细胞培养技术
- 格式：pdf
- 大小：3.39 MB
- 文档页数：138
下载文档原格式
合集下载
细胞培养技术的研究及应用
细胞培养技术的研究及应用细胞培养技术是一项重要的生物学研究和应用技术，通过对细胞培养技术的研究和应用，可以解决很多人类健康和环境问题。
本文将介绍细胞培养技术的基本原理和技术路线，以及其在生物学研究和应用中的实际应用。
一、细胞培养技术的基本原理和技术路线细胞培养技术是通过对细胞体外培养，使其在适当的环境中持续生长和繁殖。
细胞培养技术有两种类型，分别为原代细胞培养和细胞系培养。
其中原代细胞培养指的是直接从动植物组织中分离出来的细胞培养，具有更加原始和稳定的基因型；而细胞系培养则是一种细胞自身在无数代细胞的演变过程中形成的具有特定表型和基因型的细胞种系。
细胞培养技术的基本技术路线包括以下三个步骤：（1）组织分离和细胞分离：青蛙卵母细胞、小鼠卵子、小鼠骨髓细胞、小鼠脾细胞等都可以用细胞培养技术处理。
通常采用胰酶、胆汁酸等消化酶对组织进行消化，从中提取出未分化的细胞。
（2）细胞培养条件调节：对于细胞培养技术，不同的细胞类型对培养基成分和培养条件是有所不同的。
例如配制适当的培养基、控制温度、保湿等重要条件是确定其生长特性的重要神经成分。
（3）细胞生长和繁殖：细胞在培养基中的生长特点和体内略有不同，其主要关注点是增殖、转染、药物筛选、毒性测试、体外血管重建、组织重建、再生医学等。
二、细胞培养技术的实际应用细胞培养技术在生物技术和医学领域中有广泛的应用。
以下将具体介绍细胞培养技术在这方面的应用。
（1）药物筛选：细胞培养技术可以在前期从上万的化合物中筛选出可以治疗癌症、心脏病等疾病的重要药物。
（2）肝脏毒素性病理反应预测：基于体外肝细胞培养技术，主要是通过细胞毒性试验、细胞输出项目等方法对毒性评估进行定性和定量分析极其的迅速和准确。
（3）组织工程：现已凭借细胞培养技术创造出了弯曲的软骨和人工血管等组织，日益成为支持组织工程的新技术手段。
（4）真核细胞的转染：细胞培养技术可以将外源DNA导入到真核细胞中，可以有偏向的决定细胞的DNA合成和功能实现。
细胞培养技术
细胞培养技术1. 引言细胞培养技术是生物学研究中的重要工具之一，它可以使研究人员能够在体外模拟和研究体内细胞的生长、分化和功能。
随着技术的不断发展和进步，细胞培养技术已经成为生物医学研究、药物筛选与开发以及组织工程等领域的关键技术之一。
本文旨在介绍细胞培养技术的基本原理、常用技术和应用领域。
2. 细胞培养技术的基本原理细胞培养技术的基本原理是通过提供适宜的培养基、维持适宜的环境条件（如温度、湿度和氧气浓度等）和提供适量的营养物质来满足细胞的生长和分裂需求。
培养基是细胞培养中非常重要的组成部分，它通常由基础培养基、补充物和生长因子等组成。
基础培养基提供了细胞培养所必需的无机盐、氨基酸等营养物质，补充物则能够提供胎牛血清、胎儿牛血清等对细胞生长有促进作用的物质。
3. 细胞培养技术的常用技术3.1 培养皿法培养皿法是最常用的细胞培养技术之一，它将细胞悬浮于培养皿中，通过提供适宜的培养基和环境条件来促进细胞的生长。
培养皿法相对简单易行，适用于大部分类型的细胞培养。
在培养皿法中，培养皿需经过灭菌处理，细胞悬浮液需要注意卫生和无菌操作。
3.2 悬浮培养法悬浮培养法是将细胞悬浮于培养液中，以悬浮形式进行培养。
与培养皿法相比，悬浮培养法可以提供更好的氧气和营养物质供应，从而促进细胞生长和代谢。
悬浮培养法通常适用于需要大量细胞或长时间培养的情况。
3.3 筛选技术在一些特殊的细胞培养实验中，研究人员需要筛选出特定类型的细胞。
筛选技术可以通过选择性培养基或标记物的使用，将目标细胞与其他非目标细胞或者其他细胞组织进行分离和筛选。
4. 细胞培养技术的应用领域细胞培养技术在许多领域中发挥着重要作用。
下面列举了一些常见的应用领域：•药物筛选与开发：细胞培养技术可以有效模拟细胞在体内的生长环境，并通过评估药物对细胞生长和代谢的影响，来研究和开发新药物。
•组织工程：细胞培养技术可以用于培养和繁殖不同类型的组织细胞，为组织工程的研究和应用提供基础。
