细胞中过氧化物酶类、脂类和碳水化合物的鉴定
- 格式:ppt
- 大小:2.40 MB
- 文档页数:19
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高中生物实验知识点归纳2021因为斐林试剂很不稳定,容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液和乙液分别保存,使用时现配现用。
下面是小偏整理的检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高中生物实验知识点归纳2021,感谢您的每一次阅读。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高中生物实验知识点归纳20211.实验原理2.实验步骤[深度思考](1)上述实验选材的标准是什么?提示①被检测物质含量丰富;②材料接近无色;③易取材,易操作等。
(2)实验中,在加相应试剂之前为何要留出部分组织样液?提示作为对照,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说服力。
(3)鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用?提示因为斐林试剂很不稳定,容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液和乙液分别保存,使用时现配现用。
(4)蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色?提示蔗糖属于非还原糖,不与斐林试剂发生颜色反应。
观察到的现象不是无色,而是蓝色[Cu(OH)2的颜色]。
(5)在使用双缩脲试剂时,为什么要先加入试剂A,后加入试剂B?提示先加入试剂A,造成碱性环境,只有在碱性环境中,蛋白质才容易与Cu2+发生颜色反应。
(6)鉴定蛋白质时,加入试剂B后,如果没有产生紫色反应,可能的原因是什么?提示可能加入的双缩脲试剂B过量,CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2絮状沉淀,会遮蔽实验中所产生的紫色,影响观察结果。
(7)脂肪鉴定实验中为什么用50%的酒精洗去浮色,而不用清水?提示因为苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ易溶于有机溶剂酒精中,而不溶于清水中。
[技法提炼]1.利用“一同三不同”区分斐林试剂与双缩脲试剂“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分,且NaOH溶液的质量浓度都为0.1g/mL。
“三不同”分别指:(1)使用原理不同。
斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液,双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2+。
细胞中的元素和无机化合物及糖类脂肪蛋白质的鉴定基础知识一、组成细胞的元素:1、最基本元素:C2、基本元素:C、H、O、N3、主要元素:C、H、O、N、P、S4、大量元素:C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg (含量占生物体总重量万分之一以上的元素)5、微量元素:Fe、Mn、Zn、B、Cu、Mo (含量占生物体总重量万分之一以下的元素)6、鲜重最多的元素:O 鲜重排序:O>C>H>N;7、干重最多的元素:C 干重排序:C>O>N>H)二、生物界和非生物界具有统一性和差异性1、统一性:组成细胞的化学元素在自然界的无机环境中都能找到,没有一种元素是生命特有的。
2、差异性:各种元素在细胞中和无机环境中的含量却有区别。
1)、生物体含量最多的4种元素:O、C、N、H、2)、无机环境最多的4种元素:O、Si、Al、Fe3、感悟拓展:1)、生物体的元素是生物根据自身生命活动的需要,有选择地从无机环境中吸收的,这体现了生物生物界与非生物界的统一性。
2)、不同生物体内所含的化学元素的种类基本相同,但在不同生物体内同种元素的含量差别较大;同一生物体内的不同元素的含量也不相同,这是细胞统一性和差异性的表现。
三、组成细胞和生物体的化合物:水:85%~90%无机物化合物无机盐:1%~1.5%糖类:脂类:1%~2% 1%~1.5%蛋白质:7%~10%核酸:一般情况下活细胞内含量最多的化合物是水,含量最多的有机化合物是蛋白质。
1、水:占细胞总重量的60%-90%,是活细胞中含量是最多的物质。
生物体内含水超过50%,是各种化合物中含量最多的;不同生物,体内含水量不同;同一生物,不同器官含水量不同。
概念;在细胞内与其它物质结合的水结合水:含量;4.5%功能;是细胞结构的重要组成成分概念;在细胞内以游离的形式存在,可以自由流动。
自由水:含量:95.5%(幼嫩植物、代谢旺盛细胞含量高)功能;①是细胞内的良好溶剂②是细胞内各种化学反应的媒介③参与细胞内的许多生物化学反应有机化合物④运输营养和代谢废物⑤调节体温——水的比热大⑥维持细胞的形态,保证代谢的正常进行二者在一定的条件下可以相互转化,温度、代谢强度等(1)自由水结合水①在代谢旺盛的细胞中,自由水的含量一般较多;②在环境条件恶劣(如低温、干旱、盐渍)时,结合水的含量增多,使植物的抗逆性增强。
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法:1.放射免疫法:利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合,通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离,并通过检测器测定糖类的浓度。
