叶绿体色素提取实验及作用
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生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的:1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法;2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。
实验原理:叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器,其中含有多种色素,包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
这些色素能够吸收不同波长的光线,并转化为化学能以参与光合作用。
本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法,将叶绿体中的色素提取出来,并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验步骤:1. 取一片鲜叶(最好选择深绿色的叶片)切碎,加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡,使叶绿体释放出色素。
注意保持容器密封以避免光照。
2. 将浸泡片刻半小时,使叶绿体彻底释放色素。
3. 将叶绿体悬液过滤,收集含有色素的过滤液。
4. 取一支色谱柱,填充色谱吸附剂(如硅胶),再用无色溶剂(如正己烷)预洗一次。
5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中,用无色溶剂洗脱,收集不同色素的洗脱液。
6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验结果:根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线,可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰,叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰,类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。
根据吸收光谱的不同,可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。
实验结论:通过该实验,我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素,并观察到不同色素的吸收光谱。
这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制,以及不同色素在光合作用中的作用。
同时,该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器,主要功能是光合作用。
叶绿体包括一系列色素,其中最重要的是叶绿素。
在本实验中,我们将提取和分离叶绿体色素,以便进一步分析其
结构和功能。
实验步骤:
1. 从新鲜的叶子中剪下片段,用无菌蒸馏水洗涤。
2. 用离心机将叶片离心,离心速度为1000 rpm,时间为5分钟。
3. 将上清液取出并过滤,过滤剂为细孔过滤纸。
5. 将上清液取出,并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。
7. 取出上清液,将其光度值调至0.4-0.6。
(400nm处)
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中,观察叶绿素的吸收曲线。
实验结果:
实验得出的叶绿体色素提取液中,吸收最强的波长为680nm和430nm。
这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。
实验得到的叶绿体色素移液后,需要经过离心的过程,这样可去除混杂物质,获得更
为纯净的叶绿素。
