10 发酵液预处理和过滤
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发酵液的预处理和固液分离方法综述摘要:从微生物发酵液或细胞培养液中提取生化物质的第一个重要步骤,就是预处理和固液分离。
其目的不仅在于分离细胞、菌体和其他悬浮颗粒,还希望除去部分可溶性杂质和改变滤液的性质,以利于后续的各步操作。
关键字:预处理固液分离正文:一、发酵液预处理微生物发酵和细胞培养的目标产物主要有菌体、胞内产物和胞外产物三类物质。
从发酵液和细胞培养液中提取所需的生化物质,第一步就需进行预处理,以便于固液分离,使代谢产物后续的分离纯化工序顺利进行。
其原因有三个方面:首先,发酵液多为悬浮液,粘度大,为非牛顿型流体,不易过滤,而所需的生化物质往往只有分布在液相,才能有效地提纯。
并且,在有些发酵液中,菌体自溶,核酸、蛋白质及其他有机粘性物质这三类物质会造成滤液混浊、滤速极慢,必须设法增大悬浮物的颗粒直径,提高沉降速度,以利于过滤;其次,目标产物在发酵液中的浓度通常较低;此外,发酵液的成分复杂,大量的菌丝体、菌种代谢物和剩余培养基会对提取造成很大的影响。
所以,对发酵液进行适当的预处理,从而分离细胞、菌体和其他悬浮颗粒(如细胞碎片、核酸以及蛋白质的沉淀物),并除去部分可溶性杂质和改变发酵液的过滤性能,是生化物质分离纯化过程中必不可少的首要步骤。
预处理方法要根据发酵产品、所用菌种和发酵液特性来选择。
大多数发酵产品存于发酵液中,少数存于菌体中,而发酵液和菌体中都有产物存在的情形也比较常见。
如果目的产物是胞外产物,则通过离心或过滤实现固液分离,使其转入液相;而对于胞内产物而言,收集细胞是预处理的首要一步。
细胞经破碎或整体细胞萃取使目的产物释放,转入液相,再进行细胞碎片的分离。
如果所需的产物为细胞,离心或过滤所得固相经干燥等过程就可得到菌体。
图1-1为生化产品分离纯化的一般步骤,图中虚线以上为预处理过程示意图。
图1-1 生化产品分离纯化的一般步骤【1】1.1 预处理简述发酵液经过预处理,一些物理性质会改变,从悬浮液中分离固形物的速度随之提高,过滤操作更易进行;在预处理过程中,产物大多转移进入易于后处理的相中(一般为液相)。
1.发酵液预处理过程:对发酵液加热到所需温度使杂蛋白质变性凝固而沉淀分别.也可以用分散或絮凝的方法是小菌体,细胞,细胞的碎片以及杂蛋白质等胶体离子沉降去除.2.发酵液的基本特性:产物浓度低.具有极性.粘度大.表面张力大.性质不稳定.3.预处理的目的:①.转变发酵液的物理性质,促进从悬浮液中分别固形物的速度,提高固液分别器的效率②.尽可能使产物转入便于后处理的一相中(多数是液相)③.去除发酵液中的部分杂质,以利于后续各步骤的操作.4.发酵液预处理的方法:①加热②调整PH值③分散和絮凝④使用惰性助滤剂⑤使用反应剂二固液分别1.方法:①重力沉降②浮透(通气产生气泡,使固体附着在气泡表面除去,用于固液比重差小,直径5-30um颗粒的分别,污水处理.③旋液分别(霉菌和放线菌为丝状菌,体形较大,发酵液采纳过滤的方法;细菌和酵母菌为单细胞,体形较小,其发酵液采纳高速离心分别,如对发酵液采纳预处理,也可用过滤进行固液分别.④介质过滤和离心,工业上比较常用.2.过滤①澄清过滤:过滤介质为硅藻土,砂,塑料颗粒等,适合于固体含量少于0.Ig/lOOml,颗粒直径在5-100um的悬浮液的过漉分别如:河水,麦芽汁,酒类,饮料的澄清.