鼠嵌合抗体多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体共93页

抗体药物是一类利用人工合成的抗体来治疗疾病的药物。

根据抗体来源、结构和作用机制的不同，抗体药物可以分为以下几个主要分类：
完全人源化抗体（Fully Humanized Antibodies）：这类抗体完全由人源基因编码，结构与人体自身产生的抗体相似。

它们通常通过技术手段将小鼠抗体的特异性区域与人源抗体框架结合而得到。

人源化抗体（Humanized Antibodies）：人源化抗体是将小鼠源的抗体的特异性区域嵌入到人源的抗体框架中，以减少小鼠成分的含量。

这样可以减少免疫系统对药物的排斥反应。

嵌合抗体（Chimeric Antibodies）：嵌合抗体是由小鼠源的抗体的特异性区域和人源的抗体框架组成。

这种抗体保留了小鼠源抗体的特异性，但减少了小鼠成分的含量。

单克隆抗体（Monoclonal Antibodies）：单克隆抗体是从单个B细胞克隆出的同一种类的抗体。

它们具有高度特异性和单一的特异性区域。

多克隆抗体（Polyclonal Antibodies）：多克隆抗体是从多个B细胞产生的抗体混合物。

这些抗体可以对多个抗原位点产生反应。

此外，抗体药物还可以根据其作用机制进一步分类，包括：
中和性抗体（Neutralizing Antibodies）：能够中和病原体或其他分子的活性，如病毒中和抗体。

激动性抗体（Agonistic Antibodies）：能够模拟天然配体的效应，增强或激活信号通路的抗体。

抗肿瘤抗体（Antitumor Antibodies）：用于治疗癌症的抗体，可以通过直接杀伤肿瘤细胞、阻断肿瘤生长信号或刺激免疫系统等方式发挥作用。

单克隆抗体和多克隆抗体制备方法单克隆抗体和多克隆抗体，这俩名字听起来是不是有点像是高深莫测的东西，仿佛只有生物学家才能理解？但这些东西并不那么神秘，今天咱们就把它们说得通俗易懂，别让它们继续高高在上。

先说说单克隆抗体。

这个名字就像是“单打独斗”的英雄，不依赖其他伙伴，自己就能打得风生水起。

单克隆抗体其实就是从一个特定的B细胞里提取的，这个B细胞的任务就是专门对抗某种特定的病原体，比如病毒或细菌。

想象一下，它就像是个警察，只抓一个罪犯，不管周围发生了什么事情。

单克隆抗体的优势就在于它非常专一，只攻击它“锁定”的目标，不会跑去伤害其他健康的细胞或者组织。

这样一来，它就特别适合用在治疗各种疾病，像是癌症、风湿性关节炎等等。

不过，说到单克隆抗体的制备，光说简单是远远不够的。

你可别以为从一个小小的B细胞里提取抗体就能万事大吉，实际上这可是一个需要高科技和大量时间的过程。

得从小鼠身上挑选出一个免疫系统特别强壮的，然后把它暴露在一种目标抗原下。

这个抗原就像是一个“信号弹”，告诉小鼠的免疫系统：嘿，咱们需要对付的敌人来了！小鼠体内的B细胞就开始生成针对这个抗原的抗体。

好，接下来我们就得把这些B细胞提取出来，但提取出来的B细胞可不是单打独斗的，它们就像是个退休老兵，活力不再。

所以，需要把它们和一种肿瘤细胞融合在一起。

为什么是肿瘤细胞？因为肿瘤细胞能永生不死，这样一来融合后的细胞也能持续增殖，不会一时半会儿就死掉，能源源不断地产生抗体。

然后，这些细胞就会被筛选出来，找到那些能够生产我们需要抗体的细胞，最后大量培养它们，制备出单克隆抗体。

不过，说到多克隆抗体，又是一回事了。

多克隆抗体就像是一个大杂烩，目标可不仅仅是单一的，它可以同时对多个不同的抗原进行反应。

你可以把它想象成一支多兵种合作的队伍，不同的士兵有不同的任务，每个士兵能打不同的敌人。

比如当你感染了病毒，免疫系统就会产生多种抗体来应对不同的病毒部分，这些抗体就是多克隆抗体的典型代表。

嵌合抗体的制备抗体在生物医学领域中的应用极为广泛，其制备技术经历了从多克隆抗血清、单克隆抗体到基因工程抗体等3个发展阶段。

基因工程抗体是继多克隆抗体和单克隆抗体之后的第三代抗体，主要包括两部分：一是对已有的单克隆抗体进行改造，包括单克隆抗体的人源化(嵌合抗体、人源化抗体)、小分子抗体(Fab，ScFv，dsFv，diabody，minibody等)以及抗体融合蛋白的制备；二是通过抗体库的构建，使得抗体不需抗原免疫即可筛选并克隆新的单克隆抗体。

