海马细胞能量代谢仪检测指标

网络出版时间：２０２１－１－２６８：３５　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２１０１２５．１４３９．０２０．ｈｔｍｌ高尿酸血症认知功能障碍模型大鼠皮层和海马的代谢组学研究邵晓妮，黑亚南，孙英凯，吴美薇（西南民族大学药学院，四川成都　６１００４１）收稿日期：２０２０－１１－２０，修回日期：２０２１－０１－１５基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１８０１０８６）；西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（Ｎｏ２０１９ＨＱＺＺ１９）作者简介：邵晓妮（１９９０－），女，博士，讲师，研究方向：代谢性疾病分子机制与创新药物研究，通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｎｓｈａｏ＠ｓｗｕｎ．ｅｄｕ．ｃｎｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０２．０１０文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０２－０１９６－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ３２２，８１；Ｒ３３８ ６４；Ｒ４４５ ２；Ｒ５８９ ９摘要：目的　基于核磁共振氢谱（１Ｈ ＮＭＲ）代谢组学方法研究高尿酸血症诱发大鼠认知功能障碍模型的皮层和海马的内源性差异代谢物变化。

方法　采用含２％尿酸和２％氧嗪酸钾的高尿酸复合饲料饲喂大鼠１２周，Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫测定大鼠认知功能，并利用１Ｈ ＮＭＲ分析大鼠皮层和海马中的差异代谢物。

结果　高尿酸血症大鼠显示较长的逃逸潜伏期，表现出认知功能障碍；且大鼠的皮层和海马中分别筛选出２７和１８种差异代谢物，其中共有６种差异代谢物。

γ 氨基丁酸、谷氨酸、谷氨酰胺、乳酸、甘露醇、牛磺酸和谷胱甘肽均有显著变化，可能作为高尿酸血症认知功能障碍的特征生物标志物，与学习、记忆功能损伤的发生和发展密切相关。

结论　高尿酸饮食可干扰机体的正常代谢，其诱发认知功能障碍机制可能与能量代谢的糖酵解和三羧酸循环、氨基酸代谢、氧化应激、神经递质转化以及细胞膜功能的紊乱等有关。

、摘要大脑中的海马组织具有自发和诱发的电生理特性，并且在学习、记忆和癫痫发病中具有起搏点的作用，因此海马脑片成为人们在神经生理学和神经药理学领域常用的实验对象。

本文针对离体海马脑片诱发场皇焦进行了分析，开发了一个适用于神经电生理实验的自动信号分析系统。

它可以自动、快速地测出海马脑片诱发场电位的时域参数，如：幅度、面积、潜伏期等，同时也可以对信号进行频域分析和处理。

此外，系统还具有统计功能，可以方便的对实验数据进行统计，并以图形表示出来，具有良好的人机界面。

该系统不仅适用于离体脑片实验，同时也可以对在体脑部信号进行分析检测，可以做为神经电生理实验的辅助工具。

应用本系统，我们以离体海马脑片为实验对象，对咝的毽鲎塞控作用进行了研究，结果表明，酸枣仁粗提物中的皂甙Ａ可以减小群蜂电位（ＰＳ）的幅度和场电位的上升斜率，增加ＰＳ的潜伏期。