通过以上实验,我们成功地提取和分离了叶绿体色素。
叶绿素是植物所特有的,它起
到了光合作用的关键作用。
实验中的提取和分离方法,可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。
提取叶绿体实验报告提取叶绿体实验报告引言:叶绿体是植物细胞中的一种重要细胞器,它具有光合作用的功能,能够将光能转化为化学能,并产生氧气和有机物质。
为了更好地了解叶绿体的结构和功能,我们进行了提取叶绿体的实验。
本文将详细介绍实验的步骤、结果和意义。
材料与方法:1. 实验材料:新鲜的植物叶片、磨砂纸、叶绿体提取液、离心管、离心机、显微镜等。
2. 实验步骤:a. 将新鲜的植物叶片用磨砂纸轻轻研磨,使细胞破裂释放叶绿体。
b. 将研磨后的叶片组织与叶绿体提取液混合,使叶绿体与提取液充分接触。
c. 将混合液放入离心管中,进行离心,使叶绿体沉淀到离心管的底部。
d. 倒掉上清液,将离心管中的叶绿体沉淀用适量的缓冲液悬浮。
e. 用显微镜观察悬浮液中的叶绿体形态和数量。
结果与讨论:通过实验,我们成功地提取到了植物叶片中的叶绿体。
观察悬浮液下的显微镜图像,我们可以清晰地看到叶绿体的存在。
叶绿体呈现出绿色,具有典型的椭圆形状。
在不同植物种类中,叶绿体的数量和形态可能会有所不同。
叶绿体是植物细胞中光合作用的主要场所,它们通过光合作用将光能转化为化学能,合成有机物质,并释放出氧气。
叶绿体内含有丰富的叶绿素,这是一种能够吸收太阳光的色素。
通过叶绿体的提取,我们可以更好地了解叶绿体的结构和功能,进一步研究光合作用的机制。
叶绿体的提取过程中,研磨叶片是关键的一步。
研磨叶片可以使细胞破裂,释放出叶绿体。
在这个过程中,我们需要轻轻研磨叶片,以免过度破坏细胞结构。
此外,混合叶片组织与叶绿体提取液时,需要充分接触以促进叶绿体的释放。
离心是将叶绿体从混合液中分离出来的关键步骤,通过离心,叶绿体可以沉淀到离心管的底部。
最后,我们需要倒掉上清液,将叶绿体沉淀用缓冲液悬浮,以便进行后续的观察和实验。
提取叶绿体的实验不仅可以帮助我们更好地了解叶绿体的结构和功能,还可以用于研究光合作用的机制、光合色素的合成和叶绿体的生物学特性。
通过对不同植物种类中叶绿体数量和形态的观察,我们可以进一步研究植物的适应性和进化过程。
植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定引言:叶绿体是植物细胞中的一个重要细胞器,其中主要存在着叶绿素等色素,它们在光合作用中起着重要的作用。
研究叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定,对于了解光合作用的机理以及研究植物生理生化过程具有重要意义。
本实验旨在通过实验手段提取叶绿体色素,进行色素的分离、理化性质的研究和叶绿素含量的测定。
材料与方法:材料:菠菜叶片、研钵、磨杵、丙酮、乙醇、石油醚、叶绿素提取液、测色皿、高锰酸钾溶液、浓硫酸。
方法:1.取适量菠菜叶片放入研钵中,加入适量丙酮,用磨杵捣碎成糊状。
2.将捣碎的菠菜糊状物转移到玻璃漏斗中,用石油醚冲洗3次,使叶绿体附着物进一步析出。
3.将漏斗中的上清液收集,并加入适量乙醇,振摇混合,使叶绿素慢慢析出。
4.将释放出的叶绿体颗粒通过离心机离心沉淀10分钟,收集沉淀。
5.取收集到的叶绿体沉淀,加入适量叶绿素提取液,用乳钙酸钠解离剂进行叶绿素含量的测定。
6.将其中一部分叶绿体溶液加入高锰酸钾溶液,观察颜色变化。
7.将其余叶绿体溶液与浓硫酸混合,观察颜色变化。
结果与讨论:通过上述方法,我们成功地提取并分离出菠菜叶片中的叶绿体色素。
加入石油醚可以去除一部分杂质,使叶绿体进一步纯化。
加入乙醇可以使叶绿素从叶绿体中溶出。
通过离心沉淀,我们收集到了叶绿体的沉淀物。
叶绿体的提取液与高锰酸钾溶液反应后呈现蓝色或紫色,这是由于高锰酸钾通过氧化反应将一些具有现菌酮结构的物质氧化为合成叶绿素的前体物质所引起的。
这种反应也证实了叶绿体的存在。
叶绿体溶液与浓硫酸混合后呈现蓝绿色,这是由于浓硫酸通过剥离叶绿体周围的蛋白质和其他有机物质,将叶绿素分子释放出来,产生颜色变化。
叶绿素的含量测定是通过与乳钙酸钠解离剂反应来进行的。
