尿液细菌学检验基本技术文稿演示

尿液检查第一节：概述宠物泌尿器官本身或有些其它器官的疾病都可引起尿液成分和性状的变化，因此，尿液检验在临床诊断、治疗和预后判断上，都具有重要意义。

检查目的：1、协助泌尿系统疾病的诊断和疗效观察2、协助其他系统疾病的诊断3、用药监护检查内容：尿液检验包括尿液的物理学检查、尿液的化学检查、尿液沉楂显微镜检验。

物理学方法：检查其物理性状，如尿量、尿色、透明度、气味、密度等。

化学方法：测定其所含化学成分，如蛋白质、葡萄糖、潜血等。

显微镜检查：尿中的沉渣，如无机沉渣、有机沉渣等。

检查程序：第二节尿液标本的采集与保存正确地收集尿液和分析尿液，可以提供许多关于泌尿系统的有价值信息或可以反映一些系统性的紊乱。

一、采尿原则尿液可以在排尿、压迫膀胱、导尿或膀胱穿刺（首选，可避免污染）后采到。

通常最好在早上采尿样（或者是禁水数小时后），因为这是一天中尿样浓度最高的时候。

尿样在送往实验室时，要用干净的且没有化学污染的容器。

采集到的尿样应该尽快分析，如果不能在30min内分析时，应冷藏保存（检测是要恢复到常温）。

二、采尿方法（一）自然排尿（不适用于细菌学检测）应用自然排尿采尿时，中段尿液是最好的，因为开始的尿流会机械性地把尿道口和阴道或阴茎和包皮中的污物冲洗出来。

从笼子或地上采到的尿样较差，但如果考虑了污染因素，还是十分有效的。

但是污染物与细胞、蛋白或细菌有关时，必须用另一种采尿方法来证明尿样的异常。

自然排尿是评价血尿时选择的采尿方法，因为其它的方法会在采尿时导致出血而增加红细胞的量。

（二）压迫膀胱（不适用于细菌学检测）原则上不建议采用压迫膀胱采尿。

如果泌尿系统存在外伤，压迫膀胱时会使尿液样品中的红细胞和蛋白质增加。

如果动物发生尿道阻塞、膀胱最近有大的外伤或做过膀胱切开术，不能用压迫膀胱来采尿。

过大的压力会使膀胱破裂，而膀胱自身有病时则更容易破裂。

强行压迫膀胱采尿会引起尿液从膀胱逆流回输尿管，增加其受感染的危险。

在评价用该方法采得的尿液时，必须考虑尿道口、阴道或阴茎和包皮的污染情况。

尿液标本的细菌学检验尿液标本的细菌学检验介绍：尿液标本的细菌学检验是对尿液标本进行试验进而进行判断出标本中所含的细菌类型与种类，以便给以病人针对性治疗的检验。

尿液标本的细菌学检验正常值：淡黄色至琥珀色，没检出引起尿道感染细菌。

尿液标本的细菌学检验临床意义：异常结果：(1)淡黄至无色：见于大量饮水、尿崩症、糖尿病。

(2)橙色至黄褐色：胆红素尿。

肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸，服用大黄、番泻叶等。

(3)棕褐色或浓茶色：血红蛋白尿，体内溶血，常见于蚕豆病，阵发性睡眠性血红蛋白尿，血型不合之输血。

(4)红色：血尿。

(5)绿色：细菌尿(铜绿假单胞菌)。

(6)乳白色：见于乳糜尿(丝虫病等)，脂肪尿。

需要检查的人群：疑似细菌尿、脂肪尿等症状的患者尿液标本的细菌学检验注意事项：不合宜人群：没有检查前禁忌：注意正常的生活饮食习惯，注意个人卫生。

特别是保持尿道的卫生。

检查时要求：积极配合医生尿液标本的细菌学检验检查过程：近年来、尿液检查广泛应用半自动、自动分析仪，采用于化学试带技术，主要项目包括pH、比密、蛋白、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐等，较新型的仪器还可检测白细胞、红细胞及维生素C等指标，尿沉渣计数仪也已问世。

自动分析仪能迅速准确地为临床提供定量或半定量检查结果。

但若干指标也存在一些局限，以下是尿分析仪部分指标结果应用的说明。

1.蛋白质(Protein)：能报告从十～十十十十(200～5000mg/L)含量的蛋白质，但试带主要与白蛋白起反应，所以对重症肾小球肾炎，尿中出现多量大分子蛋白时，常呈阴性或弱阳性，应采用磺柳酸法或醋酸加热法检验。

