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新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程课件

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新生儿溶血病 ppt课件

新生儿溶血病 ppt课件

Rh-HDN患儿的血样本检查
释放试验 用乙醚放散，放散液与谱细胞反应。 排除合并ABO-HDN时，加相应的A、B 红细胞排除ABO新生儿溶血病（缺乏该 Rh抗体相应抗原的 A(B) 红细胞进行检 测证实）。
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新生儿溶血病的治疗
换血疗法
主要用于重症母婴血型不合引起的新生儿溶血
病，是治疗高胆红素血症的最迅速有效的方 法。
25
通过直抗、游离、释放试验确定ABO-HDN
Ö ±¿ ¹Ê ÔÑ é Ò õÐ Ô Ñ ôÐ Ô： Ò õÐ Ô Ò õÐ Ô Ñ ôÐ Ô Ñ ôÐ Ô Ò õÐ Ô Ñ ôÐ Ô
Ó ÎÀ ëÊ ÔÑ é Ò õÐ Ô Ò õÐ Ô Ñ ôÐ Ô Ò õÐ Ô Ò õÐ Ô Ñ ôÐ Ô Ñ ôÐ Ô Ñ ôÐ Ô
通过直抗试验，区分ABO-HDN和其他血型系统引 起的新生儿溶血病。ABO-HDN的直抗都很弱，一 般不会超过“1+”，而其他血型系统引起的溶血病， 特别是Rh-HDN，其直抗强度通常都超过“1+”

释放试验是“三项试验”中敏感度最高的一项试 验，阳性可确诊新生儿溶血病
直抗试验、游离试验阳性不能证实新生儿溶血病， 在新生儿溶血病检测中仅起到辅助诊断作用
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Rh-HDN患儿的血样本检查
直接抗球蛋白试验 Rh新生儿溶血病的直抗比较强，一般≥2+， 因此新生儿直抗强弱是区别ABO和Rh溶血病的主 要标志。
游离试验
Rh溶血病的游离试验要求最好用母亲的血清代
替婴儿血清做一组谱细胞,该试验阳性不能证实新生
儿溶血病，只能确定婴儿血清中可能存在的不规则
抗体。
27
致敏红细胞和血型抗体测定
35
产前诊断

实验五新生儿溶血病PPT课件

实验五新生儿溶血病PPT课件
酶A管 50μl 酶B管 酶O管
•
酶处理BC 50μl
酶处理OC 50μl
放散液
25μl 25μl 25μl
酶处理 1 2 3
Rh-HDN放散试验 1号细胞 2号细胞 50μl
50μl
3号细胞 50μl
放散液
25μl 25μl 25μl
37℃孵育15min，以1030rpm离心10min。观察结果。
生理盐水 1份
56℃水浴 轻摇7分钟 立即离心
上清液即 为
放散液
• 2.乙醚放散：
1份RBC 1份盐水 2份乙醚
振摇1min（排气） 离心3min
上层乙醚 中层RBC基质 下层放散液
吸管吸出放散液，置37℃水浴中 30min，除尽乙醚，然后鉴定抗体。
放散液中抗体的检测（卡法）
• ABO-HDN放散试验 酶处理AC
• Rh-HDN游离试验结果判断：任何一管出现凝集则 血清中存在不规则抗体（抗－D?进一步做抗体鉴 定)。3管均不出现凝集则血清中不存在不规则抗体。
放散试验
• 原理 利用特殊的方法将致敏在新生儿 红细胞上的抗体放散下来，然后再检 测放散液中的抗体。
放散液制备
• 1.热放散
取洗涤压积RBC
1份（1ml左右） +
• Rh-HDN放散试验结果判断：任何一孔出现凝集则放散出不规 则抗体（抗－D？抗体鉴定)。3孔均不出现凝集则没有放散出 不规则抗体 。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
释放试验结果判断
ABO-HDN放散试验结果判断

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程PPT文档共52页

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程PPT文档共52页
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己——德国43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验 标准检测流程
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程PPT演示课件