②滤饼过滤:过漉介质为滤布,包括自然或合成纤维织布,金属织布,玻璃纤维纸,合成纤维等无纺布,适合于固体含量大于0.lg∕100ml的悬浮液的过滤分别3常用过滤设施①转鼓真空过滤工艺转鼓真空过滤机的转鼓过滤外壁掩盖有金属丝网,网上掩盖有滤布等过滤介质.转鼓内部区域分了若干独立的扇形区,各有不同的操作功能.该设施主要适用范围:颗粒不太细,粘性不太大的液体.对于青霉素发酵老说,发酵液相对粘稠,因此发酵液质量的优劣,对转鼓处理速度有着明确的影响.转鼓过滤存在使用范围窄,处理力量低的问题.•希得艮空过廉根■作示索②板式过滤工艺原理:依靠过滤推动力与过滤介质两侧的压力差,致使固体积累在滤材上并架桥形成滤饼层,使滤液与不溶的杂质分别.板式过滤机的优点是:结构简洁,制造简洁,设施紧凑,过漉面积大而占地面积小,操作压力高,对各种物料适应力量强,缺点是间歇操作,劳动强度大,生产效率低,适用于间歇操作的场合.①装好过漉板框②检查料浆槽的进出口阀门是否关闭③调好料浆④打开料浆槽的进口和排气阀门,启动搅拌机,料浆槽装满料浆后,关闭料浆槽的进口和排气阀门⑤启动空压机待压力达到指定值后,即可打开进气阀进行测定⑥测定完后,清洗设施,关好电源.③其他预处理的工艺近期消失的超滤膜工艺,由于产生的滤液质量好不断被青霉素生产工艺所采纳,但是使用超滤膜会产生大量不宜处理的菌丝水,不宜进行环境处理,同时能耗较高,给生产成本带来较大的压力,在环保压力不断加大的现实状况下,超滤膜工艺被生产企业渐渐放弃,.而传统的板框处理,转鼓过滤工艺,由于受发酵液性质和发酵液影响,存在速度慢等问题,其生产力量受到了肯定的限制,需要改进生产工艺以适应生产的要求,全自动过滤机由于处理效率高,人工劳动强度小被生产企业所用.4 .其他过滤分别方法①切向流水过滤又称错流过滤交叉过滤和十字流过滤,是一种维持恒压下高速过滤的技术,其操作特点是使悬浮液在过滤介质表面作切向流淌,利于流淌的剪切作用将过滤介质表面的固体(滤饼)移走.②双水相萃取向水相中加入溶于水的某些高分子化合物(如:葡萄糖,聚乙二醉)后,形成密度不同的两相,轻相中富含某种高分子化合物,重相中富含盐类或另一种高分子化合物从而达到分别和提纯某种高分子化合物的目的.③吸附法向细胞碎片悬浮液中加入某种固体吸附剂,或者用细胞碎片悬浮液通过装有吸附剂的固定床,即可达到除去细胞碎片的目的,主要的目的是很难选择合适的吸附剂,以保证目的产物不被吸附而损失.5 .预处理及固液分别技术应用实例以链霉菌发酵液的预处理及固液分别技术为例,其工艺过程如下:1-2倍量水稀释发酵液,pH2∙8∙32加热70-75 酸化处理发酵液冷却,过滤, 板框过滤或离心分别 去提取。
发酵液预处理的方法
发酵液预处理是指在发酵过程中对原料进行处理,以提高发酵效率和发酵产物
的质量。
发酵液预处理的方法有很多种,下面将介绍几种常见的发酵液预处理方法。
首先,发酵液预处理的方法之一是温度控制。
在发酵液预处理过程中,合理控
制温度是非常重要的。
一般来说,较高的温度有利于促进微生物的生长和代谢,但过高的温度会导致微生物受到伤害甚至死亡,影响发酵效果。
因此,在发酵液预处理过程中,需要根据具体的发酵微生物的要求,合理控制温度,确保微生物能够正常生长和代谢。
其次,发酵液预处理的方法之二是酸碱调节。
发酵液的pH值对微生物的生长
和代谢有重要影响。
一般来说,不同的微生物对pH值的要求不同,因此在发酵液
