生物学综合性实验

微生物综合实验水中细菌总数的测定一、实验目的1．学习水样的采集和水样中细菌总数的测定方法。

2．了解和掌握平板菌落计数的原则。

3．复习、巩固微生物实验的各单元操作。

二、实验原理水中细菌总数的测定是进行水质检验的必要项目之一，主要作为判定饮用水、水源水、地表水等被污染程度的标志。

本试验采用平板菌落计数技术来测定水中的细菌总数。

该法是根据在固体培养基上所形成的菌落来进行计数。

菌落总数是指在一定条件下，1 mL水样所生长出来的细菌菌落的总数。

由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其它生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基和在一种条件下，使水中的所有细菌均能生长繁殖，因此，这种方法所得到的结果只是一种近似值。

目前一般采用营养琼脂培养基，在需氧条件下，37℃培养36-48 h，所得到的细菌绝大部分是腐生性的嗜中温性需氧菌和兼性厌氧菌。

三、实验材料1．检样：矿泉水等饮用水、河水、湖水、井水等。

2．培养基：营养琼脂培养基（附录Ⅱ-1.3）3．仪器与其它用具：三角烧瓶，广口瓶，吸管，培养皿，试管，培养箱等。

四、实验步骤1. 水样的采集与处理⑴饮用水：采样前，先用酒精棉球擦拭瓶口灭菌，以灭菌移液管或移液枪取水样。

⑵河水、湖水、池水：应取距水面10 cm~15 cm的深层水样。

先将已灭菌的带玻璃塞的广口瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来使瓶口向上，拔去瓶塞，待水盛满后，将瓶塞盖好，再将瓶子从水中取出。

在一定深度采水样时，需要用特制的采水器（图14-14）。

采水器是一金属框，内装玻璃瓶，其底部装有重沉坠，可按需要坠入一定深度。

瓶盖上系有一绳索，拉吊绳索即可打开瓶盖，待水样瓶中水盛满后，放松绳索，即自行盖上瓶盖。

水样采集后，将水样瓶取出，并立即用无菌棉塞或灭菌胶塞塞好瓶口，以备检验。

水样采集后应立即检验，如需要保存或运送，应采取冰镇措施，但一般要求不得超过4 h。

图14-14 采水器1-开瓶绳索2-铁框3-瓶盖4-水样瓶5-沉坠2. 细菌总数的测定⑴饮用水：①用灭菌吸管吸取0.2 mL水样，涂布于事先准备好平板中，共做2个平皿。

《生物科学综合实验》—分子生物学实验1 实验目的1.1学习并掌握在宿主菌中扩增质粒的理论依据与操作方法。

了解大肠杆菌质粒提取的原理和方法，掌握小量快速提取法（试剂盒法）。

1.2学习并掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳的原理与方法。

3.了解大肠杆菌感受态细胞的制备原理，掌握制备方法。

4.以pET28a质粒转化大肠杆菌TOP10为例，学习转化的基本原理及方法。

2 实验原理2.1 PET28a质粒在大肠杆菌中的扩增与试剂盒抽提细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。

各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。

基因工程用质粒都带有选择性标记序列，最常用的的选择性标记是对抗生素的抗性基因。

如本实验所使用的质粒（pET28a），即带有抗卡那霉素（Kan r）抗性基因。

当培养中含有卡那霉素时，宿主（大肠杆菌BL21）的蛋白质合成受到抑制，而pET28a质粒可自行复制，从而将大大增加拷贝数，达到抽提质粒的浓度要求。

图1 pET-28a 质粒基因结构简图一般分离质粒DNA的方法都包括3个步骤：①培养细菌，使质粒DNA大量扩增；②收集和裂解细菌；③分离和纯化质粒DNA。

分离制备质粒DNA的方法很多，其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、SDS法、羟基磷灰石层析法等。

