北京艾德莱RNA提取产品选择指南110601修改
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产品储存产品可室温运输,收到后请于2~8℃贮存。
技术支持艾德科技(北京)有限公司研发部:e-mail: 电话:。
产品介绍本产品专为磁珠法核酸自动提取仪设计,适合从200 µl新鲜的或者是冷冻贮藏的抗凝全血中分离纯化总DNA。
试剂盒提供的试剂可预先分装到2.2 ml的96深孔板,配合磁珠法核酸自动化提取仪,只需在装有Buffer SL的孔中加入血样,即可由仪器自动化完成血液DNA 释放、吸附、洗涤及洗脱等一系列过程,最后获得的DNA溶解在Buffer TE中,并可立即用于各种分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.96深孔板(2.2 ml),如果用户需要预分装好试剂的96深孔板及磁力套,请另购产品序号为A-3012096的预分装磁珠法血液DNA试剂盒2.移液器吸头(为避免样品间的污染,请选用含有滤芯的移液器吸头)3.一次性手套及防护用品和纸巾4.磁珠法核酸自动化提取仪使用前准备1.在96深孔板第1列和第7列每孔加入600 µl Buffer SL;2.在96深孔板第2列和第8列每孔加入800 µl Buffer WA;3.在96深孔板第3列和第9列每孔加入900 µl Buffer WB;4.在96深孔板第4列和第10列每孔加入900 µl Buffer WC;5.在96深孔板第5列和第11列每孔加入900 µl Buffer MG;6.在96深孔板第6列和第12列每孔加入100 µl Buffer TE;操作步骤1.在已分装好试剂的96深孔板中的第1列和第7列各孔中加入200 µl抗凝全血,将96深孔板放入核酸自动化提取仪中。
2.按以下步骤设置核酸自动纯化仪中的程序:1)磁力棒深入到磁力套中,再插入第5列和第11列吸取磁珠,将磁珠转移到第1列和第7列各孔中,移出磁力棒。
2)用磁力套在第1列和第7列持续中速和快速间隔拍打混匀10分钟。
Illumina测序用SMARTer™超低量RNA 试剂盒使用说明书Cat. No. 634935PT5163-1 (PR0X3693)March 31 2011Illumina 测序用SMARTer™超低量RNA试剂盒目录I. 组份列表 (3)II. 附加推荐产品 (4)III. 介绍 (5)IV. SMARTer cDNA合成 (7)A. 预防污染的要求Requirements for Preventing Contamination (7)B. 一般要求 (7)C. 样本推荐 (8)D. 样本要求 (8)E. 操作: 第一链cDNA合成 (8)F. 操作: 使用SPRI Ampure Beads纯化第一链cDNA (10)G. 操作: LD PCR扩增双链(ds)cDNA (10)V. 扩增后cDNA的纯化&鉴定 (12)A. 操作: 使用SPRI Ampure Beads 纯化dscDNA (12)B. 使用Agilent 2100 生物分析仪鉴定cDNA (12)VI. Covaris剪切 (15)A. 操作: Covaris 剪切全长cDNA (15)VII. 附录A: PCR洁净间使用指南 (16)A. 设备指南 (16)B. 操作说明指南 (16)VIII. 附录B: 单细胞cDNA合成 (18)A. 操作: 筛选细胞培养基 (18)B. 细胞样本的准备 (19)IX. 附录C: PCR 体系的优化 (20)X. 附录D: 疑难解答指南 (21)XI. 参考文献 (22)图列表Figure 1. 操作流程. (5)Figure 2. SMARTer cDNA合成流程 (6)Figure 3. Agilent 2100生物分析仪电泳样本分析结果实例 (13)表格列表Table I: 样本准备指南 (9)Table II: 不同起始量样本PCR循环数选择指南 (10)Table III. 程序设置 (15)Table IV: 培养基准备指南 (18)Table V: 经过验证的培养基 (18)Table VI: SMARTer cDNA合成及扩增的疑难解答指南 (22)Illumina 测序用SMARTer™超低量RNA试剂盒I.组份列表Illumina 测序用SMARTer超低量RNA 试剂盒以下组份经精心设计并优化后共同用于此操作,切勿做任何替换。
RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒目录号:RN25目录编号包装单位RN2502 50次❖适用范围:适用于快速提取全血高纯度总RNA❖试剂盒组成、储存、稳定性:﹢试剂盒组成保存50次10X红细胞裂解液RLB 裂解液RL室温4℃避光25 ml50 ml去蛋白液RE 室温25 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA 室温50个收集管(2ml)室温50个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
裂解液RL可以常温运输,收到后4℃避光保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍:1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!2.所有离心步骤如未加说明,均在室温进行。