3.还原糖法:通过还原糖的特性,将还原糖与试剂反应生成有色化合物,通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。
4.酶法:利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应,生成可测定的产物,通过检测产物的浓度来定量糖类。
脂肪的检测方法:1.水解法:将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油,再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。
2.胆固醇氧化酶法:利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物,通过测量产物的浓度来定量脂肪。
3.紫外吸收法:利用脂肪样品中的化学结构特性,通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。
4.气相色谱法:通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离,并通过检测器测定脂肪的浓度。
蛋白质的检测方法:1.低里氏法:利用低里氏试剂与蛋白质发生反应,形成可测定的复合物,通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离,并通过检测器测定蛋白质的浓度。
3.毛细管电泳法:将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离,根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。
4.射流显色法:利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物,通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
需要注意的是,以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性,具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。
此外,还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。
脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性的检测方法脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性的检测方法摘要:越来越多的研究表明,很多疾病和衰老现象都与脂质过氧化有关。
本文对近年来脂质过氧化与抗氧化剂抗氧化活性的检测方法作简单综述,包括气相色谱、液相色谱、质谱、化学发光法等,并对不同方法进行了综合比较与评价。
各种检测技术的对象各有不同,而且各有优缺点。
因此,要针对不同的实验目的及条件来选择不同的检测方法。
关键词:脂质过氧化;抗氧化剂;抗氧化活性;检测Lipids peroxidation and the Detection Methods ofAntioxidant activities of AntioxidantsAbstractLipid peroxidation has received considerable attention because of its possible contribution to the potential damage of biological systems. The study on the mechanism and the protection of lipid peroxidation are concerned to our living and health. Lipids peroxidation and the methods of determination of peroxidation and antioxidant activities in biological systems were reviewed, including Gas chromatography, Liquid Chromatography, MS, Chemiluminescence and so on. Different methods are compared comprehensively and evaluated. A variety of detection technologies have different target clientele, but also have their own advantages and disadvantages. Therefore, it is necessary for different experimental purposes and conditions to choose a different detection method.Keyword: lipid peroxidation, antioxidant, antioxidant activity, detection在生物体内,很多脂类含有高不饱和脂肪酸,特别在生物膜的磷脂中,高不饱和脂肪酸含量极高。
细胞中多糖和过氧化物酶的定位实验报告细胞是生命的基本单位,其中包含着各种复杂的分子和结构。
多糖是一种重要的生物大分子,它在细胞中起着多种重要的功能,如提供能量和结构支持等。
而过氧化物酶则是一类酶类蛋白质,其主要功能是参与氧化还原反应,保护细胞免受氧化损伤。
本实验旨在探究多糖和过氧化物酶在细胞中的定位情况,以揭示它们在细胞内的功能和作用机制。