生物制药中的细胞培养技术
生物制药中的细胞培养技术生物制药是利用生物技术生产药品的一种方法，其中细胞培养技术是生物研究领域中最重要的技术之一。
细胞培养技术是药品制造的核心技术之一，它涵盖了繁殖、分化和生长等复杂过程。
在生物制药领域中，细胞培养技术是不可或缺的技术手段之一。
下面就让我们来详细了解一下细胞培养技术在生物制药中的应用和意义。
1. 细胞培养技术的概念和分类细胞培养技术是指在细胞所需要的营养和环境指标下，利用体外培养技术使细胞繁殖并扩张量的一种技术。
细胞培养技术被广泛应用于生物医药、环境保护、农业和食品等领域。
它根据细胞类型、培养对象、生产目的和培养方式的不同，可以分为悬浮细胞培养和贴壁细胞培养两种。
2. 细胞培养技术在生物制药中的应用在生物制药领域中，细胞培养技术已经成为了药品研发和生产的核心技术之一。
目前，大部分有关蛋白质药物的研究都是通过细胞培养技术来进行的，包括重组蛋白、抗生素、癌症疫苗等。
大部分生物制药公司都使用细胞培养技术来生产药品，这些药品包括生物同源药、重组大分子、基因治疗药和细胞疗法等。
3. 细胞培养技术在药品研发中的意义细胞培养技术的发展对药品研发和生产产生了重大影响。
通过细胞培养技术，人们可以以高效、安全、可控的方式制造出高纯度的生物制品，并保证药品的长期稳定性。
同时，细胞培养技术还可以提高药品的产量和质量，减少生产过程中的变异性，并降低了生产成本。
4. 细胞培养技术的发展前景随着生物制药领域的不断发展，细胞培养技术成为了药品研发和生产的不可或缺的核心技术。
当前，细胞培养技术已经成为生物医药行业中的一个明确趋势，也是一个巨大的商业机会。
未来，生物制药领域的重点将是开发新的细胞培养技术和优化现有的技术，从而提高生物制品的产量和质量。
总之，细胞培养技术是生物研究领域中最重要的技术手段之一。
在生物制药领域中，细胞培养技术已经成为了药品研发和生产的核心技术之一。
如今，大部分生物制药公司都已经使用细胞培养技术来生产药品，并且未来这种技术还将得到更加广泛和深入的应用。
细胞培养技术3篇
细胞培养技术第一篇：细胞培养技术的基本概念细胞培养技术是指在体外人工培养生物细胞的一种技术，该技术主要应用于生命科学、医学研究、生物制药等领域。
细胞培养技术的基本概念主要包括：细胞培养的类型、培养基、细胞的消耗物质、细胞培养的设备和细胞培养的步骤等，下面就逐一进行介绍。
一、细胞培养的类型细胞培养主要分为原代细胞培养和继代细胞培养两种类型。
1.原代细胞培养原代细胞培养是指直接从体组织中分离出来的生物细胞进行培养。
该类型的细胞培养在实验室中很少用到，因为从体组织中分离细胞的方法很繁琐，而且这种方法得到的细胞数量和品质不能保证。
2.继代细胞培养继代细胞培养是指从已经培养的细胞中分离出来的细胞进行培养。
这种类型的细胞培养方法非常常见，因为可以在实验室中轻松实现。
二、培养基培养基是指用来提供细胞分裂和生长所需营养物质的一种物质。
培养基通常由肝素、胰岛素和细胞因子等多种不同的化合物构成，以满足不同类型的细胞对营养物质的需求。
三、细胞的消耗物质细胞培养期间需要提供物种很多，其中主要包括以下几种：1.抗生素：用来防止在培养细胞中出现感染。
2.气体：氧气和二氧化碳是保证细胞正常生长的重要物质。
3.酸碱指示剂：用来检测培养基的酸碱度，以保证细胞处于适宜的pH值下。
四、细胞培养设备1.培养箱：用于控制培养环境中的温度、湿度和氧气等因素。
2.显微镜：用来观察细胞的形态和生长情况。
若无显微镜，还需要检测仪器，用来检测培养细胞的生长情况。
3.细胞培养板：用来培养细胞和收集细胞。
五、细胞培养的步骤细胞培养的步骤一般可以分为以下几个：1.细胞分离：从样品中分离出单个的细胞。
2.细胞传代：选取健康的细胞将其转移至新的培养基中，继续增殖，以获得更多的细胞。
3.细胞计数：测量细胞数量以确定下一步操作所需的细胞量。
4.细胞培养：将细胞加入新的培养基中，进行培养。
根据细胞培养的不同类型，上述步骤会稍有不同。
总之，细胞培养技术对于生命科学、医学研究、生物制药等领域都具有重要的应用价值，它通过人工培养细胞，为科学家们提供了一种研究生物学的新途径。
