否有菌落的生长。如果培养基上有菌落，则说明样品不符合无菌要求。对于观察法，检查结果应根据相关标准或规定进行判定。
6. 记录和报告：
检查过程中应详细记录各项操作和结果，包括样品信息、检查方法、操作员等。检查后，应根据相关规定填写相应的检查报告，并将报告保存备查。
无菌检查是确保药品质量和安全的重要环节，对于非口服制剂尤为重要。药品生产企业应按照国家药典的要求，建立完善的无菌检查体系，进行规范化的检查操作和记录。同时，应不断关注无菌检查技术的更新和发展，提高检查方法的准确性和可靠性，确保药品无菌状态的准确评估。
1 附录1：
无菌药品
第一章 范围
第一条 无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，包括无菌制剂和无菌原料药。
第二条 本附录适用于无菌制剂生产全过程以及无菌原料药的灭菌和无菌生产过程。
第二章 原则
第三条 无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应当最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目标的关键因素，无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法及规程进行，产品的无菌或其它质量特性绝不能只依赖于任何形式的最终处理或成品检验（包括无菌检查）。
第四条 无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品；部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。
第五条 无菌药品生产的人员、设备和物料应通过气锁间进入洁净区，采用机械连续传输物料的，应当用正压气流保护并监测压差。
第六条 物料准备、产品配制和灌装或分装等操作必须在洁净区内分区域（室）进行。
第七条 应当根据产品特性、工艺和设备等因素，确定无菌药品生产用洁净区的级别。每一步生产操作的环境都应当达到适当的动态洁净 2 度标准，尽可能降低产品或所处理的物料被微粒或微生物污染的风险。
第三章 洁净度级别及监测
第八条 洁净区的设计必须符合相应的洁净度要求，包括达到“静态”和“动态”的标准。
第九条 无菌药品生产所需的洁净区可分为以下4个级别：
A级：高风险操作区，如灌装区、放置胶塞桶和与无菌制剂直接接触的敞口包装容器的区域及无菌装配或连接操作的区域，应当用单向流操作台（罩）维持该区的环境状态。单向流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36-0.54m/s（指导值）。应当有数据证明单向流的状态并经过验证。
在密闭的隔离操作器或手套箱内，可使用较低的风速。
B级：指无菌配制和灌装等高风险操作A级洁净区所处的背景区域。
C级和D级：指无菌药品生产过程中重要程度较低操作步骤的洁净区。
..
’. 无菌检查法：系指检查药品、无菌器具及适用于药典要求无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。
5.2 无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局部洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室温控18℃~26℃，相对湿度45%～65%，操作室或工作台应保持空气正压。
5.2.1 无菌室的清洁与消毒应符合《质保部洁净室清洁消毒规程》（10-G-07404）的规定。
5.2.2 无菌室无菌程度的检查应符合规定：见《洁净区沉降菌监测规程》（10-G-09113）、《洁净区尘埃粒子监测规程》（10-G-09114）。
5.3 实验设备及用具：
5.3.1 电热干燥箱、电热手提式压力蒸汽灭菌器、电热恒温培养箱、试管、注射器、针头、试管架、刻度吸管、手术剪、手术镊、砂轮、注射器盒、搪瓷托盘、双碟、75%酒精棉球、碘酒棉、无菌工作服（衣、裤、帽、口罩等）。
5.3.2 微孔滤膜：直径50mm、孔径0.22μm～0.45μm，应符合规定。
5.3.3 除菌滤器
5.3.4 所有进入无菌室的物品必须经过消毒或灭菌，应严格按照《物品进入质保部洁净室清洁消毒规程》（10-G-07403）进行操作。
5.4 稀释剂：灭菌注射用水。
5.5 培养基：
5.5.1 需气菌、厌气菌培养基（流体硫乙醇酸盐培养基）；真菌培养基。
5.5.2 培养基的使用，配制、管理及灵敏度检查应按照《培养基管理规程》（10-G-07406）、《培养基灵敏度检查规程》（10-G-07408）、《培养基配制规程》（10-G-07407）进行操作。
5.5.3 在使用前，细菌培养基须经30~35℃培养不少于14天，真菌培养基经20~25℃培养不少于14天，证明无菌后方可使用。本检查可与供试品的无菌检查同时进行。
5.6 对照用菌液：
5.6.1 金黄色葡萄球菌（Staphyoccus sureus）菌液：取金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，在30~35℃培养16~18小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。