我们选择了小麦胚芽细胞作为实验材料,这是一种常用的植物细胞模型,便于我们观察和研究。
我们采用了荧光共聚焦显微镜技术,结合荧光标记的抗体和荧光探针,对细胞中多糖和过氧化物酶进行了定位分析。
实验结果显示,多糖主要定位在细胞质和细胞壁中。
在细胞质中,多糖以颗粒状或线状分布,形成一种网状结构,可能与细胞的代谢活动和结构支持有关。
而在细胞壁中,多糖则以纤维状的形式存在,参与细胞壁的形成和细胞的保护。
这些结果表明,多糖在细胞中起着重要的结构和功能作用,对维持细胞的正常生理活动至关重要。
与此同时,过氧化物酶主要定位在细胞质和细胞膜中。
在细胞质中,过氧化物酶呈现出斑点状或颗粒状的分布,可能与其在氧化还原反应中的作用有关。
而在细胞膜中,过氧化物酶则以环状或斑块状的形式存在,可能参与细胞膜的修复和保护。
这些结果提示,过氧化物酶在细胞内起着重要的保护作用,保护细胞免受氧化损伤的影响。
综合以上实验结果,我们可以得出结论:多糖和过氧化物酶在细胞中的定位具有明显的特异性,分别在细胞质、细胞壁和细胞膜中发挥着重要的功能。
多糖参与细胞的结构支持和代谢活动,过氧化物酶则保护细胞免受氧化损伤。
这些研究结果对于我们进一步了解细胞的生理活动和疾病发生机制具有重要意义,也为相关药物和治疗方法的研发提供了理论依据。
本实验通过荧光共聚焦显微镜技术对细胞中多糖和过氧化物酶的定位进行了研究,揭示了它们在细胞内的分布和功能。
这些研究结果对于深入理解细胞生物学和病理生理学具有重要意义,为未来的研究工作和临床应用提供了有益的参考。
检测碳水化合物的方法一、化学检测法。
1.1 斐林试剂法。
斐林试剂是检测还原糖的常用试剂。
这试剂就像一个敏锐的小侦探,专门寻找还原糖的踪迹。
它由硫酸铜和酒石酸钾钠等混合而成。
当我们把含有还原糖的样品溶液和斐林试剂混合后,放在热水浴里加热,就像给它们安排了一场热热闹闹的聚会。
如果溶液里有还原糖,溶液就会发生奇妙的变化,会产生砖红色的沉淀。
这沉淀就像一个小信号,告诉我们这里有还原糖呢。
这方法简单直接,就像直来直去的大老粗,虽然很实用,但是只能检测还原糖,对于非还原糖就有点爱莫能助了。
1.2 碘液法。
碘液检测法就像是一个有特殊技能的小能手。
碘液遇到淀粉就会变蓝,这是大家都知道的“老规矩”了。
我们只需要把碘液滴到疑似含有淀粉的样品上,如果立马变蓝,那十有八九就是有淀粉存在了。
这个方法简单得很,就像张飞吃豆芽——小菜一碟。
不过它只能检测淀粉这种特定的碳水化合物,局限性比较大。
二、仪器检测法。
2.1 高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法可就高级多了,它就像一个精密的仪器大军。
这个方法是把样品注入到流动相里,流动相带着样品在色谱柱里“奔跑”,不同的碳水化合物就像不同速度的运动员,在这个过程中会被分离开来,然后被检测器检测到。
这方法就像一个火眼金睛的孙悟空,能把各种碳水化合物分辨得清清楚楚。
但是呢,它的设备昂贵,操作也比较复杂,不是谁都能玩得转的,就像开飞机,得经过专门的训练才行。
2.2 近红外光谱法。
近红外光谱法有点像一个神奇的魔法棒。
它利用近红外光照射样品,不同的碳水化合物对近红外光的吸收和反射情况不一样,就像每个人都有自己独特的指纹一样。
通过检测这些差异,就能判断样品里碳水化合物的种类和含量。
这个方法速度快,不需要对样品进行太多复杂的处理,就像快刀斩乱麻。
不过它的准确性可能会受到一些因素的影响,就像一个有点小脾气的孩子,有时候会闹点小别扭。
三、酶法检测。
3.1 葡萄糖氧化酶法。
葡萄糖氧化酶法是专门针对葡萄糖这种碳水化合物的。
脂类细胞化学(苏丹Ⅲ染色法)1.实验目的:用苏丹Ⅲ染液对小鼠的肠系膜细胞染色,观察细胞颜色,掌握苏丹Ⅲ染液的染色方法。
2.实验用品:(1)仪器及器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管(2)实验药品:蒸馏水、甲醛钙溶液、70%乙醇水溶液、苏丹Ⅲ染液(3)实验材料:小鼠3.实验原理:(1)由脂肪酸和醇作用生成的酯及其衍生物统称为脂类,这是一类一般不溶于水而溶于脂溶性溶剂的化合物。
脂类是机体内的一类有机大分子物质,它包括范围很广,大体上可以分为类脂和油脂两大类。
类脂包括磷脂(phospholipids),糖脂(glycolipid)和胆固醇及其酯(cholesterol and cholesterol ester)三类。
而油脂可以分为常温下常温液态的油和常温下固态的脂肪两类。
这几种脂类化学结构有很大差异,生理功能各不相同。
其共同物理性质是不溶于水而溶于有机溶剂,在水中可相互聚集形成内部疏水的聚集体。
(2)在固定细胞时,通常使用脂溶性固定液。
然而,鉴定的材料是脂肪时,脂溶性的固定液会溶解脂肪,致使把切片放到显微镜下观察时,观察不到被染色的脂肪,只能看到脂肪细胞中有很大的空洞。
最好的固定材料是甲醛类的固定液。
如医学上保存尸体采用的是福尔马林,即40%的甲醛水溶液,本次实验采用的则是甲醛钙溶液。
(3)光学显微镜的切片多是石蜡切片。
在熔接石蜡时,需要用到脂溶性溶剂,而脂溶性溶剂会溶解细胞中的脂肪,因此本次实验不可采用石蜡切片。
但是锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等有机溶剂,可以采用石蜡切片。
(4)制作切片有多种方法,如冰冻切片、明胶包埋冰冻切片、本次实验采用的是操作简单的铺片法。
(5)脂类染色的原理是,染料溶于脂类显色。
选择溶剂时应注意,溶剂必须既溶解的染料,又不溶解掉脂类。
4.实验步骤:(1)用断头法处死小鼠,置于解剖盘中。
剪开腹腔,用镊子提起小肠,使盖玻片紧贴于肠系膜。
用剪子将连同盖玻片和其上粘的肠系膜剪下,反扣于已滴加甲醛钙的载玻片上,固定15分钟,(2)吸蒸馏水滴于载玻片、载玻片之间冲洗,用滴管不断吸取液体以去除固定液。