细胞生物学实验PPT课件：细胞膜的渗透性
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《细胞生物学实验》课件
荧光染色实验
原理，实验步骤
细胞凋亡实验
1 原理
描述细胞凋亡的机制和原理
2 实验步骤
介绍如何进行细胞凋亡实验的步骤
结束语
总结课程内容，展望细胞生物学的未来研究方向。
《细胞生物学实验》PPT 课件
细胞生物学实验PPT课件大胞质、细胞核
细胞器的功能
线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体
细胞生命周期
1
细胞分裂
有丝分裂、减数分裂
2
细胞生长和增殖
细胞周期
细胞生物学实验
细胞培养实验
细胞培养介质的配制，细胞培养的基本操作
细胞敲除实验
原理，实验步骤
高中生物必修1 第二章 第三节 第1课时 细胞质膜具有选择透过性 课件【83张PPT】
实验效果相同
√C.0.3 g/mL蔗糖溶液处理实验材料，观察到的是图像乙
D.清水处理质壁分离的细胞，一定会发生质壁分离复原
由于外表皮细胞中含有紫色大液泡，而内表皮细胞中的大液泡内不 含颜色，所以用紫色洋葱外表皮做实验材料时更容易观察到实验结 果，B错误； 0.3 g/mL蔗糖溶液处理实验材料，会 由于细胞外液溶液浓度大于细胞液浓 度使细胞失水，出现质壁分离，即观察到的是图像乙，C正确； 若质壁分离时大量失水或质壁分离时间过长，可能会使细胞死亡， 此时用清水处理质壁分离的细胞，不能发生质壁分离复原，D错误。
第1课时
细胞质膜具有选择透过性
学习目标
1.理解渗透作用的条件及原理。 2.结合探究实验，分析理解细胞吸水和失水的过程及原理的应用。
内容索引
一、植物细胞的质壁分离和复原现象 二、观察植物细胞的质壁分离和复原现象 三、细胞质膜对不同物质的通透性不同
网络构建 课时对点练
一、植物细胞的质壁分离和复原现象
(6)将同一成熟植物细胞依次浸入蒸馏水、0.3 mol/L的蔗糖溶液和0.4 mol/L的 KNO3溶液中，测得液泡的体积随时间的变化曲线如图所示，则曲线A、 B、C分别代表细胞所处的溶液。
提示 A代表蒸馏水、B代表KNO3溶液、C代表蔗糖溶液。
二、植物细胞的质壁分离和复原的应用 细胞液中物质的浓度对于维持细胞的生命活动非常重要。现提供紫色洋 葱鳞片叶表皮细胞，请设计实验，测定该细胞的细胞液的浓度相当于多 少质量分数的蔗糖溶液。写出你的实验思路，并分析其中的基本原理。 提示 可以配制出一系列浓度梯度的蔗糖溶液，将紫色洋葱鳞片叶表皮 细胞置于配好的各种浓度的蔗糖溶液中，适当时间后用显微镜观察细胞 质壁分离情况。记录刚好发生质壁分离的细胞所用的蔗糖溶液浓度，以 及刚好尚未发生质壁分离的细胞所用的蔗糖溶液浓度，据此推算出细胞 液浓度应介于这两个浓度之间。
√C.0.3 g/mL蔗糖溶液处理实验材料，观察到的是图像乙
D.清水处理质壁分离的细胞，一定会发生质壁分离复原
由于外表皮细胞中含有紫色大液泡，而内表皮细胞中的大液泡内不 含颜色，所以用紫色洋葱外表皮做实验材料时更容易观察到实验结 果，B错误； 0.3 g/mL蔗糖溶液处理实验材料，会 由于细胞外液溶液浓度大于细胞液浓 度使细胞失水，出现质壁分离，即观察到的是图像乙，C正确； 若质壁分离时大量失水或质壁分离时间过长，可能会使细胞死亡， 此时用清水处理质壁分离的细胞，不能发生质壁分离复原，D错误。
第1课时
细胞质膜具有选择透过性
学习目标
1.理解渗透作用的条件及原理。 2.结合探究实验，分析理解细胞吸水和失水的过程及原理的应用。
内容索引
一、植物细胞的质壁分离和复原现象 二、观察植物细胞的质壁分离和复原现象 三、细胞质膜对不同物质的通透性不同
网络构建 课时对点练
一、植物细胞的质壁分离和复原现象
(6)将同一成熟植物细胞依次浸入蒸馏水、0.3 mol/L的蔗糖溶液和0.4 mol/L的 KNO3溶液中，测得液泡的体积随时间的变化曲线如图所示，则曲线A、 B、C分别代表细胞所处的溶液。
提示 A代表蒸馏水、B代表KNO3溶液、C代表蔗糖溶液。
二、植物细胞的质壁分离和复原的应用 细胞液中物质的浓度对于维持细胞的生命活动非常重要。现提供紫色洋 葱鳞片叶表皮细胞，请设计实验，测定该细胞的细胞液的浓度相当于多 少质量分数的蔗糖溶液。写出你的实验思路，并分析其中的基本原理。 提示 可以配制出一系列浓度梯度的蔗糖溶液，将紫色洋葱鳞片叶表皮 细胞置于配好的各种浓度的蔗糖溶液中，适当时间后用显微镜观察细胞 质壁分离情况。记录刚好发生质壁分离的细胞所用的蔗糖溶液浓度，以 及刚好尚未发生质壁分离的细胞所用的蔗糖溶液浓度，据此推算出细胞 液浓度应介于这两个浓度之间。
《细胞生物学实验》PPT课件
养瓶，在培养过程中不断地转动，使培养的细胞始终处于悬浮状态
之中而不贴壁。
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21
群体培养（左）和克隆培养（右）
可编辑ppt
22
目前实验室中常用的几种细胞 系
细胞系
• 3T3 • HeLa • BHK21 • PtKl • L6 • PCI2 • SP2 • SP2／0 • CHO
名称细胞类型
• 另一种是克隆培养（clonal culture），将高度稀释的游离细胞悬 液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖 每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。一个细胞克 隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。
• 此外，为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法，使用大容量的圆培
按结构成分分为细胞培养(cell culture) 组织培养(tissue culture) 器官培养(organ culture)。 3.细胞株(系)与克隆
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18
二、细胞培养定义：
1. 原代培养 （primary culture）：从动物机体取出 的进行培养的细胞群。原代培养的细胞生长比较缓慢， 而且繁殖一定的代数后（一般10代以内）停止生长， 需要从更换培养基。
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11
3.分别在下列等渗溶液中进行实验，步骤同2。
可编辑ppt
12
五、实验结果
将观察到的现象记录，并进行分析、比较：
1. 试管内液体分两层：上层浅黄色透明，下
层红色不透明为不溶血（－），镜检红细胞 完好呈双凹盘状。
2. 如果试管内液体混浊，上层带红色者，称
不完全溶血（＋或＋＋），镜检有部分红细 胞呈碎片。
（1ml）和10（10ml）份0.17mol/L 氯 化钠溶液，形成一种不透明的红色液 体，此即稀释的鸡血。
《细胞生物学实验》PPT课件
35
备注
36
实验四 叶绿体的分离与荧光观察
一、实验目的：
1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器 分离的一般原理和方法；