具有一定的抑制性作用。

实验表明本系统可以用于评价药物和进行药物作用机理的研究。

ＡｂｓｔｒａｃｔＨｉｐｐｏｃａｍｐａｌｓｌｉｃｅｓｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔａｎａｔｏｍｉｃｐａｒｔａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙａｎｄｔｈｅｐａｃｅｍａｋｅｒｏｆｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｓｏｍｏｓｔｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔａｎｄｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔｆｏｃｕｓｔｈｅｉｒｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋｏｎｉｔ．Ｉｎｍｙｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋ，ｆｉｅｌｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓｈａｓｂｅｅｎａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄ．Ｉａｌｓｏｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｏｆｔｗａｒｅ，ｗｈｉｃｈｃａｎａｕｔｏｍａｔｉｃａｌｌｙｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｔｉｍｅｄｏｍａｉｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｆｉｅｌｄｐｏｍｎｔｉａｌｆｒｏｍｔｈｅｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓ，ｓｕｃｈａｓａｍｐｌｉｔｕｄｅ，ａｒｅａ，ｌａｔｅｎｃｙｅｔｃ，ｉｔＣａｌｌａｌｓｏｐｅｒｆｏｒｍｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙ－ｄｏｍａｉｎａｎａｌｙｓｉｓ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｉｓａｎｏｔｈｅｒｆｅａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｓｏｆｌｗｖａｌ＇ｅ，ｔｈｉｓｍａｋｅｉｔｖｅｒｙｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．ＴｈｉｓｓｏｆｔｗａｒｅｈａｓａｎｉｃｅＧｒａｐｈｉｃＵｓｅｒＩｎｔｅｒｆａｃｅ，ｖｅｒｙｅａｓｙｔｏｕｓｅ．Ｉｔａｌｓｏｉｎｃｌｕｄｅｓｍａｎｙｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｇｅｎｅｒａｌｉｎｔｅｒｅｓｔｔｏｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔｓ，ａｎｄｃ４１ｎｂｅｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｓｉｇｍａｒｅｃｏｒｄｅｄｆｒｏｍｔｈｅ／ｎｖ／ｒｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｕｓｉｎｇｔｈｉｓｓｙｓｔｅｍ。

Sea horse多功能生物能量代谢监测仪创新点：侦测技术的核心是将可以即时侦测培养环境中氧分子以及氢离子浓度变化的光学侦测器整合在可以活动的探针上。

在观测的过程中将探针贴近细胞，seahorse XF能量侦测仪可以及时观测细胞与周边培养环境交换分子的情况以了解代谢系统的变化，侦测完成之后探针会再离开细胞。

完全满足新世纪代谢侦测四不一没有的要求：不用额外的试剂、不会接触细胞，不破坏细胞结构，,易操控。

多功能生物能量代谢监测仪简介：1 世界上唯一一款无损伤实时同步侦测细胞糖酵解与线粒体功能的独步全球技术系统2 固态探针侦测技术:将可以即时侦测培养环境中之氧分子以及氢离子浓度变化的光学侦测器整合在可以活动的探针上。

在观测的过程中将探针贴近细胞，海马XF能量侦测仪可以及时观测细胞与周边培养环境交换分子的情况以了解代谢系统的变化，侦测完成之后探针会再离开细胞。

完全满足新世纪代谢侦测四不一没有的要求：不用额外的试剂、不会接触细胞，不破坏细胞结构，且没有学习门槛。

3 固态光纤传感技术：***灯激发，使用寿命长，独立24根光纤探针，便于单根探针损坏时更换，仪器维护成本低4荧光功能：高效LED光源，参考型光电二极管检测器及发射光电二极管探测器，减少光散射，提高检测数据的准确度5 检测方式：细胞种于专用24孔细胞培养板，细胞均一的贴在培养板的底部，检测过程自动形成7ul的半封闭环境，检测快速灵敏。

6 样品种类：悬浮细胞、贴附细胞、组织、分离的细胞器等7 质量保证：实时动态侦测，内设对照，真实反应细胞的生理状态，保证了实验的真实性。

8 仪器设计：整合式集成控制设计，全程触摸式操作，无杂乱的链接线，节省空间；人性化操作界面，易学易懂；与探针整合的4道自动加药槽，满足不同实验及不同领域的研究需求。

多功能生物能量代谢监测仪主要功能应用：1、Extracellular Acidification Rate （产酸率）糖酵解作用所产生的丙酮酸（pyruvate）经过乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase）反应产生乳酸（lactate），允许细胞在不消耗氧气的情况下快速产生ATP以满足能量需求，测量乳酸的氢离子可以说明无氧代谢的变化。

《膨腹海马（Hippocampus abdominalis）对纳米微塑料污染的生理与分子响应特征研究》摘要：本文以膨腹海马（Hippocampus abdominalis）为研究对象，通过对其暴露于纳米微塑料污染环境下的生理与分子响应特征进行深入研究，旨在揭示纳米微塑料对海马生物的潜在影响及其作用机制。