细胞培养技术
细胞培养技术一、细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境, 在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下, 使期生长繁殖, 并维持其结构和功能的一种培养技术。
细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。
在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。
外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可反复取材等优点, 它在临床染色体分析中使用最广泛。
体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化, 成为永久细胞系, 也可直接建成永久细胞系, 永久细胞系能在体外无取制的传代和生长。
永久细胞系通常具有非整倍体细胞和各个细胞的核型不完全相同特性。
但细胞克隆的细胞系其这一特性可以不明显。
二、细胞培养的环境细胞在体外培养中所需的条件与体内细胞基本相同。
1.无污染环境培养环境无毒和无菌是保证细胞生存的首要条件。
当细胞放置于体外培养时, 与体内相比细胞丢失了对微生物和有毒物的防御能力, 一旦被污染或自身代谢物质积累等, 可导致细胞死亡。
因此在进行培养中, 保持细胞生存环境无污染、代谢物及时清除等, 是维持细胞生存的基本条件。
2.恒定的温度维持培养细胞旺盛生长, 必须有恒定适宜的温度。
人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃, 偏离这一温度范围, 细胞的正常代谢会受到影响, 甚至死亡。
培养细胞对低温的耐受力较对高温强, 温度上升不超过39℃时, 细胞代谢与温度成正比；人体细胞在39-40℃1小时, 即能受到一定损伤, 但仍有也许恢复；在40-41℃1小时, 细胞会普遍受到损伤, 仅小半数有也许恢复；41-42℃1小时, 细胞受到严重损伤, 大部分细胞死亡, 个别细胞仍有恢复也许；当温度在43℃以上1小时, 细胞所有死亡。
3.气体环境气体是人体细胞培养生存必需条件之一, 所需气体重要有氧气和二氧化碳。
氧气参与三羧酸循环, 产生供应细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。
细胞培养技术
试剂标注规范
试剂名称 配制浓度 配制人 配制日期
NaCl 0.5 mM 张三 2016.10.21
耗材
培养皿、瓶、孔板 离心管、移液管 枪尖 其他
小结二 试剂及耗材的分类及用途
培养基（成分、分类）
耗材（分类、用途）
缓冲液 （PBS、Hanks等）
消化液（分类及应用）
步骤）
消毒菌方法
物理消毒灭菌法 Co60辐射（γ射线）：破坏生物大分子（塑料制品）
紫外线（200-300 nm）：30min，阻止细菌、病毒 核酸合成。（细胞室：用于空气，操作台表面等）
湿热（高压蒸气灭菌法）：121℃，20min，破坏微 生物孢子、蛋白变性。（用于大量液体、玻璃器皿、 部分塑料耗材、手术器械等，由工作人员操作）
血清（作用、存储及解冻方法）
试剂标签要规范
三 清洗及灭菌
在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感, 均能影响培养细胞的生长 微生物产品附带杂物 上次细胞残留物 非营养成分的化学物质
需要清洗的培养用品:玻璃器皿、部分需要回收的塑料制品。 （包括：浸泡（洁消精）、超声波清洗、冲洗、烘干四个
血清
提供基本营养物质、激素和各种生长因子、 提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴 壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保 护作用。
