神经干细胞再生医学的研究进展

一绚囤　

３０％红花酒精组疗效欠佳；９００红花酒精组疗效显著但是容易　出现过敏反应。尚玉真【　２研究喜辽妥软膏涂擦配合热敷动静脉　内瘘，其通过热效应使药物通过皮肤毛孔渗透到达皮下组织，　使血管平滑肌松弛，达到解除内瘘痉挛、扩张血管的作用，并预　防内瘘狭窄，延长内瘘的使用寿命。叶锡兰等【ｚ３１报道木瓜酒对　动静脉内瘘有保护作用，采用木瓜酒湿敷，可预防动静脉内瘘　并发症，并延长内瘘使用时间。马伟平和胡绮雯㈣报道血液透　析患者动静脉内瘘发生功能不良时用木瓜酒湿敷会改善内瘘　狭窄，增强内瘘血管杂音、增加血流量及软化血管。　综上所述，动静脉内瘘的护理至关重要，我们认为外用药　敷作为常规护理内瘘，特别是开展热湿敷护理对于预防自体动　静脉内瘘并发症的发生值得探索与研究。　参考文献　［１】苏白海，付平．高通量的血液净化治疗ｍ．西部医学，２０１２，２４（２）：　２ｌ１－２１３．　［２］尤黎明，吴瑛．内科护理学［Ｍ】．第４版．北京：人民卫生出版社，　２ｏｏ８：２９９．　【３】　Ｅｔｈｉｅｒ　Ｊ，Ｍｅｎｄｅｌｓｓｏｈｎ　ＤＣ，Ｅｉｄｅｒ　ＳＪ，ｅｔ　ａ１．Ｖａｓｃｕｌａｒ　Ａｃｃｅｓｓ　Ｕｓｅ　ａｎｄ　Ｏｕｔｃｏｍｅｓ：Ａｎ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｄｉａｌｙｓｉｓ　ｏｕ￣ｏｍｅｓ　ａｎｄ　ｐｒａｃｔｉｃｅｐａｔｔｅｒｎｓｓｔｕｄｙⅡ］．Ｎｅｐｈｒｏｌ　Ｄｉａｌ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，２００８，２３（１０）：　３２１９－３２２６．　ｆ４】柳小美，邓春霞，杨丽萍，等．首次使用动静脉内瘘的护理体会Ⅱ】．长　江大学学报（自然科学版），２０１３，１０（１２）：６２－７０．　【５］５　杨丹，张丽萍．天舒欣康复液联合神灯在血液透析患者动静脉内瘘　护理中的应用【Ｊ１．护理实践与研究，２０１３，ｌＯ（１９）：９３—９４．　【６１郝思琴．对血液透析动静脉内瘘血管的保护性护理【Ｊ】．中国现代药　物应用，２０１３，７（１４）：１９４—１９５．　［７】牛明华．三七膏加喜疗妥治疗血液透析穿刺所致血肿的护理观察阅．　护理研究，２００９，２３月（６月中旬版）：１５５８—１５５９．　［８］胡兰芳，曾锦．血液透析患者动静脉内瘘闭塞的原因分析及预防［Ｊ】．　全科护理，２０１３，ｌ１（４）：１０９１—１０９２．　ｆ９】李彩凤，许树根．影响维持性血液透析患者内瘘寿命的相关因素【Ｊ】．　中国血液净化，２０１２，１１（１１）：６３３—６３５．　【１　０】黄家莲，李亚洁，梁云芳，等．远红外线照射联合马铃薯外敷治疗　动静脉内瘘皮下血肿的临床研究咖护理学报，２０１３，２０（６Ｂ）：５—９．　【ｌ１】段亚平，熊江艳，张霓，等．红花酒精湿热敷ＡＶＦ对软化血管瘢痕　的影响【Ｊ】．酿酒科技，２０１３，２３（１）：３９—４５。　［１２】尚玉真．血液透析患者采用喜疗妥软膏外涂配合热敷动静脉内瘘　的临床观察【Ｊ］．护理研究，２００４，１８（９）：１５７７．　［１３】叶锡兰，邱碧辉，夏运风，等．木瓜酒保护动静脉内瘘效果观察【ＪＪ＿　护理学杂志：（综合版），２０１０。２５（９）：ｌ２—１４．　『ｌ４］马伟平，胡绮雯．木瓜酒湿敷在血液透析患者动静脉内瘘功能不　良中的应用【Ｊ］．广东医学，２０１２，３３（１５）：２３６６、封３．　（收稿日期：２０１４—０９—２６）　

