FAM3B基因cDNA克隆及其在胃癌细胞系BGC-823的表达
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人胃癌裸鼠实验技术原理
人胃癌裸鼠模型方法:收集培养的BGC-823细胞在细胞培养至对数期时,用RPMI-1640培养液中,制成约2*10 7个/ml细胞悬液,取0.2ml注入裸小鼠颈部皮下或背部皮下,每组接种三只鼠,当皮下移植瘤长至直径为1cm左右时取出肿瘤,及时放入含无血清培养液的平皿中,再修剪肿瘤组织,去除脂肪,结缔组织及坏死肿瘤组织,并用无血清培养液洗涤2次,将瘤组织切成约1mm x1mm x2mm的小块,加入适量的pbs备用。
以Pentobarbital经腹腔注射麻醉裸鼠,常规背部肩胛区,用无菌套管针抽吸准备好的2立方毫米大小瘤块,将其接种于裸鼠背部肩胛区皮下,建立裸鼠皮下移植的人体胃癌裸鼠模型。
人胃癌裸鼠模型特点:胃癌细胞接种后第三天即可见到裸鼠接种处皮下出现结节,直径约1.5mm,质地较硬,在以后的几天中,上述皮下结节没有继续增大,此阶段为肿瘤细胞生长的潜伏期。
随后,裸鼠皮下的肿瘤结节开始缓慢生长,体积逐渐增大。
注意:如每次需要接种的数量太多时,可用瘤细胞悬液接种。
停止给予受试物之次日处死动物,先称体重,后解剖皮下瘤块,称重。
如对照组小白鼠肿瘤平均重量小于1g或20%鼠的瘤重小于400mg,大白鼠肿瘤平均重量小于2g,表示人胃癌裸鼠模型肿瘤生长不佳。
在实验期给受试物组鼠死亡超过20%,或平均体重下降超过15%者,表示受试物的毒性反应。
抗癌药物引起胃癌细胞系BGC-823凋亡的作用观察陈维鹏;李东生【期刊名称】《潍坊医学院学报》【年(卷),期】2000(22)1【摘要】目的观察多种抗癌药物对体外培养胃癌细胞系 BGC- 82 3的作用及引起凋亡的机制。
方法选用丝裂霉素 (MMC)、卡铂、5 - Fu、卡铂 +5 - Fu,作用于呈指数生长的 BGC- 82 3胃癌细胞系细胞 ,在作用 2 4,48h时 ,分别观察细胞的凋亡情况 ,利用镜下细胞计数方法 ,计数细胞凋亡的百分数 ;并分别留取正常培养12 ,2 4h,抗癌药物作用 2 4,48h的培养液上清 ,测定癌胚抗原 (CEA)的含量。
结果选用 5 - Fu、MMC、卡铂 3种药物作用于体外培养胃癌细胞系 MGC- 82 3细胞 ,其引起凋亡的结果有较大的差异 :5 - Fu在 48h后仅产生 5 %的细胞凋亡 ;作用 2 4h MMC引起的凋亡数为 5 0 % ,卡铂为2 5 % ,卡铂 +5 - Fu为 30 % ;作用 48h 后 MMC引起的凋亡数为 98% ,卡铂为 80 %~ 85 % ,卡铂 +5 - Fu为 85 %~90 %。
CEA测定结果 :作用前后无明显变化。
结论 5 - Fu对体外培养胃癌细胞系 BGC- 82 3的作用不明显 ;MMC、卡铂对胃癌细胞系BGC- 82 3的作用强大 ,特别体现在作用 48h后 ;卡铂与 5 - Fu的协同作用不明显 ;3种抗癌药物对胃癌细胞系 BGC- 82 3产生 CEA的抑制作用不明显。
【总页数】2页(P41-42)【关键词】胃癌细胞系;BGC-823;凋亡;丝裂霉素;5-Fu;卡铂【作者】陈维鹏;李东生【作者单位】潍坊医学院附属淄博市第一人民医院外科【正文语种】中文【中图分类】R735.205【相关文献】1.bcl-2阳性胃癌细胞系BGC-823凋亡模型的建立 [J], 路平;陈峻青;王舒宝2.TRAIL联合化疗药物诱导人胃癌细胞系BGC-823凋亡观察 [J], 僧靖静;张云汉;高冬玲3.养胃抗瘤冲剂及其拆方对人胃癌细胞系MGC-803及BGC-823侵袭重组基底膜的作用及作用途径 [J], 李杰;孙桂芝;林洪生;裴迎霞;祁鑫;花宝金4.顺铂或奥沙力铂联合热疗对人胃癌细胞系BGC-823抑制作用的比较 [J], 葛少华;刘宝瑞;钱晓萍5.基于miR-143-3p/FGF1信号轴吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞系增殖、迁移、侵袭的作用及机制研究 [J], 原伟伟;黄晋熙;王程虎;别良玉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
槲皮素抑制胃癌BGC823细胞增殖的研究【摘要】目的探讨槲皮素治疗胃癌细胞的作用机制。
方法采用不同浓度的槲皮素处理胃癌 BGC823 细胞后,采用四唑盐比色试验检测癌细胞生长,分别以琼脂糖凝胶电泳和 TUNEL 检测癌细胞凋亡,分别采用荧光实时定量 PCR 和Western blot 检测存活素(survivin)基因mRNA、蛋白表达情况。
结果槲皮素抑制胃癌 BGC823 细胞的恶性增殖,且呈浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳和 TUNEL显示,槲皮素处理组出现凋亡现象,且呈浓度依赖性。
槲皮素处理组 survivin 基因mRNA、蛋白表达下调,且呈时间和浓度依赖性。
结论槲皮素体外能抑制胃癌细胞的恶性增殖,与诱导凋亡、下调 survivin 基因表达有关。
