免疫印迹法检测儿童幽门螺杆菌感染及其分型
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幽门螺杆菌感染诊断方法评价一、Hp感染主要诊断方法Hp感染的诊断有多种较为可靠的方法,可从检测原理、检测意义以及对人体有无创伤等多角度进行各种不同分类。
一般依据对人体有无创伤分为侵入性和非侵入性诊断方法。
侵入性诊断方法主要是依赖胃镜活检的方法,包括:快速尿素酶试验(RUT)、胃黏膜直接涂片革兰染色镜检、胃黏膜组织切片染色镜检、Hp培养、Hp基因检测方法(如PCR、寡核苷酸探针杂交等);但活检钳消毒不严格可造成交叉污染。
而非侵入性检测方法主要是指不需要内镜检查的方法,主要包括:13C或14C 尿素呼气试验(UBT)、15N尿氨排泄试验、粪便Hp 抗原检测、Hp抗体检测;该类方法无创,病人依从性好。
二、Hp感染主要诊断方法的评价1.Hp培养:Hp是对营养要求很高的微需氧细菌,如果Hp培养条件合适,即使很少的Hp也可获得阳性的结果,但一般需3~5d。
Hp培养可形成较典型的针尖样(约0.1~1mm)透明或半透明湿润的菌落,涂片暗视野观察可见典型的弯曲样杆菌,可有弱动力,培养时间长易发生球形变,为革兰染色阴性的易球形变的弯曲形杆菌,菌落尿素酶试验为阳性。
海尔曼螺杆菌(Helicobacter heilmannii,Hh)感染是一种产尿素酶的螺旋形细菌,目前一般不能培养,故RUT或UBT阳性,但培养阴性。
不规则治疗后、胆汁反流性胃炎、萎缩性胃炎或胃癌患者因胃内环境不适合Hp定植,可因胃黏膜内Hp量很少出现RUT或UBT阴性但培养可为阳性。
该方法是Hp感染诊断的“金标准”,同时为抗原制备、药敏试验、分型和致病性等研究提供研究材料,在临床特别是基层医院不易推广,多用于科研,及用于常规Hp根除失败需行药敏试验以及不规则治疗后,胆汁反流性胃炎和萎缩性胃炎者。
2.涂片革兰染色镜检:属简单的形态学检测方法。
将每一标本胃黏膜表面在洁净玻片上涂抹成约5 mm×10 mm 大小(每块玻片可涂3~5个标本),凉干或火焰固定后行革兰染色,观察约20个油镜视野,Hp或Hh形态典型无变异,一般最快约15 min出结果。
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2016, 6(4), 191-196Published Online December 2016 in Hans. /journal/acm /10.12677/acm.2016.64036文章引用: 柳晖, 白建文. 免疫印迹法测定健康体检人群幽门螺旋杆菌抗体及毒性分型结果分析[J]. 临床医学进展,Using Western Blod Assay to Analyze H. pylori Antibody and Toxicity Typing of Health Check-Up GroupHui Liu, Jianwen BaiDepartment of Physical Examination, Shanghai East Hospital, Tongji University School of Medicine, ShanghaiReceived: Nov. 15th , 2016; accepted: Dec. 16th , 2016; published: Dec. 19th, 2016Copyright © 2016 by authors and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY)./licenses/by/4.0/AbstractObjective: To analyze the infection types of Helicobacter pylori in different age groups from December 2014 to December 2012, i.e. antibodies and characteristics of toxicity distribution after infection. Me-thods: We use Western blotting method to detect and classify the immunophenotype of serum of physical examination population. Age is used as the statistical unit, results are tested and analyzed by χ2, and P < 0.05 means that the difference has statistical sense. Results: The positive rate of type II Hp infection of A urease or/and urease B for the check-up was 33.27% (5674/17,052), and age distribu-tion ranging from 30 to 69 enjoys the