凯氏定氮仪试剂配制步骤

1、消化取两个凯氏烧瓶标号，一只加1.0ml蒸馏水作为空白对照，另一只加1.0ml样液。

各加硫酸钾和硫酸铜混合物约20mg、浓硫酸2ml。

烧瓶口插一漏斗（冷凝用），烧瓶置于电炉上加热。

开始时应注意火力，以免使瓶内液体冲至瓶颈。

待瓶内水气蒸完，硫酸开始分解生成SO2白烟时，适当加强火力，直至消化液透明并呈但旅色为止（约2~3h），用木夹取出，冷却，准备蒸馏。

2、蒸馏取50~100ml锥形瓶3只，先按一般方法洗净，再用蒸汽洗涤数分钟，冷却。

用移液管各加入2%硼酸溶液5.0ml和指示剂4滴。

如瓶内液体呈葡萄紫色，可再加硼酸液5ml，盖好备用。

如锥形瓶内液体呈绿色，需用蒸汽重新洗涤。

1.安全管2.导管3.汽水分离管4.样品入口5.塞子6.冷凝管7.吸收瓶8.隔热液套9.反应管10.蒸汽发生瓶微量凯氏蒸Array馏装置如图所示，蒸汽发生器内盛放有滴加数滴H2SO4的蒸馏水和数粒沸石。

加热后，产生的蒸汽经储液管、反应室至冷凝管，冷凝后的液体流入接受瓶。

每次使用前，需用蒸汽洗涤10min左右（此时可用一小烧杯盛接冷凝的水）。

然后将一只盛有硼酸液和指示剂的锥形瓶放置在冷凝管的下端，并使冷凝管之管口插入酸液面下，继续蒸馏1~2min，如硼酸液颜色不变，表明仪器已洗净，否则需再洗。

移去酸液，蒸馏1min，用水冲洗冷凝管口吸去反应室残夜。

将消化好的消化液，由小漏斗加入反应室，用蒸馏水洗涤凯氏烧瓶2次（每次约2ml），洗涤液均经小漏斗加入反应室，再在冷凝管下置一盛有硼酸液和指示剂的锥形瓶，并使冷凝管口插入酸液面下0.5cm处（10mL酸液置于50~100mL锥形瓶内，液体深度不大，可将锥形瓶斜放。

冷凝管口必须插在液面下，但也不宜太深，这样，万一发生倒吸现象时，硼酸液也不致被吸入反应室内）。

用小量筒取10~15mL30%的NaOH溶液，倒入小漏斗，放松弹簧夹，让NaOH溶液缓缓流入反应室，当小漏斗内剩下少量NaOH溶液时，夹紧夹子，再加入约3mL蒸馏水于小漏斗内，同样缓慢放入反应室，并留少量水在漏斗内做水封，即可蒸馏。

蛋白质的测定方法—凯氏定氮法一、原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。

二、试剂1、硫酸铜硫酸钾浓硫酸氢氧化钠2、硼酸溶液（20g/L）：称取20g硼酸，加水溶解并稀释至1000ml。

3、氢氧化钠溶液（400g/L）：称取400gNaOH加水溶解后，放冷，并稀释至1000ml。

4、盐酸标准溶液（0.05mol/L）5、甲基红乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml。

6、溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml。

7、甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：临用时以1:5混合。

三、测定1、试样处理（消化）：准确称取水解胶原蛋白0.5g,准确至0.0001g，硫酸铜0.2g，硫酸钾6g于干燥洁净的凯氏定氮管中，至消化炉上，加浓硫酸20ml，盖帽。

开启消化炉（温度设定为400℃），仪器大约20分钟达到设定温度，开始计时，样品消化需2-3h，至液体呈蓝绿色并澄清透明后。

断电，放冷。

2、蒸馏与吸收：将消化好的试样转移至100ml容量瓶中，加水（边加边缓慢振摇容量瓶，由于样品放热，操作时戴手套以免烫伤）稀释至100ml容量瓶中，摇匀，备用。

同时做空白试验。

向接收瓶中加入硼酸（20g/L）50ml及10D甲基红—溴甲酚绿混合指示剂。

打开凯氏定氮仪电源开关，打开冷却水，设置加碱（40%的NaOH 溶液）时间为7秒，蒸馏时间为6分钟，取定容后溶液10ml到消化管中，放置到相应位置。

关闭安全门，开机预热3分钟后按启动键开始加碱、蒸馏。

当吸收液呈中性时，停止吸收。

用0.05mol/L盐酸标准液滴定接收液，颜色由绿色变为灰红色即为滴定终点，记录消耗盐酸体积。

3、计算C*(V1-V0)*0.014X=----------------------*F*100M*10/100其中水解胶原蛋白换算系数F为5.791、注意事项1、开机预热3分钟，第一个样品测试用蒸馏水代替样品，加碱时间设置为0，使仪器预热。