2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟 悉荧光显微镜的使用方法。
37
二、 实验原理
组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是 分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降 速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以 及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一 时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依 次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中 的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部， 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
53
实验内容与实施过程
4、植物原生质体的分离和培养（ 课内完成，180min） ①取充分展开的嫩叶，用自来水冲洗干净； ②将叶片在0.1%升汞溶液中浸泡灭菌10min，然后用无 菌蒸馏水漂洗5次； ③用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养 皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
49
②原生质体分离纯化或融合后，在适当的 培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞 壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团， 长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其 中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体 培养中最基础也是最关键的环节。
50
三、实验仪器
台式离心机、 高压灭菌锅、 倒置显微镜、 超净工作台
26
③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒 体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧 化酶使染料保持氧化状态，即有色状态， 呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被 还原，成为无色状态
27
三、实验仪器
显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、 双面刀片、解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖 玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
备注
36
实验四 叶绿体的分离与荧光观察
一、实验目的：
1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器 分离的一般原理和方法；
2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟 悉荧光显微镜的使用方法。
37
二、 实验原理
组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是 分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降 速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以 及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一 时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依 次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中 的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部， 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
53
实验内容与实施过程
4、植物原生质体的分离和培养（ 课内完成，180min） ①取充分展开的嫩叶，用自来水冲洗干净； ②将叶片在0.1%升汞溶液中浸泡灭菌10min，然后用无 菌蒸馏水漂洗5次； ③用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养 皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
49
②原生质体分离纯化或融合后，在适当的 培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞 壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团， 长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其 中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体 培养中最基础也是最关键的环节。
50
三、实验仪器
台式离心机、 高压灭菌锅、 倒置显微镜、 超净工作台
26
③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒 体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧 化酶使染料保持氧化状态，即有色状态， 呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被 还原，成为无色状态
27
三、实验仪器
显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、 双面刀片、解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖 玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
细胞生物学实验课件-细胞膜的渗透性
不透明的紅細胞懸液變成紅色透明的血紅蛋白溶 液，這就是溶血現象。(測量物質進入紅血細胞 速度的一種指標)
紅細胞置於數種等滲溶液中，根據紅細胞對 各種溶質的透性不同，有的溶質可以滲入，有的 不能滲入，滲入紅細胞的溶質能提高紅細胞滲壓, 使水進入紅細胞，引起溶血。由於溶質進入速度 不同，溶血時間也不等。