在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途进行选择。

本实验介绍碱裂解法提取质粒DNA。

碱裂解法提取质粒DNA是根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。

在pH值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕，仍会紧密地结合在一起。

《生物学综合实习》教学大纲课程名称（中文）生物学综合实习课程编号课程性质独立设课课程属性生物科学教材及实验指导书名称《生物学综合实习指导》，学时学分：总学时2周总学分2应开实验学期一年级二学期适用专业生物科学先修课程植物学、动物学、生态学一．课程简介及基本要求生物学综合实习是学生学习生物学专业基础课不可缺少的重要环节，是专业基础课教学不可分割的重要部分，是加深、巩固、扩大和丰富课堂及书本知识的基础，也是培养学生观察和研究生物的基本方法和技能的必要手段。

对进一步加强本科生的素质教育和创新能力的培养有重要的意义。

本课程以实践环节为主，根据课程的性质、任务、要求及学习的对象，将课程内容分三个阶段：基本技能训练，野外实践方法，综合设计和科技创新实践。

第一个阶段由教师带领在实验室完成，第二阶段由教师带领，学生在野外进行分组实践活动，第三阶段在教师指导下，分别完成单项内容的研究性实践活动。

使学生学会动植物标本的制作方法，生物学野外调查的基本知识，单项研究及研究报告的写作。

经过多层次，多方式教学的全面训练后，学生应达到下列要求：1．进一步巩固和加深生物学专业基本知识的理解，提高综合运用所学知识，能独立应用专业知识进行野外调查研究的能力。

2．能根据需要选学参考书，查阅手册，通过独立思考，深入钻研有关问题，学会自己独立分析问题、解决问题，具有一定的创新能力。

3．能正确使用仪器设备，掌握测试原理，完成标本的制作和综合实习的野外工作。

4．能独立撰写野外实习报告，准确分析观察、统计结果。

二．课程实验目的要求《生物学综合实习》是继《动物学》、《植物学》、《生态学》课程之后而开设的独立实验课程，是理论教学的深化和补充，具有较强的实践性，是一门重要的技术基础课，可作为生物技术，生物科学专业学生的必修课。

随着科学技术迅速发展，生命科学的大学生不仅需要掌握生物学基础课方面的基本理论知识，而且还需要掌握基本的实验技能及一定的科学研究能力。

分子生物学综合设计性实验实验项目：不同限制性内切酶对质粒DNA的切割学院：生命科学学院年级专业班：生科121姓名：廖怡诚学号：1214100058实验地点：生化楼207指导老师：夏岩石摘要：限制酶是一种能将双链DNA切开的酶。

主要作用于DNA分子内的磷酸二脂键，进而于两条DNA链上各产生一个切口，且不破坏核苷酸与碱基。

切割形式有两种，分别是可产生具有突出单股DNA的黏状末端，以及末端平整无凸起的平滑末端。

每种限制酶能识别特定的碱基序列并进行特异切割，所以理论上加入的限制酶能够根据其特异性判断会得出的DNA片段。

通过电泳跑胶能够对得出的片段进行分析粗略判断与理论长度的吻合度。

一、关键词：限制酶酶切质粒DNA 电泳二、引言：自然界中限制性酶具有降解外源的DNA的能力，对保护宿主遗传稳定有着重要的作用。

但随着基因工程的发展，对限制酶的应用尤为重视。

由于它具有识别特定DNA序列并进行切割的能力，在基因工程中进行目的基因的导入发挥着重要的作用。

可以取长补短，增强对人类有益生物产品的产量和质量，如导入的抗铃虫基因的木棉大幅度提高了木棉的产量。

但由于，导入基因与受主本身基因结合后存在着不可预判性，可能导致生物危机，也可能随机的酶切将基因导入后产生异常的新物种。

但总体而言，限制酶对于人类基因工程的研究有着重要的意义，对于导入优越基因剔除无用基因有着很大的发展前景。

如进行疾病的治疗（基因治疗），从内在对致病基因进行剔除或置换上优越基因的研究，对于人类生命的延续无疑有着重要意义。

而研究限制酶最为基础之一就是要了解它识别序列的特性和作用机理，所以本实验选取了多种限制酶，可以随机搭配进行对已确定的质粒DNA进行酶切之后进行电泳分析，可以研究限制酶酶切后的序列长度以及多种限制酶的加入在识别位点时是否会互相干扰。