保存血清最好的方法？ 建议血清保存在-20℃。解冻后存放于4℃时，请 勿超过一个月。 （分装）
如何解冻血清才不会使产品质量受损? 建议从冷冻箱取出后，置于2～8℃冰箱使之缓
作 用）的平衡盐溶液（如PBS、D-Hank’s）。 EDTA溶液
一般用其钠盐，可溶性较好。有些组织需要Ca2+ 、 Mg2+来保持其完整性，EDTA可以螯合这些离子，可使细 胞之间裂解。其作用比胰蛋白酶缓和。使用浓度为0.02%， 以无钙、镁的平衡盐溶液配制 。 胶原酶溶液
细胞培养技术
细胞培养技术细胞培养技术是一种重要的生物技术手段，可用于研究细胞的生理、代谢和分子机制，了解疾病的发病过程，开发新药物和生物制品等。
本文将从细胞培养的基本原理、培养条件、培养方法及其应用等方面来介绍细胞培养技术。
1. 细胞培养的基本原理细胞培养基本上是将有机体的一部分组织或细胞分离出来，放在独立的培养容器（如培养皿、培养瓶）中，以固体、液体或半固体培养基为基础，模拟生物体内的环境，通过提供适当的营养、温度、湿度和气氛等条件，使细胞在体外生长、分化和繁殖，维持其生命活动。
细胞培养的基本原理包括以下几个方面：(1) 提供适当的培养基细胞培养基是细胞培养的重要条件之一，它要求有营养成分的成份、酸碱度、适当的温度和湿度等。
细胞培养基主要分为无血清培养基和含血清培养基两种。
无血清培养基可以避免血清的批次差异，降低了培养过程中的变异性，但无血清培养基更贵，对细胞生长的影响程度更大且对培养稳定性的要求更高。
在实际应用中，血清培养基仍然是最常用的培养基。
(2) 控制氧气供应细胞在生长过程中需要充足的氧气和营养物质供应。
氧气，作为呼吸作用中的最终受体，在细胞生长、异化和化学诱导中，也扮演了重要的角色。
Highmoreet al.（1978）根据细胞所需氧的需求程度将细胞分为三种类型，即耗氧型、耐氧型和厌氧型。
在细胞培养的过程中，要根据不同的需求，合理控制氧气供应，以满足细胞的生长需求。
(3) 提供适当的温度和湿度细胞定植能力、增殖速度和产生生化反应等都受到温度和湿度的影响。
在常温下，细胞生长速度相对较慢，而在适当的温度下，细胞生长速度会加快，并且会增加细胞代谢产生的热量。
湿度是影响细胞生长的另一个重要因素，不适当的湿度会影响培养液中溶液中的渗透压和细胞内液体平衡，导致细胞死亡。
(4) 增加营养和生长分子的供应细胞生长、分化和繁殖与大量的物质变换和反应有关。
给予细胞必需的营养物质和生长分子，能够促进细胞的生长和增殖，并在一定程度上控制细胞的分化和功能表达。
细胞培养技术
细胞培养技术
细胞培养技术，是生物学研究中非常重要的一个实验技术。
通过细
胞培养技术，研究人员可以将细胞在体外进行培养、繁殖和实验操作，从而深入研究细胞的生理功能、生化特性和病理变化。
细胞培养技术
的应用范围非常广泛，涉及生物医学、药物研发、基因工程、毒理学
等多个领域。
一、细胞培养技术的基本原理
细胞培养技术是基于细胞的自身生存条件进行设计的。
细胞在体外
培养时，需要提供适当的生长环境，包括营养物质、生长因子、温度、湿度等条件。
在细胞培养中，通常会使用培养基来提供细胞所需的养
分和环境，培养基的种类和配方会根据不同的细胞类型和实验目的进
行选择。
二、细胞培养技术的应用领域
细胞培养技术在生物医学领域有着重要的应用，可以用于研究细胞
生长、细胞信号传导、细胞凋亡等生理过程，也可以用于筛选药物、
评估药效及毒性。
此外，在基因工程和生物技术领域，细胞培养技术
也扮演着关键角色，如基因转染、蛋白表达等方面均需要借助细胞培
养技术。
三、细胞培养技术的挑战和发展
随着科学技术的不断进步，细胞培养技术也在不断发展。
但是，细
胞培养中仍然存在一些挑战，如细胞的纯化、传代过程中的遗传变异
等问题，这些都对研究结果的准确性提出了挑战。
未来，细胞培养技术将继续向着更高效、更精准的方向发展，为生物学研究提供更多可能。
细胞培养技术作为生物学研究中不可或缺的一部分，其重要性不言而喻。
通过不断地探索和创新，相信细胞培养技术将会在更多领域展现出其巨大的应用潜力，为人类的健康和生活质量带来更多的改变和进步。
