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29．从海藻浸提液中分离提取水溶性多糖
概况：从海藻浸提液中分离提取水溶性多糖目前普遍采用乙醇分步沉淀法，乙醇沉淀法虽有易于大规模生产等优点，但由于其主要原理是通过降低水溶液的介电常数使多糖脱水从而产生沉淀来分离多糖，几乎适用于所有水溶性多糖，虽然不同多糖可在不同浓度乙醇的条件下分步沉淀，但特异性不高，导致对所需多糖的分离选择性较差，要提高多糖的纯度需经反复多次重沉淀，从而导致多糖损失大，降低了多糖的回收率。
本技术根据多糖的化学性质，相应采用不同性质的萃取剂，通过萃取剂与多糖间的结合而使不同性质的多糖得到分离提取。
对于褐藻糖胶，我们已有的研究结果表明，所研制出的溶剂萃取体系对褐藻糖胶的单级萃取率可达95％以上，从反萃液醇析出的褐藻糖胶具有较高的纯度，其中岩藻糖含量可达40％以上，萃取过程具有较高的多糖回收率，以岩藻糖计，从浸提液到固体多糖回收率可达70％，在纯度和回收率两方面都高于乙醇分级沉淀法。
技术特点：采用萃取法来提取分离多糖，对现有的水溶性溶剂分级沉淀多糖的方法和技术来说是一个创新。
其特点主要有：1）采用非水溶性功能试剂，可循环使用，损失少；2）提取分离特异性高，因此多糖收率和纯度高。
专利、获奖和实际应用情况：该项技术已获得中国专利授权（专利号：ZL00105700.6）现处于实验室扩试阶段，具有较好的开发和产业化前景。
合作方式：合作开发、专利权转让。
三种藻类海洋中药多糖的提取及理化性质研究摘要本论文以三种藻类海洋中药海藻、昆布、海茜为原料，采用热水回流提取的方法得到海藻粗多糖HZ1，然后采用乙醇分级沉淀的纯化方法对HZ1进行初步的纯化，得到粗褐藻胶HZ2组分和粗褐藻糖胶HZ3组分。
采用硫酸苯酚的方法对HZ1进行了总糖含量的测定。
采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮高效液相色谱(PMP-HPLC)柱前衍生化方法对HZ1进行单糖组成分析，还用此方法测定了HZ2组分中甘露糖醛酸和古洛糖醛酸的比例以及HZ3组分中岩藻糖的含量。
此外，用高效凝胶渗透色谱法测定HZ3分子量。
结果表明，海藻类中药多糖的理化性质既有相似又有不同，推测可能与海藻的种类、提取方法、采收季节、生长年限等有关。
本研究为藻类海洋中药材的质量控制和药效物质基础研究提供了初步的实验数据。
关键词：海藻多糖，理化性质，PMP-HPLC柱前衍生Study on Extraction and Physicochemical Properties of three kinds of traditional marine Chinese medicinesAbstractIn this paper, three kinds of traditional marine Chinese medicines（haizao, kelp, Haiqian）were used as raw materials. Algae were extracted with water by heat under reflux method, thus, HZ1 crude polysaccharides were acquired, then two fractions crude alginate (HZ2) and crude fucoidan (HZ3) were obtained by fractional precipitation of HZ1 with ethanol. The content of total sugar in HZ1 was determined with phenol sulfate method. The monosaccharide composition using precolumn derivatization with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP); the ratio of mannuronic acid and guluronic acid in HZ2 and the content of fucose in HZ3 were also determined with this method. The molecular weight of HZ3 was measured by Gel Permeation Chromatography (GPC).Polysaccharides