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程PPT演示课件
实验室结果不一致； ⒋ 不同实验室对产后HDN三项试验的
分析标准不统一。
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（三）医疗纠纷的潜在隐患
⒈ 全国已有许多案例。
⒉ 为产前免疫性抗体效价高者开药，如果 分娩后,新生儿为O型，或Rh阴性，怎么 办？
⒊ 新生儿生理性黄疸与HDN不易区别时， 如果两个实验室三项试验结果不一致， 怎么办？
⒋ 各实验室HDN结果无可比性，存在潜在 的医疗纠纷隐患。
三、标本要求
⒈ 第一次检查：采集夫妇双方EDTA抗 凝血各3-5毫升。
⒉ 复查检查：采集夫妇双方EDTA抗凝 血3-5毫升。
⒊ 如果无配偶的血液标本，则无法检 测孕妇是否有针对其配偶特有的、低 频率抗原所产生的免疫性抗体。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
四、检查项目
⒈ 夫妇ABO、Rh(D)血型鉴定。
型者。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
二、标本采集时间 ⒈ 有不良妊娠史、输血史及HDN史的
孕前妇女和Rh阴性孕前妇女的标本采 集时间为怀孕前； ⒉ 孕妇血型为0型、配偶血型为非O型 者，标本采集时间为怀孕后；
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
（1）第一次检测，一般可在妊娠第1216周进行，以此作为抗体基础水平。如 果检测到ABO以外抗体，或高效价的IgG 抗A（B）抗体，建议每月复查一次。
新生儿溶血病（HDN）免疫 血液学试验标准检测流程
新疆医科大学第一附属医院输血科 宋小川
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2011年10月在北京由中国医师协会 输血科医师分会举办了全国首届输 血系统新生儿溶血病标准化操作研 讨会。我国开展HDN研究30年以来， 临床已召开过数次HDN专题研讨会， 而输血科实验室工作30年来却从来 没有召开过研讨会。

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程

新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
⒊ 第二次检测时可以使用第一次的 冻存标本做平行对照，有助于排除 实验技术和试剂红细胞的干扰。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 三、标本要求
❖ ⒈ 第一次检查：采集夫妇双方EDTA抗 凝血各3-5毫升。
❖ ⒉ 复查检查：采集夫妇双方EDTA抗凝 血3-5毫升。
全国首届HDN实验室工作者研讨会内容 ❖⒈ 大会交流 ❖ 专家讲座：HDN临床和实验室研究的
国内外进展 ❖⒉ 研讨：
（1）研讨内容： ① 样本采集 ② 实验项目及操作 ③ 结果判定或解释
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（2）研讨要达到目的：“三化” ❖ ① 实验方法的规范化 ❖ ② 临床导向科学化 ❖ ③ 不同实验室的结果互相可比化
❖ ⒊ 如果无配偶的血液标本，则无法检 测孕妇是否有针对其配偶特有的、低 频率抗原所产生的免疫性抗体。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 四、检查项目
❖⒈ 夫妇ABO、Rh(D)血型鉴定。
❖⒉ 孕妇/孕前妇女血液中IgG抗A（B）抗 体效价检测：
❖ 孕妇/孕前妇女是O型，若配偶是A型或B 型，检测孕妇/孕前妇女相应的IgG抗A （B）抗体效价；若配偶是AB型，分别检 测孕妇/孕前妇女IgG抗A（B）抗体效价。
不合应在出生后尽早为好。
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖⒉ 采样部位：静脉血、脐血标本均可。
❖ 注：因为母婴ABO血型不合的新生儿脐 带血大约有20﹪血清学常规三项试验 为阳性，但临床上并无新生儿溶血症 状，血清胆红素也未见升高【摘自王 羽主编，全国临床检验操作规程（第3 版）268页】。若条件允许，产后血液 学试验推荐使用静脉血。