【关键词】胃肿瘤槲皮素细胞凋亡存活素Abstract:ObjectiveTo identify the inhibitory effects and mechanism of Quercetin on gastric cancer.MethodsGastric cancer BGC823 cells were treated with different doses of quercetin,and the growth of cancer cell was exmined by MTT assay,and the apoptosis were determined by agarose gel electrophoresis and TUNEL assays,respectively.The real time-PCR and western blot were performed to study the expression of survivin.ResultsQuercetin had a remarkable inhibition on gastric cancer cell line BGC823.From DNA ladder and TUNEL assay,apoptosis were induced in cancer cells treaed with quercetin,in a dose- dependent manner.In addition, quercetin resulted in down-regulation of survivin mRNA and protein from real time-PCR and western blot assay.ConclusionQuercetin can inhibit the growth of human gastric cancer BGC823 cell through inducing apoptosis and down-regulating survivin gene in vitro.Key words:Gastric cancer; Quercetin; Apoptosis; Survivin胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,发现时一般已经处于中晚期,目前尚缺乏有效的治疗手段,故寻找有效的治疗药物和治疗手段是当务之急。
小檗碱对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响
李国英;杨林西;王玉平
【期刊名称】《中药药理与临床》
【年(卷),期】2002(018)006
【摘要】用MTT法、克隆分析、流式细胞仪及免疫组织化学法,观察了小檗碱对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响,结果发现小檗碱对人胃癌细胞株BGC-823有抑制增殖作用,且与药物浓度呈正相关.其机理主要为使突变型p53和p21蛋白的表达下调,阻滞胃癌细胞进入细胞周期,使人胃癌细胞BGC-823的细胞周期阻滞于G0/G1期.
【总页数】3页(P10-12)
【作者】李国英;杨林西;王玉平
【作者单位】兰州医学院生物化学与分子生物学教研室,兰州,730000;兰州医学院生物化学与分子生物学教研室,兰州,730000;兰州医学院生物化学与分子生物学教研室,兰州,730000
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.曲格列酮对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响 [J], 王静;王春晖
2.连翘乙醇提取物对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响 [J], 许萍;孙婧;胡文静;禹立霞;钱晓萍;刘宝瑞
3.人参皂甙Rg3对胃癌细胞株BGC-823增殖凋亡的影响 [J], 高川;张明亮
4.RNA干扰抑制yrdC蛋白表达对人胃癌细胞株BGC-823体外增殖能力的影响[J], 朱宏亮;毕建威;黄盛东;袁扬;龚德军;方国恩
5.胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性COX2抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖和PGE2分泌的影响 [J], 方兴国;赵逵;朱蓉;付晓霏;王红
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胃癌细胞株BGC-823中miR-138-5p负性调控Sirt1基因的表达杨伟;张娜;金丽娟;摆茹;韩梅【摘要】目的在胃癌细胞中筛选并鉴定靶向Sirt1基因的micorRNA.方法生物信息学软件预测特异性靶向Sirt1基因3’端非编码区域(3′-UTR)的microRNA;分别构建野生型和突变型与目的microRNA匹配的Sirt1基因3′-UTR序列双荧光素酶报告基因载体;将miR-138-5p过表达质粒分别与野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体共转染入胃癌细胞株BGC-823中,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性.miR-138-5p过表达质粒转染BGC-823细胞,荧光定量PCR检测转染细胞miR-138-5p与Sirt1 mRNA的表达,Westemblot检测SIRT1蛋白的表达.结果生物信息学软件预测显示miR-138-5p为靶向调控Sirt1的候选microR-NA;成功构建野生型和突变型Sirt1基因3′-UTR双荧光素酶报告基因载体;荧光素酶活性实验表明,miR-138-5p可以下调野生型质粒的荧光素酶活性,不影响突变型质粒的荧光素酶.miR-138-5p过表达质粒转染后的BGC-823细胞中,miR-138-5p表达显著上调,Sirt1基因mRNA和蛋白的表达水平明显下调.结论在胃癌细胞中miR-138-5p靶向作用于Sirt1基因3′-UTR,并负性调控Sirt1基因.