from different sources which are either similar or different on physicochemical properties. The composition of algal polysaccharides varies according to several factors such as species, extraction procedure, season of harvest and growth years. The results provided data to the quality control and material base of traditional marine Chinese medicines origin from algae.Key word: Seaweed polysaccharides; Physicochemical properties; PMP-HPLC precolumn derivatization目录1.前言 (1)2.实验部分 (2)2.1 海藻粗多糖的提取纯化 (2)2.1.1 海藻多糖的提取 (2)2.1.3 分子量的测定 (4)2.1.4 结果与讨论 (5)2.2 单糖组成分析 (10)2.2.1材料与仪器 (10)2.2.2 原理与方法 (10)2.2.3 结果与讨论 (12)2.3 褐藻糖胶含量测定 (13)2.3.1 材料与仪器 (13)2.3.2 原理与方法 (13)2.3.3 结果与讨论 (14)2.4 褐藻胶MG比测定 (15)2.4.1 材料与仪器 (15)2.4.2 原理与方法 (15)2.4.3 结果与讨论 (16)2.5 小结 (17)3. 综述 (18)4.参考文献 (28)5.致谢................................................................ 错误！未定义书签。
传统的海带多糖的提取方法包括:热水提取法、酶提取法、碱提取法，度是而这些提取方法都存在一定的缺陷。
热水提取的方法采用的温70^-80'}C耗能多，提取时间长.工业生产需要使用的酶量大，不经济。
酶提取的方法提取的时间长，碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法，但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。
因此寻找合适的提取方法来降低能耗，提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。
为达到这一目的，我们现采用超声波方法来提取海带多糖，随后对其理化性质和生物学活性进行检侧，并与传统方法进行比较，以期得到海带多糖提取的最佳方法。
配制1%的碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500mL水称取制备好的200g海带粉，置于不锈钢桶中，加入配好的碳酸钠溶液2. 8L,在50℃水浴5h，趁热用棉纶网进行吊滤，并不断用热冲洗保持温度，获得的吊滤液于5000r/min离心15min，保留上清液。
按体积比平均分成两份，一份上清液经减压浓缩(40 ℃)后，加入三倍体积95%乙醇，沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖 E.另一份上清液中加入氛化钙( 2g/1OOmL)，静置，5000r/min离心去除揭藻酸钙。
上清液经减压浓缩(40 ℃)后，加入三倍体积95%乙醉，沉淀过夜.离心后获得海带硫酸多糖F.将以上所得沉淀E, F各重新溶于水，离心除去不溶物。
上清液再加三倍体积95%乙醇，静置沉淀.生成沉淀经无水乙醇、乙醚洗涤，重新溶于蒸馏水，置于一20℃冰箱冷冻过夜，冷冻干燥得到海带杂多糖E,以及海带硫酸多糖粗品F1可溶性大豆多糖是一种从大豆中提取的多糖类化合物，主要由膳食纤维组成，而膳食纤维对治疗高血压、高血脂、心血管疾病和肥胖病等具有积极作用[1-3]。
可溶性大豆多糖还具有分散稳定性、乳化性，所以常用于酸性饮料中[4-5]。
其属于酸性多糖，结构类似于果胶，多数类型由半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸，也包括鼠李糖、海藻糖、木糖、葡萄糖等。
微藻可溶性糖提取技术研究进展[摘要]：海洋微藻由于其水质净化作用，极高的营养价值等功能成为当前的研究热点。
