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第一章1．发酵工程：是指利用微生物的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需产品过程的理论和工程技术体系，是生物工程与生物技术学科的重要组成部分。
该技术体系包括菌种选育和保藏、菌种的扩大生产、微生物代谢产物的发酵生产和分离纯化制备，同时也包括微生物生理功能的工业化利用等。
2.发酵工业的范围：微生物菌体酶制剂代谢产物生物转化3.工业发酵的类型：按微生物对氧的需求分为：需氧发酵、厌氧发酵、兼性厌氧发酵按培养基物理性状分为：液体发酵、固体发酵4.发酵生产工艺流程：1）用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制；2）培养基、发酵罐及其附属设备的消毒灭菌；3）扩大培养出有活性的适量纯种，以一定比例接种入发酵罐中；4）控制最适发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物；5）将产物提取并精制，以得到合格的产品；6）回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。
第二章1.发酵工业常用微生物可分为：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌四大类。
2.菌种分离筛选的步骤：样品采集→样品的预处理→目的菌富集培养→菌种初筛→菌种复筛→菌种发酵性能鉴定→菌种保藏3.初级代谢：微生物产生的对自身生长和繁殖必需的物质，如：蛋白质、核酸、多糖、脂类。
次级代谢：对自身生长和繁殖没有影响的物质，如：抗生素、生物碱、色素、毒素等。
4.代谢工程育种：通过特定突变型的选育，达到改变代谢通路、降低支路代谢终产物的生产或切断支路代谢途径及提高细胞膜的透性，使代谢流向目的产物积累的方向进行。
组成型突变株：指操纵子或调节基因突变引起酶合成诱导机制失灵，菌株不经诱导也能合成酶，或不受终产物阻遏的调节突变型，称为组成型突变株。
5.工业上常用的菌种保藏方法？①斜面低温保藏法；③矿油封藏法；④冷冻真空干燥法；⑤液氮超低温保藏法第三章发酵工业上常用的氮源：氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。
常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。
1、无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。
一．名词解释1.前体：某些化合物被加入培养基后，能够直接在生物合成过程中结合到产物分子中去，而自身的结构并未发生太大变化，却能提高产物的产量，这类小分子物质被称为前体。
如在青霉素的发酵生产中，苯乙胺及其衍生物和一些脂肪酸的前体可以被优先结合到青霉素分子中去，它们是青霉素分子的组成部分。
并且加入的这类分子不同，除可以提高产量外，还可以形成不同的青霉素。
2.聚合度：衡量聚合物分子大小的指标。
以重复单元数为基准，即聚合物大分子链上所含重复单元数目的平均值，以n表示;以结构单元数为基准，即聚合物大分子链上所含单个结构单元数目。
由于高聚物大多是不同分子量的同系物的混合物，所以高聚物的聚合度是指其平均聚合度。
3.增效反馈调节：又称合作反馈抑制，在分支代谢途径中，当两个分支的末端产物同时存在时，反馈抑制明显强于只有一种末端产物存在时的作用。
也就是1+1>2的效果。
4.共同中间体：是指既是生产初级代谢产物的中间体也是生产次级代谢产物的中间体。
5.分批发酵：又称分批培养，即在一个密闭系统内一次性投入有限数量的营养物进行培养的方法。
在以后微生物的整个生长繁殖过程中，除加氧气、消泡剂及控制pH值外，不再加入任何其他物质，因此这是一种非恒态的培养方法。
6.倒种法：种子罐数量较少，当菌种不够对多个发酵罐接种使用时，一个发酵罐加入全部菌种培养后，一罐分两罐，再补加培养基进行发酵。
7.临界氧浓度：是指不影响微生物呼吸的最低溶氧浓度，和菌种的种类、大小、生长状态等有关。
8.半合成抗生素：一部是微生物合成，另一部分是用化学方法或生物方法进行修饰而成的衍生物。
9.化学耗氧量：又称化学需氧量，简称COD。
是指在一定条件下，水体中存在的能被一定的氧化剂（如高锰酸钾和重铬酸钾）所氧化还原性物质的量，通常用mg/L来表示。
COD是表示水体有机污染的一项重要指标，能够反应水体的污染程度。
化学耗氧量越大，说明水体受有机物的污染越严重。