干细胞技术与牙齿再生的研究进展

牙齿是一个复杂的生物器官，由多种组织组成，包括牙釉质、牙本质、牙骨质和牙髓，牙齿脱落是最常见的器官衰竭[1]。牙齿及其支持组织是由上下颌突和额鼻突的外胚层及外胚间叶细胞发育而来，其发育是一个长期、复杂的生物学过程，包括细胞与细胞、上皮与间充质的相互作用，细胞分化，形态发生，组织矿化和牙齿的萌出，而牙胚的分化和发育过程是依赖于特定牙齿发生部位的上皮组织及其下方的间充质组织相互作用而形成的，故对于再生的牙齿来说，其发育至少需要两种细胞，即牙源性上皮细胞及牙源性间充质细胞，而牙齿再生研究的方向多半是寻找这两种细胞的替代物。

干细胞是一类特殊的细胞，其生物学特征既具有自我更新的能力，又具有多向分化的潜能，可以在机体生命过程中无限期分裂，并在合适的条件或给予恰当的条件后，能分化产生多种不同的细胞类型；根据干细胞的不同发育阶段，目前可将其划分为：①胚胎干细胞；②成体干细胞，包括造血干细胞、骨髓间质干细胞、肌肉干细胞、脂肪干细胞等。某些干细胞可定向分化，发育成熟为一种特定细胞或限于某种功能的细胞，如：心肌细胞、皮肤细胞、神经细胞等；某些干细胞定向性不强，但具有分化成多种类型细胞的潜能[2]。干细胞技术，又称为再生医疗技术，是指通过对干细胞进行分离、体外培养、定向诱导、甚至基因修饰等过程，在体外繁育出全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官，并最终通过细胞组织或器官的移植实现对临床疾病的治疗。本文就几个典型的干细胞在牙齿再生中的应用作一综述，为牙齿再生研究提供新的思路。

1 胚胎干细胞与牙齿再生

胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESc）是早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有一种内在的自我更新能力并能分化成各种各样的功能性组织细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性[3]。无论在体外还是体内环境，ESc都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。人类ESc是由美国生物学家Thomson[4]第一次所分离出来。ESc是一种多能性细胞，来源于三个胚胎层的衍生物。考虑到未来的临床应用，ESc可分化为神经元，心肌细胞和许多其他类型的细胞[5]。大量的研究证明小鼠的ESc可以分化为心肌细胞、造血细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞[6-10]等。在上皮分化方面，ESc可分化为角膜上皮细胞、肾上皮细胞、色素上皮细胞[11-13]等。人类ESc对于人类疾病的细胞治疗也有着巨大的潜力，如：糖尿病，神经元退化性紊乱等[14]。

．３８２・　

文章编号：１６７１—２８９７（２０１５）１４—３８２—０３　中华神经外科疾病研究杂志（Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ　Ｄｉｓ　Ｒｅｓ）２０１５：１４（４　

