安捷伦Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程定量分析

液相色谱—三重串联四级杆液质联用仪简介及使用情况安捷伦6460 LC/MS/MS配备安捷伦公司最新开发的喷射流离子聚焦离子源，将对复杂基质中痕量成分的质谱检测的灵敏度、提升到了业界同类仪器的最新高度。

三重串联四极杆质谱仪已广泛应用于食品安全、环境分析、药物代谢动力学研究、代谢物鉴定、杂质分析等多种领域；同时，在蛋白组学、代谢组学的研究中，也常用三重串联四极杆质谱仪进行方法和目标物的验证。

仪器主要特点：1. 灵敏度• 喷射流离子聚焦离子化技术，在提高雾化温度的同时，提高了电场密度，使离子化效率得以显著提升，并有效屏蔽基质干扰；此外，在高速鞘气流的作用下，离子云密度明显增加（离子聚焦），进而提高质谱取样效率；这些技术的进步，从离子生成和传输过程提高了质谱检测的灵敏度；同时，该离子源可在0.1-2.5mL/min的流速下操作，使其应用范围进一步扩大；• 芯片液相色谱技术，安捷伦独有的，业内最先进的纳流液相色谱。

将纳流分离与电喷雾离子化过程合二为一，完全消除管线连接等因素造成的柱外体积扩散；同时，在芯片上可以同时完成样品的富集、纯化和分离，从根本上有效解决了微量样品的进样以及痕量成分的高灵敏分离分析；• 经惰性处理的镀白金离子传输毛细管，消除电荷蓄积作用，同时保证在极性切换过程中不损失离子；安捷伦专利的RF离子透镜显著提高高质量端的离子传输；高效真空系统提高了离子平均自由程，将离子在传输过程中的损耗降低到最低；上述技术的综合运用，全面保证了离子传输效率的最大化，从而显著提高灵敏度；• 采用高频、小口径八极杆，更有效地聚焦离子成束，有助于MRM的高灵敏的采集；• 采用线性加速的高能碰撞六极杆反应池，有效消除背景噪音和“记忆效应”，从而保证了痕量样品快速、准确的分析结果；•6460 LC/MS/MS综合应用上述多种先进技术，从而达到了飞克（femtogram）级的检测限；线性范围达到106。

2. 准确度• 自动调谐：配合调谐溶液自动输送系统，软件控制的自动调谐，操作简便，无需其它装置或手工操作，最大限度提高用户的工作效率。

三重四极杆液相色谱质谱联用仪技术参数三重四极杆液相色谱质谱联用仪技术参数一、应用范围1、适用于新药研发，药物杂质鉴定、代谢物鉴定、研究与疾病有关的标记物和代谢组学、脂质组学、小分子和生物大分子的快速同步定性、定量分析。

2．适用于蛋白质组学：蛋白质组学研究中的多肽和蛋白质的定量分析。

二．设备名称：三重四极杆质谱仪仪器供应商应具备10年以上串联质谱生产经验，确保仪器技术成熟稳定。

1. 工作条件1.1.1电源电压：230V±10%，50/60Hz，16A1.1.2环境温度：15-27℃（最优：18~21℃）1.1.3相对湿度：20-80%★1.1.4气体需求：雾化气N2：纯（99%纯度）N2，碰撞气Ar：超高纯Ar或N2（99.999%），源区无需额外空气压缩机，简化气体供应降低消耗2. 质谱部分技术性能2.1 离子源2.1.1 离子源:独立的可加热电喷雾离子源和大气压化学电离源，全内置式气路电路接口设计，离子源外部无任何气路电路管路连接，安装离子源时即可实现气路电路连接，自动识别，实现零误操作；2.1.2 ESI与APCI切换只需更换探针，电晕针旋钮式在线调节，快速简便，切换时间小于1min，且整个过程无需拆卸离子源；2.1.3探针采用最优喷雾设计，可在任意位置固定并实现上下、前后直线型、左右圆弧型三维连续调节；2.1.4 内置大面积多边形同轴主动排废气设计，消除废气涡流，降低化学噪音，不锈钢排废管路，实现离子源腔体高温自洁净；2.1.5 具有雾化气、辅助雾化气、可调式吹扫气（0-15L/min可调），进一步提高雾化效率和稳定性；2.1.6 可拆卸的吹扫挡锥，非对称锥面设计，在高灵敏度的情况下确保长期耐用性；2.1.7可加热HESI源，加热温度最高可达550℃，不分流的情况下采用纯水作为溶剂，流速为1ul-2000μl/min；2.1.8APCI：加热温度最高可达550℃，不分流的情况下采用纯水作为溶剂，流速为50ul-2000μl/min；2.1.9双槽位全自动注射泵实现质谱直接进样，自动调谐和校正，既可通过软件也可通过操作面板自动设置；2.1.10质谱配置软件具备实时监控反馈喷雾稳定性功能；。

Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程Ⅰ目的：制定Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。

Ⅱ范围：适用于Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。

Ⅲ规程：1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~ -10%，50 ~ 60Hz）单相交流电。

注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。

2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.6 ~ 0.7 MPa。

气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。

注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。

实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。

另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 MPa。

注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。

3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且气振阀处于关闭后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。

大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启Masshunter软件与仪器通讯。

等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 Torr之后，即可进行调谐或开始实验。

注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。

4.仪器调谐：仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预热后，建议调谐质谱仪以达到最佳使用状态。

确认调谐液存量，以及管线已经连接到喷雾针之后，选择Masshunter的Tune界面，选择适当的极性，点击Autotune。

系统会自动完成调谐并给出调谐报告。

5.状态确认：质谱仪正常工作时，前级真空1.5 ~ 3Torr；高真空2.5x10-5 ~ 4x10-5Torr（6410），1.5x10-5 ~ 2.5x10-5 Torr（6460）。

仪器期间核查操作规程目录Agilent 1260-6460液质联用仪期间核查规程 (2)液相色谱仪期间核查规程 (5)气相色谱仪期间核查规程 (9)气质联用仪期间核查规程 (12)电导率仪期间核查规程 (14)酸度计期间核查规程 (16)原子吸收分光光度计期间核查规程 (18)AFS—9800型双道原子荧光光度计期间核查操作规程 (19)UV—1750 期间核查作业指导书 (23)pH计期间核查作业指导书 (25)微量水分测定仪期间核查规程 (27)马弗炉期间核查操作规程 (29)电热恒温干燥箱期间核查规程 (30)电热鼓风干燥箱期间核查规程 (31)恒温水浴锅期间核查操作规程 (34)面筋测定仪核查方法 (36)降落数值测定仪期间核查程序 (38)粉质测定仪期间核查程序 (41)拉伸测定仪期间核查规程 (42)小麦硬度指数测定仪期间核查规程 (43)容重器期间核查规程 (44)恒温设备期间核查 (45)高压灭菌器期间核查 (46)干烤灭菌器期间核查 (47)电子天平期间核查 (48)离子色谱仪期间核查规程 (49)荧光定量PCR仪期间核查程序 (54)Agilent 1260-6460液质联用仪期间核查规程1。

目的对Agilent 1260-6460串联质谱仪运行情况进行检查，保证仪器正常使用，确保检验数据准确可靠。

2。

范围适用Agilent 1260—6460串联质谱仪在两次校准之间或维修之后的运行检查.3。

依据3。

1 Agilent 1260-6460液相-质谱/质谱联用仪说明书3。

2 JJG（教委） 003—1996 有机质谱仪检定规程4.条件4.1 环境条件4.1.1 仪器分析室应该清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好4。

1。

2 仪器应平衡地放在工作台上，便于操作，周围无强烈的机械振动和电磁干扰，仪器接地良好4.1.3 环境温度18-25℃，24小时内温度波动不超过±3℃,相对湿度低于75%4。

液质联用仪本实验室使用的液质联用仪是安捷伦公司6400系列的一款产品，包括超高效液相色谱1290和质谱主机G6460，以及与其配套的计算机和打印机，他们之间通过网络协议通讯，并通过网络交换机连接在一起。