K9840操作步骤一．化学试剂的准备1 将蒸馏水加入到蒸馏水桶（带有蓝色H2O标签）内, 并将瓶盖拧紧。

2 配制30％～40%的氢氧化钠（NaOH）溶液，加入到碱液桶（带黄色NaOH标签）内，并将桶盖拧紧。

（建议用40%浓度，溶液在室温变化后不易结晶，也不易堵塞管路）3 根据实验需要配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂溶液。

4 配制2%硼酸（H3BO3）溶液，然后按100：1的比例加入甲基红-溴甲酚绿混指示剂，混合均匀，加入到硼酸桶（带红色H3BO3标签）内，并将瓶盖拧紧。

二．安装使用1. 安装仪器①仪器平稳放置在试验台上，仪器背面应离开墙壁40厘米以上，电源插座距机器不大于一米，并配备空气开关，漏电开关和可靠的地线②连接好冷凝水进水管，一般情况下连接自来水阀门；连接排水管，放入排水池，并保证排水通畅。

③将储液桶和消化管进行清洗后加入已配好的试剂，．并按照仪器图示接好气路液路管路：碱桶气源出口-接碱桶气路管，硼酸气源出口-接硼酸桶气路管，蒸馏水气源出口-接蒸馏水桶气路管，碱液接入口-接碱液桶液路管，硼酸接入口-接硼酸桶液路管，蒸馏水接入口-接蒸馏水桶液路管。

④装一只空的消化管和锥形接收瓶，关好防护门，插上电源线，做好一切开机准备。

2仪器预热①打开冷却循环水，开机仪器直入主界面。

②首界面分三个模块，分别为测试、维护、帮助。

可使用【左】、【右】键进行选择，选中测试，点击【确定】键，进入测试模块。

③按左右方向键可以选择相应操作，按【确定】进入下一界面。

也可直接按【自动】键进入自动测试参数界面，或者按【手动】键进入手动测试界面。

我们一般选择【自动测试】，按确定进入。

④按上下左右键来选择需要修改的参数项，按数字键用来修改相应参数。

稀释水量：可输入需要添加稀释水的体积（ml）（做样品时，为了避免浓硫酸与浓碱反映过于剧烈，加入适量稀释水进行稀释10-20ml即可）硼酸体积：可输入需要添加硼酸的体积（ml）（一般硼酸设置加25ml）加碱体积：可输入需要添加碱液的体积（ml）(加碱量一般为消解时浓硫酸的4倍为宜，蒸空管预热仪器时不需要加碱，可设置为“0”）蒸馏时间：可输入需要蒸馏的时间（min）(蒸馏时间一般设置为5min)淋洗水量:可输入需要添加淋洗水量的体积（ml）（仪器中的淋洗功能为冲洗冷凝管路，确保无氮损失一般可设置10-20ml）⑤参数输入完毕按【确认】后给出“接收杯是否到位”安全提示，查看接收杯是否放置好，放置好后按【确定】后仪器开始进行测试，测试的顺序为系统自动运行，运行的次序分别为加硼酸、加稀释水、加碱、蒸馏、淋洗。