研究采用多种实验方法，包括生理学、分子生物学及基因表达分析等，以期为海洋生态保护及环境保护策略的制定提供科学依据。

一、引言随着工业化的快速发展和人类活动的增加，海洋环境中纳米微塑料污染问题日益严峻。

作为海洋生态系统的重要组成部分，海马是评估环境污染物对海洋生物影响的理想模式生物。

因此，本文以膨腹海马为研究对象，对其在纳米微塑料污染环境下的生理与分子响应特征进行研究。

二、材料与方法（一）实验材料实验用膨腹海马（Hippocampus abdominalis）采集自特定海域，经实验室培养后用于实验。

纳米微塑料采用特定粒径范围的材料。

（二）实验方法1. 暴露实验：将海马暴露于不同浓度的纳米微塑料溶液中，设立对照组。

2. 生理学分析：通过监测海马的呼吸频率、心率、游泳活动等生理参数变化，分析其对纳米微塑料污染的生理响应。

3. 分子生物学分析：利用基因表达分析、蛋白质组学等方法，研究纳米微塑料对海马基因表达及蛋白质表达的影响。

4. 数据分析：采用统计软件对实验数据进行处理和分析。

三、结果与分析（一）生理学响应特征实验结果显示，膨腹海马在暴露于纳米微塑料后，其呼吸频率和心率均出现显著变化。

高浓度纳米微塑料暴露下，海马的游泳活动能力显著下降。

（二）分子响应特征1. 基因表达分析：纳实验发现，暴露于纳米微塑料后，膨腹海马部分基因表达发生明显改变，其中包括与解毒代谢、细胞应激及能量代谢等相关的基因。

2. 蛋白质组学分析：与对照组相比，暴露于纳米微塑料的海马样品中部分蛋白质表达量出现显著变化，这些蛋白质主要涉及能量代谢、细胞应激及免疫反应等方面。

《蛋白磷酸酶1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况》一、引言近年来，生物医学研究在深入探索生理及病理过程上取得了重大突破。

其中，蛋白磷酸酶1（PP1）及其DNA甲基化在低氧预适应过程中的作用，引起了科研人员的广泛关注。

本文将就这一主题展开讨论，分析PP1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况。

二、蛋白磷酸酶1（PP1）及其作用蛋白磷酸酶1（PP1）是一种在多种细胞中发挥重要作用的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。

它通过去磷酸化过程参与调节各种细胞内过程，包括神经传递、细胞凋亡和细胞生长等。

PP1在神经细胞中的关键作用表现在维持神经元的稳定性和神经网络的可塑性。

三、低氧预适应及其对小鼠海马和神经细胞的影响低氧预适应是一种生理过程，通过模拟低氧环境来提高机体对缺氧的耐受性。

低氧预适应能刺激机体内多种生理生化反应，其中对小鼠海马和神经细胞的影响尤为显著。

海马区是记忆和情感的重要部位，而神经细胞则对维持正常神经功能起着至关重要的作用。

四、蛋白磷酸酶1（PP1）在低氧预适应过程中的变化在低氧预适应过程中，PP1的表达和活性会发生变化。

具体来说，低氧环境会刺激PP1的表达增加，以应对缺氧带来的压力。

这种变化有助于维持神经细胞的稳定性和功能。

然而，这一过程的机制尚未完全明确，需要进一步的研究来揭示。

五、DNA甲基化在低氧预适应过程中的作用DNA甲基化是一种重要的表观遗传学机制，通过改变基因的表达而不改变基因序列来实现对生物过程的调控。

在低氧预适应过程中，DNA甲基化会发生变化，影响PP1和其他相关基因的表达。

这些变化可能对神经细胞的生存、分化和功能产生重要影响。

六、蛋白磷酸酶1（PP1）与DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况在低氧预适应过程中，PP1的表达和活性与DNA甲基化之间存在密切的关联。

