详述纳氏试剂的配制方法
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纳氏试剂的配制方法
纳氏试剂是一种常用的生化试剂,用于测定蛋白质含量。
它是由Na2CO3和NaOH混合而成的一种碱性试剂,因其配制简单、使用方便而被广泛应用于实验室中。
下面将介绍纳氏试剂的配制方法及注意事项。
首先,准备所需原料和仪器。
配制纳氏试剂所需的原料包括Na2CO3和NaOH,需要准备的仪器有天平、烧杯、磁力搅拌器等。
其次,按照一定比例将Na2CO3和NaOH称量。
一般情况下,纳氏试剂的配制比例为Na2CO3,NaOH=10,1。
在称量时,要求精确,以确保配制出的纳氏试剂浓度准确。
然后,将称好的Na2CO3和NaOH溶解于适量的去离子水中。
在搅拌的同时缓慢加入NaOH,直至Na2CO3和NaOH完全溶解并混合均匀。
这一步需要注意搅拌速度和时间,以确保试剂溶解均匀。
接着,将配制好的纳氏试剂转移至干净的烧杯或容器中。
在转移过程中,要注意避免杂质的混入,以免影响后续实验的准确性。
最后,使用PH试纸或PH计检测纳氏试剂的PH值。
纳氏试剂的PH值应在11左右,若偏离过大,应适量添加Na2CO3或NaOH进行调节,直至达到所需的PH值。
在配制纳氏试剂的过程中,需要注意以下几点:
1. 配制过程中要保持实验环境的清洁,避免杂质的混入。
2. 配制好的纳氏试剂应密封保存,避免受潮和污染。
3. 配制过程中要佩戴防护眼镜和实验服,避免发生意外。
总之,纳氏试剂的配制方法简单易行,但在操作过程中仍需严格按照标准操作程序进行,以确保配制出的试剂符合实验要求。
希望本文所述内容能够对您有所帮助。
纳氏试剂(Nessler)是指一种利用紫外-可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。
制备方法
有两种
1. Hgcl2-ki-koh解决方案
称重15.0 G氢氧化钾(KOH),溶于50 ml水中,冷却至室温。
称取5.0克碘化钾(KI)并将其溶解在10毫升水中。
在搅拌下,将2.50 g HgCl2粉末添加到碘化钾溶液中几次,直到溶液变为深黄色或微红色。
当溶液缓慢溶解时,充分搅拌并混合,然后更改以添加二氯化汞饱和溶液。
当少量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴下。
在搅拌下,将冷却的氢氧化钾溶液缓慢加入氯化汞和碘化钾的混合物中,并稀释至100毫升。
在黑暗中放置24小时后,将上清液倒出并储存在聚乙烯瓶中。
橡胶塞或聚乙烯盖用于紧紧盖住。
在阴暗处可以稳定保存1个月。
2. Hgi2-ki-naoh解决方案
称量16.0 g氢氧化钠(NaOH),溶于50 ml水中,冷却至室温。
称量7.0 g碘化钾(KI)和10.0 g碘化汞(HgI2)并将其溶解在水中,然后在搅拌下将溶液缓慢加入上述50 ml氢氧化钠溶液中,并用水稀释至100 ml。
存放在聚乙烯瓶中,用橡胶塞或聚乙烯盖紧盖,在阴暗处保存,有效期一年。
使用注意事项
1.内斯勒试剂中的汞是有毒的。
使用时要小心,触摸皮肤时要及
时清洗。
2. Nessler试剂的使用寿命相对较短,通常在制备后仅三周即可保存。
降水量的增加会影响测定结果。
3.配制溶液时,所有水都必须不含氨,并且不能用普通滤纸过滤,否则很容易污染Nessler试剂。
纳氏试剂配制方法纳氏试剂是一种用于检测蛋白质浓度的试剂,其基本原理是通过与蛋白质中的酚酸反应生成蓝色化合物,然后利用比色法来测定蓝色化合物的吸光度,从而计算蛋白质的浓度。
下面我将详细介绍纳氏试剂的配制方法。
纳氏试剂的主要成分包括硫酸铜、硝酸钠和酒石酸。
硫酸铜会与蛋白质中的酚酸发生反应生成蓝色化合物;硝酸钠作为络合剂用于稳定试剂;酒石酸用于调节溶液的PH值。
以下是纳氏试剂的配制步骤:步骤一:准备所需的试剂和器材,包括硫酸铜、硝酸钠、酒石酸、蒸馏水、容量瓶、比色皿等。
步骤二:取一定的硫酸铜溶液。
硫酸铜的浓度可根据需要调整,一般为1 mM。
根据实验需求,可以根据需要调整浓度。