新生儿溶血病筛查PPT课件

新生儿溶血病筛查PPT课件
ABO新生儿溶血病筛查
新生儿溶血病
（hemolytic disease of the newborn,HDN）
是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。 胎儿从父方遗传所获ABO血型抗原为母方所缺乏，分娩过 程中该胎儿血型抗原进入母体，使母体产生抗该血型抗原的 抗体（IgG类）。当母体再次妊娠时，抗该血型抗原的抗体 （IgG类）可通过胎盘进入胎儿血液循环，使胎儿在宫内或 出生后发生大量红细胞破坏，出现一系列溶血性征象的疾病。 在我国以ABO血型不合最常见，约占85.3%，但预后良好。 RhD血型不合在我国发病率较低，约占14.6%，但往往出现 中等程度或重度HDN。其它如MN、Kell血型系强，通常意味着新生儿溶 血病的病情越重，这一特点也是释放实验 所不具备的。释放实验的特点是敏感度高， 由于释放实验所使用的红细胞比直抗实验 多几百倍，因此有可能达到较高的敏感度。 释放实验是“三项实验”中敏感度最高的 一项实验，也是判定新生儿溶血病最有利 的证据。
影响因素
放散试验的时间和温度：温度过高或时间 过长，抗体可能变性；温度过低或时间缩 短，抗体从红细胞上解离不完全。
被检标本：用EDTA抗凝血，避免出现假阳 性；红细胞标本一定不能被细菌污染，否 则出现假阳性反应；标本不宜久置，防止 红细胞上已致敏的抗体游离到血浆中，造 成假阴性或阳性程度降低，尽可能应用当 日采集的新鲜血做本实验。
诊断标准
直抗、游离、释放试验确定ABO新生儿溶血 病
（不包括O细胞阳性结果）见下表：
直抗实验 游离实验 释放实验
结论
—
—
—
不能证实为血型免疫抗体引起的
新生儿溶血病
+
—
—
可疑为新生儿溶血病
—

免疫性溶血性贫血检验输血学课件

免疫性溶血性贫血检验输血学课件
❖ （5）释放试验：是诊断新生儿溶血病的主 要依据。结果阳性应诊断新生儿溶血病，因 致敏红细胞通过加热加热抗体释放出来，而 释放液中抗体的特异性可用标准红细胞来确 定。 ABO血型不合溶血病行56℃热放散法，R 和D血型不合溶血病行乙醚放散法。
辅助诊断
X线摄片
全身水肿胎儿在X线摄片可见软组织增 宽的透明带，四肢弯曲度较差。
外祖母学说
孕妇Rh阴性，孕妇自己在胎儿时期，孕妇 的母亲（外祖母）的Rh阳性红细胞经胎盘反向 流入胎儿体内而发生了初次免疫反应，当孕妇 第一胎妊娠Rh阳性胎儿时，进入孕妇体内的胎 儿红细胞刺激孕妇已致敏的淋巴细胞，引起免 疫会反应，产生足够Rh抗体，可导致第一胎发 病。
临床表现
❖ 新生儿溶血病的临床表现轻重与缓急取决于抗原 性的强弱、个体的免疫反应、胎儿的代偿能力和 产前的干预措施等因素。
胆红素脑病
患儿可出现胆红素脑病（又称：核黄疸）， 足月胆红素超过306umol/L，早产儿胆红素超过 204～255umol/L应高度怀疑有发生胆红素脑病的 可能。可表现为神志萎靡、吸允反射和拥抱反射 减弱、肌张力低下，历时半天到一天，如病情进 展，出现发热、两眼凝视、肌张力增高、抽搐、 角弓反射等，最终可因呼吸衰竭或肺出血死亡。
（二）血型血清学检查
（1）血型：孕期取样水测定胎儿ABO血型， 若证实母胎同型者或新生儿O型者可排除 ABO血型不合溶血病，但不排除其他血型 系统的溶血病。胎儿RhD血型应取胎儿血检 测。
（2）抗体效价：ABO血型不合溶血病可执行 A和（或）抗B效价测定，RhD血型不合溶 血病可执行抗D效价测定。
三、血液治疗
1、血液制剂与血液制品输注
可输注血浆和白蛋白。白蛋白可与非结合素结 合，使游离非结合胆红素减少，预防胆红素脑病。 生后两个月内，应及时复查红细胞和血红蛋白。 若血红蛋白＜70g/L，可多次少量输注红细胞。