海洋微藻可溶性糖是海洋微藻的生物活性物质，随着海洋药物兴起，逐渐发现海洋微藻多糖具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射和降血糖等活性功效，其作为药物和药物中间体的研究已成为药物研究的重点。
由于其具有独特的化学结构和药用价值，有效地溶出海洋微藻可溶性糖更是重中之中。
本文阐述了超临界流体萃取技术、热水抽提、超声萃取技术溶出海洋微藻可溶性糖及不同方法间提取的有效性差异，并介绍了其他几种提取海洋微藻可溶性糖的技术。
[关键词]：海洋微藻；提取技术；原理；有效性1引言微藻多糖是新近引起人们关注的功能大分子，具有抗血凝，降血脂，抗肿瘤，抗病毒，增强肌体免疫机能等多种生物学活性，是具有潜力的药用资源，有望在人类治疗癌症，艾滋病，心血管疾病等顽症方面发挥重要作用[1]。
在全球资源枯竭化的今天，海洋微藻产业正在崛起，形成了还有经济新的增长点，蓬勃发展的微藻产业，为微藻多糖的生产提供了丰富的原料。
同时，也向微藻多糖的研究提出更深层次的要求。
一方面，他要求人们不断的去发现微藻多糖的功能，为微藻多糖的应用提供更广阔的空间。
另一方面，他要求人们对微藻多糖进行化学研究，揭示多糖的构效关系，为微藻多糖的应用提供理论基础。
如今许多科学家正效力于前者的研究，成果颇多，至于后者，由于微藻多糖结果复杂，样品纯化困难，分析方法和技术手段落后，从事这方面研究工作的人员相对较少，微藻多糖结构鲜有报道。
事实上不仅是微藻多糖化学，即便是多糖化学研究也一直没有太大的突破，基本上还是处于起步阶段。
据此，本文阐述几种目前已经工业化生产或有可能工业化生产的海洋微藻中提取分离纯化微藻多糖，以期能为这些微藻的充分利用与提取提高理论基础，为微藻多糖提取技术研究而提供资料。
2正文一、超临界流体萃取技术自20世纪60年代，Zosel博士首先提出超临界流体萃取(SFE)工艺并被应用于咖啡豆脱咖啡因的工业生产以来，SFE作为一种新型的绿色化分离技术受到广泛重视，成为当前超临界流体技术发展的主要方向[2]。
抗菌抗氧化海藻多糖的提取与应用研究第一章：绪论海藻是一种富含多种营养物质的海洋植物，被广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。
其中，海藻多糖是一种重要的活性物质，在医药和保健食品等领域有着广泛的应用。
随着人们对健康和营养的关注度不断提升，抗菌抗氧化海藻多糖的研究与应用也显得格外重要。
第二章：海藻多糖的提取方法海藻多糖是一种具有生物活性的高分子化合物，其提取方法对于海藻多糖的质量和产量具有决定性的影响。
目前常见的海藻多糖提取方法包括酸提法、碱提法、辅助酶解法、微波辅助提取法等。
其中，酸碱提法是最常见的海藻多糖提取方法。
第三章：海藻多糖的抗菌作用近年来，多项研究表明，海藻多糖具有很强的抗菌作用。
海藻多糖可以通过破坏菌体的结构、影响菌体代谢、调节免疫系统等多种方式，发挥抗菌作用。
此外，海藻多糖还可以增强机体的免疫功能，促进机体抵抗病原体的能力。
第四章：海藻多糖的抗氧化作用海藻多糖具有很强的抗氧化作用，可以清除自由基，抑制脂质过氧化反应等。
海藻多糖的抗氧化作用可以有效地预防和治疗多种疾病，如心脑血管疾病、肝脏疾病、癌症等。
第五章：海藻多糖的应用海藻多糖在医学、保健品、食品等领域具有广泛的应用价值。
在医学领域，海藻多糖可以用于肿瘤治疗、抗炎、免疫调节和伤口愈合等方面；在食品领域，海藻多糖可以用于饮料、果汁、酸奶、面包等食品的添加剂中；在保健品领域，海藻多糖可以用于补充营养、增强体质、延缓衰老等方面。
第六章：海藻多糖未来的研究方向随着人们对健康和营养的需求不断提高，海藻多糖将在医学、保健品和食品领域中得到更广泛的应用。
未来研究的方向包括：发掘新的海藻物种和提取技术、深入研究海藻多糖的药理学作用和相关分子机制、开发新的海藻多糖的应用领域。
第七章：结论综合以上研究成果，海藻多糖是一种具有广泛应用价值的高分子化合物。
未来，我们需要进一步深入研究海藻多糖的药理学作用和相关分子机制，开发新的海藻多糖的应用领域，以更好地服务人类健康和营养需求。
实验五海带多糖的提取及含量测定（3学时）1、实验目的及原理海带是褐藻门植物，海带多糖是海带药用价值的最集中体现，海带多糖的种类很多。
本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。
对海带多糖的提取方法有很多，碱提取法是其中重要的一种。
多糖中的己糖能与苯酚-硫酸试剂发生显色反应，颜色的深浅与己糖含量成正比。