细胞培养技术名词解释
细胞培养技术名词解释
嘿，朋友！你知道细胞培养技术不？这可真是个神奇又超级重要的
玩意儿！细胞培养技术呀，就好比是在给细胞们打造一个专属的“家”。
比如说，你想象一下，细胞就像是一个个小宝贝，而培养它们的环
境就是那个温暖舒适的小窝。
我们要给这些小宝贝提供合适的温度、
营养和空间，让它们能开开心心地生长、分裂。
在细胞培养的过程中，有好多关键的名词呢！像培养基，这可是细
胞的“美食大餐”呀！不同类型的细胞就需要不同的“菜肴”来满足它们的需求。
还有细胞株，这就像是一个特定的细胞“家族”，它们有着相似
的特点和行为。
再看看培养瓶，那不就是细胞们的“小房子”嘛！细胞们在里面安居
乐业。
还有传代，哎呀，这就像是家里的孩子长大了，要分出去另立
门户一样。
细胞培养技术可不仅仅是在实验室里捣鼓哦，它的用处大着呢！反
问你一下，要是没有细胞培养技术，我们怎么去研究疾病的发生机制呀？怎么去开发新的药物呀？这就像是没有了钥匙，打不开那扇通往
新知识的大门！
我跟你说呀，我曾经在实验室里亲眼看到那些细胞在培养瓶里一点
点地生长，那种感觉真的很奇妙。
就好像看着自己种下的种子慢慢发芽、长大。
总之，细胞培养技术是现代生物学研究中不可或缺的一部分，它为
我们揭示生命的奥秘提供了重要的手段。
它就像一把神奇的钥匙，能
打开无数未知的大门，让我们对生命有更深入的了解和探索。
所以呀，一定要好好了解细胞培养技术的这些名词，才能更好地掌握这门神奇
的技术哦！。
生物技术中的细胞培养技术
生物技术中的细胞培养技术细胞培养技术是生物技术中的核心技术之一，随着科学技术的不断发展和生物医药相关产业的不断壮大，越来越多的公司和实验室开始关注和应用这项技术。
本文将会从细胞培养的基本概念，细胞培养技术的种类和应用范围三个方面展开。
一、细胞培养的基本概念细胞是生命的基本单位，每一个细胞都是全球唯一的。
细胞培养是一种利用外界环境条件、营养物质和药物等刺激来培养生物细胞的技术，也是维持细胞生长、增殖和分化的有效手段。
相对于动物和植物体内的复杂环境，细胞培养所涵盖的环境因素更易于控制和调节，能够为人们研究细胞功能和特性提供便利。
依据主要培养条件与器械的不同，细胞培养技术大致可以分为两类，其中一类为二维细胞培养，同时还有三维培养体系。
二、细胞培养技术的种类1. 传统二维细胞培养技术传统二维细胞培养技术是通过二维文化器皿，如滴虫瓶、培养皿、多孔板等装置中的细胞培养基，使细胞在平面上生长和发育。
目前，这种技术在细胞行为和细胞生物喜好分析中仍然很受欢迎。
2. 三维培养技术三维培养技术是将细胞生长在特定的材料或载体中来模拟自然3D构建的环境。
这种技术被广泛应用于组织修复、外科及整形手术、肿瘤治疗等领域，它可以更好地模拟体内环境，并能适当地操控细胞微环境，从而获得更准确的结果。
比如用三维培养技术，生产内皮细胞及其等价物，就有望改善性疾病治疗。
此外，在基于免疫学的肿瘤疗法中，目前研究方向主要集中于三维培养肿瘤芯片和组织工程序列学的建设战略之间的交互作用。
三、细胞培养技术的应用范围随着生物医药行业的迅速发展，细胞培养技术以其广泛的应用范围、能够大量生产已应用到药品研发、临床治疗、生物材料等多领域。
在药品研发中，细胞培养技术被广泛应用于各类铁路线的筛选，包括药物的毒性实验，对基础科学的研究，以及新型药物开发，如干细胞疗法、基因疗法等等。
此外，细胞培养技术是外科及整形手术中给予适当的术前准备，使手术结果更加美观，且减少了损伤术后的感染和炎症的几率。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 培养细胞学与细胞培养技术是生物医药领 域的工具:
– 揭示生、老、病、死的规律 – 探索优生、抗衰老、防治疾病的手段或途径 – 人为地诱导细胞遗传性状的改变，以便有利于
研究人类和自然界的关系。
培养细胞学（Cultural cytology）
• 活细胞的研究是当前生命科学研究中的重 要核心问题之一。
• 培养细胞学的应用
– 细胞生物学
• 单细胞克隆便于对细胞生物学的基础理论进行研 究，如形态、结构、细胞器及其功能、遗传物质、 核型、变异、细胞转化、生长周期等；