一方面，PP1的改变可能影响DNA甲基化的模式和程度；另一方面，DNA甲基化的变化也可能影响PP1的表达和活性。

seahorse实验原理Seahorse（海马仪器）是一种流式细胞代谢分析系统，用于评估细胞的呼吸和酸碱平衡。

它可以通过测量氧气消耗和酸碱转化的动力学来确定细胞的能量代谢状态和功能。

Seahorse仪器的工作原理包括以下几个步骤：细胞预处理、装载、测量和分析。

首先，细胞预处理。

细胞在培养基中孵育，通过调整培养条件来激活或抑制细胞代谢途径。

例如，将细胞孵育在低糖或高糖培养基中，以模拟缺氧或高糖环境。

在处理前，细胞需要进行准备，包括洗涤和预处理。

其次，装载。

经过预处理的细胞被装载到Seahorse培养底片的微孔中，通常每个孔有数千个细胞。

装载时要确保细胞均匀分布，以使测量结果准确。

接下来，测量。

Seahorse系统通过将循环的介质通过底片的微小泵浦系统，将细胞与测量区分离。

细胞所在的区域中有传感器，可以测量介质中的氧气和酸碱变化。

在测量期间，根据预设的实验方案，底板内的介质会逐渐变化。

例如，可以通过控制气体组成来调节氧气浓度，并在短时间内迅速改变实验环境。

最后，分析。

Seahorse系统通过测量介质中的氧气和酸碱变化来计算各种细胞代谢参数。

氧气消耗速率（OCR）是一个关键指标，它反映了细胞的呼吸活性。

酸化速率（ECAR）是另一个关键指标，它反映了细胞的酸碱代谢状态。

通过分析OCR和ECAR之间的关系，可以评估细胞的能量代谢状态和功能。

需要注意的是，Seahorse系统只能提供相关的代谢数据，对于潜在的生物学机制的解释需要进一步的研究和分析。

总结起来，Seahorse（海马仪器）通过测量细胞的呼吸和酸碱平衡来评估细胞的能量代谢状态和功能。

它的工作原理包括细胞预处理、装载、测量和分析。

通过分析氧气消耗速率（OCR）和酸化速率（ECAR）之间的关系，可以评估细胞的能量代谢状态和功能。

Seahorse系统为细胞研究提供了一个有力的工具，可以深入了解细胞代谢的机制。

磁共振波谱对原发性癫痫患者海马病变的诊断价值分析作者：程俊美薛兰侯梦琳来源：《医学食疗与健康》2019年第03期[摘要]目的：就原发性癫痫患者海马病变的临床诊断，针对采用磁共振波谱的疗效展开研究分析。

方法：在2017年11月至2018年11月期间展开本次研究，随意选择我院接诊的40例癫痫患者作为实验组，再选择40例健康志愿者作为对比组，对两组人员展开EEG、MRI与MRS检查。

结果：实验组病侧海马的代谢水平情况均比对比组差，P<0.05。

结论：磁共振波谱能够让海马的生化改变得到清晰的显示，有助于临床原发性癫痫的诊断。

[关键词]原发性癫痫;海马病变;磁共振波谱[中图分类号]R742.1 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）03-000-01近些年磁共振波谱在临床癫痫诊断中有了广泛的应用，磁共振波谱可以从生化水平角度将脑组织的代谢改变充分的反映出来，从而更好的诊断原发性癫痫。

本次研究对我院40例癫痫患者展开磁共振波谱，取得一定的疗效，现将研究详细内容叙述如下。

1资料与方法1.1一般资料在2017年11月至2018年11月期间展开本次研究，随意选择我院接诊的40例癫痫患者作为实验组，再选择40例健康志愿者作为对比组。

实验组中男性患者的数量为21例，女性患者的数量为19例，患者的年龄分布区间为14-57岁，年龄中间值为（32.2±2.3）岁。

对比组包含有男性20人，女性20人，年龄分布区间为15-64岁，年龄中间值为（41.35±2.35）岁。

比较两组人的基础数据，P>0.05。

1.2方法对两组人员均实施EEG、MRI与MRS检查。

EEG检查中所用的仪器为美国尼高力ONE V32台式数字视频EEG仪，安放电极的时候根据国际10-20来进行，对EEG展开常规的描记。

MRI检查中所用的仪器为GE公司的1.5T Signa超导型磁共振机，矩阵设置为256×256，层厚设置为5mm，对检查者运用标准头颅线圈，并对检查者展开常规性的轴状位、矢状位与冠状位的扫描。