步骤三:准备硝酸钠溶液。
将适量的硝酸钠溶解在蒸馏水中,浓度一般为4%。
步骤四:准备酒石酸溶液。
将适量的酒石酸溶解在蒸馏水中,浓度一般为2%。
步骤五:将硝酸钠溶液和酒石酸溶液按照1:1的体积比混合,得到一定体积的硝酸钠-酒石酸缓冲液。
这样做是为了调节试剂的PH值,一般为8.5-9。
调节PH 的目的是为了使试剂在反应过程中呈现最佳效果。
步骤六:将硫酸铜溶液和硝酸钠-酒石酸缓冲液按照9:1的体积比混合。
慢慢滴加缓冲液,同时用漏斗控制滴液速度,避免产生剧烈的化学反应。
步骤七:将滴加后的溶液进行充分的搅拌混合,确保试剂均匀混合。
步骤八:最后将试剂转移至容量瓶中,并用蒸馏水补足至刻度线。
步骤九:检查试剂的颜色和透明度,确保试剂无混浊或沉淀。
如果有,说明反应不完全,需要重新调整试剂的配制方法。
以上就是纳氏试剂的配制方法。
在实际操作中,还需要注意以下几点:1. 所使用的试剂和器材必须干净,以避免对试剂制备和测定结果产生干扰。
2. 在试剂配制过程中,尽可能避免与皮肤接触,避免对人体和环境造成伤害。
3. 配制好的纳氏试剂应保存在避光、干燥的地方,以保证试剂的稳定性。
纳氏试剂是一种常用的蛋白质浓度测定试剂,具有灵敏度高、稳定性好等优点。
通过合理的配制方法,可以得到满足实验需求的纳氏试剂。
水中氨氮的测定纳氏试剂光度法实验报告
1.了解纳氏试剂的配制方法。
2.学习水中氨氮的测定方法。
3.掌握光度计的使用方法。
实验方法:
1.配制纳氏试剂:将1g 碘酰胺氨基磺酸钠和1g磺基甲酸钠粉末分别溶解在500ml 去离子水中,混合后用去离子水定容至1000ml 中,即为纳氏试剂。
2.样品处理:将水样取2ml 加入50ml 的锥形瓶中,加适量去离子水至50 ml。
3.样品分析:取纳氏试剂2ml 加入瓶中,盖好瓶盖,轻轻颠动。
4.在样品加入纳氏试剂后5min 内,用比色皿取适量样品液和纳氏试剂混合液,送入分光光度计测定吸光度值。
5.用含0.5mg-N /L NH4Cl 标准溶液依次配制不同浓度的标准曲线,测定各浓度标准溶液的吸光度值。
实验结果及分析:
在测定过程中,对比样品吸光度和标准曲线的吸光度,得出水样的氨氮浓度。
在标准曲线上,吸光度和氨氮浓度呈线性相关。
测算水样的氨氮浓度时,需乘以系数K ,根据实验数据确定。
根据实验结果,可以判断水样中氨氮的含量,判断是否符合相关的水质标准。
如果水样的氨氮含量超过了水质标准限值,需要采取相应的措施处理水质问题。
实验结论:
通过本实验测定水中氨氮的含量,可用纳氏试剂光度法测定氨氮。
实验结果可判断水样中氨氮的含量,判断水质是否达到标准。
实验中还应注意设备的正确使用以及试剂的正确配制和处理方法。
通过本实验,可有效提高实验者的实验操作能力和实验判断能力,增加实验经验和知识。
氨氮测定方法——纳氏试剂光度法(纳氏试剂比色法)1.方法原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长410—425nm 范围内测其吸光度,计算其含量。
2.干扰及消除脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物,以及铁、锰、镁和硫等无机离子,因产生异色或混浊而引起干扰,水中颜色和混浊亦影响比色。
为此,须经絮凝沉淀过滤预处理,易挥发的还原性干扰物质,还可在酸性条件下加热以除去。
对金属离子的干扰,可加入适量的掩蔽剂加以消除。
3.方法的适用范围本法最低检出浓度为0.025mg/L (光度法),测定上限为2mg/L 。
采用目视比色法,最低检出浓度为0.02mg/L 。
水样作适当的预处理后,本法可适用于地面水、地下水、工业废水和生活污水中氨氮的测定。
4.仪器(1) 分光光度计。
(2) pH 计。
5.试剂配制试剂用水均应为无氨水。
(1) 纳氏试剂:可选择下列方法之一制备:[1] 称取20g 碘化钾溶于约25mL 水中,边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgC l2)结晶粉末(约10g ),至出现朱红色沉淀不易溶解时,改为滴加饱和二氯化汞溶液,并充分搅拌,当出现微量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加氯化汞溶液。