使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3.裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.考虑到环保问题,本试剂盒不含有实验室常用试剂氯仿,用户使用前需要自备氯仿。
5.常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。
好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带,分别为~5Kb(28S),~2Kb (18S),条带亮度比值约为2:1。
*仅用于科学研究,不用于诊断与治疗。
请随时跟我们索取并使用最新版本的说明书。
m 6A RNA 甲基化文库构建试剂盒(测序版)此品非常适合从广泛的物种比如从哺乳类动物,植物,真菌和细菌,不仅如此,还包括培养细胞与新鲜和冷冻的组织等感兴趣的样本中提取总RNA 来富集片段化的含有m6A 的RNA 。
整个实验时间不到6小时。
手动操作不到1小时。
目录号:A-P-9016(24次、12次)操作手册在您收到定购的产品时,请确认操作手册是配套的!同时,有翻译不妥的地方还请各位老师批评指正!反馈信箱:2021年11月,第1版,对应英文第20210915版艾德科技(北京)有限公司A&D TechnologyCorporation扫我收藏分享,还有机会拿红包哦!目录表目录表 (2)试剂盒组成 (3)运输和保存 (4)配套器材(自备) (4)重点提示 (4)说明 (5)一般特性 (5)产品简介 (6)原理/步骤 (7)用法 (8)操作手册为了得到最好的实验结果,在实验开始前,请通读这个操作手册。
(8)附录 (13)凝难解答 (13)定购信息 (14)推荐产品 (15)相关产品 (15)如何下单 (15)试剂盒组成内容A-P-9016-12(12次)A-P-9016-24(24次)保存条件WB(Wash Buffer)15ml30ml4°C CB(Capture Buffer)2ml4ml常温NDE(Nuclear Digestion Enhancer)150ul300ul常温CEM(Cleavage Enzyme Mix)*30ul60ul–20°C m6A Antibody(1mg/ml)*25ul50ul–20°C Non-Immune IgG(1mg/ml)*10ul20ul4°C PDB(Protein Digestion Buffer) 2.5ml5ml常温Proteinase K(10mg/ml)*50ul100ul4°C Affinity Beads*50ul100ul4°C RPS(RNA Puritication Solution)300ul600ul常温NA Binding Beads*30ul60ul4°C Elution Buffer1ml2ml常温内容A-P-9016-12(12次)A-P-9016-24(24次)保存条件5X Reaction Bufffer*100ul200ul–20°C RT Enzyme*13ul26ul–20°C Adaptor-A(10uM)*28ul56ul–20°C Reaction Enzyme Mix*25ul50ul–20°C Adaptor-B(10uM)*28ul56ul–20°C MQ Binding Beads* 1.8ml 3.6ml4°C 2X HiFi PCR Master Mix*160ul320ul–20°C Primer U(10uM)*15ul30ul–20°C Primer I(10uM)*15ul30ul–20°C 使用手册11常温运输和保存该试剂盒分二部分运输,第一部分是在室温环境下;第二部分需在4°C加冰袋运输。
『不同起始材料试剂用量及预期RNA 产率』 生物材料起始量 溶液 I溶液 II预期产量0.5-5 mg 150 μl 50 μl 0.5-30 μg 5-10 mg 300 μl 100 μl 2-60 μg 10-20 mg 600 μl 200 μl 4-120μg 25 mg750 μl 250 μl 12-250 μg 30 mg 900 μl 300 μl 14-300 μg 50 mg 1.5 ml 500 μl 25-500 μg 50-100 mg 3 ml 1 ml 25-1000 μg 100-200 mg 6 ml 2 ml 50-2000 μg 150 mg 4.5 ml 1.5 ml 75-1500 μg 动物组织250 mg 7.5 ml2.5 ml125-2500 μg1-5 mg 150 μl 50 μl 1-5 μg 5-10 mg300 μl 100 μl 5-20 μg 10-25 mg 750 μl 250 μl 20-50 μg 50-100 mg 3 ml 1 ml 50-200 μg 植物组织200 mg 6 ml2 ml200-400 μg1只(0.5-2 mg )100 μl 33 μl 0.5-3.5 μg 5-10 只300 μl 100 μl 11-17 μg 20 只(10-40 mg )750 μl 250 μl 30-44 μg 40-80 只 2.4 ml 800 μl 88-135 μg 果蝇100 只 3 ml1 