网络出版时间：２０２３－０７－２５１０：３５：４５　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０７２４．１３４３．０３６丙酮酸钠对小鼠海马神经ＨＴ２２细胞神经保护作用李　娜１，２，蔡珂沁１，２，李文欣１，２，吕　军１，石瑞丽１，马宝慧１，时静华１，郝肖琼１，邵　国３，齐瑞芳１，２（内蒙古科技大学包头医学院１．基础医学与法医学院、２．内蒙古低氧适应转化医学重点实验室，内蒙古包头　０１４０４０；３．广东省深圳市龙岗区第三人民医院转化医学中心，广东深圳　５１８１７２）收稿日期：２０２３－０１－２６，修回日期：２０２３－０４－０４基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２０６０３３７）；内蒙古自治区高等学校科学研究项目（ＮｏＮＪＺＹ２０１７１）；包头医学院科学研究基金项目（ＮｏＢＹＪＪ ＢＳＪＪ ２０２００３）作者简介：李　娜（１９９６－）：女，硕士生，研究方向：低氧预适应的神经保护机制，Ｅ ｍａｉｌ：ｄｕｅｅｅｎ＠１６３．ｃｏｍ；邵　国（１９７２－）：男，博士，教授，博士生导师，研究方向：低氧预适应的神经保护机制，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｈａｏ＿ｇｕｏ＿ｃｈｉｎａ＠１６３．ｃｏｍ；齐瑞芳（１９８２－）：女，博士，副教授，研究方向：低氧预适应的神经保护机制，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｑｉｒｕｉｆａｎｇ１２３＠１６３．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１００９１文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０８－１５２２－０５中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ３２２ ８１；Ｒ３２９ ２５；Ｒ３９２；Ｒ８４５ ２２；Ｒ９１６ ４摘要：目的　研究丙酮酸钠（ｓｏｄｉｕｍｐｙｒｕｖａｔｅ，ＳＰ）在低氧条件下对小鼠海马神经细胞ＨＴ２２的神经保护作用。

方法　在低氧条件下，用ＭＴＳ检测不同浓度ＳＰ孵育ＨＴ２２细胞的活性变化；从形态学上，采用铁染色观察ＳＰ对ＨＴ２２细胞的影响；应用溶酶体染色检测ＳＰ对ＨＴ２２细胞的溶酶体变化；采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测Ｂｃｌ ２、Ｂａｘ和ＬＣ３ Ⅱ／ＬＣ３ Ⅰ蛋白的表达。

代谢组学分析系统1.工作条件：1.1 电压：220V（±10%）单相，50Hz(±1)。

1.2 环境温度：19-22o C1.3 相对湿度：<70%* 2.设备用途和基本组成2.1 仪器用途：所提供仪器为高分辨率，高灵敏度、高通量的分析系统，配以专业的数据分析处理软件构成代谢组学专用分析系统，从而快速寻找标记物。

2.2 仪器组成2.2.1 仪器由超效液相色谱-四极杆/二级碰撞室/飞行时间质谱组成的系统，和专用代谢组学分析软件以及代谢物分析软件构成，具有先进的中医药代谢组学研究分析功能。

* 2.2.2 质谱主机要求配置同一厂家生产的液相色谱仪，具有良好的兼容性。

* 2.2.3 具备准确质量测定功能准确质量测定的内标必须有独立于实测样品的通道进入离子源，内标不得干扰实际样品的数据结果，并且质量准度<2ppm。

2.2.4 真空系统要求完全被保护的多级真空系统，具有自动断电保护功能，采用分子涡轮泵。

离子源和质谱间有隔断阀。

便于源清洗和日常维护。

* 2.2.5 碰撞室具有两级碰撞功能。

分为以下部分：捕获富集单元：具有离子传输富集、碰撞室两种功能传输单元：具有离子传输、碰撞室两种功能* 2.2.6 检测器检测器由单个微通道板离子计数检测，可检测正负离子和采集MS和MS/MS的数据, TDC转换速率>4.0 GHz。

* 2.2.7 数据采集和处理系统工作站用于仪器控制和采集, 1024MB RAM, 200GB硬盘，DVD-ROM，刻录光盘驱动器，1.44MB 3.5英寸软驱。