基因工程抗体，即应用基因工程技术将抗体的基因重组并克隆到表达载体中，在适当的宿主中表达并折叠成有功能的一种抗体分子。

基因工程抗体具有分子小、免疫原性低、可塑性强及成本低等优点。

此技术的基本原理是，首先从杂交瘤或免疫脾细胞、外周血淋巴细胞等中提取mRNA，逆转录成cDNA，再经PCR 分别扩增出抗体的重链及轻链基因，按一定的方式将两者连接克隆到表达载体中，并在适当的细胞(如大肠杆菌、CHO细胞、酵母细胞、植物细胞及昆虫细胞等)中表达并折叠成有功能的抗体分子，筛选出高表达的细胞株，再用亲和层析等手段纯化抗体片段。

基因工程抗体技术的着眼点在于尽量减少鼠源成分，保留原有抗体的亲和力和特异性。

借助于基因工程技术，既可以对完整抗体，又可以对抗体片段进行改造。

单克隆抗体(McAb)以其高特异性、高亲和力等优点，在许多疾病的诊疗中得到广泛应用，成为新型药物研制的一条有效途径。

然而大多数McAb都是鼠源的，众多的临床研究表明，将鼠源McAb重复注入人体内会引起患者的人抗鼠抗体(HAMA)反应，出现全身过敏毒性反应并阻断抗体功效的发挥。

为了降低鼠源McAb在人体内的免疫原性，尽可能地避免患者出现HAMA反应，从而可以给患者重复应用McAb来实施治疗现在已经发展了三种技术来克服抗体的免疫原性：(1)将鼠源McAb的恒定区(c区)置换为人抗体的C区，构建成人／鼠嵌台抗体；(2)在采用人的C区的基础上，将鼠源McAb的互补决定区( cDR)移植到人抗体的框架区( FR)中，构建成人源化改形抗体；(3)从人类噬菌体抗体库中获得针对特异性抗原的人抗体的可变区(V区)基因，再构建完整的人抗体或抗体片段。

单克隆抗体和多克隆抗体之间的区别抗体（antibody）是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。

它（免疫球蛋白不仅仅只是抗体）是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。

抗体能识别特定外来物的重要特征，该外来目标被称为抗原。

抗体是免疫蛋白质，在宿主对病毒、细菌和真菌等感染性病原体的防御中发挥着基本作用。

这些Y型蛋白质的免疫功能是由其结合抗原的能力决定的，抗原是由细胞释放的或在细胞上发现的刺激免疫反应的分子。

除了在宿主免疫中的作用，抗体在研究和治疗方面也被证明是有价值的。

两种类型的抗体，多克隆抗体和单克隆抗体为研究人员提供了检测或量化目标抗原的不同方法，主要是由于特异性和亲和力的不同。

定义多克隆抗体和单克隆抗体有用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和灵敏度。

抗体的特异性是由其结合域和目标抗原之间的相对亲和力决定的，而其他分子是存在的。

对这种特异性的利用对免疫学研究人员和临床医生来说是至关重要的，因为许多应用都是利用多克隆和/或单克隆抗体来专门检测目标分子。

结合抗原特异性，抗体的灵敏度是一个重要的参数，决定了它在实验室的实用性。

高灵敏度的抗体非常适用于诊断应用，如免疫沉淀、West Blot和酶联免疫吸附试验（ELISA），因为它们能够识别低水平的目标抗原。

单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）：就是指由单一B细胞（其基因仅能编码一种抗体）克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。

单克隆抗体是通过将抗原注入到宿主动物体内启动机体免疫应答而产生的。

因而制作单克隆抗体的大多数操作都是在体外将来自这些宿主的脾细胞与培养的恶性骨髓瘤细胞进行融合。

将细胞克隆分离出来，融合步骤中存活下来的细胞称为杂交瘤。

杂交瘤因骨髓瘤特性而可以永生，且容易在培养物中繁殖。

基因工程抗体的定义及种类
基因工程抗体是通过基因工程技术手段，将人工合成的抗体基因导入到生物体中，使其能够产生特定的抗体蛋白。

基因工程抗体具有高效、可定制、可扩展的特点，被广泛应用于生物研究、医学诊断和治疗等领域。

根据抗体来源的不同，基因工程抗体可以分为以下几类：
1. 全人源抗体：完全由人类基因编码的抗体，与人体内自然产生的抗体非常相似，因此具有较低的免疫原性和较高的亲和力，被广泛用于治疗人类疾病。

2. 人鼠嵌合抗体：将人源的可变区（variable region）基因与
小鼠的恒定区（constant region）基因组合，形成具有人源可
变区和小鼠源常变区的抗体。