视网膜神经干细胞研究进展　

李晋江　熊剑　（沈阳军区总医院神经外科，辽宁沈阳１１００１６）　

关键词视网膜干细胞；培养；分化；鉴定；移植　

中国图书资料分类号　Ｒ　３２９．１　文献标识码Ａ　

视网膜是一层对光敏感的、精细的膜样结构，是形成各种　

视功能的基础。由胚胎时期神经外胚叶形成的视杯发育而　来，视杯外层形成单一的视网膜色素上皮层，视杯内层则分化　

为视网膜神经感觉层。视网膜神经感觉层由外向内分别是：　

视锥、视杆层，外界膜，外核层，外丛状层，内核层，内丛状层，　

神经节细胞层，神经纤维层，内界膜（属Ｍｉｉｌｌｅｒ细胞的基底　

膜）。视网膜是由各种分子组成和神经化学物质不同的细胞　

类型组成的复杂的网络结构。这些不同成分组成的高度活性　

的神经元和神经胶质以相当精确的组织层分层，经常呈有秩　

序分布，周围包绕丰富的、分层的细胞外基质及二元脉管系　

统…。所有的视网膜组成成分均影响视网膜祖细胞的增殖和　

生存，它们通过紧密有秩序的基因和微环境机制完成。哺乳　

动物的视网膜起源于神经外胚层来源的视网膜祖细胞，最早　

发生于视神经管两侧突出视泡。视网膜祖细胞重复增殖，子　

细胞最终退出细胞细胞周期，分化成数十种类型，形成有规则　

的镶嵌式物质散布于细胞体的交互层和突触连接。　

视网膜变性会导致严重的致盲眼病，主要有视网膜色素变　

性和年龄相关性黄斑变性。目前尚无有效的治疗方法。如何　

能有效阻止视网膜变性的进展和恢复视网膜变性疾病患者的　

视功能，是当今神经科学领域面临的挑战。采用有活性的种子　细胞移植修复或替代受损组织或细胞也许能成为治疗视网膜　

变性疾病有效的方法之一　Ｊ。特别是诱导式多能干细胞的问　

世及快速发展，视网膜干细胞移植进入临床试验已经不太遥　远　Ｊ。视网膜神经干细胞移植为此提供了广阔的前景，同时也　

灏江中医药大学学报２０１３年１１月第３７卷第Ｈ期　的ＣＳＣｓ的递减及干细胞池中分裂能力降低甚至丧失　分裂能力的细胞递增有关㈣。在衰老和失代偿期的心　脏中仍然存在一少部分具有强大增殖能力的ＣＳＣｓｔｕ。　研究表明，ＩＧＦ１／ＩＧＦ１受体系统和肾素一血管紧张素系　统（ＲＡＳ）在ＣＳＣ复制、分化、衰老和死亡中起着重要的　作用。ＩＧＦ１／ＩＧＦ１受体促进ＣＳＣ的分裂，增强端粒酶活　性，维持端粒长度，阻止复制所致的衰老，维持动物和人　类Ⅱｑ多潜能性ＣＳＣｓ的数目。在衰老的ＣＳＣｓ中ＩＧＦ１　受体的表达和ＩＧＦ１的合成减少，ＩＧＦ１促进细胞增殖，　干扰氧化损伤和阻止端粒缩短的能力也会下降［１１１。　ＣＳＣｓ中存在ＲＡＳ，并且随着年龄的增加，血管紧张素　ＩＩ合成及血管紧张素ＩＩ受体的表达增加，在ＣＳＣ衰老　和死亡中产生一定的作用＿ｌ２１。因此，改变ＣＳＣｓ中这些　生长因子受体系统的比例能够增加他们的增殖储备，　成为干细胞疗法的一个关键性决定因素。　２　ＨＳＣｓ与心脏再生　心脏干细胞ＣＳＣｓ定居于成熟心脏心肌层，出现　在生长发育的早期，负责在胚胎和胎儿的心肌再生。　这些未分化细胞可能位于远处的器官，例如骨髓，然　后不断向逐渐发育成熟的心脏迁移，在那里这些细胞　会发挥特定的功能，从而使心脏在发育过程中形成成　熟的表型，并能够维持成熟心脏内环境的稳态。