软件基于Windows XP 操作系统的应用软件包括集成化的仪器控制、数据处理等软件，代谢组学分析软件以及代谢物分析软件等。

3 仪器的详细技术指标3.1 液相色谱仪* 液相色谱仪必须是能够耐超高压（1000bar）的超高效液相色谱仪(UPLC)。

3.1.1 可编程二元梯度泵。

溶剂数量：4流速范围：0.010 - 2mL/min，步进0.001mL/min，流速精度：< 0.075% RSD，流速准确度：±1%，泵耐压：0 - 15000psi（1000bar）梯度设定范围：0 - 100%*系统延迟体积：< 120uL3.1.2 二极管阵列检测器波长范围：190-700nm.*测量范围：0.0001～4.0000AUFS*采样速率：40点/秒流通池：500nl低扩散3.1.3 自动进样器系统样品数量：96孔板、384孔板、24x4ml瓶、48x2ml瓶进样范围：0.1- 50 μL,“针内针”样品探针。

seahorse线粒体能量代谢中的计算公式
线粒体是细胞中的重要器官，负责维持细胞的能量代谢。

seahorse是一种常用于研究线粒体功能的设备，通过测量细胞的呼吸功能来评估线粒体对能量代谢的贡献程度。

在seahorse实验中，有几个重要的计算公式用于评估细胞的线粒体能量代谢。

1. 基础能量代谢率（Basal metabolic rate, BMR）：
BMR是用来评估细胞在静息状态下的能量消耗速率，通常以单位时间内消耗的氧气量（OCR）为衡量指标。

BMR的计算公式为：
BMR = OCR - 非线性静息呼吸（Non-mitochondrial respiration）
2. 最大呼吸性能（Maximal respiration）：
最大呼吸性能是指细胞在最大程度上利用氧气进行呼吸以产生能量的能力。

在seahorse实验中，最大呼吸性能通常通过刺激剂（如化合物）的添加来激活细胞的呼吸，其计算公式为：
Maximal respiration = 最高OCR - 非线性静息呼吸
3. 呼吸耦合效率（Respiratory coupling）：
呼吸耦合效率是指细胞将氧气转化为ATP的效率。

该指标常用于评价细胞的线粒体功能状态和运作情况。

呼吸耦合效率的计算公式为：
Respiratory coupling = (最高OCR - 非线性静息呼吸) / 最高OCR
以上是seahorse线粒体能量代谢中常用的计算公式，通过这些公式我们可以评估细胞的能量代谢状况、线粒体功能以及细胞对外界刺激的响应情况。

这些计算公式在研究线粒体与能量代谢有关的问题时起到了重要的作用，并有助于揭示细胞内部的能量调控机制。

高分压氧的细胞毒性作用背景和依据：氧气是治疗众多缺氧性疾病的重要手段，而氧毒性是限制其广泛应用的主要障碍。

目前对于中枢神经系统氧毒性的发病机制还不清楚。

有资料显示，在CNS氧中毒抽搐发生前脑组织提取物和血液中的ROS水平明显增高，并且相应的核酸、脂质等氧化产物也相应增加，故推断，ROS增多产生的氧化损伤是导致CNS氧毒性的主要原因。

Demchenko等人指出，暴露于高压氧环境下的大鼠在发生抽搐前脑内一氧化氮（NO）水平升高。

Elayan 等人则采用微透析的方法，对高压氧抽搐前大鼠的海马和纹状体内的·OH 和NO进行检测，发现NO水平较对照组显著升高，而未发现·OH水平有明显变化。

然而究竟何种ROS在CNS 氧毒性中起到主导作用，目前尚无定论。

目的：以细胞培养为基础，明确高浓度氧对细胞的毒性作用，通过对氧毒性过程中各种活性氧水平的检测从而探讨氧毒性的发生机制和本质。

材料：PC12细胞。

PC12细胞是一个常用的神经细胞株，来源于大鼠的肾上腺嗜铬细胞瘤。

由协和医科大学细胞室提供。

方法：将细胞培养至生长对数期后进行分组，实验组分高压氧A组、高压氧B组、高压氧C 组、高压空气组，分别经2ATA、3ATA、4ATA的氧气及4ATA的空气处理，加压15min，稳压1h，减压15min。

对照组不经任何处理。

实验组处理后迅速用氧电极检测培养基中的氧浓度。

再放回CO2培养箱培养30min。

30min后检测相应指标。

检测指标：1．细胞形态学：苏木精-伊红染色后镜下观察以及电镜下观察。

2．细胞活力的检测：台盼蓝染色和改良的MTT检测法（1）台盼蓝染色：需要的材料：台盼蓝、PBS缓冲液、细胞计数板、蒸馏水原理：细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。

而活细胞能阻止染料进入细胞内。

故可以鉴别死细胞与活细胞。

用品：1. 4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。