预处理过程中,需要根据具体的微生物要求,合理调节发酵液的酸碱度,以提供适宜的生长环境。
另外,发酵液预处理的方法之三是营养物质添加。
微生物在发酵过程中需要各
种营养物质来维持生长和代谢。
因此,在发酵液预处理过程中,需要根据微生物的需要,合理添加各种营养物质,以提供充足的营养供给。
最后,发酵液预处理的方法之四是氧气供应。
在发酵过程中,一些微生物需要
氧气来进行代谢,因此在发酵液预处理过程中,需要确保有足够的氧气供应,以促进微生物的生长和代谢。
总之,发酵液预处理是发酵过程中非常重要的一环,合理的预处理方法可以提
高发酵效率和产物质量。
通过温度控制、酸碱调节、营养物质添加和氧气供应等方法,可以有效地改善发酵液的质量,提高发酵产物的产量和品质。
希望以上介绍的发酵液预处理方法能够对您有所帮助。
发酵液预处理的主要方法1 加水稀释法和加热法加水稀释法能降低液体粘度, 但会增加悬浮液的体积, 加大后继过程的处理任务。
而且, 单从过滤操作看,稀释后过滤速率提高的百分比必须大于加水比才能认为有效,即若加水一 倍,则稀释后液体的粘度必须下降50%以上才能有效提高过滤速率。
加热是发酵液预处理最简单最常用的方法。
加热可有效降低液体粘度,提高过滤速率。
同时,在适当温度和受热时间下可使蛋白质凝聚,形成较大颗粒的凝聚物,进一步改善了发 酵液的过滤特性。
对于粘度较高的发酵液,稀释或者加热可以降低发酵液黏度,有利于输送和过滤等后续 操作。
史鹏等 [2] 的研究比较了热处理和酸处理两种方法对HA 分子量降低的影响。
2 离心法国内在这方面的报道,主要反映了高速离心能耗大、设备昂贵,因而得不到推广应用。
国内有些厂家仿效国外的做法, 采用高速蝶片式喷嘴离心机分离菌体, 虽对谷氨酸菌体的 除去有一定效果, 但对菌丝较轻细的肌苷菌体至今未取得满意的结果且设备价格昂贵 [3] 。
3 絮凝和凝聚及混凝方法絮凝预处理能显著加快发酵液中固体颗粒的沉降,提高过滤速度。
李凡锋等 [4] 处理 1, 3丙二醇发酵液后, 其中絮凝样的滤饼湿基、 干基重量分别比对照样增加了41.13%、 51.88%。
江龙法等 [1] 采用壳聚糖作为絮凝剂对 L 乳酸发酵液进行预处理,取得了较好的结果。
经处理后的发酵液菌体减少95 %以上, 江龙法等 [5] 用壳聚糖作絮凝剂处理谷氨酸发酵液,谷氨酸浓度没有降低。
周荣清等 [6] 的研究证明:透明质酸发酵液经絮凝预处理后,不仅可以大大改善发酵液的固液分离效果,同时其滤清液的纯度亦有一定幅度的提高,在超滤过程中污染程度明显减少, 渗透通量增加。
4 调节 PH值调节pH值可以改善发酵液吸附性质和使蛋白变性。
对于加入离子型絮凝剂的发酵液, 调节pH可改变絮凝剂的电离度, 从而改变分子链的伸展状态。
发酵液膜过滤处理方案十年磨一剑,今天我来给大家分享一份关于发酵液膜过滤处理的方案。
这是一份结合了我多年经验和实践的结晶,希望能够帮到大家。
一、项目背景随着生物发酵产业的飞速发展,发酵液的过滤处理成为了一个亟待解决的问题。
传统的过滤方法如板框压滤、离心分离等,不仅效率低下,而且对产品的品质和收率影响较大。
膜过滤作为一种新兴的过滤技术,具有高效、节能、环保等优点,因此,我们决定采用膜过滤技术来处理发酵液。
二、方案设计1.膜材料选择膜材料的选择是决定过滤效果的关键。
根据发酵液的特性,我们选择了具有良好耐腐蚀性、耐高温性、高通量、低能耗的聚砜(PSF)膜。
