实验名称：坐骨神经—腓肠肌标本的制备
一、实验目的
学习坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法，掌握基本操作技术。
二、实验原理
1、牛蛙作为实验动物的优势
容易饲养，产量丰富价格便宜，性价比高。蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与哺乳动物相似，如神经的生物电活动、肌肉收缩等。牛蛙是哺乳动物的理想替代品。牛蛙的离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。在任氏液的浸润下神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
2、使用锌铜弓检验标本活性的原理
锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一端分开。锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压）。
细胞的静息 膜电位为外正内负，电刺激可改变可兴奋细胞的膜电位差。 膜电位减小时，细胞去极化。细胞兴奋，膜电位增大时，细胞超极化，细胞兴奋性被抑制。
当用锌铜弓接触标本时，可产生沿锌片—活组织—铜片流向的电流对细胞产生刺激效应。引起标本局部去极化，引发动作电位，肌肉收缩。
三、实验器材
1、实验动物：牛蛙。
2、实验器材：任氏液，蛙类手术器械一套，大头针，锌铜弓。
四、实验流程和步骤
1、实验流程
洗干净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离两后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→分离股骨头→标本检验
2、实验方法与步骤
（1） 毁髓：一只手握住牛蛙，使其背部向上。用拇指压住牛蛙背部，食指压其头部前端，另一只手持毁髓。用解剖针从蛙的枕骨大孔（把头抬起来时凹陷的部位或者脊柱与头骨的中心点）插入向前搅动后再向后搅动，直至毁髓成功（蛙的四肢自然下垂，瘫软无力）。
（2） 剥制后肢标本：轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约 1 公分处用粗剪刀横向剪断脊柱。轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置。沿脊柱两侧横向切口剪断体壁、去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
（3） 分离两后肢：用粗剪刀纵向剪开脊柱，并剪断两后肢相连的肌肉。一只用于剥制标本，另一只放入任氏液中保存。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
一、实验目的
二、实验原理
三、实验步骤
四、实验结果
五、实验结论
一、实验目的
本次实验的主要目的是通过坐骨神经腓肠肌标本制备，了解人体肌肉组织的结构和特点。同时，通过对标本制备过程中各个步骤的操作，掌握标本制备技能和方法。
二、实验原理
1. 坐骨神经腓肠肌标本制备原理
坐骨神经腓肠肌标本制备是指将动物或人体组织切割成薄片并进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。在这个过程中，需要进行以下几个步骤：
（1）取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
（2）固定：将组织样品放入固定液中进行固定处理。
（3）包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理。
（4）切片：将包埋后的组织样品切成薄片。
（5）染色：将切片进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
2. 坐骨神经腓肠肌结构原理
坐骨神经腓肠肌是人体下肢的一部分，由坐骨神经支配。它主要由三个部分组成：大腿后侧的半膜状肌、半腱状肌和小腿后侧的胫长伸肌。这三个部分都是由肌纤维束组成的，每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
三、实验步骤
1. 取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
2. 固定：将组织样品放入10%福尔马林液中进行固定处理，固定时间为24小时。
3. 包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理，包埋时间为48小时。
4. 切片：将包埋后的组织样品切成厚度为5微米左右的薄片。
5. 染色：将切片进行染色处理，常用染色方法有HE染色法和Masson染色法等。本次实验采用HE染色法进行染色处理。
6. 封片：将染好色的切片放入玻璃片上，加上封片胶，用玻璃片盖住，使其能够在显微镜下观察。
四、实验结果
经过以上步骤的操作，制备出了坐骨神经腓肠肌标本。在显微镜下观察到了肌纤维束组成的三个部分：半膜状肌、半腱状肌和胫长伸肌。每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
五、实验结论
通过本次实验，我们了解到了坐骨神经腓肠肌标本制备的基本步骤和操作方法，并且通过观察标本结构，掌握了人体肌肉组织的结构和特点。这对于我们深入理解人体解剖学知识具有重要意义。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程，掌握基础的组织学实验技能，同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法：
材料：成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内，然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时；
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除，每步时间为1小时；
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中，每步时间为2小时，至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本，置于石蜡组织取样盒中，根据实验需求，选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出，用微型切片机切制厚度为5微米的切片，将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色，脱色后洗净水片后，在水晶片上滴几滴覆盖剂，然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片，压紧即可。
实验成果： 经过制备和染色后，我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本，通过光学显微镜的观察与检测，我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状，同时染色后肌纤维呈现出红色，血管呈现出蓝色，系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义：
《 人体及动物生理 》课程实验报告
实验名称 牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本制备
【实验目的】（5分）
1. 掌握牛蛙双毁髓的实验方法。
2. 掌握牛蛙坐骨神经——腓肠肌的急性分离实验技术。
【实验原理】（10分）
两栖类牛蛙的一些基本生理功能与温血动物没有明显区别，同时购买价格相对温血动物便宜，并且饲养方便。而且离体神经-骨骼肌肉组织维持其生理功能所需的条件也比较易于掌控。因此，在实验中常用牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本来观察神经的兴奋性，神经对刺激产生反应的一些基本规律，以及骨骼肌的收缩特征等。掌握牛蛙坐骨神经——腓肠肌的急性分离实验技术十分必要。
【器材及试剂】（5分）
牛蛙、解剖针、粗剪刀、手术刀、手术镊、骨剪、玻璃分针、玻璃板、蛙板、废液缸、锌铜弓、培养皿、胶头滴管、医用纱布、粗棉线、任氏液
【操作步骤】（30分）
1、 损毁牛蛙的脑和脊髓。
2、 弃去牛蛙躯干上部及内脏。
3、 撕脱牛蛙后肢皮肤。
4、 用骨剪分离牛蛙后两后肢
5、 肉眼分离牛蛙坐骨神经的方法。
用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经，将标背侧向上放置，剪断梨状肌及其附近的结缔组织。用玻璃分针小心从股二头肌及半膜肌之间的裂缝处剥离出分布在大腿部分的坐骨，神经，并将该坐骨神经一直游离至大腿和小腿之间腘窝处为止。
6、 完整的牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本急性分离方法
7、 鉴定牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本的机能
【实验现象及数据】（30分）
牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本
【结果与讨论】（20分）
反思：实验过程中，第一次牛蛙坐骨神经——腓肠肌标本制作失败。坐骨神经断裂，为什么坐骨神经断裂？
1、 我们在分离牛蛙的上下半身体时，同时把两腿分离，没有找准位置。盲目的在大概中间位置用骨剪剪了数次，导致剪断了坐骨神经。
2、 把肉骨分离时，不小心弄断了坐骨神经。但我们认为更多是第一条原因导致我们第一次实验失败，因为骨肉分离过程中，我们都很仔细，并没有剪到坐骨神经。