凯氏定氮仪使用步骤凯氏定氮仪是一种用于测定有机物中氮含量的仪器。

它使用凯氏蒸馏的原理，通过将样品中的氮化合物转化为氨，并用酸解氢氧化，从而形成氨。

然后用强碱进行中和，生成三氯铜氨络合物，最后通过反应定量测定氮的含量。

以下是使用凯氏定氮仪的步骤：1.准备样品：将需要测定氮含量的样品称取适量，一般为0.1-1g。

样品可以是比较干燥的固体或者经过溶解后的液体。

2.加入氢氧化钠：将样品转移到凯氏定氮仪的固氮分离器中，加入适量的氢氧化钠。

氢氧化钠的作用是将样品中的氨生成氢氧化铵。

3.蒸馏：将固氮分离器与蒸馏器连接，并将蒸馏器中加入一定量的碱性钼酸铵试剂。

启动仪器，开始蒸馏过程。

在蒸馏过程中，样品中的氮化合物会转化为氨，然后与碱性钼酸铵试剂反应生成铵酸锰(I)。

这个反应会在蒸馏器中不断进行，直到样品中的氮化合物完全转化为氢氧化铵。

4.中和：蒸馏完成后，将蒸馏器中的液体转移到接收器中，加入适量的硫酸至中和。

硫酸的作用是中和溶液中的氢氧化钠，生成氨。

这一步是非常关键的，因为如果溶液中的氨未能被中和完全，则会影响最终的测量结果。

5.反应：加入足量的三氯化铜溶液与中和后的样品进行反应。

三氯化铜与氨反应生成三氯铜氨络合物。

6.过滤：将反应后的溶液过滤，去除不溶于水的固体。

这个步骤可以保证最终测量结果的准确性。

7.测定氮含量：将过滤后的溶液转移到光度计中，使用适当的波长下进行测定。

根据溶液的吸光度可以得到氮含量的测量结果。

8.计算结果：根据测定结果，可以计算出样品中的氮含量。

通常以百分比或者质量比的形式表示。

总结：凯氏定氮仪是一种测定有机物中氮含量的仪器，使用步骤包括准备样品、加入氢氧化钠、蒸馏、中和、反应、过滤和测定氮含量等。

每个步骤都非常关键，需要仔细操作才能得到准确的测量结果。

在使用过程中，还需注意仪器的清洁和校准，以保证测量结果的准确性。

凯氏定氮仪所需试剂的配置方法-优谱通用1制备溶液所需设备1.1 电热干燥箱:室温~300°C1.2 电子万用炉13分析天平:分度值0.1mg1.4 A级玻璃量器：100Om1容量瓶、IOOm1容量瓶、50Om1烧杯、50m1烧杯、IOm1刻度移液管、5m1刻度移液管1.5 辅助工具：搅拌棒、滴管2氢氧化钠溶液称取400g氢氧化钠,于500m1烧杯中,用去离子水溶解,冷却至室温,转移至IOOOm1容量瓶,定容至刻度才密匀备用3硼酸溶液称取20.00g硼酸,用去离子水溶解并定容至IOOOm1容量瓶插匀移至试剂瓶备用才安100:1比例加入甲基红-漠甲酚绿混合指示剂,混匀。

4混合指示剂4.1 甲基红乙醇溶液(1g∕1):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇用95%乙醇稀释至IOOm14.2 浸甲酚绿乙醇溶液(1g∕1):称取0.1g漠甲酚绿，溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至IOOm104.3 混合指示剂:1份甲基红乙醇溶液与5份漠甲酚绿乙醇溶液临使用时混合。

5标准滴定溶液一盐酸标准滴定溶液按照表1的规定量取盐酸,缓缓注入IOOOmI水中，冷却，摇匀。

表1按表2的规定取决于27(TC~300°C高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠，溶于50m1蒸储水中,加10滴甲基红-浸甲酚绿指示液,用配置好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时做空白试验。

盐酸标准溶液的滴定浓度[C(HCI)1数值以摩尔每升(mo1/1)表示,按式1计算；c(HC1)=m*1000∕(V1-V2)*M .................................................... 式1式中：m-无水碳酸钠的质量的准确数值，单位为克(g);VI—盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(m1);V2—空白试验盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(m1);M一无水碳酸钠的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mo1)[M(1∕2Na2CO3)=52.994]二硫酸标准滴定溶液配制按照表3的规定量取硫酸，缓缓注入IOOOmI水中，冷却，摇匀。

8400凯氏定氮仪操作规程1、仪器原理：在NaOH存在的条件下，通入蒸汽蒸馏出氨。

蒸出的氨通过冷凝器送至含加入混合指示剂的硼酸吸收液的滴定缸中，，用盐酸标准溶液滴定。

2、试剂配制：2.1 400g/LNaOH:取400g氢氧化钠溶于水中，并不断搅拌，同时再通风橱中进行，冷却至室温后，用水稀释至1000ml。

2.2 10g/L硼酸:称取10g硼酸，用沸水溶解，冷却后稀释至1L。

2.3甲基红指示剂（1g/L）：称取1g甲基红指示剂于小烧杯中，用无水乙醇溶解转移并定容至1L容量瓶中，储存于棕色瓶中。

2.4溴甲酚绿指示液（1g/L）：称取1g溴钾酚绿于小烧杯中，用无水乙醇溶解转移并定容至1L容量瓶中，储存于白色瓶中。

3、操作步骤3.1 开机前准备工作：先检查消化管边缘是否不平、有裂纹和缺口。

仪器的各连接管及线路是否连接好，再检查冷却水笼头或循环冷却装置是否开启、蒸馏装置是否完好。

3.2 检查氢氧化钠、硼酸、稀释液（纯水）、盐酸标准滴定液以及废液桶的液位，确认前四种溶液是否足够，若不够及时添加或更换；以及废液桶液位是否能再接收废液，处于高位时及时处理。

检查是否有试剂结晶堵住桶盖上的空气孔，如有，可用温水清洗桶盖直到没有结晶残留。

3.3 按顺序打开总电源、冷凝水以及仪器电源开关,等待仪器自检至出现菜单选项。

3.4 打开仪器设置菜单，选择收到添加接收液到滴定缸，直到流出液与桶内颜色一致。

3.5选择列表菜单，新建批次将“分析类型”设置为Kjeldahl 在“样品架名称”中选择合适数量的样品架→根据测定需求选择不同的程序【BLANK空白、DAP氮含量分析、cleaning清洗】→在“样品”中设置分析样品数量→在“预定义类型”中选择【HSL 做仪器校准、 N样品分析、 Blank 空白】→结果类型会根据选择自动变为ml或N%。