颜色的深浅可通过分光光度计测定，因此，可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系，绘制标准曲线，测定样品的吸光度值，再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。
2、实验基本内容和要求（1）掌握碱提取法提取海带多糖（2）掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂（1）基本仪器：分光光度计，离心机（2）实验材料及试剂：干海带1 %碳酸钠溶液：称取15g无水碳酸钠加入1500ml蒸馏水95%乙醇溶液，氯化钙溶液(2g/100ml)，1.0ml 6%的苯酚溶液，98%浓硫酸标准糖溶液：用岩藻糖和半乳糖fuc/gal(3:1)作为标准糖，取其混合物0.1g，其中0.075g的岩藻糖，0.025g的半乳糖，将其溶解到1000ml的水中，制成0.1mg/ml的标准溶液。
梯度稀释，用蒸馏水稀释分别配成，0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/ml。
4、实验步骤4.1海带多糖的提取（1）购买海带后,用自来水将其洗净,晒干，研磨，过60目----80目的筛,收集备用。
称取制备好的2g海带粉,置于烧杯中,加入28ml刚配好的碳酸钠溶液。
（2）在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。
上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖。
4.2海带多糖的测定（1）将标准糖配成0.1mg/ml溶液（2）取少量标准糖溶液，用蒸馏水稀释到2.0ml，向其中加入1.0ml 6%的苯酚溶液，振荡器混匀，再加入浓硫酸5.0ml，振荡混匀。
海藻多糖提取一、海藻多糖的概述海藻多糖是一种天然高分子化合物，广泛存在于海洋中的各种藻类中。
它们具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗菌等作用。
因此，海藻多糖已成为近年来研究的热点之一。
二、海藻多糖提取方法1. 热水提取法将干制的海藻粉末加入适量的水中，经过高温高压处理后，使得其中的海藻多糖溶解在水中。
然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。
2. 酸碱法提取法将干制的海藻粉末先用酸或碱处理，并经过再次中和后，使得其中的海藻多糖溶解在水中。
然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。
3. 酶解法提取法将干制的海藻粉末加入适量酶解液（如纤维素酶），经过反应后，使得其中的海藻多糖溶解在水中。
然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。
三、海藻多糖提取的影响因素1. 海藻品种：不同的海藻品种中含有的海藻多糖种类和含量不同，因此会影响提取效果。
2. 提取方法：不同的提取方法对于海藻多糖的提取效果也有影响，需要根据实际情况选择合适的方法。
3. 提取条件：如温度、时间、酸碱度等条件也会影响海藻多糖的提取效果。
四、海藻多糖应用领域1. 医药领域：由于其抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用，海藻多糖已经成为医药领域中广泛应用的一种天然药物。
2. 食品工业：海藻多糖可以作为食品添加剂，增加食品营养价值和口感，并且具有保湿和保鲜作用。
3. 化妆品工业：由于其保湿和抗氧化作用，海藻多糖被广泛应用于化妆品工业中，如乳液、面霜等产品中。
五、海藻多糖提取技术的发展趋势1. 绿色环保：未来的海藻多糖提取技术将更加注重环保，采用更加环保的方法和材料进行提取。
2. 高效性：未来的海藻多糖提取技术将更加高效，能够在较短时间内提取出更多的海藻多糖。
3. 应用广泛性：未来的海藻多糖提取技术将更加注重应用广泛性，能够适应不同领域和不同需求的要求。
海藻多糖的提取及其生物活性研究海洋是一个广阔的宝藏，其中的资源非常丰富。
海洋中的海藻是我们广泛研究的一种资源，海藻中的多糖在医学、食品等多个领域都有着很广泛的应用。
本文将介绍海藻多糖的提取和生物活性研究。
一、海藻多糖的提取海藻多糖是指由海藻中提取得到的碳水化合物，包括海藻酸、半乳糖、甘露糖、葡萄糖等多种不同的糖类。
在提取海藻多糖之前，需要先选择适合的海藻种类和提取方法。