• 培养细胞学的应用
– 细胞生物学
• 离体培养Байду номын сангаас胞便于进行环境因素、药物等单因素及 多因素影响的研究，探索作用机制。
• 细胞通讯和信号转导 • 细胞增殖与细胞周期的调控 • 细胞生长和分化、衰老和死亡 • 干细胞的应用研究
细胞培养技术
北京大学医学部基础医学院 细胞生物学系
内容
• 第一节 培养细胞学（Cultural cytology） • 第二节 体外培养 （In vitro culture） • 第三节 培养细胞的分类 • 第四节 培养细胞成功与失败综合分析 • 第五节 细胞观察 • 第六节 培养细胞学的常用术语
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 培养细胞为病毒的增殖提供了场所； • 细胞是分离病毒最好和最方便的基质； • 体外培养的细胞存在以下特点：
– 无抗体，没有免疫力； – 没有隐性感染； – 接种量大； – 不受非特异拮抗物质的影响，培养条件易于控制； – 容易选择易感细胞，对病毒的敏感性比体内细胞高； – 提高疫苗产量和质量； – 加速病毒分离过程； – 真核基因病毒载体的理想宿主
培养细胞学（Cultural cytology）
• 细胞在体外培养的特定条件下，通过对离 体细胞的研究，获取与三个学科相关信息：
– 细胞生理学 – 分子细胞学 – 细胞社会学
• 细胞生理学：
– 研究细胞生命活动规律
• 如何从环境中摄取营养 • 如何经过代谢获得能量 • 如何促进生长、分裂 • 如何诱导分化和表达功能
• 少量胎儿脱落细胞是能分裂的，经2-4周细胞培养， 形成显著单层上皮样细胞，可按常规制备染色体。
• 产前检测出几十种代谢病与遗传病，较准确地指导 优生优育。
• 培养细胞学的应用
– 细胞毒性实验及生物实验的工具
• 利用培养细胞进行毒性实验，对化学物质、放射线、 激素、药物等提供了最简易而又可靠的方法。
• 培养细胞学的应用
– 细胞工程学
• 细胞工程学是以培养细胞学为基础，以细胞培养技 术为手段和工具。利用细胞融合及杂交技术，进行 细胞工程的研究与开发。
• 如生物反应器的开发研究，将编码某生物活性物质 的基因导入动物受精卵，从这种受精卵发育的动物 组织、体液分泌物中获得外源基因的表达产物。
• 培养细胞学的应用
• 分子细胞学：
– 从遗传信息 (DNA-RNA-蛋白质) 角度研究胞内 遗传物质的结构和表达的调控。
• 细胞社会学：
– 研究整体和细胞群中细胞间的社会行为，包括 识别、通讯和相互作用；
– 研究整体和细胞群对细胞生长、分化和死亡等 活动的调节控制。
培养细胞学（Cultural cytology）
– 细胞生物学和分子生物学的相互渗透，分子克 隆技术与细胞培养技术结合；
– 阐明基因的结构与功能 – 阐明基因在细胞生长和分化中的作用 – 阐明细胞癌变机制
培养细胞学（Cultural cytology）
• 培养细胞学的应用
– 病毒学 – 细胞生物学 – 细胞工程学 – 干细胞生物学 – 淋巴细胞培养 – 遗传性疾病的产前检查 – 细胞毒性实验及生物实验的工具 – 在现代生物技术中应用
• 采用离心感染法或提取病毒核酸进行感染，细胞打 孔器协助感染可扩大病毒感染的宿主范围；
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 常用于病毒分离的细胞
细胞种类
可分离的病毒
非洲绿猴肾细胞
HSV、RSV、VZV、腮腺炎病毒、风疹病毒
人单核细胞
HIV、HTLV、HHV-6
人胚肾、肺细胞
腮腺炎病毒、腺病毒
恒河猴猕猴肾细胞 （二倍体细胞株）
• 利用细胞培养进行病毒定性和定量，测定50％组织 培养感染量(50％tissue culture infectious dose， TCID50);
• 用于防治方面的研究：病毒的分离鉴定、抗原及减 毒活疫苗制备和干扰素的生产，细胞是病毒增殖的 场所。
• 细胞培养技术是伴随着病毒学的发展而发展起来的。