highest positive rate; the positive rate of type I Hp infection of cytotoxin A or/and vacuolate cytotoxin A was 10.58% (1804/17,052), and age ranging from 30 - 49 enjoys the highest positive rate. In different age groups of I and II, there exist differences (P < 0.05): low age group (18 - 30 years old) and old age group (>70 years) have lower possibilities to infect Hp. Conclusion: Among physical examination population, the rate of Hp infection and the immune typing results after infection, compared with clinical cases, both have some differences. Hp infection, as well as immune typing, exists special distribution characteristics among physical examination population.KeywordsHelicobacter pylori , Health Check-Up Group, Immune Phenotype, Immune Typing免疫印迹法测定健康体检人群幽门螺旋杆菌 抗体及毒性分型结果分析柳 晖,白建文柳晖,白建文同济大学医学院附属上海市东方医院体检科,上海收稿日期:2016年11月15日;录用日期:2016年12月16日;发布日期:2016年12月19日摘要目的:本文回顾性分析2012年12月至2014年12月健康体检人群不同年龄段幽门螺旋杆菌感染类型的情况,即感染后产生的抗体及毒性的分布特征。
·综述·幽门螺杆菌及其分型与消化道疾病关系的研究进展王芯郑世勤付青海何旭东【摘要】幽门螺杆菌(Hp)是国际公认的Ⅰ类致癌物,研究表明Hp感染与胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种消化道疾病有关。
Hp的主要毒力因子是细胞毒素相关蛋白A(CagA)和空泡细胞毒素A(V acA),依据基因表达的不同可将Hp分为Ⅰ型和Ⅱ型。
Hp分型与多种疾病进展有关,对其进行基因型检测有助于精准诊疗。
该文就Hp及其分型与消化道疾病关系的研究进展作一综述,以期为临床诊疗提供参考。
【关键词】幽门螺杆菌;幽门螺杆菌分型;消化道疾病DOI: 10. 3969/j. issn. 1673-534X. 2023. 06. 003幽门螺杆菌(Hp)是一种存在于人体胃黏膜的微需氧革兰阴性菌,有较强的传染性和较高的感染率[1-2]。
据研究报道,全球范围内的Hp感染率约为50%,中国的Hp感染率为40%~70%,WHO 已将其列为Ⅰ类致癌物[3]。
Hp的主要毒力因子是细胞毒素相关蛋白A (CagA)和空泡细胞毒素A(VacA),据此可分为HpⅠ型[CagA和(或)VacA阳性]和HpⅡ型(CagA 和VacA均阴性)[4]。
王菲等[5]的研究表明,Hp毒力的差异可能是导致Hp感染者发病和出现临床症状的重要原因。
刘卫东等[6]发现HpⅠ型的毒力较强,有诱发恶变风险,HpⅡ型则可引起炎症性改变。
本文就Hp及其分型与消化道疾病关系的研究进展作一综述,以期为疾病诊治提供参考。
1 Hp的概述Hp经口进入机体胃内,一部分可被胃酸杀灭,另一部分则可利用其鞭毛穿过黏液层定植于胃窦黏膜表面,通常不侵入胃腺和固有层内。
Hp能产生CagA、VacA、血型抗原结合黏附素(BabA)、上皮接触毒性蛋白(IceA)、十二指肠溃疡诱导因子(DupA)和尿素酶(Ure)等多种直接或间接参与Hp致病过程的毒力因子[7]。
Hp分泌的CagA和VacA等毒力因子可直接损伤机体胃黏膜;此外,基金项目:湖北省卫生健康委指导性项目(WJ2021F048)作者单位:442000 湖北十堰,湖北医药学院附属国药东风总医院消化内科通信作者:何旭东,Email:*****************Hp产生的氨可导致黏膜细胞损伤,促进炎症介质释放,且Hp菌体细胞壁的Lewis X和Lewis Y抗原可引发自身免疫反应,进一步加重机体的损伤[8]。
两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体及其分型试剂的敏感性和特异性,从而判断其在临床诊断中的应用价值。