3.6当批次和样品设定完成后在“注册”中点击注册→所选批次后面会出现A→点“分析”后仪器会按之前设定好的顺序逐个分析。

K1100操作步骤一前处理1、清洗消化管，然后烘干。

2、称量样品、催化剂与消化管中，再加入浓硫酸。

3、放到消解仪上开始消解220℃ 20 min280℃ 20min350℃ 20min420℃ 90min以样品消化澄清蓝绿色后再消化至少0.5h为宜4、消化完成后，取下消化管冷却，彻底冷却后上机开始测试。

二：试剂配制1、硫酸标准滴定溶液[c(1/2H2SO4)=0.0500/0.1mol/L]2、40%氢氧化钠溶液1000 ml（400 g/L）3、0.05 mol/L硫酸铵标准溶液1000 ml，溶液中的氮含量为1.4 mg/mL。

(隔夜使用)4、2%浓度硼酸溶液2000 ml （20g/L）5、甲基红、溴甲酚绿混合指示剂（配制方法：0.1 g甲基红加0.5 g 溴甲酚绿用无水乙醇定容至100 ml）不少于100mL。

隔夜使用！6.指示剂与硼酸溶液按1：100混合，例如： 10ml指示剂加入1000ml硼酸溶液中。

（试剂配好后用稀酸或稀碱溶液把硼酸的PH值调至4.5左右）三：定氮仪操作流程1、打开自来水2、开机→清洗→换酸清洗→启动→清洗2—3次（防止管路中有气泡产生造成结果不稳定，所以进行换酸清洗）3、放根空消化管，进入测试→自动测试→设置参数→确认→4-5个空管测试（精密仪器内部有硬件和软件连接而成所以需要有个预热，让其达到一个最稳定的状态。

）4、预热时参数设置（仅供参考，具体情况具体分析）：1)编号：流水编号自动累积加12)重量：样品质量3)滴定酸：标定后氢离子浓度4)空白体积：05)蛋白转换系数：参照国标6)稀释水：20ml7)硼酸：25ml （以实际情况而定）8)碱：40ml（与消化所取酸体积有关，过量为准）9)蒸馏：5min5、仪器预热稳定后即可测样品空白（当多次空白测定值误差较小时，仪器即稳定）6、把所测得样品空白的滴定体积输入至空白体积处，输入重量和蛋白转换系数即可测样7、测试结束后，放根空消化管，选择测试→自动测试→重量：0,空白体积：0，稀释水：80ml，碱：0蒸馏：5min，→确认进行清洗测试结束后关机关水（关机前确保接收杯内液体全部排出）四：注意事项1，消化管要安装正确。

凯氏定氮仪操作步骤凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器.1.原理：将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。

在这一步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点。

样本的分析过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明（开始时很暗)。

在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏,这一步会将铵盐转化成氨.而总氨量(由样本的含氮量直接决定）会由反滴定法确定：冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。

氨会和酸反应,而过量的酸则会在甲基橙的指示剂下变色,用碳酸钠滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。

2.适用范围：凯氏定氮仪仪器用凯氏方法检测谷物、食品、饲料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化学品中的氨、蛋白质氮含量、酚、挥发性脂肪酸、氰化物、二氧化硫、乙醇等含量。

具有相当好的性价比，仅仅滴定过程需要人工操作一下,非常适合实验室及检验机构常规检测。

广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。

3。

操作步骤：3。

1配制溶液1、0。

1mol/L HCl 溶液（8.3mL浓盐酸溶于1000mL蒸馏水）2、硼酸溶液 10g/L (20g硼酸于2L蒸馏水）3、溴甲酚绿指示剂（0.1%，无水乙醇,每L硼酸指示剂加入10mL）4、甲基红指示剂(0.1%，无水乙醇，每L硼酸指示剂指示剂加入7mL)5、400g/L NaOH 溶液（800g NaOH 固体于2L 蒸馏水，实验室外通风处配制）6、硼酸指示剂配——将溶液2、3、4混匀搅拌，配制成硼酸指示剂。

3.2样品消化在通风橱进行样品消化实验，在样品中加入10ml浓硫酸和催化剂→长按开关开机→将样品放入消化炉→盖上盖子，并通水→4小时后，完成消化→长按开关键关机→将样品冷却后放在海绵上→结束3.3样品测定开关→开冷凝水→调整盐酸浓度（根据标定值）→恢复操作界面→按左右方向键选择Blank，Blank<0.2时才可开始→按左右方向键选择栏目，如mg（样品中含有多少mg蛋白质)；mgN(样品中的N含量) →空管洗空白【程序5下操作，洗到小于0.5000mgN】→Blank【程序1下操作,Result调到“blank”，洗到小于0.1mgN】→测定样品【程序1下操作，Result 调到“mgN”(酒红色→绿色→酒红色)】→清洗机器（测定完样品后，调到程序5下操作，Result调到“mgN”，洗到0。