– 干细胞生物学
• 胚胎干细胞是机体最原始的细胞，具有较强的再生 能力，在一定条件下可分化、增殖出各类细胞。
• 在体内干细胞数量极少，经增殖、分化参与构成各 种组织和器官。
• 成体干细胞主要研究领域包括：
– 造血干细胞 – 神经干细胞 – 间充质干细胞
induced pluripotent stem cell iPS
人胚肺成纤维细胞株
ECHO、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A、B组、 RSV
CMV、VZV、鼻病毒
WI-38、MRC-5 （传代细胞系）
腮腺炎病毒、腺病毒
Hela Hep-2 Vero
柯萨奇A、B组、RSV 腺病毒、RSV HSV、RSV、风疹病毒 、轮状病毒、麻疹病毒
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 病毒感染指标易观察，光镜下可见细胞病变效应 (cytopathic effect，CPE)、包涵体、细胞融合、血 细胞吸附等现象，同时也便于用分子病毒学技术进 行检测。
• 培养细胞学的应用
– 淋巴细胞培养
• 在培养环境中，淋巴细胞受某些生长因子的刺激， 出现旺盛的分裂、增殖。
• 用于研究机体免疫功能状况：
–研究细胞标记 – 检测T、B细胞数量及功能 – 检测T细胞亚群(CD3、CD8、CD4等细胞)的变化
• 培养细胞学的应用
– 遗传性疾病的产前检查
• 羊膜穿刺术获得羊水中的胎儿细胞进行培养，在妊 娠早期诊断胎儿是否患有先天性遗传病。
• 采用肿瘤细胞进行抗癌药物的药敏测试，以指导临 床抗癌药物的使用及配伍。
• 培养细胞学的应用
– 在现代生物技术中应用
• 基因分离、基因测序与表达、基因转移与重组、癌 基因研究等。
转基因猴“安迪” 安迪于2000年10月2日 出生于俄勒岗医学大学。
– 揭示生、老、病、死的规律 – 探索优生、抗衰老、防治疾病的手段或途径 – 人为地诱导细胞遗传性状的改变，以便有利于
研究人类和自然界的关系。
培养细胞学（Cultural cytology）
• 活细胞的研究是当前生命科学研究中的重 要核心问题之一。
• 培养细胞学的应用
– 细胞生物学
• 单细胞克隆便于对细胞生物学的基础理论进行研 究，如形态、结构、细胞器及其功能、遗传物质、 核型、变异、细胞转化、生长周期等；
• 培养细胞学的应用
– 细胞生物学
• 离体培养Байду номын сангаас胞便于进行环境因素、药物等单因素及 多因素影响的研究，探索作用机制。
• 细胞通讯和信号转导 • 细胞增殖与细胞周期的调控 • 细胞生长和分化、衰老和死亡 • 干细胞的应用研究
细胞培养技术
北京大学医学部基础医学院 细胞生物学系
内容
• 第一节 培养细胞学（Cultural cytology） • 第二节 体外培养 （In vitro culture） • 第三节 培养细胞的分类 • 第四节 培养细胞成功与失败综合分析 • 第五节 细胞观察 • 第六节 培养细胞学的常用术语
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 培养细胞为病毒的增殖提供了场所； • 细胞是分离病毒最好和最方便的基质； • 体外培养的细胞存在以下特点：
– 无抗体，没有免疫力； – 没有隐性感染； – 接种量大； – 不受非特异拮抗物质的影响，培养条件易于控制； – 容易选择易感细胞，对病毒的敏感性比体内细胞高； – 提高疫苗产量和质量； – 加速病毒分离过程； – 真核基因病毒载体的理想宿主
培养细胞学（Cultural cytology）
• 细胞在体外培养的特定条件下，通过对离 体细胞的研究，获取与三个学科相关信息：
– 细胞生理学 – 分子细胞学 – 细胞社会学
• 细胞生理学：
– 研究细胞生命活动规律
• 如何从环境中摄取营养 • 如何经过代谢获得能量 • 如何促进生长、分裂 • 如何诱导分化和表达功能
• 少量胎儿脱落细胞是能分裂的，经2-4周细胞培养， 形成显著单层上皮样细胞，可按常规制备染色体。