【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2016(038)009【总页数】7页(P980-984,993,封4)【关键词】microRNA-138-5p;Sirt1;负性调控;人胃癌BGC-823细胞系【作者】杨伟;张娜;金丽娟;摆茹;韩梅【作者单位】宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系,银川750004;宁夏回族自治区第三人民医院,银川750021;宁夏回族自治区第三人民医院,银川750021;宁夏回族自治区第三人民医院,银川750021;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系,银川750004【正文语种】中文【中图分类】R735.2沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, Sirt1)作为一种依赖于烟碱腺嘌呤二核苷酸(nicotine-amid adenine dinucleotide,NAD)的去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)广泛存在于哺乳动物细胞质和细胞核中。
大蒜素对胃癌细胞BGC-823增殖影响的研究张智龙;苏丽娜;荣慧;陈琳琳;侯毅鞠【摘要】目的研究大蒜素对胃癌BGC-823细胞增殖的影响.方法通过细胞培养技术、瑞氏染色、MTT实验方法,观察大蒜素对胃癌细胞生长的影响.结果 BGC-823细胞在大蒜素的作用48 h后,出现体积变小、核固缩等形态学改变.大蒜素对胃癌细胞的生长曲线有明显的抑制作用,其抑制作用与大蒜素的浓度和时间呈正相关.结论大蒜素对体外培养的BGC-823细胞具有明显的增殖抑制作用.【期刊名称】《吉林医药学院学报》【年(卷),期】2010(031)005【总页数】3页(P267-269)【关键词】大蒜素;胃癌;BGC-823细胞【作者】张智龙;苏丽娜;荣慧;陈琳琳;侯毅鞠【作者单位】吉林医药学院检验系,吉林,吉林,132013;吉林医药学院检验系,吉林,吉林,132013;吉林医药学院检验系,吉林,吉林,132013;吉林医药学院检验系,吉林,吉林,132013;吉林医药学院检验系,吉林,吉林,132013【正文语种】中文【中图分类】R735.2大蒜在我国民间药用已有三千多年的历史,在《本草纲目》和《验方新编》中就有关于大蒜药用价值的记载[1]。
大蒜素(又名大蒜注射液)是对大蒜进行重整获得的挥发油,有效成分为大蒜辣素。
大蒜辣素不仅具有抗菌消炎的作用,而且可以抑制多种癌细胞的生长并诱导其凋亡。
胃癌的发生和发展与细胞凋亡关系密切,诱导细胞凋亡已成为治疗胃癌的新手段。
大蒜素作为一种可诱导细胞凋亡的天然药物,有望为胃癌治疗开辟一条新途径[2]。
本研究将对大蒜素抑制胃癌细胞的生长作用加以探讨。
1.1 材料大蒜素注射液(三硫二丙烯)购自安徽华源医药有限公司,BGC - 823细胞为吉林医药学院检验系细胞培养室冻存细胞株。
1.2 细胞生长状态观察常规培养胃癌细胞至对数生长期[3],将对数生长期细胞均匀的分成7组(每组设有1个对照孔和5个实验复孔),以每孔106个细胞接种于96孔细胞培养板中,分别向7组中加入大蒜素使终浓度分别为5 μg/mL、10 μg/mL、15 μg/mL、20 μg/mL、25 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL,其中对照孔中只加入相同体积含10%小牛血清的1640完全培养液,分别于培养24 h、48 h、72 h和96 h时在倒置显微镜下观察细胞形态并照相。
华蟾素诱导人胃癌BGC-823细胞miRNA表达变化的实验研究周荣平;陈刚;沈志力;潘立群【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2013(035)009【摘要】目的研究华蟾素对人胃癌BGC-823细胞MicroRNA (miRNA)表达谱的影响.方法应用华蟾素处理胃癌细胞系BGC-823细胞,以MTT法确定细胞增殖受到抑制后,基因芯片方法分析BGC-823细胞在药物处理前后miRNA表达谱的变化,qRT-PCR法验证miRNA的表达水平.结果随华蟾素质量浓度增加及作用时间的延长,华蟾素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖抑制率相应增加,具有时效和量效关系.人胃癌细胞BGC-823中,华蟾素诱导了33个miRNA的表达上调,12个miRNA的表达下调.qRT-PCR验证华蟾素诱导的miR-29a和miR-26a的表达上调的结果.结论华蟾素可能通过诱导miRNA表达谱的改变参与抑制人胃癌细胞增殖作用.【总页数】5页(P1842-1846)【作者】周荣平;陈刚;沈志力;潘立群【作者单位】南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京210046;南京医科大学附属江宁医院,江苏南京211100;南京医科大学附属江宁医院,江苏南京 211100;南京医科大学附属江宁医院,江苏南京 211100;南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京210046【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.华蟾素抑制人胃癌BGC-823细胞体外侵袭、迁移的机理 [J], 乔翠霞;张新峰;蔡小平;程旭锋2.华蟾素对TGF-β1诱导人结肠癌细胞上皮-间质化的实验研究 [J], 沈国强;林炜栋;陈向芳3.华蟾素联合放疗对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响 [J], 沈玲;朱海超;杨雪;王中焕;李莉华;刘志辉;楚建军4.华蟾素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的实验研究 [J], 崔永安;左小东;秦叔逵;王锦鸿;陈惠英5.华蟾素诱导人胃癌细胞株BGC-823凋亡实验研究 [J], 韩鸿彬;陈嘉勇;袁勇;梁道明;张毅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