方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)检测幽门螺杆菌抗体及其分型(分为CagA、VacA和Urease),共检测血清476份,检测结果与对比试剂不同的标本用第三方经SFDA认证的试剂进行复核,对于Urease不符合的病例,采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒(胶体金法)进行检测,对于CagA和VacA不一致的标本,则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。
结果南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌抗体及其分型试剂CagA阳性符合率94.5%,阴性符合率96.5%,总符合率95.8%(P>0.05);Urease阳性符合率95.1%,阴性符合率92.7%,总符合率95.4%(P>0.05);VacA阳性符合率91.6%,阴性符合率97.1%,总符合率95.2%(P>0.05);两种方法结果经统计学检验差异无统计学意义。
结论经以上结果的分析,本次临床试验的有效病例476例,大渊Hp 分型检测试剂盒(蛋白芯片法)与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)的一致率均在90%以上,产品质量达到临床使用要求。
标签:幽门螺杆菌抗体;分型;蛋白芯片法;免疫印迹法幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)是一种革兰氏阴性杆菌,是能够在人的胃中生存的唯一微生物种类。
幽门螺旋杆菌外形为S形或弧形弯曲,细菌可以穿过胃黏膜而定居至胃上皮细胞,又能产生大量尿素酶,分解尿素在菌体周围形成一股碱性的“氨云”,可以抵抗胃中的酸性环境,免受胃酸杀死。
1 材料与方法1.1 研究对象随机选取2013年1月~2013年2月本院门诊及住院患者476例。
免疫印迹法检测幽门螺杆菌及其分型的意义的开题报告一、研究背景和意义:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种革兰阴性杆菌,它生长在人体胃黏膜表层,是人类常见的胃肠疾病的一种重要致病菌。
据统计,全球约有一半以上的人群感染Hp,而我国感染率更高,据报道,我国家庭感染率约为70%以上。
Hp感染可导致胃炎、消化性溃疡、胃癌等疾病,Hp感染与胃癌的关系已成为世界上公认的医学事实。
因此,对Hp 的快速检测和分型具有重要的临床意义。
幽门螺杆菌的分型主要有两种,即根据细菌的 Virulence factor cagA 基因分型和 vacA 基因分型。
cagA 是Hp独有的基因,在Hp感染期间,cagA的表达会导致上皮细胞炎症反应并使其代谢紊乱,而vacA是编码Hp分泌毒素的基因之一,具有毒性和免疫学效应。
cagA 阳性和 vacA s1 型菌株与 Hp 感染相关性最高,引起患者严重胃病的风险最高。
因此,为了准确、快速地检测和分型Hp,研究实验室常用的技术——免疫印迹法在Hp的检测和分型中的应用,具有重要的临床意义。
二、研究内容和方法:本研究将采用免疫印迹法来检测 Hp 的存在以及分型。
具体研究内容包括:1. 建立免疫印迹法检测 Hp 存在的适宜条件2. 用免疫印迹法检测 Hp 的分型(cagA、vacA s1/s2)并比较其结果与 PCR 实验结果的一致性3. 分析免疫印迹法检测 Hp 存在及分型与患者临床病情的相关性,探讨其临床应用前景。
研究方法:选取 Hp 标准菌株和 50 份临床患者样本,采用免疫印迹法检测 Hp 的存在及分型,下一步将与 PCR 实验结果进行比对,同时记录患者的临床资料,在对免疫印迹法和 PCR 检测的结果进行数据分析后,探讨免疫印迹法在 Hp 检测和分型中的应用。
三、预期效果:本研究采用免疫印迹法检测 Hp 及其分型的方法,具有操作简单、结果准确、敏感度高、特异性强等优点,是一种可靠的 Hp 检测方法。
HP抗体免疫印迹法分型对胃肠道疾病的诊断价值发表时间:2016-05-12T15:11:39.770Z 来源:《医药前沿》2016年1月第1期作者:袁雪菲韩娟邵迎春杨慧程云飞孟艳任传路[导读] 解放军第100医院检验科免疫印迹法可以作为检测幽门螺杆菌的初筛方法。
(解放军第100医院检验科江苏苏州 215007)【摘要】目的:用免疫印迹法对幽门螺杆菌抗体(Helicobacter Pylori,Hp)分型(Ⅰ型和Ⅱ型)的结果进行比较分析。
方法:搜集我院100例被诊断为胃肠道不适(包括慢性胃炎,胃溃疡,胃癌等)患者和100例无症状的健康体检者血清,采用Hp分型检测试剂盒对幽门螺杆菌抗体Ⅰ型和Ⅱ型进行统计结果:被诊断为胃肠道不适患者HpⅠ型抗体阳性率明显高于健康体检者(P<0.01),胃肠道疾病患者HPⅡ型抗体阳性率低于健康体检者阳性率(P<0.05) 结论:免疫印迹法可以作为检测幽门螺杆菌的初筛方法,并且HpⅠ型(CagA\VacA)比HpⅡ(UreB\UreA)型对胃肠道疾病的诊断和治疗具有更高的临床价值。