ml50-350 μg2-5×105150 μl 50 μl 1-5 μg 1-2×106300 μl 100 μl 5-20 μg 3-5×106600 μl 200 μl 15-50 μg 6-9×106750 μl 250 μl 30-90 μg 1×107 1.5 ml 500 μl 50-100 μg 培养细胞3×1074.5 ml1.5 ml150-300 μg010-********/82894339 北京美莱博医学科技有限公司MyLab ®通用型RNA 快速提取试剂盒使用说明书 4产品编号:RP01-50RP01-100MyLab ®通用型RNA 快速提取试剂盒(适用于动物组织、植物组织、培养细胞、昆虫、分离的白细胞等)使用说明书北京美莱博医学科技有限公司2006年12月『规格』50/100T 。
6100植物总RNA提取中文操作手册Total RNA Isolation Chemistry从植物组织样本中提取总RNA包括4个步骤:从植株上采集适当的组织样本,比如100-200 mg叶片或者根尖等。
(可选)如果不能立即进行RNA提取,则将样本置于适当的温度下冰冻保存。
样本可以保存在2X Nucleic Acid Purification Lysis Solution中、液氮中或者干冰中。
为了操作方便,也可以在匀浆前对新鲜样本用液氮进行预处理。
样本粉碎、浸软、或者匀浆。
匀浆时可以不加缓冲液,也可以加Nucleic Acid Purification Lysis Solution。
从匀浆液中分离总RNA。
如果样本会堵住total RNA purification tray,可以在RNA提取前增加一步tissue pre-filter tray预过滤,也可以减少样本用量。
一、试剂准备使用等体积的无钙、镁离子的PBS(MLS公司产品)将2X Nucleic Acid Purification Lysis Solution稀释成1X,颠倒试管3-4次混匀。
二、[可选步骤]样本冻存样本可以冰冻保存在2X Nucleic Acid Purification Lysis Solution中;也可以直接保存在液氮或者干冰中。
2X Nucleic Acid Purification Lysis Solution是一种RNA稳定剂,如果在样本采集的当天或者第二天在此溶液中匀浆,匀浆液可以在4℃稳定保存24小时。
[可选步骤]样本预处理用液氮预处理新鲜的植物样本,可以方便匀浆。
预处理的方法是:取 0.1-3 g样本置于-80 ℃预冷的干净研钵中,加入5-20 mL液氮使样本冰透,然后让大部分液氮蒸发,剩余1-2 mL,用-80 ℃预冷的研杵将组织样本研成粉末,期间随时加入液氮以保证样本始终处于冰冻状态。
用-80 ℃预冷的抹刀或者铲子将粉末转移到灭菌的50 mL离心管中保存或者备用。
RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南准备试剂:氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)。
操作步骤:1. 匀浆处理a. 植物组织:以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.,大约100mg 叶片使用1 ml Trizol.b. 动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过Trizol体积的10%.c. 单层培养细胞.直接在培养板中加入Trizol裂解细胞,每10cm2面积加1ml Trizol.用取样器吹打几次.注意:Trizol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定.如果Trizol加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染.d.细胞悬液:离心取细胞,每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml Trizol。
加Trizol 前不要洗涤细胞,以免降解mRNA。
一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪处理。
e.血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10min,10 000rpm 离心1min。
弃上清,收集白细胞沉淀。
每1ml血液收集的白细胞沉淀中加入1ml Trizol。
2. 将匀浆样品在15-30℃放置5mim,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 可选步骤:4 ℃10 000rpm离心10min,取上清。
如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等,可离心去除。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA,上清中含有RNA。
处理脂肪组织样品时,上层是大量油脂,应除去。
取澄清的匀浆溶液进行下一步操作。
4. 每使用1ml Trizol加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈震荡15s,室温放置3min。