凯氏定氮法操作流程
凯氏定氮法是一种常用的水质监测方法，通过测定水中氨氮和
亚硝酸盐氮的含量来判断水体的污染程度。

下面将详细介绍凯氏定
氮法的操作流程。

1.试剂准备。

首先，准备好所需的试剂，包括硼酸-硼酸钠缓冲液、碱性碘化
钾溶液、硫酸铜溶液等。

确保试剂的纯度和浓度符合实验要求，避
免影响实验结果。

2.样品处理。

将采集的水样进行预处理，去除悬浮物和有机物质，以保证实
验结果的准确性。

可以采用沉淀法、过滤法或萃取法进行样品处理，具体方法根据水样的特点来选择。

3.反应操作。

取适量处理后的水样，加入硼酸-硼酸钠缓冲液和碱性碘化钾溶
液，使水样中的氨氮和亚硝酸盐氮与试剂发生反应。

在反应过程中，要保持温度稳定，避免温度对反应结果产生影响。

4.测定结果。

根据反应后产生的颜色深浅，利用分光光度计或比色皿对水样
中氨氮和亚硝酸盐氮的含量进行测定。

根据标准曲线或计算公式，
计算出水样中氨氮和亚硝酸盐氮的浓度。

5.结果分析。

根据测定结果，对水质进行评价和分析。

根据相关标准和法规，判断水体是否达标，是否存在污染问题，为后续的环境保护工作提
供参考依据。

凯氏定氮法是一种简便、快速的水质监测方法，广泛应用于各
种水体的监测和评价工作中。

通过严格按照操作流程进行实验操作，可以得到准确可靠的实验结果，为保护水环境、维护人类健康提供
重要的数据支持。

希望以上内容能够对凯氏定氮法的操作流程有所帮助，如有任
何疑问或补充，欢迎交流讨论。

凯氏定氮仪操作流程
1、准备6个凯氏烧瓶，标号。

1、
2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。

再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸2.0mL，30%过氧化氢1.0mL。

4、5、6号烧瓶作为空白对照，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质，对样品测定进行校正。

4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1.0mL代替样液，其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。

2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上，接好抽气装置。

先用微火加热煮沸，此时烧瓶内物质炭化变黑，并产生大量泡沫，务必注意防止气泡冲出管口。

待泡沫消失停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至溶液澄清后，再继续加热使消化液微沸15min。

在消化过程中要随时转动烧瓶，以使内壁粘着物质均能流入底部，以保证样品完全消化。

消化时放出的气体内含SO2，具有强烈刺激性，因此自始至终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出。

整个消化过程均应在通风橱中进行。

消化完全后，关闭火焰，使烧瓶冷却至室温。

凯氏定氮仪应如何制备试剂凯氏定氮仪操作规程凯氏定氮仪是检测蛋白质含量的仪器，在检测过程中，标准溶液以及汲取液、指示剂等试剂的配置是特别紧要的。

下面简单介绍一下凯氏定氮仪分析所用试剂的配置方法。

（1）标准溶液（任选一）1.硫酸标准滴定溶液[c（1/2H2SO4）=0.1mol/L]，移取3mL浓硫酸（密度为 1.8419g/mL），蒸馏水稀释并定容至1000mL容量瓶，摇匀，用无水碳酸钠标定。

2.盐酸标准溶液[c（HCl）=0.1mol/L]，移取9mL浓盐酸（盐酸浓度36%～38%）用蒸馏水稀释并定容至1000mL容量瓶，摇匀，用无水碳酸钠进行标定。

（2） 40%（400g/L）氢氧化钠溶液：称取400g氢氧化钠溶解于1000mL无氨蒸馏水中。

（3） 2%（20g/L）硼酸溶液（汲取液）：称取40g硼酸溶于2000mL无氨蒸馏水中。

（4）甲基红、溴甲酚绿混合指示剂：称取0.1g甲基红，用无水乙醇溶解并定容至100mL，称取0.1g溴甲酚绿，用无水乙醇溶解并定容至100mL。

（5）硼酸—指示剂混合溶液：取将甲基红、溴甲酚绿乙醇溶液依照1:5的比例混合，再取20mL混合指示剂加入到（3）的2000mL 硼酸溶液中，现用现配。

（6）硫酸铵干燥：取适量硫酸铵于105℃干燥箱中，干燥至少4h，恒重，取出放入干燥器中冷却至室温，称量0.1g至消化管中备用。

（7）蒸馏水10L以上。

全自动凯氏定氮仪的应用如何？全自动凯氏定氮仪仪器完全由微处理器掌控，用凯氏方法检测谷物、食品、饲料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化学品中的氨、蛋白质氮含量。