【實驗用品】
1、 材料：新鮮兔血
2.、藥品：
0.17M NaCl 0.17M NH4Cl 0.17M CH3COONH4 0.17M NaNO3 0.12M Na2SO4
0.12M 草酸銨 0.32M 葡萄糖
0.32M 甘油 0.32M CH3CH2OH 0.32M CH3CH2CH2OH
阿爾塞弗溶液（Alsevr’s solution）：葡萄糖2.05克， 檸檬酸三鈉0.80克，氯化鈉0.42克，混合後加蒸餾水 100ml，然後以10%檸檬酸三鈉調節PH值至6.1。
2、取試管一只，加入0.17M NH4Cl溶液5ml，然後
再加入1ml稀釋兔血，輕輕搖動，注意觀察試管
內溶液顏色變化，是否發生溶血現象，記下時間
（自加入1 ml稀釋兔血到溶液逐漸變為紅色透明澄
清，紅血球全部溶血所需時間）
3、分別在其他八種等滲溶液：草酸銨 、 CH3COONH4 、葡萄糖、甘油、NaNO3 、Na2SO4 、 CH3CH2OH、CH3CH2CH2OH中，進行實驗，將你 觀察到的現象記錄結果。
【作業】
完成以下表格，並回答有幾種溶液中含有不能滲透的溶質？試分析原因。
試管編號
是否溶血 時間
1
5 ml NaCl + 1 ml 稀釋兔血
2
5 ml NH4Cl + 1 ml 稀釋兔血
细胞生物学实验《细胞膜的渗透性》
关。
了解细胞膜渗透性的机制和影响 因素有助于深入理解生物学过程 和疾病机制，为疾病诊断和治疗
提供新的思路和方法。
02
CATALOGUE
实验原理
细胞膜的结构和功能
01
细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌 其中的蛋白质组成的半透性膜， 具有选择透过性，能够控制物质 进出细胞。
02
细胞膜的主要功能是维持细胞的 内部环境稳定，参与细胞信号转 导，以及实现细胞与外界环境的 物质交换。
渗透性的定义和机制
渗透性是指物质通过细胞膜的能力，是细胞膜的一种重要特 性。
物质通过细胞膜的方式主要有被动运输和主动运输两种。被 动运输是物质顺浓度梯度进行的跨膜运输，不需要消耗能量 ；主动运输则是物质逆浓度梯度进行的跨膜运输，需要消耗 能量。
影响细胞膜渗透性的因素
温度
温度会影响细胞膜的流动性，进而影响其渗透性。一般来 说，温度升高会使细胞膜的流动性增加，渗透性增大。
究可以拓展其在药物研发、疾病诊断和治疗等方面的应用。
03
深入研究细胞膜的结构与功能
细胞膜的结构和功能是密切相关的，深入研究细胞膜的结构与功能有助
于更深入地理解细胞膜渗透性的机制和影响因素。
THANKS
感谢观看
ห้องสมุดไป่ตู้
脂溶性
物质的脂溶性越强，越容易通过细胞膜。这是因为脂溶性 物质可以溶解在磷脂分子中，从而更容易穿过细胞膜。
物质浓度
物质的浓度也会影响其通过细胞膜的能力。一般来说，浓 度差越大，物质通过细胞膜的速率越快。
细胞膜的完整性
细胞膜的完整性对于维持其渗透性至关重要。如果细胞膜 受到损伤或破裂，其渗透性会受到影响，可能导致物质大 量进出细胞，影响细胞的正常功能。
了解细胞膜渗透性的机制和影响 因素有助于深入理解生物学过程 和疾病机制，为疾病诊断和治疗
提供新的思路和方法。
02
CATALOGUE
实验原理
细胞膜的结构和功能
01
细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌 其中的蛋白质组成的半透性膜， 具有选择透过性，能够控制物质 进出细胞。
02
细胞膜的主要功能是维持细胞的 内部环境稳定，参与细胞信号转 导，以及实现细胞与外界环境的 物质交换。
渗透性的定义和机制
渗透性是指物质通过细胞膜的能力，是细胞膜的一种重要特 性。
物质通过细胞膜的方式主要有被动运输和主动运输两种。被 动运输是物质顺浓度梯度进行的跨膜运输，不需要消耗能量 ；主动运输则是物质逆浓度梯度进行的跨膜运输，需要消耗 能量。
影响细胞膜渗透性的因素
温度
温度会影响细胞膜的流动性，进而影响其渗透性。一般来 说，温度升高会使细胞膜的流动性增加，渗透性增大。
究可以拓展其在药物研发、疾病诊断和治疗等方面的应用。
03
深入研究细胞膜的结构与功能
细胞膜的结构和功能是密切相关的，深入研究细胞膜的结构与功能有助
于更深入地理解细胞膜渗透性的机制和影响因素。
THANKS
感谢观看
ห้องสมุดไป่ตู้
脂溶性
物质的脂溶性越强，越容易通过细胞膜。这是因为脂溶性 物质可以溶解在磷脂分子中，从而更容易穿过细胞膜。
物质浓度
物质的浓度也会影响其通过细胞膜的能力。一般来说，浓 度差越大，物质通过细胞膜的速率越快。
细胞膜的完整性
细胞膜的完整性对于维持其渗透性至关重要。如果细胞膜 受到损伤或破裂，其渗透性会受到影响，可能导致物质大 量进出细胞，影响细胞的正常功能。
细胞膜的渗透性
方法与步骤
血细胞悬液的制备
取1mL抗凝全血于50mL小烧杯中，再加 入9mL 0.17 mol/L氯化钠，配置好稀释的 血细胞悬液。
溶血现象观察
在试管中按1：5的比例加入血细胞悬液和 蒸馏水，观察溶液颜色由不透明变成澄清 的现象。
方法与步骤
细胞膜渗透性
将红细胞悬液与10种等渗溶液分别按1 ： 5的比例在试管中混合，记录各试管中溶 液的溶血时间。
作业
列表比较各等渗溶液造成红细胞溶血的 时间快慢，并分析溶血时间不同的原因。
实验材料
抗凝兔血或鸡血
实验仪器、用具
小烧杯 试管及试管架 移液管
实验试剂
0.17 mol/L氯化钠 0.17mol/L氯化铵 0.17 mol/L醋酸氨 0.17 mol/L硝酸钠 0.12 mol/L硫酸钠 0.12 mol/L草酸铵
0.32 mol/L葡萄糖 0.32 mol/L甘油 0.32 mol/L乙醇 0.32 mol/L丙酮 蒸馏水
细胞生物学实验课件
细胞膜的渗透性
细胞膜具有选择通透性， 使细胞能够在不同的外界环境 下保持自身的稳恒状态，这样 细胞才能够生存。
实验目的
了解相对分子质量、脂溶性大小、电解 质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响。
实验原理
溶血现象可作为测量物质进入红细胞速 度的指标。
当红细胞处于低渗环境时，水分子大量渗 入细胞，使细胞膨胀，进而破裂，血红蛋 白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液 变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶 血现象。
实验原理
பைடு நூலகம்
实验 - 细胞膜的渗透性
实验二细胞膜的渗透性一、实验目的了解细胞膜[1]的渗透性及各类物质进入细胞的速度[2]二、实验原理1、在等渗溶液中，细胞对各种溶质的透过性不同。
有的溶质可以进入，有的溶质不能渗入。
2、渗入的溶质能提高细胞的渗透压，促进水分子进入细胞，引起溶血现象[3]。
3、不同的溶质渗入到细胞内的速度不同，因此溶血时间也不同。