【关键词】免疫印迹法;幽门螺杆菌;胃肠道疾病【中图分类号】R573 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)01-0188-02The value of immunoblotting in typing Helicobacter Pylori antibody for theDiagnosis of Gastrointestinal DiseasesYuan Xuefei,HangJuan, Shao Yingchun, Yang Hu,Cheng Yunfei, Meng Yan, Ren Chuanlu*Depart. of Lab. Of No.100 hospital,Suzhou,215007,China【Abstract】Objective To analyze and compare the type(typeⅠand type Ⅱ) of Helicobacter pylori antibody(Hp) by immunoblotting method.Methods 100 patients diagnosed as gastrointestinal discomfort(chronic gastritis, gastric ulcer, gastric cancer and so on)and 100 asymptomatic healthy people were selceted,using the detection kit for typing Hp antibody of type Ⅰ and type Ⅱ.Results Diagnosed with gastrointestinal discomfort in patients with type Ⅰantibody positive rate is more higher than healthy subjects (P<0.01). The positive rate of type Ⅱantibody in patients with gastrointestinal diseases is lower than in healthy persons(p<0.05) Conclusion Immunoblotting method can be used as a screening method in typing detection of Hp infection. Hp typeⅠ(CagA\VacA)has higher clinical value in the diagnosis and treatment of gastrointestinal diseases than type Ⅱ(UreB\UreA).【Key words】Immunoblotting; Helicobacter pylori; Gastrointestinal diseases幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎,消化性溃疡以及胃癌等胃肠道疾病的重要致病因子[1 -2]。
2021年8月 第15期影像学及诊断检验抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值李春鸿,林养,吴春芳,杨康土湛江市第四人民医院,广东 湛江 524008【摘要】目的:探讨抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值。
方法:选取健康体检者200名,使用免疫印迹法进行幽门螺杆菌抗体分型检测,根据抗体分型分为I型(98例)和II型(102例),记录两组患者的幽门螺杆菌感染情况。
结果:①200名体检者中共发现幽门螺杆菌感染140例,幽门螺杆菌感染率为70.0%。
其中I型组感染84例,感染率为42.0%;感染抗体分型主要是细胞毒素、空泡毒素、尿素酶A、尿素酶B,均为阳性20例,占23.8%;细胞毒素、尿素酶B阳性10例,占11.9%;II型组感染56例,感染率为28.0%,尿素酶B为阳性,细胞毒素、空泡毒素、尿素酶A为阴性最为常见,10例,占17.9%,其次为尿素酶A为阳性、细胞毒素、空泡毒素、尿素酶B为阴性,3例,占5.4%,尿素酶A与尿素酶B阳性、细胞毒素、空泡毒素为阴性,3例,占5.4%。
②幽门螺杆菌抗体分型I型患者呼气实验阳性率52.4%,显著高于抗体分型II型患者呼气实验阳性率10.7%,P<0.05。
结论:抗体分型检测有助于诊断幽门螺杆菌感染,提高诊断水平,值得临床推广。
【关键词】抗体分型检测;幽门螺杆菌;感染[中图分类号]R57 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2021)09-0196-02幽门螺杆菌是寄生在人体胃黏膜表层的病原菌,其不仅是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病的重要诱因,而且与胃癌的发生、发展也有直接关系[1]。
本文对抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值进行了探讨,现报道如下:1 资料与方法1.1一般资料 选取2019年1月~2019年12月的健康体检者200名,其中,男性122例,女性78例,年龄在18~82岁之间,平均45.9±5.8岁。