jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测药物代谢酶基因多态性平台的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测药物代谢酶基因多态性平台的建立随着科技的不断进步和人们对健康的关注，药物安全性和有效性的评价变得越来越重要。

药物代谢酶是影响药物在人体内代谢和排泄的关键因素，其基因多态性会导致药物代谢能力的个体差异，从而对药物疗效和毒性产生重要影响。

因此，建立一种高效、准确、快速的方法来检测药物代谢酶基因多态性具有重要意义。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）是一种基于质荷比的分析技术，已经广泛应用于蛋白质组学、代谢组学和药物代谢研究中。

其快速、高通量、高灵敏度和高准确性的特点，使其成为药物代谢酶基因多态性检测的理想平台。

本研究旨在建立一种基于MALDI-TOF MS的药物代谢酶基因多态性检测平台，并应用于临床研究。

首先，我们收集了大样本数量的人群数据，并提取了它们的基因组DNA。

接下来，我们选择了代谢酶相关基因的多个多态性位点进行分析，如CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4等。

然后，利用聚合酶链反应（PCR）扩增目标位点，并通过限制性酶切方法获得特定的多态性片段。

最后，我们将多态性片段通过MALDI-TOF MS进行质谱分析，并利用专用的分析软件对结果进行解析。

建立的平台具有以下特点和优势。

首先，我们收集的大样本数量可以更全面、准确地反映基因多态性的分布情况，从而提高检测的准确性和可靠性。

其次，基于MALDI-TOF MS的药物代谢酶基因多态性检测平台具有高通量的优势，可以同时分析多个基因位点。

此外，该技术的快速性使得药物代谢酶基因多态性检测成为可能，有助于临床医生在给予患者药物治疗之前了解其个体药物代谢酶基因型，并据此进行个体化治疗。

在本研究中，我们对该平台的性能进行了验证。

结果显示，建立的平台具有较高的准确性和可重复性。

与传统方法相比，该方法大大节省了时间和成本，并提供了更详细、全面的基因多态性信息。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱随着科技的不断进步，飞行时间质谱技术已经成为了许多领域中不可或缺的分析方法。

其中，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF）更是在生物医学研究、食品安全检测、环境污染监测等领域中得到了广泛的应用。

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的基本原理MALDI-TOF技术是一种利用基质辅助激光解吸电离的质谱技术。

其基本原理是：先将待检样品与一种辅助基质混合，然后将混合物均匀地涂在一个金属板上，待基质干燥后，用紫外激光照射样品，使其与基质分子共同激发。

这样，样品分子就会与基质分子形成一个复合物，并在激光的作用下被解吸电离。

接着，离子会被加速器加速并飞行到一个离子探测器中，最后形成质谱图。

二、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的应用1、生物医学研究MALDI-TOF技术在生物医学研究中的应用非常广泛。

它可以用于蛋白质分析、肽类分析、糖类分析等。

例如，在蛋白质分析方面，MALDI-TOF技术可以用于检测蛋白质的分子量、序列、修饰以及配体结合情况等。

这对于研究蛋白质功能及其在疾病中的作用有着非常重要的意义。

2、食品安全检测食品安全一直是人们关注的焦点之一。

MALDI-TOF技术可以用于检测食品中的各种成分，如蛋白质、糖类、脂类等。

这些成分的分析可以帮助人们了解食品的营养价值和质量安全情况，从而保障人们的健康。

3、环境污染监测环境污染是一个全球性问题，而MALDI-TOF技术可以用于检测环境中的各种化合物，如有机物、无机物等。

这些化合物的分析可以帮助人们了解环境的污染状况，从而采取相应的措施进行治理。

三、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的优缺点1、优点（1）灵敏度高：MALDI-TOF技术的灵敏度可以达到非常高的水平，可以检测到非常微量的化合物。

（2）分析速度快：MALDI-TOF技术的分析速度非常快，可以在几分钟内得到样品的分析结果。

（3）适用范围广：MALDI-TOF技术可以用于分析各种化合物，包括有机物、无机物、生物大分子等。

基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱在寡糖结构分析中的应用项目完成单位：国家生物医学分析中心项目完成人：刘炳玉谷苗桑志红王鸿丽刘峰魏开华杨松成1.前言寡糖和多糖具有调节抗体水平、增强免疫功能、抗肿瘤、抗感染等作用,在肝炎、风湿病和爱滋病等重大疾病诊疗上应用价值大。

它还具有抗消化性溃疡、降血糖、降血脂、抗血栓、抗辐射、抗毒物损伤、抗晕、祛痰镇咳、诱导干扰素产生、促进血功能恢复以及促进蛋白质和核酸的生物合成等方面的生物活性，在国内外（尤其我国传统医学中）应用十分广泛。

糖类化合物结构比蛋白质和核酸复杂得多，包括单糖及其衍生物、寡糖、多糖、复合多糖和糖苷类，糖链由含多元羟基并顺反异构环状己或戊糖通过苷键连接而成,各单糖有五个手性碳且连接位置和构型多种多样。