三、实验材料新鲜血液（鸡血、猪血、牛血等）四、实验器材试管（1.5 cm X 18 cm）、试管架、10 ml移液管、1 ml移液管、200 ml烧杯（2个）、250ml容量瓶、移液枪、胶头滴管、菜刀、吸球、电子天平、显微镜、盖玻片、载玻片、秒表五、实验药品及试剂0.17 M NaCl、0.17 M NH4Cl、0.17 M NH4Ac、0.17 M NaNO3、0.12 M Na2SO4、0.12 M 草酸铵、0.32 M 葡萄糖、0.32 M 甘油、0.32 M 乙醇、0.32 M 丙酮、肝素抗凝剂[4]六、实验步骤1、制备血液稀释液（1）抗凝剂的制备：首先称取1克肝素钠粉末，然后加入0.17 M NaCl溶液10 ml（1∶10的比例），混合均匀，制成肝素抗凝剂。
（2）血液稀释液的制备：取新鲜血液，按比例（肝素抗凝剂:血液=1∶10）混合均匀，配制成经肝素抗凝的血（3）按比例（经肝素抗凝的血液∶0. 17 M NaCl 溶液=1∶10）混合均匀，形成一种不透明的红色液体[7]。
2、低渗溶液（空白对照）的观察取试管一只，加入10 ml 蒸馏水，然后再加入1 ml 稀释的血液。
注意观察溶液颜色的变化。
结果是溶液由不透明的红色变为澄清。
记录下这个过程所要的时间。
3、红血球的渗透性按表一的配制，分别在下列十种等渗溶液中进行实验。
轻轻摇动，注意有无颜色变化，是否有溶血现象发生，记下时间（自加入稀释血液到溶液逐渐由红色变为透明澄清，红血球全部溶血所需时间），填入表一的空格中。
4、显微观察（1）血液红细胞的观察滴一滴稀释的血液于载玻片上，盖上盖玻片。
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实验三、细胞膜的渗透性
一 、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。 二、实验原理 与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极
性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种 极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多 细胞代谢产物通过特有的机制通过。
• 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
• 五、结果与分析
• 将观察到的现象记录， 并进行分析
试管编号 溶液种类 是否溶血 溶血所需时间 结果分析
1 2 3 4 … … 10
• 六、思考题
• 1.推断下列溶液的溶血反应会如何。
• 0.17 mol/L氯化钾、0.17 mol／L硝酸钾 0.12mol／L 氯化镁、0.12 mol／L氯化钙、0.10 mol／L硫酸钾、 0.10mol／L醋酸钾、0.10mol/L 柠檬酸钠、0.32 mol ／L甘露醇、0.32mol/L 蔗糖。
2. 试剂 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯 化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖， 0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L 丙醇；0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠， 0.10mol／L醋酸钠，
3. 器材 试管，1mL移液枪，载玻片，盖玻片， 光学显微镜等。
• 血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析 出淡黄色透明液体即血清。
抗凝血剂的种类与特点
• 常用抗凝血剂包括： • 1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素； • 2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素 、华法令和新抗凝
等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和 Ⅹ减少而抗凝； • 3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑 制作用； • 4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成 的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。
• 3、溶血前后的镜检观察 • 在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻
片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的 形态差异。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （1）分别取3只试管，各加入3ml的 0.17 mol／L氯
化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （2）分别取4只试管，各加入3ml的 0.32 mol／L葡 萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇， 0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反 应现象。
肝素的作用机理
• 肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。
• 与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一 作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin III，AT III ）。
• At III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸 的蛋白酶的抑制剂。肝素与At Ⅲ所含的赖氨酸结合后 引起AT Ⅲ构象改变，使At Ⅲ所含的精氨酸残基更易与 凝血酶的丝氨酸残基结合，形成At III凝血酶复合物而 使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （3）分别取3只试管，各加入3ml的 0.12 mol／L
硫酸钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸 钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载 玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形 态差异。
• 将红细胞放置在各种溶液中 ，渗入红细胞的溶 质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起 溶血及细胞膜破裂。
• 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此， 可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。