目前，在提取海藻多糖的方法中，常见的有酸碱法、酶法和微波辅助提取法。
酸碱法是利用酸碱性溶液来提取海藻多糖，优点是操作简单、效果较好，但缺点是容易对环境和提取物质造成损害。
酶法是利用特定的酶来分解海藻细胞壁，以便提取多糖，其优点是提取效率高、成本低、对环境无污染。
微波辅助提取法是利用微波辐射技术，辅助实现多糖的提取和分离，具有快速、高效的优点，但是需要考虑微波对热敏性物质的影响。
提取海藻多糖的方法选择取决于所需考虑的因素，包括效率、成本、安全性等因素。
一旦选择了提取方法，就可以开始提取海藻多糖。
提取海藻多糖的主要步骤包括制备海藻粉末、浸提、澄清、酸沉淀、纯化等。
二、海藻多糖的生物活性研究海藻多糖在医学和食品工业中有着广泛的应用。
目前已经知道，海藻多糖具有抗肿瘤、抗病毒、降血压、降血脂等多种生物活性。
因此，对海藻多糖的生物活性研究非常重要。
海藻多糖对抗病毒的作用是其中的一种生物活性。
多项研究表明，海藻多糖具有较强的抗病毒活性，可以对多种病毒进行抑制。
比如，利用海藻多糖对HIV-1进行抗病毒研究，得到了很好的效果。
海藻多糖亦可降低血糖，保护肝脏，提高免疫力等等。
在海藻多糖的生物活性研究中，还需要考虑海藻多糖的分子结构和活性成分。
目前，利用光谱分析和色谱分析等技术，已经可以对海藻多糖的分子结构进行梳理和识别。
对于海藻多糖的活性成分研究，则需要更加精细的试验方法和技术手段。
结语：在海洋中的海藻多糖有着很广泛的应用，但其提取和生物活性研究仍在不断发展中。
海藻能源的多糖提取与开发技术研究海藻是一种广泛分布于海洋中的植物，也是一种重要的生物质资源。
其中，海藻多糖是一类具有多种生物活性的天然产物，具有潜在的应用价值。
通过提取和开发海藻多糖，可以为能源、医药、食品工业等领域带来新的机遇。
海藻多糖的提取方法有许多，其中较为常用的包括酸法、酶解法、热水提取法和超声波法等。
酸法是一种较为传统的提取方法，通过在酸性条件下将海藻的多糖水解成单糖后，经过旋转蒸发、冷却结晶等步骤，得到目标多糖。
酶解法是利用酶的催化作用，将海藻的多糖降解成单糖或低聚糖以便提取。
热水提取法则是利用高温水对海藻进行提取，通过达到一定温度和时间的热处理，使多糖从海藻中溶解出来。
超声波法利用超声波的机械作用，破坏海藻细胞壁，增加多糖的溶解度，从而实现多糖的提取。
在海藻多糖的开发应用中，研究人员不仅关注其在食品工业中的应用，还将目光转向了能源领域。
海藻多糖可以用作生物质能源的原料，通过发酵等方法将其转化为生物燃料。
海藻多糖还可以用作生物柴油的合成催化剂，通过催化加氢的方式将多糖转化为柴油。
这些方法不仅能够利用废弃的海藻资源，还能够降低对传统能源的依赖，实现能源的可持续发展。
此外，海藻多糖还具有一定的医药价值。
研究表明，海藻多糖具有抗凝血、抗肿瘤、免疫增强等活性，在药物研发和生产中有着广阔的前景。
例如，海藻多糖可以用作药物的辅助剂，改善药物的溶解度和稳定性，提高药物的生物利用度。
海藻多糖还可以作为生物制剂的原料，制备治疗疾病的药物。
海藻多糖的抗肿瘤活性也吸引了研究人员的关注，通过对多糖的结构和功能的研究，有望开发出新型抗癌药物。
在海藻多糖的提取和开发过程中，仍然存在一些挑战和问题需要解决。
首先，海藻种类繁多，其多糖的化学结构也相对复杂，不同类型的海藻多糖具有不同的生物活性和应用价值，因此需要深入研究海藻多糖的种类和特性。
其次，提取方法需要进一步优化，以提高多糖的提取率和纯度，并减少对环境的影响。
藻类多糖的提取分离方法
藻类多糖是一类具有重要生物活性的多糖物质，具有广泛的应用前景。
因此，其提取分离方法备受关注。
目前，常用的提取分离方法主要包括以下几种：
1. 热水提取法：将藻类样品加入适量的热水中，经过一定时间的加热，使多糖物质释放到水中，再通过分离、除杂等步骤得到纯净的多糖。
2. 酸碱法：将藻类样品加入酸性或碱性溶液中，通过调节pH值使多糖分子断裂，然后用乙醇等溶剂沉淀提取，最终得到纯净的多糖。
3. 超声波辅助提取法：将藻类样品加入适量的溶剂中，在超声波作用下破坏细胞壁，促进多糖物质的释放，然后通过离心等步骤分离出多糖。
4. 酶解法：利用特定的酶类对藻类样品进行酶解，使多糖分子断裂，然后通过分离、除杂等步骤得到纯净的多糖。
以上提取分离方法各有优缺点，应根据不同的实验目的选择合适的方法进行操作。
同时，还可以结合其他技术手段，如色谱分离、电泳分离等，进一步提高多糖的纯度和分离效率。
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