要阐明一种糖结构,必须了解: (1) 分子量;(2) 单糖残基组成; (3) 单糖残基间的顺序; (4) 单糖残基在糖苷键中的位置; (5) 环状结构的类型; (6) 糖苷键的构型。

糖的组成复杂,结构相似,没有显色基团,难以不经衍生就进行光谱、色谱分析,但质谱不受此影响。

早期研究糖结构的质谱方法主要是快原子轰击电离质谱（FAB-MS），可以显示碎片离子,但有时候检测不到分子离子峰，而且，FAB-MS的分子量范围小、灵敏度不高[1]。

以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI－TOF－MS) 和电喷雾质谱（ESI-MS）为代表的生物质谱打开了质谱分析研究生物大分子的新领域,并很快发展成为能在多个层次上分析研究生物分子的生物质谱学(Biological Mass Spectrometry , BMS) [2-4]。

近年来，ESI－MS已在糖的结构分析中显示出强大的生命力。

它无需衍生化就能确定寡糖的结构、聚合度及组成，并能精确测定糖蛋白的分子量及其中寡糖的序列及结构均一性，还能区分寡糖是O一还是N－连接的，常被用于糖型（glycoform）的分析[5]。

但是，ESI-MS受样品中的无机盐和溶剂中干扰物的影响比较大，常导致其表观灵敏度不高。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是，先通过PCR扩增目标序列，然后加入snp序列特异延伸引物，在SNP 位点上，延伸1个碱基。

将制备的样品分析物与芯片基质共结晶，将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发，由于基质分子经辐射所吸收的能量，导致能量蓄积并迅速产热，从而使基质晶体升华，核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子，产生的离子多为单电荷离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能，进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离，在真空小管中飞行到达检测器。

MALDI产生的离子常用飞行时间（Time-of-Flight,TOF）检测器来检测，离子质量越小，就越快到达。

理论上讲，只要飞行管的长度足够，TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。

MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。

主要用途： 1.对生物大分子物质分子量的测定； 2.对蛋白质进行高通量的鉴定； 3.对有机小分子化合物分子量的测定； 4.对寡核苷酸的分析； 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别：0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息： 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上； 2.检测灵敏度范围：10-15～10-18摩尔； 3.质量准确度可达5ppm； 4.分辨率右达2万。

附件信息：配有源后衰变装置，可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介：基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ）：具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点，特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定，其测定质量数范围最高可达40万Da以上，灵敏度可达10-15～10-18摩尔，质量准确度5ppm。

配有源后衰变（post-sourc e decay, PSD)装置，计算机自动联机检索系统。

一、引言近年来，随着科学技术的不断发展和进步，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在药厂的应用越来越广泛。

这项技术能够在分析化学和药学领域发挥重要作用，为药厂的研发和生产提供了技术支持和保障。

二、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的原理和特点1. 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是一种高灵敏度和高分辨率的质谱分析技术。

其原理是利用激光将基质与待分析样品相结合，通过激光解吸产生游离离子进行质谱分析。

2. 这项技术具有分析速度快、灵敏度高、分辨率高的特点，能够对复杂的生物样品进行精准的分析和检测，为药厂的质量控制和研发提供了强大的分析工具。

三、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在药厂的应用1. 药物成分分析：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术能够对药物的成分进行精准分析，确保药品的质量和安全性。

2. 药效评价：通过对药物代谢产物的分析，可以对药物的药效进行评价，为药厂提供研发新药的重要依据。

3. 药物残留检测：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术可以对药品在生产及加工过程中的残留进行快速准确的检测，保障了药品的质量和安全。

4. 生物样品分析：在生物制药领域，这项技术也能够对生物样品中的蛋白质、肽和代谢产物等进行精准的分析，为药厂的生物制品研发和生产提供了强有力的技术支持。

四、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在药厂应用的优势1. 高灵敏度：能够对微量样品进行分析，提高了检测的灵敏度和准确度。

2. 高分辨率：能够准确分析样品中的成分，有利于区分不同的化合物和代谢产物。

3. 高速度：快速进行样品分析，提高了生产效率和质量检测的效率。

4. 多样性：能够对多种药物和生物样品进行分析，满足了药厂研发和生产中的多样化需求。

五、结语基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在药厂的应用为药品的质量控制、研发和生产提供了强大的技术支持，为药厂的科研和生产工作带来了许多便利和效益。

相信随着技术的不断发展和进步，这项技术在药厂中的应用会更加广泛，为药品的质量和安全保驾护航。

基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱）是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。

质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。

因此，质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦，有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图，由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以，所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。

但是，不管是哪种类型的质谱仪，其基本组成是相同的。

都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。

以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解，然后按质荷⽐（m/z）⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离，检测它们的强度，并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱，这种分析研究的⽅法叫做质谱图，质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量（质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量），并可以确定化合物的分⼦式（可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。

这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了，如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚，然后将碎⽚拼构起来，就可以使花瓶复原。

花瓶好⽐有机物的分⼦，打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。

收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。

⽽将碎⽚重拼花瓶的过程，相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。

由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图，⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律，这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础）。

飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。

这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。

由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管，并以恒定速度飞向离⼦接收器。

离⼦质量越⼤，到达接收器所⽤时间越长，离⼦质量越⼩，到达接收器所⽤时间越短，根据这⼀原理，可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机 1. 开主机总电源至ON。

2. 开主机正面有钥匙的开关至ON顺时针。

3. 开计算机及显示器启动FlexControl软件。

4. 等待源高真空达到3×10-6mbar如达不到该数值检查是否有漏气发生。

5. 进入日常操作。

二. 关机1将靶退出。

2在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压按“OFF”。

3关闭所使用的软件关闭计算机。

4关主机正面有钥匙的开关至OFF逆时针。

5关主机总电源至OFF。

三日常操作1 打开FlexControl 进入仪器控制界面。

2 确认真空度为10-7mbar或稍低。

3 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关将样品靶放入仪器等待约2分钟调整好靶位。

在此过程中不应操作软件或硬件以确保仪器通讯畅通。

4 根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。

2 肽质量指纹谱测量根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。

⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。

⑷如果进行串联质谱分析则选择LIFT方法。

5 选择适当的仪器参数6 测量⑴手动测量a 选择好待测样品的靶位及相应参数后按Start开始测量。

b 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。

c 按Save As保存图谱。

注在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。

⑵自动测量a 按菜单AutoXecute再按Select选择一个Sequence文件名。

b 按Edit编辑待测样品用Sample position 的Sample依次选定靶位?蟀碅dd添加到Edit AutoXecute Sequence中。

c 按AutoXecute Method选择Calibration 或样品测量方法。

d 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临
床病原菌鉴定中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）是一种高性能的质谱技术，近年来在临床病原菌鉴定领域得到了广泛的应用。

以下是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床病原菌鉴定中的应用：
1、快速鉴定病原菌：MALDI-TOF MS可以快速、准确地鉴定临床样本中的病原菌，包括细菌、真菌和酵母等。

通过对临床样本进行适当的处理和提取，然后进行质谱分析，可以得到病原菌的指纹图谱，从而进行鉴定。

2、鉴定疑难菌：对于一些形态学鉴定困难的病原菌，MALDI-TOF MS具有较高的鉴定准确性。

例如，对于一些分枝杆菌的鉴定，传统方法往往需要复杂的生化试验，而MALDI-TOF MS可以直接进行鉴定，大大提高了工作效率。

3、鉴定抗生素敏感性：MALDI-TOF MS可以用于鉴定病原菌的抗生素敏感性。

通过对病原菌进行质谱分析，可以得到其抗生素指纹图谱，从而判断其对抗生素的敏感性，为临床治疗提供依据。

4、监测病原菌的变异：MALDI-TOF MS可以用于监测病原菌的变异。

通过对同一菌株在不同时间点的样本进行质谱分析，可以观察到菌株的变异情况，从而为临床治疗提供实时信息。

5、病原菌的定量分析：MALDI-TOF MS可以对病原菌进行定量分析，有助于临床医生了解感染的程度和治疗效果。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定病原微生物临床应用专家共识要点（完整版）基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）是一种新型软电离有机质谱技术，用于分析生物分子（如DNA、蛋白质、多肽、糖类等）和大分子量的有机分子［1 ］，使得微生物蛋白质指纹图谱进行菌种鉴定成为可能。

随着MALDI-TOF MS仪器临床使用日渐广泛，越来越多的临床问题需要规范。

本专家共识旨在对日常使用MALDI-TOF MS进行病原微生物鉴定的常见问题给出详细建议，仅供临床微生物学实验室参考。

本专家共识制定过程：本共识由郝晓柯教授、应斌武教授和鲁炳怀教授牵头，确定执笔专家和汇总专家，召开共识启动会，讨论会和定稿会。

搜集临床问题，专家讨论归纳出22个问题，执笔专家分别回答擅长问题，汇总后专家会议讨论确定内容，并最终确定13个实用性问题。

涵盖了MALDI-TOF MS应用的“概述、标本制备、结果分析与展望”4部分。

执笔专家通过大量文献调研并结合使用经验分别对共识内容进行了撰写和互审，形成“共识讨论稿”。

通过函审形式由编写专家形成了40余版“共识修改稿”。

在此基础上，专家组共同凝练出13个实用性问题并形成13条推荐意见纳入共识讨论内容中。

同时制定了共识调查问卷，针对每个推荐意见征集专家建议，通过函审形式调查。

调查结果的统计分为推荐、有条件推荐、不推荐和弃权。

推荐和有条件推荐统计为推荐意见，征集到47位专家的建议统计后形成了最终的推荐意见。

综合评审和调查结果，执笔专家形成“共识审阅稿”，同时由审阅组专家进行审核。

最终结合专家反馈的建议和意见对文章完成修改后形成本共识。

一、概述问题1 MALDI-TOF MS进行病原微生物鉴定的优势和局限性有哪些？推荐意见1 推荐MALDI-TOF MS作为细菌、酵母及酵母样真菌鉴定的首选方法之一。