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, ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２３．０８．０３５高尔基体蛋白７３（ＧＰ７３）对慢性肝病的诊断价值马杨青１，范海纳１，孙 鑫１，２，刘成海１，２，３１上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所，上海２０１２０３；２上海市中医临床重点实验室，上海２０１２０３；３肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海２０１２０３通信作者：刘成海，ｃｈｅｎｇｈａｉｌｉｕ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００２－１６９６－６００８）摘要：早期诊断并准确评估肝脏炎症和纤维化程度对慢性肝病的治疗干预及预后尤为重要。
本文通过回顾高尔基体蛋白７３（ＧＰ７３）与肝癌、肝纤维化及肝脏炎症的诊断、预后方面的研究，归纳总结了目前ＧＰ７３对于慢性肝病的诊断效能。
分析表明除了与肝癌有关外，ＧＰ７３与肝纤维化程度及预后密切相关，也可较好地反映肝脏炎症损伤。
ＧＰ７３与其他血清标志物联合，可提高慢性肝病的无创诊断效能。
关键词：肝疾病；高尔基体基质蛋白质类；诊断基金项目：国家自然科学基金（８１７３０１０９，８２２７４３０５）；上海市临床重点专科建设项目（ｓｈｓｌｃｚｄｚｋ０１２０１）；上海市科学技术委员会启明星计划扬帆专项（２２ＹＦ１４４９３００）；上海中医药大学预算内项目（２０２１ＬＫ０８１）ＲｏｌｅｏｆＧｏｌｇｉｐｒｏｔｅｉｎ７３（ＧＰ７３）ｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓＭＡＹａｎｇｑｉｎｇ１，ＦＡＮＨａｉｎａ１，ＳＵＮＸｉｎ１，２，ＬＩＵＣｈｅｎｇｈａｉ１，２，３．（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｓ，ＳｈｕｇｕａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｈａｎｇｈａｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；３．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＬｉｖｅｒａｎｄＫｉｄｎｅｙＤｉｓｅａｓｅｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＵＣｈｅｎｇｈａｉ，ｃｈｅｎｇｈａｉｌｉｕ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ（００００－０００２－１６９６－６００８）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄａｃｃｕｒａｔｅａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｌｉｖｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄｆｉｂｒｏｓｉｓｉｓｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ．ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｅｆｆｉｃａｃｙｏｆＧｏｌｇｉｐｒｏｔｅｉｎ７３（ＧＰ７３）ｆｏｒｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓｂｙｒｅｖｉｅｗｉｎｇｒｅｌａｔｅｄｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｎＧＰ７３ａｎｄｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒ，ｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ，ａｎｄｌｉｖｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｓｔｈａｔｂｅｓｉｄｅｓｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒ，ＧＰ７３ｉｓｃｌｏｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅ ｇｒｅｅｏｆｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓａｎｄｃａｎｂｅｔｔｅｒｒｅｆｌｅｃｔｌｉｖｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄａｍａｇｅ．ＧＰ７３ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｏｔｈｅｒｓｅｒｕｍｍａｒｋｅｒｓｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｓ；ＧｏｌｇｉＭａｔｒｉｘＰｒｏｔｅｉｎｓ；ＤｉａｇｎｏｓｉｓＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１７３０１０９，８２２７４３０５）；ＳｈａｎｇｈａｉＫｅｙＳｐｅｃｉａｌｔｙｏｆＴｒａｄｉ ｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ（ｓｈｓｌｃｚｄｚｋ０１２０１）；ＳｈａｎｇｈａｉＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎ（２２ＹＦ１４４９３００）；ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴＣＭＢｕｄｇｅｔＰｒｏｊｅｃｔ（２０２１ＬＫ０８１） 各种原因引起的慢性肝病严重危害人类健康，因此早期、有效诊断评价肝脏炎症、肝纤维化，进行有效干预及监测可减少肝硬化并发症和肝细胞癌（ＨＣＣ）等终末期肝病的发生［１］。