抗癌生物活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4表达的影响温再和;崔宏伟;张嘉玲;苏秀兰【期刊名称】《内蒙古医学院学报》【年(卷),期】2011(033)002【摘要】目的:探讨抗癌生物活性肽对人胃癌细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4的影响及其作用机制.方法:实验分为活性肽组及对照组,将不同浓度的抗癌生物活性肽按不同时间作用于培养的人胃癌细胞株(BGC-823),应用MTT法检测增殖抑制率.建立荷胃癌裸鼠模型,给予生理盐水作为阴性对照组,应用免疫组化技术对抗癌生物活性肽作用前后的胃癌裸鼠肿瘤中CDK4、CDC2的表达进行检测.结果:不同浓度的抗癌生物活性肽对胃癌细胞均有增殖抑制作用;抗癌活性肽S-2作用后人胃癌组织中的CDK4表达明显低于对照组(P<0.01),而CDC2表达高于对照组(P<0.01).结论:抗癌生物活性肽具有抗胃癌细胞增殖作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过下调CDK4和上调CDC2的表达实现.%Objective:To study the effect of anti -cancer bioactive peptide (ACBP) on the expression of CDC2 and CDK4 of human gastric cancer cells and the possible anti - cancermechanism.Methods:Human gastric cancer BGC -823 cells were cultured in vitro and gastric cancer loaded nude mice mode were established. Test groups were given ACBP and control groups were given NS. Then immunohistochemistry method was carried out to detect the expression of CDC2 and CDK4. Result:Different concentrations of anti cancer bioactive peptide had the function of inhibiting the proliferation of BGC - 823 cells.The expression of CDK4 of test groups were significant lower than those of control groups(P <0. 01 ); but the expression of CDC2 of test groups were significantly higher than those of control groups(P <0. 01 ). Conclusion:We have confirmed that ACBP execute the function of antitumor by deregulating CDK4 and up regulating CDC -2.【总页数】4页(P89-92)【作者】温再和;崔宏伟;张嘉玲;苏秀兰【作者单位】内蒙古医学院附属医院,麻醉科,内蒙古,呼和浩特,010050;内蒙古医学院附属医院,临床医学研究中心;内蒙古医学院附属医院,临床医学研究中心;内蒙古医学院附属医院,临床医学研究中心【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.消痰散结方对人胃癌细胞周期及CDK4表达影响的实验研究 [J], 李相勇;魏品康;许玲;秦志丰2.维甲酸对人胃癌细胞HGC-27增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(P16、P21、P27)表达的影响 [J], 崔建华;李华;范钰;林庚金;钱立平;徐康;颜吉丽3.不同浓度的丙泊酚对人胃癌BGC-823细胞增殖以及相关蛋白表达的影响 [J], 张冰; 陈杰; 张静静; 闫睿; 雷钟4.螯合白血病患者骨髓细胞内外钙离子对硫化氢生成影响的实验研究相关检索词免疫组化蛋白表达白血病硫化细胞增殖 cell proliferation bax h2s 骨髓胃癌硫化氢细胞周期 bcl-2 间充质干细胞图像分析单个核细胞电极乳腺癌钙离子leukemia 相关专家李杰张旻李艳平葛楚天相关机构· 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所· 中国科学院上海生命科学研究院· 北京师范大学· 浙江大学动物科学学院· 浙江大学螯合白血病患者骨髓细胞内外钙离子对硫化氢生成影响的实验研究 [J], 孙晓红;于志刚;张雪莉;庄宝祥;张圣明5.白鹤冲剂对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤瘤组织血管内皮生长因子和p53蛋白表达的影响 [J], 董智平;胡志前;彭炜;舒志军;曹烨民;陆磊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。