磁珠法总RNA提取试剂盒MagBeads Total RNA Extraction Kit【目录号】TRE-5010;TRE-5030;TRE-5100;【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃;其它组分室温;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2. 清洗液1使用前请按照瓶身标签描述加入异丙醇,稀释备用;3. 清洗液2使用前请按照瓶身标签描述加入无水乙醇,稀释备用;4. 建议使用新鲜或4℃存放少于3天样本进行提取,反复冻融导致核酸得量明显降低;5. 请仔细阅读本说明书,并严格按照操作步骤完成操作。
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒适用于从植物材料、动物组织、各种微生物、培养细胞等样本中提取总RNA。
试剂盒采用独特分离作用的纳米磁珠和缓冲液体系,磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对核酸具有极强的富集能力,当条件改变时可以可逆的释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
试剂盒经过磁珠与核酸结合、清洗、洗脱等步骤,最大限度的去除了蛋白质及其它杂质,所得RNA产物纯度优良,可直接应用于酶切、PCR、qPCR、文库构建、测序等各种下游分子生物学实验。
【试剂盒说明】仪器自动版英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、EP管离心机、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、EP管、无水乙醇、异丙醇以及氯仿、PBS溶液(1×)。
手动版水浴锅或金属浴、EP管离心机、涡旋振荡仪、EP管、EP管配套用磁力架、无水乙醇、异丙醇、氯仿、PBS溶液(1×)。
【手动版操作步骤】1. 样本前处理及裂解1)贴壁培养细胞倒弃培养液,用PBS溶液(1×)冲洗一次,按照每10cm2生长细胞中加入1mL的比例加入裂解液,轻微晃动使裂解液均匀分布于细胞表面,将内含细胞的裂解液转移至EP管中,涡旋振荡至无明显颗粒物,室温静置5min。
北京艾德莱生物RNA提取产品选择指南首先询问客户提取的大致种类,是动物组织细胞?植物?血液样品?真菌?细菌?病毒?酵母?不同的种类应该选择不同的产品。
动物组织细胞(1)RN01 TRIpure reagent,这个就是Invitrogen的TRIzol,我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。
(2)RN04 总RNA提取试剂盒。
这款就是TRIzol,只是把TRIzol配套使用的氯仿,异丙醇,70%乙醇,DEPC处理的水和配全了。
等于是TRIpure(RN01)加氯仿,异丙醇,70%乙醇,DEPC处理的水。
该款产品用的人很少,因为大部分实验室肯定是有这些常见的试剂的,不需要买公司的。
(3)RN03 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒。
这个等于是TRIzol加离心柱子(和天根的DP419完全一样),在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。
等于是TRIpure(RN01)加离心柱子。
(4)RN07 EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74104完全一样,它的优点在于不用苯酚,氯仿等毒性物质,速度最快,但是残留DNA可能稍多,必要时候还可能要用DNA酶消化。
(5)RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74134完全一样,是目前世界上最先进的试剂盒。
15分钟提取,不用苯酚,氯仿,也不残留DNA,不用DNA酶消化直接可以做荧光定量PCR,价格只有Qiagen同类产品的四分之一。
目前国内就我们一家能做,天根没有此产品。
天根的DP431理论上是对应这个产品的,但是天根的需要DNA酶消化,时间长,步骤繁琐,还容易降解RNA。
动物组织细胞RNA提取的总结:1.首先推荐就是RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
2.客户觉得RN28贵,或者客户习惯用天根的DP419就推RN03 (Trizol+离心柱,等于天根DP419)。
北京艾德莱生物RNA提取产品选择指南首先询问客户提取的大致种类,是动物组织细胞?植物?血液样品?真菌?细菌?病毒?酵母?不同的种类应该选择不同的产品。
动物组织细胞(1)RN01 TRIpure reagent,这个就是Invitrogen的TRIzol,我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。
(2)RN04 总RNA提取试剂盒。
这款就是TRIzol,只是把TRIzol配套使用的氯仿,异丙醇,70%乙醇,DEPC处理的水和配全了。
等于是TRIpure(RN01)加氯仿,异丙醇,70%乙醇,DEPC处理的水。