另称取60g 氢氧化钾溶于水,并稀释至250mL ,冷却至室温后,将上述溶液徐徐注入氢氧化钾溶液中,用水稀释至400mL ,混匀。
静置过夜,将上清液移入聚乙烯瓶中,密塞保存。
[2] 称取16g 氢氧化钠,溶于50mL 水中,充分冷却至室温。
另称取7g 碘化钾和碘化汞(HgI 2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中。
用水稀释至100mL ,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存。
(2) 酒石酸钾钠溶液:称取50g 酒石酸钾钠(KNaC 4H 4O 6•4H 2O )溶于100mL 水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100mL 。
(3) 铵标准贮备溶液:称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NHCl)溶于水中,移入1000mL容量4瓶中,稀释至标线。
纳氏试剂配制方法探讨摘要:纳氏试剂比色法是测定水体中氨氮的常规用法,是经典的国家标准分析方法,改进纳氏试剂的配制,减少二氯化汞的用量有效减轻分析残留物的二次处理和药物对分析人员的危害,改进法与hj535-2009同样具有较好的灵敏度、准确度和精密度。
关键词:氨氮;纳式试剂;二氯化汞氨氮,是以游离氨(nh3)或铵盐(nh4+)形式存在于水中,两者的组成取决于水体的ph值和水温。
当ph值高是游离(nh3)的比例较高,反之铵盐的比例较高。
氨氮是水体中的营养素,可导致水富营养化现象产生,是水体中的主要耗氧污染物,氨氮是我国水体环境监测的主要指标,是各级监测站点的必测项目。
测定水体中的各种形态的氮化物有助于评价水体被污染和”自净”情况,氨氮含量较高时对鱼类有毒害作用,甚至会导致鱼类死亡,氨氮含量高时对人体健康也会有危害作用。
在当今环保意识不断增强的趋势下氨氮的测定越来越受到人们的重视。
测定氨氮的方法有很多,通常有钠氏试剂比色法、苯酚-次氯酸盐比色法、电极法、离子色谱法等。
其中,纳氏试剂比色法是测定水体中氨氮经典的国家标准分析方法。
其原理是以游离态的氨或铵离子的形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色的络合物,该络合物的吸光度与氨氮的含量成正比。
纳氏试剂比色法的测试范围是水样体积为50ml,使用20mm比色皿时,其检出限为0.025 mg/l,上限是2.0mg/l,下限为0.10mg/l。
因纳氏试剂比色法具有操作简便、灵敏等特点,成为广大监测人员最常用的分析氨氮的方法。
但二氯化汞的用量偏高,二氯化汞是剧毒药物,降低它的使用量,有利于分析人员的安全和减少二次污染,但又不影响分析数据的可靠性和精密度。
1.实验步骤a.实验仪器50ml具塞比色管;分光光度计;20mm比色皿。
b.试剂配置配制试剂用水均应为无氨水。
无氨水:可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后,重蒸馏得到。
纳氏试剂:称取15.0g氢氧化钾,溶于50ml水中,充分冷却至室温。
纳氏试剂的配制方法
纳氏试剂是一种用来定性测定脱氢酶活性的化学试剂。
它是由NAD+(烟酸腺嘌呤二核苷酸)和苯乙酮或丙酮组成的。
一般来说,纳氏试剂的配制方法如下:
1. 准备所需的实验室用具:烧杯、量筒、搅拌棒等。
2. 称取一定质量的NAD+和苯乙酮或丙酮。
3. 将NAD+和苯乙酮或丙酮溶解于适量的缓冲液中(比如Tris-HCl缓冲液),并使用搅拌棒充分搅拌混合。
4. 调节溶液的pH值,确保其在适合的范围内(一般约为7.0-8.0)。
5. 最终得到纳氏试剂的溶液。
需要注意的是,在配制纳氏试剂的过程中要保持实验室的清洁和卫生,严格按照配制方法操作,以保证试剂的纯度和稳定性。