乳钙酸钠解离剂能够与叶绿体中的叶绿素结合,并形成稳定的叶绿素-乳钙酸钠络合物。
这种络合物通过光密度的测定,可以根据比色法来测量叶绿素的含量。
一、实验目的1. 了解叶绿体在植物细胞中的分布和功能。
2. 掌握叶绿体提取的原理和方法。
3. 观察叶绿体的形态和结构。
二、实验原理叶绿体是植物细胞中进行光合作用的重要细胞器,含有多种色素,如叶绿素、类胡萝卜素等。
叶绿素在光合作用中起着关键作用,可以将光能转化为化学能。
本实验通过提取叶绿体,观察其形态和结构,以加深对叶绿体的认识。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶片、95%乙醇、碳酸钙、石英砂、剪刀、研钵、漏斗、滤纸、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子等。
2. 实验仪器:显微镜、天平、烧杯、酒精灯、加热器、烘箱等。
四、实验步骤1. 取新鲜菠菜叶片,用剪刀剪成碎片,放入研钵中。
2. 加入少量石英砂和碳酸钙粉,用研杵充分研磨,使叶片碎片充分破碎。
3. 向研钵中加入适量95%乙醇,继续研磨,使叶绿体充分溶解。
4. 将研磨好的混合物转移到漏斗中,用滤纸过滤,收集滤液。
5. 将滤液转移到烧杯中,用酒精灯加热,蒸发溶剂,使叶绿体浓缩。
6. 将浓缩后的叶绿体溶液涂在载玻片上,制成涂片。
7. 将涂片放入显微镜下观察,观察叶绿体的形态和结构。
五、实验结果与分析1. 叶绿体的形态和结构在显微镜下观察,可以看到叶绿体呈椭圆形或圆形,具有双层膜结构。
叶绿体内含有大量的叶绿素,使叶绿体呈现绿色。
2. 影响叶绿体提取的因素(1)研磨程度:研磨程度越高,叶绿体破碎越充分,提取效果越好。
(2)乙醇浓度:乙醇浓度越高,叶绿体溶解度越大,提取效果越好。
(3)碳酸钙和石英砂:碳酸钙和石英砂可以防止研磨过程中叶绿体结构的破坏。
六、实验结论通过本实验,我们成功提取了菠菜叶片中的叶绿体,并观察到了叶绿体的形态和结构。
实验结果表明,叶绿体是植物细胞中进行光合作用的重要细胞器,含有大量的叶绿素,使植物呈现绿色。
在提取叶绿体的过程中,要注意研磨程度、乙醇浓度等因素,以保证提取效果。
七、实验拓展1. 探究不同植物叶片中叶绿体的差异。
2. 研究叶绿体在光合作用中的作用机制。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的本次实验的主要目的是了解叶绿体中色素的提取和分离方法,掌握色素的分离技术,并了解不同色素对叶绿体的作用。
实验原理叶绿体是植物和藻类细胞中最重要的细胞器之一,也是进行光合作用的场所。
其中,叶绿素是其最主要的色素,在光合作用中起到吸收太阳能的作用。
叶绿体中还包含其他色素,如类胡萝卜素、花青素等,它们具有吸收不同波长的光线的能力。
叶绿体中色素的提取和分离主要利用其不同的亲水性和亲油性,通过不同的溶剂将其提取出来,并进行分离、纯化。
其中,有机溶剂如丙酮、乙醇等可以提取出叶绿素和类胡萝卜素等亲油性色素,而酸性溶液可以提取出卟啉类、铁类等亲水性色素。
实验步骤1.取适量菠菜叶,去掉梗部,用清水反复洗净,去除表面的灰尘。
2.将菠菜叶放入离心管中,加入约5毫升丙酮,使用手持式超声波仪器超声处理10分钟。
3.将超声处理后的菠菜混合物离心10分钟,待叶绿体沉淀下来。
4.取叶绿体沉淀,加入少量乙酸乙酯,经超声震荡3分钟。
5.将混合物离心10分钟,分离出上层的色素提取液,放置在离心管中。
6.加入冷水,将提取液分层,即可分离出不同色素。
7.将分离好的色素涂于色谱纸上,将色谱纸浸泡至溶液面之下,待上端溶液移动至色素液的1/2处时,取出晾干,即可得到不同色素的分离结果。
实验结果通过叶绿体中色素的提取和分离实验,我们成功地分离出了叶绿体中的色素,其中包括叶绿素、类胡萝卜素等。
在色谱纸上的分离结果如下:色素名称相对迁移率叶绿素0.48氧化型叶绿素0.39类胡萝卜素0.92实验分析在本次实验中,我们使用丙酮和乙酸乙酯等溶剂成功地提取了叶绿体中的色素,也尝试了不同溶剂对色素的亲水性和亲油性的作用。
通过色谱纸的分离结果,我们可以清晰地观察到各色素的迁移情况,进一步了解到不同色素在不同溶剂中的特点和性质。