(3)RN03 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒。
这个等于是TRIzol加离心柱子,在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。
等于是TRIpure(RN01)加离心柱子。
(4)RN07 EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74104完全一样,它的优点在于不用苯酚,氯仿等毒性物质,速度最快,但是残留DNA可能稍多,必要时候还可能要用DNA酶消化。
(5)RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74134完全一样,是目前世界上最先进的试剂盒。
15分钟提取,不用苯酚,氯仿,也不残留DNA,不用DNA酶消化直接可以做荧光定量PCR,唯一缺点,就是好货不算便宜。
总结:首先推荐就是RN03 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒或者RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒这两款产品。
其它的随机应变。
根据客户需要来,客户觉得RN28贵,就推RN03,还觉得贵,就推RN01,就是想替换invitrogen的TRIzol,就推RN01,还想TRIzol 的基础上用离心柱子,更快更好,就推RN03,想替换Qiagen的74104,就推RN07,也可以建议我们有升级版本的Qiagen的74104,就是等于Qiagen的74134的更好的RN28,如果嫌RN28贵,就还是用RN07替换74104,但是一般能用Qiagen的客户,肯定能用得起更好的,就推荐RN28,这款等于Qiagen的74134,是目前最好的。
植物植物千变万化,种类繁多,非常复杂,世界上任何一家公司任何一种试剂盒也无法确保100%提取成功。
因此选择推荐植物RNA提取试剂盒必须多和客户,技术人员沟通。
A: TRIzol可以提取的植物样品首先询问客户的样品是否曾经用别的试剂或者试剂盒提取过的植物样品,TRIzol是否可以提取成功?如果TRIzol可以提取成功的样品:(1)首先有两种选择:第一是用我们的RN01 TRIpure reagent,这个就是Invitrogen的TRIzol,我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。
第二是用RN33 PLANTpure 通用植物总RNA快速提取试剂盒(普通植物组织细胞),这个试剂盒的原理,成分和RN03完全一样,也是TRIzol加离心柱子,在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。
等于是TRIpure(RN01)加离心柱子。
(2)然后根据客户的特殊具体需求比如想速度更快,操作更简单,还不想用TRIzol这种苯酚,氯仿毒性物质的客户还有两种选择:一种选择是RN09 EASYspin植物RNA提取试剂盒,这个盒子和Qiagen的74904完全一样,不用苯酚,氯仿,速度最快,操作最简单。
但是对部分植物样品来说,可能残留基因组DNA稍多,只有做了试验才知道客户的样品是不是残留DNA稍多,就是Qiagen也不能确保100%的样品没有残留DNA。
我们能确保的就是和Qiagen的效果一致。
实在有DNA残留的,就可能还要用DNA酶消化。
具体只能让客户自己权衡选择或者和艾德莱技术人员沟通了再选择。
另一种就是RN38 EASYspin Plus植物RNA提取试剂盒这个试剂盒是RN09的改进版本(Qiagen也没有这款,是艾德莱在Qiagen 基础上改进世界首创的),它使用基因组清除柱子的技术和配方在保持RN09不用苯酚,氯仿毒性物质,最简单,最快速的基础上消除了基因组DNA残留,一般肉眼不可见DNA残留。
注意:目前在我们测试的几种植物样品中均已经获得成功,使用RN09提取有残留DNA 的样品种类使用这款后,均无DNA残留。
但是,植物千变万化,我们还是不能给客户做100%保证(世界上也没有公司可以保证,我们已经是最好的)。
让客户自己权衡或者找艾德莱技术支持沟通后再选择。
B: TRIzol无法提取的植物样品如果客户说,他们曾经用过TRIzol,但是TRIzol无法提取成功,或者没有用过TRIzol,但是知道TRIzol无法提取成功的样品,那么RN01,和RN33是肯定不行了。
别无选择只有两个可能推荐:RN09和RN38,具体又分两种情况:(1)叶片、花瓣、花芽类比较叶片类的种类包括象葡萄叶子,杨树叶子,棉花叶片类类代谢产物多酚丰富的种类:叶片、花瓣类目前成功率基本为100%,这种情况推荐RN09,或者RN38都可以。
客户特别在意不要有DNA污染,用于做反转录荧光定量的可以推荐RN38尝试。
(2)如稻谷种子,百合鳞茎,葡萄果实,唐菖蒲的球茎等淀粉含量特别大,特别干种子一类:这一类很难提取,失败率高我们不能确保成功,只能客户根据需要尝试,不能确保成功。
必须找艾德莱技术支持沟通再选择。
总结:植物千变万化,如果TRIzol可以提取的种类,我们100%的确保我们RN01和RN33一定可以提取。
想要更快速简单,无毒性物质的,可以尝试RN09和RN38。