• 三、材料、试剂和仪器 1．材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等
渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在 0.01-0.2mg /mL；等渗液为0.15mol/L NaCl）
3、血小板
• 也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的 圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小 板的功能是参与止血与凝血。
两个概念
• 红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血 液中所占的容积百分比。正常成年男性为40%～ 50%，女性37%～48%，它反映了血液中红细胞和 血浆的相对数量变化。
• 2.抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？
渗透压（osmotic pressure）
• 用符号π表示，单位：atm • π的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的
溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积× 比重）。也可用Vant Hoff提出的公式计算：
π = icRT或π=n/VRT c=溶液的摩尔浓度；i = 等渗系数 π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的体积（dm3)， n是溶质的物质的量，R是摩尔气体常数，约8.314 。
血液的主要成分
• （一）血浆 • 血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄
色液体，其中除含有大量水分以外，还有 无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、 酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。
（二）血细胞
• 血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。 • 1、红细胞 • 呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，
细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就 是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结 合的能力。
• 2、白细胞 • 在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进
入周围组织中。 • 根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为
粒细胞和无粒细胞。 • 无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。 • 粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。
• 渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、 溶液温度和溶质解离度相关，因此有时 若得之渗透压的大小和其他条．血红细胞悬液： • 用注射器吸入 2mL含有肝素的等渗液后从鸡
翼下静脉取鸡血5mL，加 入50mL烧杯，将 鸡血用等渗液进行1：10稀释。
• 2． 溶血现象观察： • 取试管一支加入3mL蒸馏水， 加入1滴
或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意 观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂， 溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶 血现象。
一 、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。 二、实验原理 与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极
性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种 极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多 细胞代谢产物通过特有的机制通过。
• 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
• 五、结果与分析
• 将观察到的现象记录， 并进行分析
试管编号 溶液种类 是否溶血 溶血所需时间 结果分析
1 2 3 4 … … 10
• 六、思考题
• 1.推断下列溶液的溶血反应会如何。
• 0.17 mol/L氯化钾、0.17 mol／L硝酸钾 0.12mol／L 氯化镁、0.12 mol／L氯化钙、0.10 mol／L硫酸钾、 0.10mol／L醋酸钾、0.10mol/L 柠檬酸钠、0.32 mol ／L甘露醇、0.32mol/L 蔗糖。
2. 试剂 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯 化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖， 0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L 丙醇；0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠， 0.10mol／L醋酸钠，
3. 器材 试管，1mL移液枪，载玻片，盖玻片， 光学显微镜等。
• 血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析 出淡黄色透明液体即血清。
抗凝血剂的种类与特点
• 常用抗凝血剂包括： • 1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素； • 2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素 、华法令和新抗凝
等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和 Ⅹ减少而抗凝； • 3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑 制作用； • 4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成 的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。