故障与维护全自动凯氏定氮仪在平常使用中常见故障及维护问题如下：（1）滴定时无法滴加酸碱液可能由于酸碱液太少，进液管离开液面，需适时补液。

（2）酸碱桶无压力可能由于酸碱管路或者气泵漏气、损坏，需适时更换管路或者气泵。

（3）酸碱桶有压力，却无法加液可能由于电磁阀电源未接通或者电磁阀内部结晶堵塞管路，需适时断电检查电磁阀接线或者拆洗电磁阀。

2012-秋史培华完善版凯式定氮法定氮步骤准备工作：1、仪器清洗：用清水冲洗过后，用蒸馏水润洗两遍。

2、溶液配制：---硼酸指示剂：20g硼酸加蒸馏水定容至1升，加5ml指示剂原液（0.5g溴甲酚绿和0.1g 甲基红溶于100ml乙醇中），并用稀硫酸或稀碱调节至微紫色，此时该溶液PH为4.8，指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。

每个样需要加5ml，1600个样大概需要8升。

可以一次配制两升，即40g硼酸加蒸馏水定容至2升，加10ml指示剂原液。

---指示剂原液：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100ml乙醇中。

---氢氧化钠溶液：4瓶氢氧化钠（500g/瓶）加5升水配制。

每个样品需要用10ml，共需要16升，可以分三次配制，边用边配。

---1mol/l硫酸的配置：28.3ml浓硫酸定容至1000ml。

---稀硫酸溶液：1mol/L硫酸吸取10ml定容至1000ml。

---碳酸钠标准溶液配制：（称取经270℃～300℃烘干至恒重的基准无水碳酸钠0.4g(精确至0.0001 g)，置250 ml碘量瓶中，加蒸馏水50 ml 使溶解。

）有待确定！！！操作步骤：1、称样：每个样品称取0.2g（0.1~0.5g不等；小麦一般0.15g，水稻植株0.3g，籽粒0.2g）左右。

使用万分之一天平，尽量保持在0.1950-0.2040g之间。

每个样品做好编号，装入对应编号的试管中。

2、消煮：每个样品加5-10ml浓硫酸（最好能浸泡一夜），放入消煮炉内消煮。

220℃半个小时，之后280℃半小时再340℃1小时，关闭消煮炉，冷却10min左右，边加入双氧水边小心摇晃至溶液无色透明，340℃继续加热半小时。

3、定容：消煮完成，样品冷却后，加入蒸馏水定容至100ml，摇匀。

4、蒸馏：加入10ml样品溶液，加入8-10ml氢氧化钠溶液。

提前在三角瓶中加入5ml指示剂。

大约40ml。

5、滴定：稀硫酸滴定至颜色变为原来的红色，读数。

自动凯氏定氮仪的使用方法自动凯氏定氮仪是一种用于测定样品中氮含量的仪器。

它采用凯氏法，通过与硫酸和碱液反应，将样品中的氮转化为氨，再用酸反应产生的氨，通过蒸馏和滴定的方法进行测定。

本文将介绍自动凯氏定氮仪的使用方法。

一、仪器准备1. 样品准备：将需要测定氮含量的样品加入到样品瓶中。

样品瓶应该干净、干燥、无油污，并且要保证样品的精确称量。

2. 试剂准备：将硫酸、碱液、氯化钠、碘化钾、硫酸铜、氢氧化钠等试剂准备好，并按照说明书的要求进行稀释和配制。

3. 仪器准备：将自动凯氏定氮仪的各个部件安装好，并将试剂瓶放置好。

检查仪器是否正常运转，是否有异常声音或故障。

二、操作步骤1. 样品加入：将样品瓶放置在自动凯氏定氮仪的样品架上，将样品加入到样品瓶中，并按照说明书的要求将样品瓶放置在样品架上。

2. 试剂加入：按照说明书的要求将硫酸、碱液、氯化钠、碘化钾、硫酸铜、氢氧化钠等试剂加入到相应的试剂瓶中。

3. 开始测定：将自动凯氏定氮仪的电源开关打开，按照说明书的要求设置好仪器的参数，然后点击“开始”按钮，仪器就会开始自动测定样品中的氮含量。

4. 结果记录：当测定完成后，仪器会自动显示出测定结果，并将结果记录在仪器的存储器中。

此时，需要将结果记录下来，并按照要求进行计算和分析。

5. 清洗仪器：测定完成后，需要将仪器进行清洗，以保证下次使用时的准确性。

清洗时，需要将样品瓶、试剂瓶、蒸馏器、滴定管等部件进行清洗，并注意防止交叉污染。

三、注意事项1. 严格按照说明书的要求进行操作，避免操作失误和安全事故的发生。

2. 样品的称量和加入要精确，以保证测定结果的准确性。

3. 试剂的配制和使用要严格按照说明书的要求进行，避免试剂变质和误用。

4. 在使用过程中，要注意仪器的维护和保养，以延长仪器的使用寿命。

5. 在清洗仪器时，要注意防止交叉污染，避免影响下次测定的准确性。

四、总结自动凯氏定氮仪是一种非常精确的测定氮含量的仪器，在农业、环保等领域得到了广泛的应用。

试剂：1、浓硫酸2、30%过氧化氢（H2O2）3、40%氢氧化钠（NaOH）：400g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中。