高尔基蛋白73（GP73）是一种在肝脏细胞中表达的蛋白质，它在肝癌的发生和发展过程中起着重要的作用。
近年来，GP73已经成为了肝癌诊断和预后评估的重要标志物。
然而，对于GP73检测结果为69的情况，我们需要进行深入的分析和讨论。
首先，我们需要明确GP73的正常范围。
一般来说，正常人血清中的GP73浓度应该在10-50 ng/mL之间。
如果GP73检测结果为69，那么这个数值是在正常范围内的。
然而，这并不意味着我们可以完全排除肝癌的可能性。
因为GP73的升高并不总是与肝癌直接相关，它也可能是其他肝病或者非肝病疾病的表现。
其次，我们需要考虑患者的临床症状和其他检查结果。
如果患者有肝癌的高危因素，如长期饮酒、肝炎病毒感染、肝硬化等，那么即使GP73的数值在正常范围内，我们也需要密切关注其动态变化，并结合其他的肝癌标志物和影像学检查进行综合判断。
最后，我们需要强调的是，GP73虽然是一个有用的肝癌标志物，但它并不能替代其他的肝癌诊断方法。
对于疑似肝癌的患者，我们还需要通过肝功能测试、肝脏超声、CT或MRI等检查来进行确诊。
一种新的血清肝癌标志物——GP73肖潇【摘要】血清甲胎蛋白(AFP)检查是目前应用最广泛的肝癌肿瘤标志物,部分肝癌患者AFP检测结果呈阴性.学者们一直在寻找新的血清肝癌标志物,高尔基体蛋白73(GP73)是一种2型高尔基体膜蛋白.众多研究表明,GP73对肝癌诊断的敏感性和特异性均优于AFP,而核心岩藻糖化GP73则更为理想.因此,GP73与AFP和(或)其他肝癌标志物联合检测可能会大幅度提高早期肝癌的诊断率.%Serum alpha-fetoprotein( AFP )examination is the most widely used tumor marker, but some patients with liver cancer AFP test results were negative. Scholars have been looking for new serum tumor markers of liver cancer. The Golgi protein 73( GP73 )is a type 2 Golgi membrane protein, many studies have shown that GP73 sensitivity and specificity for diagnosis of hepatocarcinoma are better than AFP,while the core fucosylated GP73 is more ideal. So GP73 and AFP and/or other tumor markers combined detection may substantially improve the diagnostic rate of early hepatocarcinoma.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)020【总页数】3页(P3380-3382)【关键词】肝癌;血清肿瘤标志物;高尔基体蛋白73【作者】肖潇【作者单位】第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科,重庆,400042【正文语种】中文【中图分类】R446.61肝癌是全球常见的十种恶性肿瘤之一，全世界每年约有25万人死于肝癌，中国因肝癌死亡的人数占全球死亡人数的45%～50%［1］。
高尔基体蛋白73在肝脏疾病中的诊断价值一、GP73简介高尔基体蛋白73（GP73）是近年来发现的一种表达于上皮细胞高尔基体的跨膜蛋白。
又称高尔基膜蛋白Ⅰ或高尔基磷酸化蛋白2。
由于在聚丙烯酰胺凝胶电泳中它的相对分子量是7.3×104，所以被称为GP73。
GP73的生物学功能还不完全明了，很可能与高尔基复合体的结构、功能密切相关，包括胞内运输、蛋白修饰和信号转导等。
组织学研究发现，在正常肝脏组织，GP73主要由门静脉区的胆管上皮细胞表达，但在肝脏实质细胞中很少或无表达。
然而，在有腺病毒感染、HBV感染或肝癌时，胆管上皮细胞的GP73表达没有明显变化，但肝脏实质细胞中表达增高。
这可能是当疾病发生时，肝实质细胞发生了一些转化，改变了一些调控GP73表达的因子，研究这个调控机制将帮助理解肝脏疾病的发病机理。
二、GP73与肝炎自身免疫性肝炎、病毒性肝炎（HBV或HCV感染）时，GP73表达升高。
尤其是当有HBV或HCV感染时，肝实质细胞的GP73表达显著提高，而胆管细胞不变，提示肝炎病毒在细胞内活跃复制可能是诱发GP73表达的重要因素。
在急性肝炎时，GP73迅速上升，在病情缓解后又迅速下降。
因此，GP73能够反映肝脏炎症的活动度，亦可作为慢乙肝疾病进展、预后、转归的评估指标。