本仪器于2014年年初安装使用，价值两百多万元。

物质只要能溶于液体，均可以被检测。

本实验室主要用于农产品样品的农药残留定性检测，超高效液相色谱1290是整个系统的分离和进样装置，样品在色谱柱中经初步分离，通过接口进入质谱。

质谱以离子源、质量分析器和检测器为核心。

离子源是将分析物中的中性化合物离子化，并将产生的离子在电场的作用下进入离子传输毛细管。

离子传输毛细管是离子的导入通道，它将离子源产生的离子传输进入质谱，同时，隔绝了外部的常压与质谱内部的高真空。

离子通过毛细管后，进入离子光学组件，它包括skimmer1，八极杆以及lens1和lens2，进一步除去了溶剂以及中性分子，也是一个高效的离子传输组件，并聚焦随机运动的离子进入三重四极杆质量分析器。

G6460的质量分析器是三重四级杆，是由三组四极杆空间串联而成，一个质谱就是一个四级杆，所以三重四级杆质谱是空间串联的多级质谱分析，也叫做QQQ质谱。

第一个四级杆根据设定的质合比范围扫描和选择所需的离子。

第二个四级杆，也称碰撞池，用于聚集和传送离子。

在选择离子飞行的途中，引入碰撞气体氮气，第三个四级杆用于分析在碰撞池中产生的碎片离子。

实际上，碰撞池采用了六极杆的设计，拥有更好的聚焦及传输功能，四级杆就被淘汰了，但还沿用三重四级杆的名称。

G6460质谱的检测器包括高能打拿极和电子倍增器，此外，质谱需要在真空环境下工作，它的真空系统由前级真空泵和分子涡轮泵组成，前级真空一般在 1.8-2.5Torr之间，高真空在1.9-2.3*10-5Torr之间。

原理：它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。

样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。

目的1制定TSQ Quantiva三重四级杆液相色谱质谱联用仪使用操作规程, 确保操作人员能正确规范的使用液质联用仪进行检测工作。

2适用范围本操作规程适用于TSQ Quantiva三重四级杆液相色谱质谱联用仪的使用。

3操作规程3.1开机(从Off\停机至就绪\Standby 状态)1.打开氮气与氩气钢瓶的开关, 调节分压分别为0.55~0.65MPa 和0.135MPa 左右；2.打开排风；打开空调，保持实验室温度在(18～25℃)；3.检查洗针溶液和后密封清洗溶液的量以及流动相的量；4.流动相须现配并超声, 缓冲盐溶液过0.22μm 微孔滤膜（或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液）；5.打开稳压电源以及UPS 电源开关, 检查电源电压输出是否稳定且零地电压是否小于1V；6.检查机械泵油量, 油面应该在视窗的1/2 多一些；7.打开质谱右侧（Main power）开关——ON 位置, 此时机械泵也会随之启动；真空开关开启约12 小时后(或者隔夜), 打开电子开关（Electronics）在Operational 状态；8.打开计算机（此时液相和质谱内置的CPU 会通过网线与电脑主机建立通讯联系, 这个时间大约要1～2 分钟）；9.确认质谱前面板上的power、vacuum、communication 指示灯均为绿色, 双击桌面上Tune 图标, 进入质谱界面, 查看质谱状态, 确认前级压（Fore Pump Pressure）TSQ Quantiva 小于 4.5 Torr, TSQ Endura 小于2.0 Torr, 离子规压力（Ion Gauge Pressure）小于4e-6 Torr（TSQ Endura）, 9e-6（TSQ Quantiva）；10.打开质谱扫描, 打开液相自动进样器和泵以及柱温箱的电源；11.设定质谱及色谱条件参数, 平衡色谱柱, 准备进样。

3.2质谱操作双击TSQ Quantis 3.0Tune软件看仪器状态Spray V oltage（喷雾电压）Ion Transfer Tube Temp （离子传输管温度）Vaporizer Temp（蒸发温度, 辅助气加热温度）Sheath Gas 鞘气Aux Gas 辅助气Sweep Gas 反吹气看真空VacuumSource Pressure 小于1.5Analyzer Pressure 小于6e-63.3液相控制软件双击Tracefinder软件右上角Real time status————Instrument Controls——Thermo Scientific SII for Xcalibur——最下面Direct Control53.4怎样/判断联机Home界面, 每个模块左下角connect 前面方框勾上。

Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程定性
分析
Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程
定性分析
1.打开定性分析软件时会自动弹出Open Data File对话框，选中待分析的数据文件，单击Open按钮，即可打开
2.提取色谱图：右键点击数据导航区选择的数据，或者在色谱图显示区域点击右键，在弹出的菜单选择Extract Chromatograms。

提取质谱图：提取某点的质谱图，直接在该点双击左键即可。

3.在TIC图中使用选择范围工具选择某点或一段背景范围，单击鼠标右键，选择Extract Spectrum to Background，该质谱图被自动加入到背景质谱图(Background Spectra)。

4.在MS Spectrum Results内的某张质谱图上右键点击，在弹出的窗口选择Substract Background Spectrum。

则该质谱图会自动扣除掉上面的背景质谱图，
5.要对色谱图进行积分，在方法浏览区选择Chromatogram功能区，根据不同需要进行积分选择，选择Integrate(MS)等。

选择Agile 积分器。

直接右键点击色谱图，在弹出的菜单选择Integrate Chromatogram进行积分。

6.从File菜单选择Print>Analysis Report…从左侧选择要打印的数据文件，可以选择一个或多个打开的数据。

设定好报告选项后，点击OK按钮生成报告。

三重四极杆质谱仪简述质谱仪操作规程在工业生产和实验研究的过程中，色谱与质谱在其中扮演着重要的作用，但是单纯使用一款设备无法较全面的运用到实际行业中，因而联用仪以及色谱质谱搭配其他设备便有了较好的市场。

气相色谱和液相色谱配备质谱目前在土壤检测和分析领域有着广泛应用。

其中液相色谱配备三重四级杆质谱仪，为土壤样品中的中等极性、极性和离子型化合物的痕量分析提供了很多优势。

所谓三重四极杆质谱仪，是指在这款设备中的四根电极杆分为两两一组，分别在其上施加射频反相交变电压，而位于此电势场中的离子，被选择的部分稳定后可到达检测器，或者进行后续分析。

作为一款主要适应于对已知化合物的定量分析的设备，三重四级杆质谱仪不利于对未知化合物定性定量工作的开展。

而飞行时间质谱仪，更适应于对样品中未知化合物的初步筛查，缩小化合物范围。

一般四极杆质谱仪的结构和电路都相对其他质谱仪要简单，但是其定量分析结果的准确度和精密度却相对其他质谱仪较好，目前，四级杆质谱仪被广泛的应用于色谱-质谱联用中。

通过多个四级杆的串联使用，可以实现多重质谱分析，从而获得待测物的结构信息。

四级杆质谱仪每次只允许单一荷质比的离子通过，在扫描较大质量区间时，四级杆质谱仪所需的时间要远远大于飞行时间质谱，轨道离子阱质谱，线性离子阱等使用脉冲采样方式的质谱仪。

质谱仪的两种扫描方式质谱仪扫描方式有两种，全扫描与选择离子扫描：全扫描是对指定质量范围内的离子全部扫描并记录,得到的是正常的质谱图,这种质谱图可以提供未知物的分子量和结构信息。

可以进行库检索。

质谱仪还有另外一种扫描方式叫选择离子监测(SelectionMoniringSIM)。

此种扫描方式是只针对选定的离子进行检测，而其它离子不被记录。

它的最大优点：一、对离子进行选择性检测只记录具有特征的、感兴趣的离子，不相关的，干扰离子统统被排除;二、选定离子的检测灵敏度大大提高在正常扫描情况下，假定一秒钟扫描2～500个质量单位。

三重串联四极杆液质联用仪品牌：WA TERS1、设备名称：液相色谱串联四极杆质谱联用仪2、主要用途：用于多种农、兽药残留、生物毒素残留、食品添加剂的检测，动物及动植物源食品的残留监控工作，特别是对检测结果为阳性的样品，可进行结果确证，并且可以对预期要开展的检测项目进行检测技术储备，以加强对出口食品、农产品安全卫生质量的监管和控制。