4、2%硼酸：20g硼酸溶于1000mL蒸馏水中。

5、100mL 95%乙醇：95mL无水乙醇加5mL蒸馏水。

6、定氮混合指示剂：称取0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL 95%乙醇中。

7、0.02mol/L盐酸（HCl）：1.8mL盐酸加入1000mL蒸馏水中。

操作步骤：一、消化1、称取过0.5mm筛的风干试样0.5g，置于消化管底部，用移液管加入10mL浓硫酸和1.5mL30%过氧化氢，小心摇匀，放置在消化炉中消化2-3小时。

空白样不加任何东西，别的处理都一样。

消化温度420度。

（在消化2小时后观察消化管中样品是否澄清透明，若澄清透明可停止消化，否则接着消化，3小时后停止消化）。

2、消化结束后，在消化炉中冷却半小时后，打开毒气罩，取出消化管放在消化管架上冷却至室温。

3、将消化管中液体无损的转入100mL容量瓶，定容。

4、洗净消化管，从定容后的消化液中取出10mL加入消化管底部。

准备蒸馏。

二、蒸馏1、打开全自动定氮仪预热半小时。

2、取一根消化管加入一些水，加碱，加蒸汽，让仪器运行一遍。

接收液可不用硼酸，用水代替。

3、将加有样品的消化管放入定氮仪，接收液为50mL 2%的硼酸加5滴定氮混合指示剂。

加碱，加蒸汽。

（接收液变为蓝色）三、滴定将0.02mol/L 盐酸加入酸式滴定管中，滴定至蓝色刚变为淡红色为终点。

记录消耗盐酸的体积。

计算公式：。

K9840操作步骤一．化学试剂的准备1 将蒸馏水加入到蒸馏水桶（带有蓝色H2O标签）内, 并将瓶盖拧紧。

2 配制30％～40%的氢氧化钠（NaOH）溶液，加入到碱液桶（带黄色NaOH标签）内，并将桶盖拧紧。

（建议用40%浓度，溶液在室温变化后不易结晶，也不易堵塞管路）3 根据实验需要配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂溶液。

4 配制2%硼酸（H3BO3）溶液，然后按100：1的比例加入甲基红-溴甲酚绿混指示剂，混合均匀，加入到硼酸桶（带红色H3BO3标签）内，并将瓶盖拧紧。

二．安装使用1. 安装仪器①仪器平稳放置在试验台上，仪器背面应离开墙壁40厘米以上，电源插座距机器不大于一米，并配备空气开关，漏电开关和可靠的地线②连接好冷凝水进水管，一般情况下连接自来水阀门；连接排水管，放入排水池，并保证排水通畅。

③将储液桶和消化管进行清洗后加入已配好的试剂，．并按照仪器图示接好气路液路管路：碱桶气源出口-接碱桶气路管，硼酸气源出口-接硼酸桶气路管，蒸馏水气源出口-接蒸馏水桶气路管，碱液接入口-接碱液桶液路管，硼酸接入口-接硼酸桶液路管，蒸馏水接入口-接蒸馏水桶液路管。

④装一只空的消化管和锥形接收瓶，关好防护门，插上电源线，做好一切开机准备。

2仪器预热①打开冷却循环水，开机仪器直入主界面。

②首界面分三个模块，分别为测试、维护、帮助。

可使用【左】、【右】键进行选择，选中测试，点击【确定】键，进入测试模块。

③按左右方向键可以选择相应操作，按【确定】进入下一界面。

也可直接按【自动】键进入自动测试参数界面，或者按【手动】键进入手动测试界面。

我们一般选择【自动测试】，按确定进入。

④按上下左右键来选择需要修改的参数项，按数字键用来修改相应参数。

稀释水量：可输入需要添加稀释水的体积（ml）（做样品时，为了避免浓硫酸与浓碱反映过于剧烈，加入适量稀释水进行稀释10-20ml即可）硼酸体积：可输入需要添加硼酸的体积（ml）（一般硼酸设置加25ml）加碱体积：可输入需要添加碱液的体积（ml）(加碱量一般为消解时浓硫酸的4倍为宜，蒸空管预热仪器时不需要加碱，可设置为“0”）蒸馏时间：可输入需要蒸馏的时间（min）(蒸馏时间一般设置为5min)淋洗水量:可输入需要添加淋洗水量的体积（ml）（仪器中的淋洗功能为冲洗冷凝管路，确保无氮损失一般可设置10-20ml）⑤参数输入完毕按【确认】后给出“接收杯是否到位”安全提示，查看接收杯是否放置好，放置好后按【确定】后仪器开始进行测试，测试的顺序为系统自动运行，运行的次序分别为加硼酸、加稀释水、加碱、蒸馏、淋洗。