传统肝损害指标ALT具有很高的灵敏度，但人群的个体差异显著，影响因素众多，心、脑、肾等其他组织组织器官有炎症损伤时均可能有ALT的升高。
肝组织活检证实，部分患者即使ALT正常，也可能存在肝脏炎症。
已经出现了较严重的肝损伤，但ALT正常的HBV患者或携带者，需要及时发现，及时抗病毒治疗。
可以利用GP73与ALT联合检测，有效补充ALT检测的不足。
三、GP73与肝硬化肝硬化是弥漫性肝脏损伤的终末阶段表现，通常有两种发生机制：1，肝细胞再生和结节的增生。
2，纤维组织增生和纤维瘤形成、肝脏组织和血管的重建。
从肝炎到肝纤维化、肝硬化和肝癌是一个漫长且复杂的过程，在不同病因所致慢性肝病的进程中，血清GP73水平随肝纤维化进展和肝硬化的发生逐渐上升，相关性研究发现，血清GP73浓度变化与肝硬度值相关。
用于肝癌筛查的新的标志物：Meta-analysis Caroline D. M. Witjes1• Susanna M. van Aalten2•Ewout W. Steyerberg3• Gerard J. J. M. Borsboom3•Robert A. de Man4• Cornelis Verhoef5• Jan N. M. IJzermans21,2肝胆移植外科，伊拉斯谟大学医学中心，230,3015，荷兰鹿特丹，e-mail: c.witjes@erasmusmc.nl3公共卫生学系，伊拉斯谟大学医学中心，荷兰鹿特丹4肝消化内科，伊拉斯谟大学医学中心，荷兰鹿特丹5肿瘤外科，伊拉斯谟大学医学中心，荷兰鹿特丹引文HCC的发病率在许多国家呈上升的趋势［1］。
AFP和超声检查被广泛的应用于肝癌的筛查。
然而，当cut-off值定为20ng/mL时，AFP检测的敏感性只有60%；超声检查的敏感性只有65-80%，其特异性大于等于90%［2］。
由于缺乏有效的检查方法，因此有必要研究新的HCC的标志物。
一些研究已经报道能够检测HCC，包括DCP、PIVKAⅡ、AFP-L3、α-岩藻糖苷酶、GPC-3、HSP-70。
然而这些血清标志物的敏感性和特异性偏低，已经被证明不能满足筛查的需要。
WHO推荐的用于疾病有效筛查的一般标准为：疾病筛查应该体现死亡的主要原因、疾病的自然史、符合成本效益、筛查的方法应该被人们所接受。
另外，诊断和治疗的设备应该是可用的。
此外，在疾病的早期，检查结果可以改善疾病的治疗［2］。
HCC的筛查符合这些标准［1,3］。
为了确定HCC筛查最佳的方法，我们通过系统综述和Meta-analysis，讨论最可能成为HCC筛查的新的生物标志物。
材料和方法通过对PubMed、Embase和Web of Science数据库进行系统性检索，确定了2005年1月～2010年10月间发表的以尿液、血清或唾液中的HCC生物标志物的文章为研究重点。
在全球范围内,肝癌的死亡率位于人类恶性肿瘤的第3位[1]。
近数十年以来,其发病率呈上升趋势,严重危害着人类的生命健康[2]。
肝细胞癌(he-patocellular carcinoma,HCC)是肝癌最常见的组织收稿日期:2022-12-07;修回日期:2023-01-30;网络首发日期:2023-04-17基金项目:医学分子生物学国家重点实验室专项经费项目(2060204)作者简介:郭月(1998—),女,湖北荆门人,硕士研究生,主要从事GP73在肝脏疾病中的研究;郭月和刘梦媛对本文的贡献相同,为本文共同第一作者;*通信作者:邹飞(1965—),男,湖北监利人,副教授,主要从事免疫调节研究,E-mail:*******************。
DOI:10.16605/ki.1007-7847.2022.12.0237GP73及其相关miRNA 在肝癌中的研究进展郭月1,2,刘梦媛3,李博韬2,吴江锋2,4,马岚2,4,邹飞2*(1.三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室,中国湖北宜昌443002;2.三峡大学基础医学院,中国湖北宜昌443002;3.宜昌市夷陵医院,中国湖北宜昌443000;4.器官纤维化与药物靶向递送研究所,中国湖北宜昌443002)摘要:高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是位于顺式高尔基体膜上的糖基化跨膜蛋白,其在肿瘤的发展进程中具有重要作用,是肿瘤治疗的潜在靶标。
目前研究表明,GP73可作为辅助诊断肝细胞癌(hepatocellu-lar carcinoma,HCC)的血清学标志物。
随着GP73的深入研究,与GP73有关的微RNA (microRNA,miRNA)也逐渐被挖掘出来。
GP73相关miRNA 与多种肿瘤的发生、发展密切相关,其中miR-212、miR-27a 等miRNA 能抑制HCC 的侵袭及转移,GP73与miR-27b 、miR-493-5p 等能作为HCC 患者预后的生物标志物。
高尔基体蛋白73（GP73）在肿瘤诊断中的临床应用摘要】原发性肝癌是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一，在全世界范围内的发病率有逐年上升的趋势。
早期诊断对肝癌患者的预后至关重要。
对于肝癌的高危人群，现在最常用的监测手段是定期检测血浆中甲胎蛋白(AFP)水平和影像学检查如超声等。
然而，甲胎蛋白的敏感性和特异性都不令人满意。
近年来，蛋白组学技术的发展使得筛选新的肿瘤标志物成为可能，各种有希望的新的肿瘤标志物被相继发现，其中高尔基体蛋白73 (GP73)最有可能成为更好的诊断肝癌，尤其是早期肝癌的血清标志物。