新生儿溶血病ppt课件

新生儿溶血病ppt课件
胎
第二胎溶血 少量胎儿血 胎儿红细 0.05～0.1ml 胞溶血
胎盘
Rh阴性母 产生IgM 产生少量
血
抗体 IgG抗体
母血循环 产生大量 IgG抗体
初发免疫反应
次发免疫反应
Rh溶血病发生在第一胎的情况
Rh阴性母亲既往输过Rh阳性血。 Rh阴性母亲既往有流产或人工流产史。 极少数可能是由于Rh阴性孕妇的母亲为Rh阳性，其 母怀孕时已使孕妇致敏，故第一胎发病（外祖母学 说）。
RhD血型不合者约1/20发病
母亲对胎儿红细胞Rh抗原的敏感性不同。
定义 病因和发病机制 病理生理 临床表现 实验室检查 诊断和鉴别诊断 并发症 治疗 预防
病理生理
◆ ABO溶血
胎儿红细胞溶血轻
◆ Rh溶血
胎儿红细胞溶血重
胎儿血中胆红素↑ 胎儿重度贫血 髓外造血↑
胎盘 母亲肝脏
低蛋白血症 心力衰竭
有报道:
ABO溶血病 Rh溶血病 MN溶血病
占新生儿溶血比例 85.3% 14.6% 0.1%
HDN均伴有程度不一的高未结合胆红素血症和贫血 ; 胆红素脑病为HDN最严重的并发症;
定义 病因和发病机制 病理生理 临床表现 实验室检查 诊断和鉴别诊断 并发症 治疗 预防
胎儿从父亲遗传而来的红细胞抗原恰为母亲所缺 少,胎儿红细胞通过胎盘进入母体血循环中刺激母 体产生相应的血型抗体（IgG）。
不常见
母缺少任一Rh抗原 具有该Rh抗原
胎儿却
一般发生在第二胎；第一胎也 可发病
大多数更严重
临床表现 黄疸 贫血 肝脾大 晚期贫血
较轻 生后第2～3天出现 轻 很少发生 很少发生
较重，严重者甚至死胎 24小时内出现并迅速加重 可有严重贫血或伴心力衰竭 多有不同程度的肝脾增大 可发生，持续至生后3～6周
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❖ （5）试验方法； ❖ （6）试验结果； ❖ （7）实验者、复核者签名； ❖ （8）如需复查，复查时间需注明； ❖ （9）参考值范围。 ❖ 七、试验报告参考格式（查看Word文
件）
PPT学习交流
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
新生儿溶血病产后血清学检测的目的 ❖ 一、确定新生儿血型是否与母亲不
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 二、试剂与设备（查看Word文件） ❖ 三、检测方法 ❖ ⒈ 产妇血样检测： ❖ 同《HDN产前免疫血液学试验》孕妇血
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ （1）第一次检测，一般可在妊娠第1216周进行，以此作为抗体基础水平。如 果检测到ABO以外抗体，或高效价的IgG 抗A（B）抗体，建议每月复查一次。
❖ （2）第二次检测在妊娠28-30周做，以 后每隔2-4周重复测定一次，了解抗体增 加速度。抗体效价上升快，提示HDN的可 能性大。
PPT学习交流
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全国首届HDN实验室工作者研讨会内容
❖⒈ 大会交流
❖ 专家讲座：HDN临床和实验室研究的国 内外进展
❖⒉ 研讨：
（1）研讨内容：
① 样本采集
② 实验项目及操作
③ 结果判定或解释
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（2）研讨要达到目的：“三化” ❖ ① 实验方法的规范化 ❖ ② 临床导向科学化 ❖ ③ 不同实验室的结果互相可比化
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我国HDN实验室检查存在的问题
（一）产前检查 ⒈ 试剂、实验方法不统一，不同实验室 测定IgGABO抗体效价差别大； ⒉ IgGABO抗体效价与产后发病预测价值 太低； ⒊ Rh抗体效价与产后发病概率资料不全
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（二）产后检查
❖⒈ 新生儿血型鉴定困难；
❖⒉ 三项试验“分析判断”与临床不吻 合；
新生儿溶血病（HDN）免疫 血液学试验标准检测流程
宋小川
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2011年10月在北京由中国医师协会 输血科医师分会举办了全国首届输 血系统新生儿溶血病标准化操作研 讨会。我国开展HDN研究30年以来， 临床已召开过数次HDN专题研讨会， 而输血科实验室工作30年来却从来 没有召开过研讨会。
❖⒊ 三项试验试剂、方法不统一，不同 实验室结果不一致；
❖⒋ 不同实验室对产后HDN三项试验的分 析标准不统一。