这种抗体在结构上更接近于人体抗体，可以减少免疫反应。

3. 草鼠抗体：有时称为小鼠源抗体，是最早被研究和开发的基因工程抗体。

草鼠抗体的可变区与小鼠相同，常量区与人类相似。

尽管草鼠抗体具有较高的免疫原性，但其广泛用于研究和诊断领域。

4. 单特异性抗体：这是由单个抗体链变体或人工构建的抗体基因克隆产生的抗体。

与完整抗体相比，单特异性抗体更小，更便于制备和改造，广泛应用于研究和临床领域。

5. 二抗（二抗体）：由两种不同的单克隆抗体通过基因工程技
术合并而成，具有双重特异性。

这种抗体可用于治疗癌症、自身免疫性疾病等。

总的来说，基因工程抗体的种类非常丰富，每一种都具有特定的特点和应用价值。

随着基因工程技术的不断发展，未来还会有更多新型的基因工程抗体涌现。

基因工程抗体的定义及种类一、基因工程抗体定义基因工程抗体是指通过基因工程技术对抗体基因进行克隆、表达和纯化，产生的具有高度特异性和稳定性的抗体。

与传统抗体相比，基因工程抗体具有更高的特异性和亲和力，并且可以克服传统抗体生产中的一些限制，如产量低、批次间一致性差等问题。

二、基因工程抗体种类1.单克隆抗体单克隆抗体（Monoclonal Antibody，简称mAb）是通过杂交瘤技术产生的单一特异性抗体。

杂交瘤技术是将免疫后的B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，形成的杂交瘤细胞具有分泌特异性抗体的能力。

通过筛选和克隆，可以得到具有所需特性的单克隆抗体。

单克隆抗体具有高度特异性和亲和力，广泛用于治疗、诊断和科研等领域。

2.多克隆抗体多克隆抗体（Polyclonal Antibody）是来自免疫后的动物血清或脾脏组织的混合抗体。

多克隆抗体的制备相对简单，适用于大规模生产。

但是，由于是多克隆抗体，其特异性不如单克隆抗体高。

多克隆抗体通常用于基础研究和临床诊断等应用。

3.人源化抗体人源化抗体（Humanized Antibody）是通过基因工程技术将鼠源单克隆抗体的可变区基因插入到人抗体基因中，形成嵌合抗体基因，然后将嵌合抗体基因转染到人类细胞系中表达产生。

人源化抗体的免疫原性较低，可以在人体内保持较长时间的活性，并且副作用较小。

人源化抗体适用于治疗和诊断等领域。

4.功能化抗体功能化抗体（Functionalized Antibody）是通过基因工程技术对抗体可变区基因进行改造，引入新的功能基团或其他蛋白质，使其具有新的功能。

功能化抗体可以在保持原有抗体的特异性和亲和力的基础上，增加新的治疗或诊断功能。

例如，可以引入酶活性基团，使其具有细胞毒性作用；也可以引入荧光基团，使其具有荧光示踪功能。

功能化抗体在肿瘤治疗、自身免疫性疾病等领域具有广泛的应用前景。

动物抗体类型一、单克隆抗体（Monoclonal Antibodies）单克隆抗体是指由单个克隆细胞分泌的抗体，具有高度特异性和单一的抗原结合位点。

单克隆抗体具有较低的背景信号和较高的灵敏度，因此在生物医学研究和临床应用中得到广泛应用。

单克隆抗体的制备一般通过融合抗体产生细胞（B细胞）和癌细胞，从而获得具有稳定特异性的单克隆细胞系。

二、多克隆抗体（Polyclonal Antibodies）多克隆抗体是指由多个克隆细胞分泌的抗体，具有多个不同的抗原结合位点。

多克隆抗体的制备相对简单，通过免疫动物（如小鼠、兔子等）后，从其血清中提取多克隆抗体。

多克隆抗体具有较高的亲和力和较强的抗原结合能力，但也存在一定的非特异性反应。

三、重组抗体（Recombinant Antibodies）重组抗体是通过基因工程技术制备的抗体，具有高度特异性和大规模生产的优势。

重组抗体可以通过将人源抗体的DNA序列导入哺乳动物细胞中表达，从而获得与人体免疫系统更加兼容的抗体。

重组抗体的制备过程中可以对其结构进行修饰，如引入荧光标记、毒素等，以实现特定的应用需求。

四、单链抗体（Single-chain Antibodies）单链抗体是由单个抗体的轻链和重链连接而成的单链分子。

相比传统的完整抗体分子，单链抗体更加小巧灵活，可以更好地渗透到组织和细胞内部。

单链抗体具有较低的免疫原性和较高的稳定性，适用于药物输送、肿瘤治疗等领域。

五、嵌段抗体（Bispecific Antibodies）嵌段抗体是一种能够同时与两个不同抗原结合的抗体分子。

嵌段抗体通常由两个单链抗体分子通过某种方式连接而成，可以同时识别两个不同的抗原，从而实现更精确的疾病诊断和治疗。

嵌段抗体在肿瘤治疗、免疫疗法等领域具有广阔的应用前景。

六、人源化抗体（Humanized Antibodies）人源化抗体是将非人物种的抗体通过基因工程技术改造，使其更接近人体自身抗体的结构和功能。