在仅有的少数报道中，其敏感性可达69% ，特异性可达90% ，而其异构体敏感性和特异性可达90%和100%。
除此之外，新发现的肝癌患者血清中高表达的标志物有甲胎蛋白异质体(AFP2L3)、异常凝血酶原(DCP) 、α2L2岩藻糖苷酶(AFU)、磷脂酰基醇蛋白聚糖23 (GPC23)、肝细胞生长因子(HGF) 、转化生长因子β1 (TGFβ1)、血管内皮生长因子(VEGF)、粘液素1 (MUC21，KL21)等。
这些新的血清标志物，正在被各种临床研究进行检测，有希望改变肝癌早期诊断和治疗的现状。
我们正在进行GP73的大样本临床研究，取得初步结果。
肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)的增长速度之快已成为一个世界性难题，其发病率在全球位居第4位，总发患者数约56.4万[1]。
在我国，由于乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)携带者数量之庞大，与此相关的HCC患者已占世界的55%左右，其死亡率在恶性肿瘤中排第2位。
乙型肝炎、肝硬化及肝癌在医疗费用及社会负担中占有相当大的比重。
在过去相当长的时间里，早期诊断HCC主要是依靠影像学手段及血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)，但影像学检查对肿瘤体积较小者不易被发现;临床上最常用的AFP也因其敏感性(39%-64%)不高并不令人满意[2]。
OPEN血清GP73是慢性乙肝患者诊断和预后的标志物许正锯1, 刘立关1,潘兴南1 ,魏开鹏2, 魏梅娟2,刘立飞3 ,杨环文1 , 刘钎1(1临床肝病中心；2临床肝病中心实验室；3病理科，中国人民解放军第180医院，泉州，福建，362000)yi摘要谷丙转氨酶（ALT）是肝损伤最常用的标记物，但会有一定比例严重肝损伤的慢性乙肝病毒感染患者显示ALT水平正常。
高尔基体蛋白73(GP73)是一个能较好反应肝损伤的标志物。
本研究评估了GP73水平和肝脏疾病严重程度之间的关系, 通过监测慢性乙肝患者在接受恩替卡韦(ETV)治疗过程中GP73水平的变化，并研究血清GP73在慢性乙肝病毒感染患者中，作为一种新的肝损伤生物标志物潜在的诊断和预后价值。
本研究共纳入1150例慢性乙肝病毒感染患者，其中200例接受1年ETV治疗后，回顾性的纳入本研究。
通过免疫组织化学检测GP73在肝脏中的表达，酶联免疫法测定样品中单个或系列血清GP73的水平。
免疫组化分析表明，在慢性HBV感染中GP73含量从正常肝组织或轻度肝炎到重度肝炎再到肝硬化过程中逐渐升高。
血清GP73水平与慢性HBV感染疾病的严重程度正相关（r=0.58，P <0.001）。
在ALT正常，但存在肝脏炎症损伤和纤维化的患者中，GP73含量显著高于没有出现肝脏炎症损伤和纤维化的患者。
经过1年的ETV抗病毒治疗后，ALT正常的患者中，血清GP73的含量及其在肝脏组织中的表达下降。
因此，血清GP73水平与肝损伤的严重程度密切相关，因此GP73可能是一种新的有效的肝脏炎性损伤的生物标志物，并可能成为监测ALT正常的慢性HBV感染患者的预后水平。
引文：Zhengju Xu , Liguan Liu,Xingnan Pan, Kaipeng Wei, Meijuan Wei , Lifei Liu, Huanwen Yang, Qian Liu. Serum Golgi Protein 73 (GP73) is a Diagnostic and Prognostic Marker of Chronic HBV Liver Disease . Medicine, 2015, 94(12): e659. doi: 10.1097/MD.0000000000000659.收到日期2015年1月30日；接受日期2015年2月24日通讯作者：许正据，中国人民解放军第180医院临床肝病中心，该研究获得医院科技计划项目的经费支持（(11D3006)）E‑mail: h180@许正锯和潘兴南对于本文的贡献相当Medicine _ Volume 94, Number 12, March 2015 ∣1介绍慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共健康一个重大的挑战。
高尔基体蛋白73标准值全文共四篇示例，供您参考第一篇示例：高尔基体蛋白73（Golgi Protein 73，GP73）是一种位于高尔基体和内质网之间的膜蛋白，它在多种生理和病理条件下发挥重要作用。
GP73的标准值对于肝脏疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义。
本文将围绕GP73的标准值展开详尽的介绍，以期为读者提供详实的知识和资讯。
我们来介绍一下GP73的一般特征及其生理功能。
GP73是一种高度保守的蛋白质，广泛存在于多个组织和器官中，但其在肝脏中表达量最高。
GP73属于非酶性高尔基体膜蛋白，它参与了泛素化、泛扯化和囊泡转运等细胞生物学功能。
关于GP73的标准值，一般是通过血清或血浆中的浓度来进行检测。
目前临床上对于成年人而言，正常人群GP73的标准值一般在10-20 ng/ml之间。
而对于儿童而言，GP73的标准值可能会有所不同，需要根据年龄和性别的不同而有所调整。
那么，为什么要对GP73的标准值进行检测呢？一方面，GP73作为肝脏疾病的新的生物标志物，对于肝脏疾病的早期诊断和鉴别诊断有着非常重要的价值。