同时,使用过的纳氏试剂应妥善处理并遵守相关废弃物处理规定。
各实验试剂配制方法NOx的测定试剂配制1、1.00g/L盐酸萘乙二胺贮备液:称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C10H7NH(CH2)NH2·2HCl)于500ml容量瓶中,用水稀释至标线。
此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中,在冰箱中冷藏可稳定三个月。
2、显色液:称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H),溶解于约200ml热水中,将溶液冷却至室温,全部移入1000ml容量瓶中,加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸,用水稀释至标线。
此溶液于密闭的棕色瓶中,在25℃以下暗处存放,可稳定三个月。
若呈现淡红色,应弃之重配。
3、吸收液:临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合,即为吸收液。
吸收液的吸光度不超过0.005(540nm,lcm比色皿,以水为参比)。
否则,应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。
4、亚硝酸钠标准贮备液:准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02,优级纯,预先在干燥器内放置24h)溶解于水,移入1000ml容量瓶中,用水稀释至标线。
贮于密闭的棕色试剂瓶中,可稳定三个月。
此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。
5、亚硝酸钠标准使用液:吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中,用水稀释至标线。
临用前现配。
此溶液每毫升含2.5μg亚硝酸根。
6、硫酸溶液C(1/2H2S04)=lmol/L:取15ml硫酸(ρ=1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。
7、酸性高锰酸钾溶液:称取25g高锰酸钾,稍微加热使其全部溶解于500ml水中,然后加入lmol/L硫酸溶液500ml,混匀,贮于棕色试剂瓶中。
SO 2的测定试剂配制1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)=0.0050mol/L :称取 1.82g 反式-l ,2-环己二胺四乙酸((trans-1,2-Cyclohexylenedinitrilo)tetraacetic acid ,简称CDTA),加入1.50mol/L 的氢氧化钠溶液6.5ml ,溶解后用水稀释至100ml 。
纳氏试剂的配制方法
纳氏试剂是一种常用的化学试剂,用于检测蛋白质和肽的存在。
下面介绍纳氏试剂的配制方法,供参考。
材料:
1. 碳酸钠 (Na2CO3)
2. 硫酸银 (AgNO3)
3. 磷酸二氢钾 (KH2PO4)
4. 碳酸氢钠 (NaHCO3)
5. 蒸馏水
步骤:
1. 准备好所需的化学试剂和实验器材。
2. 首先按照需求量,称取适量的碳酸钠和硫酸银,分别置于两个干燥的烧杯中。
保持试剂干燥,避免吸湿。
3. 用蒸馏水分别将碳酸钠和硫酸银溶解至饱和。
搅拌溶液以帮助溶解过程。
4. 将溶液分别过滤,以去除未溶解的固体杂质。
5. 将过滤后的溶液分别称取一定的体积,放置于干燥烧杯中。
6. 再称取适量的磷酸二氢钾和碳酸氢钠,分别加入到碳酸钠和硫酸银的溶液中。
搅拌溶液以帮助溶解过程。
7. 等待溶液充分反应,产生纳氏试剂。
反应完成后,溶液会呈现浑浊的白色沉淀。
8. 将纳氏试剂溶液过滤,以去除沉淀和未反应的物质。
9. 将过滤后的溶液转移到干燥的容器中,即可得到纳氏试剂。
注意事项:
1. 配制过程中,要注意试剂的质量和干燥程度,以免影响试剂的性能。
2. 操作时要佩戴安全手套和护目镜,以保护自己的安全。
3. 配制好的纳氏试剂应尽量避免日光直射和空气暴露,保存在干燥、阴凉的地方。
以上是纳氏试剂的配制方法。
提醒读者在进行相关实验时,务必遵守实验室安全操作规范,并根据具体实验需要进行适当的调整。
详述纳氏试剂的配制方法
纳氏试剂法测氨氮的详细步骤:
一、原理
碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长410—425nm范围内测其吸光度,计算其含量.本法最低检出浓度为0.025mg/L (光度法),测定上限为2mg/L.
二、仪器
1.500mL全玻璃蒸馏器 .
2.50mL具塞比色管.
3.分光光度计.
4.pH计.
三、试剂
配制试剂用水均应为无氨水.
1.无氨水:可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后,重蒸馏得到. 2.1mol/L氢氧化钠溶液.
3.吸收液:①硼酸溶液:称取20g硼酸溶于水中,稀释至1L.
②0.01mol/L硫酸溶液.
4.纳氏试剂:称取16g氢氧化钠,溶于50mL水中,充分冷却至室温.
另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中.用水稀释至100mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存.
5.酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100mL.
6.铵标准贮备溶液:称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入1000mL 容量瓶中,稀释至标线.此溶液每毫升含1.00mg氨氮.
7.铵标准使用溶液:移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中,用水稀释至标线.此溶液每毫升含0.010mg氨氮.
四、测定步骤
1.水样预处理:无色澄清的水样可直接测定;色度、浑浊度较高和含干扰物质较多的水样,
需经过蒸馏或混凝沉淀等预处理步骤.
2.标准曲线的绘制:吸取 0 、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0mL铵标准使用液于50mL比色管中,加水至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液,混匀.加1.5mL纳氏试剂,混匀.放置10min后,在波长420nm处,用光程10mm比色皿,以水为参比,测定吸光度.
由测得的吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量(mg)对校正吸光度的标准曲线.
3.水样的测定:分取适量的水样(使氨氮含量不超过0.1mg),加入50mL比色管中,稀释至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液(经蒸馏预处理过的水样,水样及标准管中均不加此试剂),混匀,加1.5mL的纳氏试剂,混匀,放置10min.
4.空白试验:以无氨水代替水样,作全程序空白测定.
五、计算
由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后,从标准曲线上查得氨氮含量(mg).
氨氮(N,mg/L)=m×1000/V
式中:m-——由校准曲线查得样品管的氨氮含量(mg);
V——水样体积(mL).
注意事项
1、纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例,对显色反应的灵敏度有较大影响.静置后生成的沉淀应除去.
2、滤纸中常含痕量铵盐,使用时注意用无氨水洗涤.所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污.。