2.葡萄糖(Glucose)：试带法不受传统方法干扰因素的影响，特异性、灵敏度都高于传统方法。

3.隐血(Occultblood)：能检出尿中血红蛋白、肌红蛋白，当血红蛋白达150μg/L及红细胞为5～10个/μl时，可出现阳性，有部分化学纸条灵敏度过高，正常尿中出现较多假阳性，尿中含有不耐热酶也可呈假阳性。

尿细菌培养实验报告本实验旨在通过将尿液样本进行培养，从中分离出细菌，进而确定尿液中是否存在致病菌群。

实验原理：尿液是人体内代谢废物的产物，其中可能含有正常菌群以及致病菌。

为了确定尿液中的致病菌，我们采用尿液细菌培养的方法。

实验步骤如下：1. 取得尿液样本：从受试者中采集尿液样本，保持卫生和无菌操作。

2. 分离菌群：将尿液样本经过适当稀释之后，分别接种到含有适宜培养基的琼脂平板上，然后在恒温培养箱中培养一定时间。

3. 鉴定菌群：通过观察琼脂平板上的菌落形态，进行初步鉴定。

通常我们会观察菌落的大小、形状、色素等特征。

4. 鉴定致病菌：从初步鉴定的菌落中选取几个代表性的菌落，进行进一步的生化鉴定和鉴定试纸反应，以确定是否存在致病菌。

实验结果：在该实验中，我们通过培养尿液样本得到了以下结果：1. 菌群分离：尿液样本分别接种到琼脂平板上后，经过一段时间的培养，我们观察到了多个不同形态的菌落。

2. 菌落特征鉴定：我们通过观察菌落的大小、形状、色素等特征，对初始的菌落进行了初步的鉴定。

根据观察结果，我们发现了一些常见的正常菌群，如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。

3. 致病菌鉴定：从初始的菌落中选择了几个代表性的菌落，进行了进一步的生化鉴定和鉴定试纸反应。

通过这些方法，我们确定了尿液样本中存在一些致病菌，如沙门菌和葡萄球菌。

讨论：根据我们的实验结果，尿液样本中存在一些致病菌，这可能是由于受试者感染了这些细菌导致的。

尿液是体内的废物产生物，若存在致病菌，可能会引起尿路感染或其他相关疾病。

因此，通过尿液细菌培养的方法，可以及早发现尿液中的致病菌，以便采取相应治疗措施。

然而，我们需要注意的是尿液细菌培养结果仅能作为初步筛查的手段，进一步的细菌鉴定和药敏试验是确诊致病菌和选择适当抗生素的重要依据。

此外，在进行尿液细菌培养实验时，我们也需要遵循严格的无菌操作，以避免外界细菌的污染。

综上所述，通过尿细菌培养实验，我们可以初步了解尿液中的细菌群落，并鉴定出其中的致病菌。

尿液标本的细菌学检验操作规程SOP微003汉源县人民医院检验科尿液标本的细菌学检验操作编号：LAB/SOP/HY/微-003日期：2010年5月3日版本：第一版，第0次修订第1页，共3页一、【标本采集】1.使用无菌导尿法，取尿液5-10ml，盛于无菌试管中送检。

2.尿路感染通常采集中断尿：其方法为：（1）女患者先用肥皂水及1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口，留取中段尿；（2）男患者应先翻转包皮冲洗，用2%红汞或者1：1000苯扎溴铵消毒尿道口，留取中段尿；（3）儿童、婴儿先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道，待排尿后立即送检。

3.若取左右两侧肾盂尿，应由泌尿科医师采取，左右侧的标签应标记明确，以免出现错误。

4.做结核杆菌检查时，可收集24h尿液，将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。

伤寒杆菌等其它细菌的培养检查，可取清晨第一次尿液送检。

5.膀胱穿刺：此法要紧用于厌氧菌培养。

二、【检验方法】1.直接涂片检查（1）通常细菌涂片：以无菌方法吸取尿液10—15ml置于无菌试管内，经3000r/min，离心沉淀15-20分钟，倒去上清液，取沉渣涂成薄膜镜检，自然晾干，革兰染色镜检，能够得出初步报告“找到革兰ⅹ菌，形似ⅹⅹ细菌”。

（2）结核分枝杆菌：尿液经高压消毒后，将尿液离心取沉淀物涂片，抗酸染色镜检，根据镜检可报告：“找到或者未找到抗酸杆菌”。

（3）假丝酵母菌涂片：取尿液离心沉淀物置于洁净玻片上，加以盖玻片，轻轻加压，用高倍镜检查。

如沉渣太多可滴加100g/L的KOH 溶液使其溶解后再镜检。

若发现有发亮的芽丝胞子与假菌丝，经革兰染色镜检时有酵母样细胞时，可报告“找到酵母样细胞，形似假丝酵母菌”。

否则可报告“未找到假丝酵母菌”。

2.细菌培养（1）通常细菌培养：将接种环灭菌后挑取离心沉淀物，分别接种在血平板及中国兰平板上，35℃培养18-24h，观察有无细菌生长，根据菌落特征与涂片、染色结果，选择相应的方法做进一步鉴定，如培养2天无细菌生长，则报告“经48h培养无细菌生长”。