研究　表明，心脏的发育主要受到ｃ—ｋｉｔ阳性的ＣＳＣｓ的控　制，而且是主要负责出生时子代心肌细胞的生成，自　发Ｃａ２＋振荡活动发生在ＣＳＣｓ促进细胞周期再次进　入和干细胞不对称分裂的过程中　］。造血干细胞　（ＨＳＣｓ）似乎不仅仅是心肌细胞再生的一个重要决定　因素，在胚胎、胎儿和新生儿心脏成熟过程中发挥中　重要的作用，参与成人心脏遭受缺血性和非缺血性　心肌损伤后的适应性反应过程㈣。已有实验发现，心　肌梗死后，ｃ—ｋｉｔ阳性的造血干细胞治疗的心肌再生　率明显升高【】５１，而单核细胞治疗的心肌再生率无明显　升高　。　造血干细胞参与了受损心肌的恢复过程并且有　助于心脏修复，表明骨髓来源的干细胞能够再生心肌　细胞和冠状血管。研究发现，造血干细胞可以转分化　并生成心肌细胞和冠状血管，可以用于人类的细胞疗　法【ｌ７】。基于在第１阶段和第２阶段的临床试验获得的　积极的结果口８１，不同类型的骨髓细胞目前正用于急性　和慢性缺血性心肌病患者的治疗。骨髓来源的干细　胞能分泌多种细胞因子激活内源性物质，这些物质　１３６１　主要作用于修复过程和心室功能的改善『１　７ｌ。造血干细　胞可以转分化为有潜能的心肌细胞【Ｉ５】，暗示造血干细　胞可以通过获得肌细胞和内皮细胞系而成为人类疾　病的重要治疗方法。　３心肌细胞去分化与心脏再生　在肥大心肌、特发性扩张型心肌病（ＩＤＣ）、急性心　肌梗死【・９１和冬眠心肌中发现肌原纤维的减少与未分　化的细胞质的扩张。据报道，肌联蛋白和结蛋白有部　分缺失，并有胚胎基因的再表达，包括仅平滑肌肌动　蛋白、心房钠尿肽和　骨骼肌肌动蛋白口９１。心肌细胞　的这些结构特点被认为是细胞去分化产生了一个不　成熟的增殖的细胞表型。成人心肌细胞的去分化与　ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶的抑制作用、细胞外基质骨　膜蛋白的作用ｆ　或生长因子神经调节蛋白的作用『２Ｊ１　密切相关。　抑癌蛋白参与心肌细胞产前和产后早期的心肌　发育过程，在心脏病变也会出现，可能是由巨噬细胞　释放的ＩＬ－６等燹Ｉ生细胞因子、制瘤素Ｍ介导的【１９１。研　究表明，在扩张型心肌病和心肌梗死的活体模型中，　巨噬细胞产生制瘤素Ｍ增多，可以促进胎儿、新生儿　细胞的再生，但不能促进心肌细胞的再生＿】９１，表明心　肌细胞去分化对心室重构和心脏血流动力学的影响　的机制有待进一步研究。同样地，在ＩＤＣ或急性ＭＩ　患者的心脏中，去分化的心肌细胞未进行核分裂或胞　质分裂。血流动力学超负荷时胚胎基因的表达过程可　能只是影响了定植ＣＳＣｓ的再生，而不影响分化的有　丝分裂后的细胞的去分化㈤。　制瘤素Ｍ被认为能够逆转体外有丝分裂后细胞　的结构，导致许多干细胞相关基因表达的上调，包括　ｃ—ｋｉｔＵｇ￣。最近一项研究测试了胎儿心肌细胞是否能够　去分化再次恢复干细胞状态，是否有ｃ—ｋｉｔ的表达，　这些心肌细胞来自小鼠，在ｃ—ｋｉｔ的促发作用下能够　表达增强型绿色荧光蛋Ｉ￣ｔ（ＥＧＦＰ）ｔ”】。去分化细胞维持　和改善受损心脏的心室功能的作用也十分有限，细胞　在缺乏足够的血供和组织缺氧时效能会降低。ＣＳＣｓ　是专能干细胞，能够生成心肌细胞和冠状血管，从而　修复损伤的心肌。　４展望　内皮祖细胞、单核细胞、间充质基质细胞以及　ＣＤ３４￣Ｈ性淋巴细胞已经用于急性心肌梗死或慢性缺　血性心肌病患者的治疗　】。研究血性心肌病患者的　引．　瞥高趣　胃捌　窜　ｊ｛