3、工件条件:工作电压：230V±10%温度：18-250C湿度：350-85%4、技术指标：1）超高效液相色谱系统技术要求1.1二元或四元泵*1.1.1压力：0-15,000 psi1.1.2流量：0.001-2.000ml/min, 以0.001ml/min 为增量1.1.3精度：≤0.075％RSD1.1.4流速准确度：±1.0%1.1.5延迟体积：<120μL1.1.6溶剂数量：4种1.1.7设定范围：室温上5 – 60 °C，1°C 步距1.1.8温度控制精度：±0.1oC温度1.2自动进样器1.2.1精度：< 0.5%1.2.2样品交叉污染度：<0.005%1.2.3进样准确度：±1 μL1.2.4进样体积：0.1 ～50μl1.2.5进样线性度: > 0.9991.3在线真空脱气机1.4二极管阵列检测器1.4.1波长范围：190-800nm1.4.2二极管个数：1024个1.4.3光学分辨率：1.2nm1.4.4狭缝宽度：1，2，4，8，16nm1.4.5实时信号:同时输出8个实时信号1.4.6波长精度：1nm1.4.7基线噪音：±1.0 x 10-5 AU,在254nm和750nm(1mL/min甲醇)1.4.8基线漂移: 2 x 10-3AU/hr , 在254nm(1mL/min甲醇)1.4.9数据采集率：〉80Hz2）质谱部分指标*2.1质量范围m/z: MS1及MS2：30－3,000amu2.2分辨率：?2.5M2.3质量数稳定性：≤0.1 amu ／8H2.4电喷雾灵敏度指标(相同绝对量，不同浓度下的灵敏度)：1pg利血平，m/z 609-195，信噪比≥500:12.5ESI负离子：2.5pg氯霉素，m/z321-152，信噪比≥100:12.6正、负离子采集切换速率≤20 ms2.7MRM扫描时间≤5 ms,一个采集通道可MRM定量数≥502.8扫描速率：?5000amu/秒2.9动态范围：?4X1062.10质量精度：≤0.1 amu2.11离子源：大气压离子源是双正交设计，而且离子源和质谱间有隔断阀，锥孔有N2保护气，可容忍不挥发性的缓冲盐。

作业指导书第1版第0次修订Agilent7000B三重串联四极杆气质联用仪操作规程文件编号：版本：第 1 版编制：审核：批准：发布日期： 2018-02-05实施日期： 2018-02-05受控状态：受控号：持有人签名：XXXXXX有限公司发文件编号：版本：第1版修订状态：第0次修订发布实施：修订页第2页共21页文件编号：JXHX-ZY-19 版本：第1版修订状态：第0次修订发布实施：2018-02-05Agilent7000B三重串联四极杆气质联用仪操作规程1、目的制定Agilent7000B三重串联四极杆气相色谱质谱联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范的使用气质联用仪进行检测工作。

2、范围本操作规程适用于Agilent7000B三重串联四极杆气相色谱质谱联用仪的使用、维护以及管理。

3、职责3.1仪器负责人：负责仪器使用预约登记，安排操作人员正确使用及维护仪器。

3.2技术负责人：负责预约使用的批准。

3.3检测员：按操作规程正确使用仪器，填写仪器使用记录和维护记录。

4、操作规程4.1开机步骤4.1.1打开氦气钢瓶总阀，设置分压阀压力至0.5Mpa。

打开氮气钢瓶总阀，设置分压阀压力0.15MPa。

4.1.2打开计算机，输入账号:Admin密码:3000hanover登录进入Windows系统。

4.1.3确认毛细色谱柱已经装好，打开 7890B电源开关。

打开7000B质谱仪电源，在打开质谱电源的同时用手向右推分析器前侧板直至侧面板被紧固地吸牢。

涡轮泵开始工作，等待大约2min，仪器自检完毕。

4.1.4在桌面上双击仪器控制图标，进入Masshunter数据采集化学工作站界面。

第3页共21页文件编号：JXHX-ZY-19 版本：第1版修订状态：第0次修订发布实施：2018-02-054.1.5开机后要注意观察真空泵运行状态，分子涡轮泵转速在10分钟内应该达到95%以上。

否则，说明系统有大漏气，应检查侧板是否压正、放空阀是否拧紧、柱子是否接好。