通过检测肝脏疾病患者血清中GP73的含量，可以及时发现肝炎、肝硬化、肝脏肿瘤等肝脏疾病的变化，为临床治疗提供了重要的依据。
对于肝脏移植术后的监测也需要通过检测GP73的标准值来判断肝脏功能的复原情况。
通过不同时间点的检测，可以了解肝脏移植患者的康复情况，是否出现了排斥反应或者肝脏功能障碍等问题。
近年来研究还发现GP73对于代谢性疾病、肿瘤等其他疾病也有一定的参考价值。
部分研究表明GP73与肥胖、糖尿病等代谢性疾病有一定的相关性，因此在未来可能对这些疾病的辅助诊断和治疗提供帮助。
需要注意的是，血清中的GP73标准值受到许多因素的影响，比如性别、年龄、季节、个体差异等都会对其标准值造成影响。
在进行检测时，需要综合考虑患者的整体情况，不能仅仅依赖于GP73的标准值来进行诊断。
GP73的标准值作为一种新的生物标志物，在肝脏疾病的早期诊断、肝脏移植后的康复监测以及其他疾病的辅助诊断中具有重要的临床应用价值。
收稿日期：2011-08-15修回日期：2011-10-20基金项目：国家科技部十一五“重大新药创制”科技重大专项资助项目（2009ZX09103-680）．作者简介：江均昌（1985－），女，生物化学与分子生物学硕士．通讯作者：周林福（1973－），男，副教授，硕士生导师，从事传染病学研究；Email ：239zlf@zju．edu．cn．http ：∥www．journals．zju．edu．cn /med DOI ：10．3785/j．issn．1008-9292．2012．02．017高尔基体驻膜糖蛋白73的研究进展及其与肝癌等疾病的联系江均昌，周林福综述（浙江大学医学院生物化学与遗传学系，浙江杭州310058）［摘要］高尔基体驻膜糖蛋白73（GP73）是定位于高尔基体的Ⅱ型跨膜蛋白，在肝癌组织中高表达，并分泌入血。
研究表明，GP73作为血清标志物检测肝癌的特异性和灵敏度均优于AFP 。
另外，GP73在前列腺肿瘤、肾脏肿瘤、肺癌、食道肿瘤、精原细胞瘤等疾病中的表达也有增高，因此，GP73也可能成为这些疾病辅助诊断的新型指标。
但是，目前GP73的生理功能和表达调控机制尚不清楚。
文中将从理化性质、细胞内分布、表达调节、与疾病相关性和临床应用等方面对GP73的迄今研究状况作一较为全面的综述。
［关键词］肝肿瘤/诊断；高尔基体；糖蛋白类/血液；肿瘤标记，生物学；高尔基体驻膜糖蛋白73；肝癌；血清肿瘤标志物［中图分类号］R 735．7［文献标志码］A［文章编号］1008-9292（2012）02-0215-07Advances on Golgi glycoprotein 73and its association with diseasesJIANG Jun-chang ZHOU Lin-fu （Department of Biochemistry and Genetics ，Zhejiang University School of Medicine ，Hangzhou 310058，China ）［Abstract ］Golgi glycoprotein 73（GP73）is a transmembrane glycoprotein residing in the cis-Golgi complex ，which is strongly expressed in hepatocellular carcinoma （HCC ）and secreted into the blood．It has been regarded as a promising serum tumor marker for the detection of HCC with higher sensitivity and specificity than AFP．GP73is also significantly elevated in kidney cancer ，prostate cancer ，lungadenocarcinoma ，esophageal cancer and seminomas ；therefore ，it would be helpful for the diagnosis of these diseases．However ，the function of GP73and the regulatory mechanism for its expression are unclear．In this article ，the physical-chemical properties ，the regulation of its expression ，the relation with various cancers and the clinical applications of GP73are reviewed．［Key words ］Liver neoplasms /diag ；Golgi apparatus ；Glycoproteins /blood ；Tumor markers ，biological ；Golgi glycoprotein 73；Hepatocellular carcinoma ；Serum tumor marker［J Zhejiang Univ （Medical Sci ），2012，41（2）：215-221．］第41卷第2期2012年浙江大学学报（医学版）JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY （MEDICAL SCIENCES ）Vol 41No 22012GP73是近年新发现的Ⅱ型高尔基体驻膜糖蛋白，与肝癌等肿瘤密切相关，可能发展成为一个新的血清肿瘤标志物，具有重要的临床价值。