2.膜组件设计膜组件的设计包括膜面积、膜孔径、膜间距等参数。
根据发酵液的产量和成分,我们选择了合适的膜组件,确保过滤效果和收率。
3.过滤系统设计过滤系统主要包括预处理、膜过滤、清洗和浓缩四个部分。
(1)预处理调整pH值:将发酵液的pH值调整到适宜膜过滤的范围内;灭菌:对发酵液进行高温高压灭菌,防止微生物污染;过滤:采用预过滤器对发酵液进行过滤,去除大颗粒杂质。
(2)膜过滤进料:将预处理后的发酵液送入膜过滤系统;过滤:发酵液在膜表面形成滤饼,透过膜的液体会形成渗透液;收集:收集渗透液,即为所需的发酵产品;浓缩:对剩余的发酵液进行浓缩,回收有用成分。
(3)清洗清洗剂选择:选择合适的清洗剂,如柠檬酸、EDTA等;清洗方式:采用反向清洗和正向清洗相结合的方式;清洗频率:根据膜污染程度,定期进行清洗。
(4)浓缩浓缩方式:采用真空浓缩、冷冻浓缩等方法;浓缩倍数:根据产品要求,确定浓缩倍数;收集:收集浓缩后的发酵产品。
三、实施步骤1.准备工作:对发酵液进行预处理,包括调整pH值、灭菌和过滤;2.膜过滤:将预处理后的发酵液送入膜过滤系统,进行过滤和浓缩;3.清洗:定期对膜组件进行清洗,保证持续运行;4.收集:收集渗透液和浓缩液,即为所需的发酵产品;5.检测:对发酵产品进行质量检测,确保符合要求;6.存储:将合格的发酵产品进行储存,待后续加工或销售。
第三章发酵液预处理从微生物发液中提取发酵产品的第一步骤就是预处理,其目的的不仅在于分离菌体和其他悬浮液的性质,以利用于提取和精制后断各工序的顺利进行。
各种发酵产品,由于菌种不同和发酵液特性不同,其预处理方法的选择也有所不同。
大多数发酵产物存在于发酵液中,也有少数产物存在于菌体中,或发酵液和菌体中都有含有。
–对于胞外产物,经预处理应尽可能使目的产物转移到液相,然后经固液分离除去固相;–对于胞内产物,则首先收集菌体或细胞,经细胞破碎后,目的产物进入液相,随后再将细胞碎片分离。
第一节发酵液过滤特性改变微生物发酵液的特性可归纳为:发酵产物浓度较低,大多为1%~10%,悬浮液中大部分是水;悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大:固体粒子可压缩性大;液相粘度大,大多为非牛顿型流体;性质不稳定,随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解等作用的影响。
一、降低液体粘度降低液体粘度的常用方法有加水稀释法和加热法等。
采用加水稀释虽然降低液体粘度,但会增加悬浮液的体积,加大后继过程的处理任务。
若加水一倍,则稀释后液体的粘度必须下降50%以上才能有效提高过滤速率。
升高温度可有效降低液体粘度,提高过滤速率,如12ºBe 麦芽汁40℃时粘度为1.2×10-3Pa·s,升高到75℃其粘度可下降一半,过滤速率可加倍。
同时,在适当温度和受热时间可使蛋白质凝聚,形成较大颗粒的凝聚物,进一步改善了发酵液的过滤特性。
如链霉素发酵液,调酸至pH3.0后。
加热至70℃,维持半小时,液相粘度下降至1/6,过滤速率可增大10~100倍。
使用加热时必须严格控制加热温度与时间。
二、调整pH⏹pH值直接影响发酵液中某些物质有电离度和电荷性质,适当调节pH值可改善其过滤特性。
⏹对于氨基酸、蛋白质等两性物质,在酸性条件下带正电荷,在碱性条件下带负电荷,而在某一pH值下,净电荷为零,称为等电点下,两性物质的溶解度最小,此即为等电点沉淀法提取谷氨酸。