实验总结叶绿体中色素的提取和分离是生物学实验中常见的实验之一,通过本次实验,我们加深了对叶绿体和其中色素的了解,掌握了相关的实验技术和方法。
实验3 叶绿体色素的提取、分离和含量的测定一、实验目的:1、掌握叶绿体色素的提取、分离和含量的测定的方法。
2、掌握分光光度计的应用。
二、实验原理:1.分光光度法测定叶绿素含量叶绿素不溶于水,溶于有机溶剂,可用多种有机溶剂,如丙酮、乙醇或二甲基亚砜等研磨提取或浸泡提取。
叶绿色素在特定提取溶液中对特定波长的光有最大吸收,用分光光度计测定在该波长下叶绿素溶液的吸光度(也称为光密度),再根据叶绿素在该波长下的吸收系数即可计算叶绿素含量。
根据比尔定律,利用叶绿素a和b吸收光谱的不同,测定各特定峰值波长下的光密度,再根据色素分子在该波长下的消光系数,计算出浓度. 叶绿素a的80%丙酮提取液的最大吸收峰为663nm,叶绿素b的吸收峰为645nm.这样,叶绿素a 和b在两种波长下浓度与光密度的关系可用下式表示:D663= 82.04 Ca + 9.27 Cb D645= 16.75 Ca + 45.60 Cb (单位:毫克/升)解得:CA = 12.7 D663 - 2.69 D645 CB = 22.9 D645 - 4.67 D663CT = CA + CB = 20.3 D645 + 8.04 D663 CK = 4.7D440 –0.27 C a+b 式中: CA、CB分别为叶绿素a和b的浓度, CT 为叶绿素总浓度,CK为类胡萝卜素浓度. 式中单位:毫克/升2.叶绿体色素的分离原理(纸层析法)它的原理是利用混合色素中各个成分物理、化学性质的差别,分别以不同程度分布于两相中(即固定相和流动相)。
由于它们以不同的速度移动,从而达到分离的目的。
三、材料用具及器材药品:(1)层析液配方:石油醚:乙醚:4:1(V/V)(2)天平、研钵、石英砂、碳酸钙、烧杯、量筒、滤纸、表面皿、剪刀、80%丙酮、25ml容量瓶、漏斗、滴管、比色皿、载玻片(3)菠菜叶子四、实验步骤:1. 分光光度法测定叶绿素含量取菠菜(或其他植物)叶子2g,洗净,擦干,剪碎,放在研钵中,加石英砂和碳酸钙少许,80%丙酮约2-3ml,研磨成匀浆,再加80%丙酮定容至25ml,用漏斗过滤,即为色素提取液。
叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定生命科学学院09生科基朱文杰实验目的:掌握提取和分离叶绿体色素的方法;掌握测定叶绿体色素含量的方法;熟悉叶绿体色素的理化性质及吸光特性;了解植物叶绿体色素组成及其与生境的相关性。
实验原理:叶绿体色素是吸收光能的重要物质,包括叶绿素和类胡萝卜。
利用不同色素的极性不同可以用色谱分离法将其分离。
不同的色素对光的吸收范围不同,因此我们也可以测量不同色素在不同波长光下的吸光值,即可用公式计算出其中各色素的含量。
光对叶绿体色素有破坏作用,将叶绿体色素暴露于强光下,可以发现叶绿素被破坏,溶液颜色变化。
叶绿体色素分子吸收光后变为激发态,如能量不被光合作用利用,激发态变回到基态,放出波长较长的红光。
叶绿素分子中卟啉环上的Mg处于不稳定的状态,可被H、Cu、Zn离子取代。
叶绿素不溶于水,能溶于有机溶剂,且各色素的脂溶性不同,故可利用乙醇或丙酮提取,用不同的有机溶剂萃取或用色谱法进行分离。
实验步骤:分别选取2g左右新鲜菠菜和0.2g左右玉米幼株的叶片剪碎放入研钵中。
在研钵中加入5ml丙酮以及少量的石英砂和氯化钙,充分研磨至无纤维装组织。
过滤并转移动至量筒中,再用3ml丙酮冲洗研钵,最后加入丙酮定容至10ml 作为备用提取液。
实验一:吸光值测定:取0.1 ml色素提取液,用80%丙酮稀释到3 ml ,测定663、645 nm 处的吸光值,根据公式计算叶绿素a、叶绿素b的含量。
Chla(μg /ml)=12.7 OD663-2.69OD645,Chlb(μg /ml)=22.9 OD645-4.68 OD663。
实验二:光破坏:取少量色素提取液并稀释3到5倍,分为2份,一份至于暗处,一份正对观察透射光,反身观察反射光,最后放在培养箱中的强光下放置2H。
实验三:铜带反应:取少量色素提取液少许于试管中,一滴一滴加浓盐酸,直至溶液颜色出现褐绿色。
然后加醋酸铜晶体少许,慢慢用水浴加热溶液,则又产生鲜亮的绿色。