• 3、溶血前后的镜检观察 • 在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻
片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的 形态差异。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （1）分别取3只试管，各加入3ml的 0.17 mol／L氯
化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （2）分别取4只试管，各加入3ml的 0.32 mol／L葡 萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇， 0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反 应现象。
肝素的作用机理
• 肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。
• 与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一 作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin III，AT III ）。
• At III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸 的蛋白酶的抑制剂。肝素与At Ⅲ所含的赖氨酸结合后 引起AT Ⅲ构象改变，使At Ⅲ所含的精氨酸残基更易与 凝血酶的丝氨酸残基结合，形成At III凝血酶复合物而 使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （3）分别取3只试管，各加入3ml的 0.12 mol／L
硫酸钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸 钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载 玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形 态差异。
• 将红细胞放置在各种溶液中 ，渗入红细胞的溶 质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起 溶血及细胞膜破裂。
• 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此， 可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。
• 三、材料、试剂和仪器 1．材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等
渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在 0.01-0.2mg /mL；等渗液为0.15mol/L NaCl）
3、血小板
• 也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的 圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小 板的功能是参与止血与凝血。
两个概念
• 红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血 液中所占的容积百分比。正常成年男性为40%～ 50%，女性37%～48%，它反映了血液中红细胞和 血浆的相对数量变化。
• 2.抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？
渗透压（osmotic pressure）
• 用符号π表示，单位：atm • π的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的
溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积× 比重）。也可用Vant Hoff提出的公式计算：
π = icRT或π=n/VRT c=溶液的摩尔浓度；i = 等渗系数 π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的体积（dm3)， n是溶质的物质的量，R是摩尔气体常数，约8.314 。
血液的主要成分
• （一）血浆 • 血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄
色液体，其中除含有大量水分以外，还有 无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、 酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。
（二）血细胞
• 血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。 • 1、红细胞 • 呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，
细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就 是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结 合的能力。
• 2、白细胞 • 在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进
入周围组织中。 • 根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为
粒细胞和无粒细胞。 • 无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。 • 粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。
• 渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、 溶液温度和溶质解离度相关，因此有时 若得之渗透压的大小和其他条．血红细胞悬液： • 用注射器吸入 2mL含有肝素的等渗液后从鸡
翼下静脉取鸡血5mL，加 入50mL烧杯，将 鸡血用等渗液进行1：10稀释。
• 2． 溶血现象观察： • 取试管一支加入3mL蒸馏水， 加入1滴
或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意 观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂， 溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶 血现象。