通过实验结果验证理论的准确性以及对实验过程中出现的不可预测的因素导致的各种结果的分析。

对于进一步了解限制酶的作用机理有更深的认识，为以后限制酶的研究奠定良好的基础。

浅析综合性实验在生物学教育中的应用综合性实验是指将多个学科的知识和技能综合运用于一个实际问题中的实验。

在生物学教育中，综合性实验的应用可以提供学生综合运用生物学知识和技能的机会，培养学生的综合实践能力和创新思维。

本文将从实验设置、实验内容和实验效果三个方面对综合性实验在生物学教育中的应用进行浅析。

首先要注意的是综合性实验的设置。

综合性实验需要选取一个既能反映学生对生物学基本原理的理解，又能体现学生对多学科知识和技能的综合运用的实验课题。

实验课题可以选择实际问题，例如环境保护、健康饮食等，也可以选择与生物学相关的课题，例如细胞培养、基因工程等。

实验的设置应该考虑到学生的实际情况，既要有足够的挑战性，又要有一定的可行性，以激发学生的学习兴趣和积极性。

其次是要关注综合性实验的内容。

综合性实验要求学生综合运用多学科知识和技能，因此实验的内容应该涵盖多个学科的知识。

在生物学中，实验内容可以包括生物化学、细胞生物学、分子生物学、遗传学等多个方面的知识。

实验还应该涉及到其他学科的知识，例如物理学、化学、数学等。

通过在实验中综合运用这些知识，学生可以更好地理解生物学的基本原理，培养综合运用知识的能力。

最后要考虑综合性实验的效果。

综合性实验可以提供一个实践环境，使学生在实验中运用生物学知识解决实际问题，从而培养学生的实践能力和创新思维。

实验过程中，学生需要设计实验流程、收集数据、分析结果并得出结论，这样可以培养学生的实验能力和科学思维。

学生还需要与其他组员合作，培养团队合作能力和沟通能力。

通过综合性实验的实践，学生可以将理论知识与实际问题相结合，提高学习的有效性和针对性。

初中生物学综合实践教案
【实践目的】
通过本次实践活动，让学生了解生物学的基本概念和实验方法，培养学生的观察能力、实验技能和科学思维。

【实践内容】
本次实践活动将分为以下几个部分：
1. 实验准备：介绍实验材料和操作步骤；
2. 实验操作：让学生逐步完成实验操作；
3. 实验观察：让学生观察实验现象，并记录数据；
4. 实验分析：让学生对实验结果进行分析和总结。

【实践材料】
1. 毛细管、刻度瓶、试管、显微镜等实验工具；
2. 毛细管法测量水的表面张力实验液体；
3. 实验记录表。

【实践步骤】
1. 实验准备：
- 将刻度瓶装满水，并放在平台上；
- 取一根毛细管，浸入水中，然后将水滴到刻度瓶中，直至形成一条水柱；
- 将刻度瓶水平放置，记录水柱的高度。

2. 实验操作：
- 将刻度瓶放在平台上，让学生逐步进行实验操作；
- 让学生用毛细管法测量水的表面张力。

3. 实验观察：
- 让学生观察实验现象，记录数据；
- 让学生用显微镜观察水的分子结构。

4. 实验分析：
- 让学生对实验结果进行分析和总结，讨论表面张力的原理和影响因素。

【实践总结】
通过本次实践活动，学生了解了水的表面张力的实验方法和原理，培养了他们的观察能力和实验技能。

同时，学生还能够应用科学方法对实验结果进行分析和总结，培养了他们的科学思维和创新能力。

希望学生在今后的学习中能够继续努力，探索更多生物学知识。