尿液标本的细菌检验一、常见病原菌尿路感染通常由患者自身的常居菌上行至膀胱所致，为内源性感染。

健康个体膀胱穿刺尿是无菌的；经尿道排出尿液，受到尿道寄居的正常菌群污染而混有细菌，因此，尿液细菌计数是判断尿路感染的实验室依据。

取经尿道排出的清洁中段尿，细菌数一般不超过103CFU/ml，患有泌尿系统感染时，尿中细菌数通常高于105CFU/ml。

尿路感染的主要病原菌为大肠埃希菌、奇异变形杆菌、阴沟肠杆菌、腐生葡萄球菌、肠球菌等也是尿路感染较常见的细菌。

其它病原菌如肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、产气肠杆菌、杜克雷嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、解脲棒状杆菌、摩根菌和链球菌也可分离自尿液标本。

二、检验方法与程序（一）检验程序（二）标本的采集和运送1.尿液标本的种类（1）中段尿：清洁外阴及尿道口周围，自然排尿，让尿流不间断，留取中段尿，置于无菌大口容器或尿液运送杯中，不少于1ml。

（2）导尿管：①直接插入导尿管导尿：由医护人员无菌插入导管后先让尿液流出15ml 弃去，再留取尿液标本，一般尽量不采用此方法收集尿液标本，因为操作过程中容易将尿道细菌带入膀胱，增加医源性感染的危险；②通过滞留导尿管收集尿液：用70%乙醇消毒导管口，夹住导管口10～20min，用针筒从导管口抽取5～10ml尿液，置于无菌容器中送实验室。

切不可取尿袋内的尿液送检，导尿管也不能用于培养。

（3）膀胱穿刺尿：采取无菌技术由耻骨上经皮肤穿刺插入膀胱获取膀胱内的尿液。

此方法主要用于婴儿、中段尿检查结果难以确定及怀疑厌氧菌所致感染者。

2.尿液标本留取和运送注意事项①尽可能留取晨尿或在膀胱内停留4小时以上的尿液，可以降低培养结果的假阴性率；②留尿前，经可能减少因液体摄入稀释尿液所致的尿菌计数偏低；③对于普通细菌培养阴性的浑浊脓尿，应进行结核分枝杆菌的检测，尿液标本应该留取第一次晨尿，且连续留取3天；④尿标本采集后，应尽快送检，新鲜尿液应在2小时以内送检，有保存液的尿液室温保存不超过24小时或置4℃冰箱，在24小时内送检；否则为不合格标本。

尿液细菌学检查
尿液细菌学检查介绍：
尿液细菌检查是对尿路感染的检查，尿路感染是由细菌(极少数可由真菌、原虫、病毒)直接侵袭所引起。

尿液细菌学检查对尿路感染的诊断与治疗有决定意义。

尿液细菌学检查正常值：
清晨第1次新鲜中段尿沉渣涂片，每高倍镜视野下细菌数<10个或无细菌，则通常中段尿培养阴性或菌落计数<103/mL;细菌数达15～20个则中段尿培养菌落数>105 /mL。

<104/mL认为无意义或污染，菌落数>105/mL可作为尿路感染诊断的根据，当菌落数104～105/mL为可疑。

尿液细菌学检查临床意义：
异常结果：检出同一种细菌时，革兰阴性杆菌≥105/ml菌落数(CFU)时可认为是病原菌，有人认为一次培养菌数在105/ml，准确率为80%，两次检出同一细菌在1 05/ml以上，准确率为91%，三次为95%;104/ml～105/ml时为可疑，应重复检查;<10 4/ml时视为污染;革兰氏阳性球菌≥104/ml则可视为病原菌。

需要检查的人群：老年人、小儿及慢性尿路感染患者，
尿液细菌学检查注意事项：
不合宜人群：.糖尿病、尿路结石、甲状腺肥大患者等易导致尿路感染疾病，应小心并接受适当的治疗
检查前禁忌：勿憋尿，尤其是怀孕的妇女。

女性上完厕所后，卫生纸应由会阴部往后擦至肛门口，不可来回擦拭。

检查时要求：容器必须清洁，防止采集标本时被污染，如有特殊要求医师会说明。

尿液细菌学检查检查过程：
根据医生要求提取尿液，如有不适，应及时向医生咨询。