全自动凯氏定氮仪系列产品试剂配制方法及步骤精锐分析
一、质量分数为35%氢氧化钠溶液（碱液）配制步骤：
1.取洁净干燥的2L大烧杯
2.称取700g氢氧化钠转移至烧杯中
3.量取1300ml蒸馏水加入大烧杯中，溶解氢氧化钠
4.使用玻璃棒将溶液搅拌均匀至氢氧化钠完全溶解冷却
5.转移至对应溶液桶内即可
备注：此过程实验者需佩戴防腐橡胶手套，在通风橱中完成此溶液配制。

二、溴甲酚绿-甲基红指示剂配制步骤：
1．使用研钵将甲基红与溴甲酚绿分别研磨至碎末状态
2．称取0.5g研磨好的甲基红置于500ml烧杯中
3．称取1.0g研磨好的溴甲酚绿置于同一烧杯中
4．使用100ml量筒量取300ml无水乙醇（95%）加入同一烧杯中
5．使用玻璃棒搅拌混匀，直至甲基红溴甲酚绿完全溶解
6．将配制好的指示剂转移至磨口瓶中保存待用
三、质量分数为2%硼酸溶液（吸收液）配制步骤：
1.取洁净干燥的2L大烧杯
2.称取40g硼酸转移至大烧杯中
3.量取1960ml蒸馏水加入大烧杯中，溶解硼酸
4.使用玻璃棒将溶液搅拌均匀至硼酸完全溶解
5.使用20ml移液管移取20ml溴甲酚绿-甲基红指示剂加入已配制好的硼酸中
6.玻璃棒搅拌混匀溶液，转移至对应溶液桶
四、H+浓度为0.1mol/L的稀硫酸滴定液配制步骤：
1.取干燥洁净的1L容量瓶
2.使用5ml刻度移液管移取2.7ml浓硫酸至1L容量瓶中
3.加入蒸馏水定容至容量瓶刻度线
4.摇匀精确标定其H+的浓度值
5.将标定好的滴定液转移至滴定液瓶中即可
备注：转移浓硫酸过程中一定要佩戴防腐橡胶手套。

凯氏定氮实验流程（201608）1.称取样品：每个样品（已经磨粉）称取1g(尽可能精确)放入250ML消化管，每天第一架留2个空白样本。

2.所用试剂：硫酸钾，五水合硫酸铜，浓硫酸，氢氧化钠，硼酸，溴甲酚绿，甲基红，无水乙醇，浓盐酸，硼砂，甲基红指示剂，蒸馏水。

3.试剂配置：（可同比例放大或缩小）催化剂：硫酸钾500g与五水合硫酸铜57.1g混合；氢氧化钠溶液：1L水（超纯水）加400g氢氧化钠，即5L水需4瓶氢氧化钠硼酸：100g硼酸溶于10L水（超纯水或是蒸馏水），添加100ML溴甲酚绿溶液（0.1g溴甲酚绿溶于100ML无水乙醇），再添加70ML甲基红溶液（0.1g 甲基红溶于100ML无水乙醇），最后用稀酸或是稀碱溶液调至葡萄酒色。

盐酸：8.3ML分析纯盐酸，加水定容至1L；（盐酸溶液需要用硼砂或是无水碳酸钠进行标定，标定采用的是酸碱滴定法）。

用硼砂标定(0.2g硼砂融入15ML纯水，加2滴甲基红指示剂，然后用配好的盐酸滴定到变色，得到数据计算eg：0.2硼砂质量（具体量）/190.68/滴定酸体积*1000，计算2个数据求平均)。

4.消化：将称好的样，加入小半管催化剂，在加入12ml浓硫酸(专门的工具，出口必须对着废液瓶)，打开消化机(先插电，长按亮灯，再长按至出现LOGO即可等待升温)，等到420度时候打开风机：按电源，再按风扇按钮，将样品放上，再罩上冷凝管，打开冷凝管水龙头。

5.仪器操作：抬高红色管子排空液体，打开凯氏定氮仪自检，开机密码1234，把配置好的试剂加入相对应的试剂桶。

配置中手动排空滴定钢再充满滴定缸若干次直至没气泡，然后清洗一边。

在队列中配置选择20管子，然后具体中增加4空白，5-20设置为样品，单位mg N/g，输入具体样本质量，然后注册，第一管用清水进行分析，2-4空白使用空白样本到值<0.04准备完毕。

注意：消化完的样本按照顺序加入然后依次分析记录数据，试剂不足及时补上。