但是如果碰到TRIzol 不能提取的种类,只能尝试RN09和RN38,我们绝对不能告诉客户100%能成功。
尤其是淀粉含量特别丰富的土豆,块茎,稻谷种子,干种子之类的样品,失败率还是很高的。
必须多和艾德莱技术人员沟通。
我们能100%保证的就是RN09和RN38,一定只比Qiagen的同类产品74904好,Qiagen的74904能提取出来的样品种类,我们不能提取的,退货再赔偿1000元。
这个可以和客户保证。
(这还是我们保守的说法,因为象Qiagen 74904不能提取的冬青树,虎仗,黑加仑很多样品,我们RN09,RN38都可以提取,实际上RN09就是改进版的Qiagen的74904)。
注意:由于植物实在千变万化,RN09和RN38也不是说RN38效果一定好于RN09,所以,权衡利弊,在推荐RN09和RN38的时候,原则上先推荐RN09, 如果可以提取成功,但是残留DNA 多,这个时候可以再试试RN38,看是否能提高效果,消除DNA残留。
如果RN09根本无法提取(排除客户操作方面的原因)就不要尝试RN38了,因为RN38和RN09相比唯一的好处,就是部分用RN09提取残留DNA的植物种类用RN38提取”可能”不会残留DNA(不能确保100%成)。
如果RN09完全不能提取的植物种类,RN38也是肯定不能提取的,就没有必要再试RN38了。
客户部分成功样品列表(还在不断增长中):棉花、海棠、黑加仑、烟草、拟南芥、虎杖、大豆、草莓、冬青、月季、蔷薇、沙棘、冬枣、芦荟、仙人掌、报春花、水稻、玉米、唐菖蒲、樱桃、白玉兰、毛白杨、樱花、葡萄、百合花、紫菜、绿藻、香蕉、水仙花、青花菜、地被菊、苹果、梅花、番茄、石斛、毛桃、苎麻、榛子。
真菌样品选择是RN09 EASYspin植物RNA提取试剂盒,没错,真菌就是用RN09植物RNA提取的盒子来提取的。
这个盒子RN09和Qiagen的74904 RNeasy plant mini kit完全一样。
客户要搞不清楚就下原版qiagen的说明书看看就行了,确保RN09和Qiagen的74904一样。
下面是Qiagen网站的74904的介绍:/products/rnastabilizationpurification/rneasysystem/rneasyplan tmini.aspxRNeasy Plant Mini Kit从植物和真菌中纯化多达100 ug总RNA30分钟即可获得高品质的总RNA无需酚/氯仿抽提无需氯化铯梯度离心,无需氯化锂或乙醇沉淀出色的RNA回收率即用型RNA适合各种下游应用血液样品A: 无保护直接冻存血液(血液RNA保存的时候,一定要先处理了才保存,直接把抗凝血液冻到负80冰箱,RNA肯定降解,至少部分降解。
)提取冻存的血液RNA的时候,你没有太多选择,只有选择RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒,因为你不可以先融解冻血,然后再裂解红细胞,因为细胞冰冻后已经受损破裂,RNA酶释放出来了,这个时候,不能裂解红细胞再去折腾了,必须使用可以直接裂解全血的裂解液,乘RNA酶还没有完全降解RNA的时候,就抑制住RNA酶,然后往下面提取。
B: 新鲜的血液(3)可以选择RN25 RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒,这个原理就是先红细胞裂解液裂解红细胞得到白细胞,然后Trizol(TRIpure)裂解白细胞,最后离心柱子漂洗。
(4)也可以用RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒。
(5)RN06 EASYspin 全血RNA快速提取,这款和Qiagen的qiaamp blood RNA KIT一样,优点是不用苯酚,氯仿(trizol)毒性物质。
缺点是残留DNA多,还要加DNA酶消化,如果RNA做荧光定量PCR,不推荐这款。
(6)最后,你经费特别紧张,也可以选择RN23的不用离心柱的版本。
RN02 TRIpure LS Reagent,LS就是liquid sample的意思,液体样品RNA提取试剂,就是专门提取液体样品的TRIzol 版本。
这个缺点就是不用离心柱子纯度差一点(当然一般不影响试验结果),繁琐一点,对操作技术的要求高一点,样品量太小也不适合。
总结:如果是新鲜血样品,首先推荐RN25 RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒或者RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒;如果你是冰冻血,别无选择,只有推荐RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒;需要处理,运输,保存血液样品后再提取也是推荐RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒。
酵母样品RN10 EASYspin酵母RNA快速提取试剂盒,不用苯酚,氯仿毒性物质,快速简单。
细菌样品RN08 EASYspin酵母RNA快速提取试剂盒,不用苯酚,氯仿毒性物质,快速简单。
病毒样品(从血浆,血清,体液等无细胞体系)RN27 病毒RNA快速提取试剂盒从同一个样品里面同时提取RNA、DNARN29 ALLprep 组织细胞RNA/DNA分提试剂盒。