• 产前检测出几十种代谢病与遗传病，较准确地指导 优生优育。
• 培养细胞学的应用
– 细胞毒性实验及生物实验的工具
• 利用培养细胞进行毒性实验，对化学物质、放射线、 激素、药物等提供了最简易而又可靠的方法。
• 培养细胞学的应用
– 细胞工程学
• 细胞工程学是以培养细胞学为基础，以细胞培养技 术为手段和工具。利用细胞融合及杂交技术，进行 细胞工程的研究与开发。
• 如生物反应器的开发研究，将编码某生物活性物质 的基因导入动物受精卵，从这种受精卵发育的动物 组织、体液分泌物中获得外源基因的表达产物。
• 培养细胞学的应用
• 分子细胞学：
– 从遗传信息 (DNA-RNA-蛋白质) 角度研究胞内 遗传物质的结构和表达的调控。
• 细胞社会学：
– 研究整体和细胞群中细胞间的社会行为，包括 识别、通讯和相互作用；
– 研究整体和细胞群对细胞生长、分化和死亡等 活动的调节控制。
培养细胞学（Cultural cytology）
– 细胞生物学和分子生物学的相互渗透，分子克 隆技术与细胞培养技术结合；
– 阐明基因的结构与功能 – 阐明基因在细胞生长和分化中的作用 – 阐明细胞癌变机制
培养细胞学（Cultural cytology）
• 培养细胞学的应用
– 病毒学 – 细胞生物学 – 细胞工程学 – 干细胞生物学 – 淋巴细胞培养 – 遗传性疾病的产前检查 – 细胞毒性实验及生物实验的工具 – 在现代生物技术中应用
• 采用离心感染法或提取病毒核酸进行感染，细胞打 孔器协助感染可扩大病毒感染的宿主范围；
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 常用于病毒分离的细胞
细胞种类
可分离的病毒
非洲绿猴肾细胞
HSV、RSV、VZV、腮腺炎病毒、风疹病毒
人单核细胞
HIV、HTLV、HHV-6
人胚肾、肺细胞
腮腺炎病毒、腺病毒
恒河猴猕猴肾细胞 （二倍体细胞株）
• 利用细胞培养进行病毒定性和定量，测定50％组织 培养感染量(50％tissue culture infectious dose， TCID50);
• 用于防治方面的研究：病毒的分离鉴定、抗原及减 毒活疫苗制备和干扰素的生产，细胞是病毒增殖的 场所。
• 细胞培养技术是伴随着病毒学的发展而发展起来的。
– 干细胞生物学
• 胚胎干细胞是机体最原始的细胞，具有较强的再生 能力，在一定条件下可分化、增殖出各类细胞。
• 在体内干细胞数量极少，经增殖、分化参与构成各 种组织和器官。
• 成体干细胞主要研究领域包括：
– 造血干细胞 – 神经干细胞 – 间充质干细胞
induced pluripotent stem cell iPS
人胚肺成纤维细胞株
ECHO、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A、B组、 RSV
CMV、VZV、鼻病毒
WI-38、MRC-5 （传代细胞系）
腮腺炎病毒、腺病毒
Hela Hep-2 Vero
柯萨奇A、B组、RSV 腺病毒、RSV HSV、RSV、风疹病毒 、轮状病毒、麻疹病毒
• 培养细胞学的应用
– 病毒学
• 病毒感染指标易观察，光镜下可见细胞病变效应 (cytopathic effect，CPE)、包涵体、细胞融合、血 细胞吸附等现象，同时也便于用分子病毒学技术进 行检测。
• 培养细胞学的应用
– 淋巴细胞培养
• 在培养环境中，淋巴细胞受某些生长因子的刺激， 出现旺盛的分裂、增殖。
• 用于研究机体免疫功能状况：
–研究细胞标记 – 检测T、B细胞数量及功能 – 检测T细胞亚群(CD3、CD8、CD4等细胞)的变化
• 培养细胞学的应用
– 遗传性疾病的产前检查
• 羊膜穿刺术获得羊水中的胎儿细胞进行培养，在妊 娠早期诊断胎儿是否患有先天性遗传病。
• 采用肿瘤细胞进行抗癌药物的药敏测试，以指导临 床抗癌药物的使用及配伍。
• 培养细胞学的应用
– 在现代生物技术中应用
• 基因分离、基因测序与表达、基因转移与重组、癌 基因研究等。
转基因猴“安迪” 安迪于2000年10月2日 出生于俄勒岗医学大学。