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（三）医疗纠纷的潜在隐患
⒈ 全国已有许多案例。
⒉ 为产前免疫性抗体效价高者开药，如果 分娩后,新生儿为O型，或Rh阴性，怎么 办？
⒊ 新生儿生理性黄疸与HDN不易区别时， 如果两个实验室三项试验结果不一致， 怎么办？
不合应在出生后尽早为好。
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖⒉ 采样部位：静脉血、脐血标本均可。
❖ 注：因为母婴ABO血型不合的新生儿脐 带血大约有20﹪血清学常规三项试验为 阳性，但临床上并无新生儿溶血症状， 血清胆红素也未见升高【摘自王羽主编， 全国临床检验操作规程（第3版）268 页】。若条件允许，产后血液学试验推 荐使用静脉血。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 五、检测方法（查看Word文件）
❖ 六、试验报告
❖⒈ 试验报告至少包括以下内容：
❖ （1）实验室名称和联系方式；
❖ （2）被检者姓名和唯一性编号；
❖ （3）送检医院；
❖ （4）样本接受/采集日期和报告日期；
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ16
HDN产前免疫血液学试验检测标准
孕前妇女； ❖ ⒉ Rh阴性孕前妇女； ❖ ⒊ 孕妇血型为0型、配偶血型为非O
型者。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 二、标本采集时间 ❖ ⒈ 有不良妊娠史、输血史及HDN史的
孕前妇女和Rh阴性孕前妇女的标本采 集时间为怀孕前； ❖ ⒉ 孕妇血型为0型、配偶血型为非O型 者，标本采集时间为怀孕后；
⒋ 各实验室HDN结果无可比性，存在潜在
的医疗纠纷隐患。
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新生儿溶血病（HDN）免疫 血液学试验检测标准
一、 HDN产前免疫血液学试验检测标准 二、HDN产后免疫血液学试验检测标准 三、HDN换血治疗中血液及血型选择标准
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 一、检查对象 ❖ ⒈ 有不良妊娠史、输血史及HDN史的
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ ⒊ 采样量：
❖ （1）父亲抗凝血2ml；
❖ （2）母亲不抗凝血4ml分离血清；抗凝 血2ml；
❖ （3）患儿抗凝血3ml以上；不抗凝血 1ml（新生儿如果采样困难，应尽量保
证抗凝血样本）
❖⒋ 抗凝剂选择：EDTA抗凝/枸橼酸钠 抗凝。
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合； ❖ 二、证实患儿血清中是否有来自于
母亲的抗体； ❖ 三、患儿红细胞是否被来自母亲的
免疫性抗体所致敏。
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 一、标本要求 ❖ ⒈ 采样时间建议： ❖ （1）可疑ABO不合HDN患儿血清学
检查最好在出生后1-7天之内； ❖ （2）可疑Rh等其他血型系统血型
型，检测孕妇/孕前妇女相应的IgG抗A
（B）抗体效价；若配偶是AB型，分别检
测孕妇/孕前妇女IgG抗A（B）抗体效价。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖⒊ 孕妇/孕前妇女血液中ABO以外抗 体检测：
❖ 需要使用抗体筛选细胞和其配偶红细 胞进行ABO以外抗体和针对其配偶特 有的、低频率抗原所产生的免疫性抗 体的筛选。如有抗体要进行抗体特异 性鉴定和效价测定。
❖ ⒊ 如果无配偶的血液标本，则无法检
测孕妇是否有针对其配偶特有的、低
频率抗原所产生的免疫性抗体。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 四、检查项目
❖⒈ 夫妇ABO、Rh(D)血型鉴定。
❖⒉ 孕妇/孕前妇女血液中IgG抗A（B）抗 体效价检测：
❖ 孕妇/孕前妇女是O型，若配偶是A型或B
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
⒊ 第二次检测时可以使用第一次的 冻存标本做平行对照，有助于排除 实验技术和试剂红细胞的干扰。
PPT学习交流
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 三、标本要求
❖ ⒈ 第一次检查：采集夫妇双方EDTA抗 凝血各3-5毫升。
❖ ⒉ 复查检查：采集夫妇双方EDTA抗凝 血3-5毫升。