上转发光法定量测定高尔基体蛋白73试剂盒评价周泽云【摘要】目的：考核高尔基体蛋白73(GP73)定量测定试剂盒(上转发光法)在临床使用中的价值、质量性能和操作的适用性.方法：用北京热景生物技术有限公司生产的GP73定量测定试剂盒(上转发光法)与北京热景生物技术有限公司GP73定量测定试剂盒(酶联免疫法)进行对比.通过试验结果评价GP73定量测定试剂盒(上转发光法)的诊断灵敏度及特异性.结果：阳性符合率为93.42%，阴性符合率为96.08%，总符合率为94.94%；考核试剂与对比试剂的一致性(K值)为0.896；考核试剂与对比试剂的相关系数( R值)分析为0.917.结论：考核试剂的检测质量达到目前临床使用试剂的质量.【期刊名称】《中国民康医学》【年(卷),期】2012(000)022【总页数】2页(P2800-2801)【关键词】上转发光;高尔基体蛋白73(GP73)【作者】周泽云【作者单位】吉林省肝胆病医院检验科,吉林长春 130062【正文语种】中文【中图分类】R446.6上转化化学发光(UPT)简称上转发光。
20世纪70年代，科学家们发现了一类可以反Stokes规则而发光的特殊材料，这种材料在红外区(波长780nm)被激发，可以发射波长远短于激发光的可见光(波长475～670nm)，即能力上传。
据此，人们将自然界发光现象又分为上转化化学发光法和下转化化学发光，常见的荧光法属于下转化化学发光。
上转发光法定量测定高尔基体蛋白73(GP73)是应用双抗体夹心免疫层析法。
试纸条上的NC膜上反应区(T线)用抗GP73抗体包被，质控区(C线)用羊抗鼠包被。
测试时，将标本和稀释液滴入试纸条加样处上，液体在毛细管效应下向上层析。
标本中的抗原在层析过程中先与UCP标记的GP73抗体结合，然后继续往上层析，随后结合物会被包被在T线上的GP73抗体结合，在T线位置会形成固相GP73抗体-抗原-标记GP73抗体-UCP颗粒复合物。
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（HumanHuman））高尔基体蛋白7373（（GP73GP73））ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被高尔基体蛋白73（GP73）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的高尔基体蛋白73（GP73）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1.5、3、6、12、24ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的OD 值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最低检测浓度小于0.1ng/mL。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURESPROCEDURES..Human GP73ELISA Kit instruction Intended useThis GP73ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of GP73in the sample, this GP73ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus GP73concentration.The concentration of GP73in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.S ample collection and storagesSerum-Use a serum separator tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorP recautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach roomtemperature(20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note:Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,1.5,3,6,12,24ng/ml Reagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.A ssay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from lightlight..7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.C alculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axisversus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is0.1ng/ml6.Standard curve Storage：2-8℃.validity：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!。