10.抗生素的效价单位：指每毫升或每毫克中所含某种抗生素的有效成分的多少，其有三种表示方法：一是稀释单位，是将抗生素配成溶液，逐步进行稀释，以抑制某一标准菌株生长发育的最高稀释度（即最小剂量）作为效价单位；二是重量单位，是以抗生素的有效成分（即生理活性部分）的重量作为抗生素的效价单位，即1微克作为一个效价单位；三是特殊单位，某些抗生如青霉素G钠盐1毫克定为1667单位，另外，为了生产科研的方便而规定的，链霉素、土霉素等其效价基准都是以1毫克作1000单位计算。
第五章培养基及设备的灭菌第一节培养基灭菌的目的、要求和方法一、定义1，培养基灭菌的定义是指从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子，或从中将其除去。
工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。
2，灭菌与消毒的区别灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。
二、培养基灭菌的目的1，在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力；在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主；杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难；杂菌会降解目的产物；杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。
2，工业上具体措施包括（1）使用的培养基和设备须经灭菌；（2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理；（3）设备应严密，发酵罐维持正压环境；（4）培养过程中加入的物料应经过灭菌；（5）使用无污染的纯粹种子。
3，培养基灭菌的目的杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。
4，培养基灭菌的要求（1）达到要求的无菌程度（10-3）（2）尽量减少营养成分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的：培养基中不同营养成分间的相互作用；对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。
5，灭菌的方法（1）化学法化学药品灭菌法（2）物理法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法6，湿热灭菌的原理每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。
当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。
当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。
7，湿热灭菌中的相关定义杀死微生物的极限温度称为致死温度。
在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。
发酵过程中异常情况及解决措施金星集团信阳啤酒有限公司黄华龙465100 发酵液的澄清是一种自然的凝聚、沉降悬浮颗粒（包括酵母、冷凝固物等）的过程，这是一种简单但由耗时比较长的形式，这种自然沉降遵循斯托克斯定律（球形物体在流体中运动所受到的阻力，等于该球形物体的半径、速度、流体的黏度与6π的乘积）。
这个定律叫做斯托克斯定律：如果物体在流体中因自身的重量而下落，根据上面公式，则为最终速度。
）从上式中可以看出，发酵液的澄清即悬浮混浊颗粒的沉降，受混浊颗粒的大小和液体黏度的影响较大，因此，要加速发酵液的澄清，必须设法去减小液体的黏度，增加混浊颗粒相互凝聚成大颗粒的机会。
其次，对自然澄清的形式来说，液体中混浊颗粒的沉降还与沉降的距离、液体的运动程度有关，因为液体的不规则运动和较大的沉降距离都不利于颗粒的沉降，因此贮酒时的静止、罐的直径或高度都是发酵液澄清的重要条件。
1、贮酒期发酵液澄清不好的原因：经过规定时间的静止贮酒以后，发酵液仍然混浊不清，造成这种现象的主要原因有：a)原料质量差（麦芽溶解度差），糖化效果不良，带入后发酵许多胶黏性物质（如葡聚糖、糊精等），导致发酵液的黏度较高，影响颗粒物质的沉降；b)贮酒酒龄太短，凝固物颗粒与酵母沉降时间不足；c)升温糖度提前，导致大量的混浊物质和酵母悬浮，随着温度的不断降低，冷凝固物细粒不断析出，但没有能凝聚成较大颗粒物质沉降；d)封罐糖度偏高，酵母细胞数偏多，导致后发酵持续时间较长，液体处于运动状态，混浊颗粒不易沉降；e)发酵温度偏高，发酵液PH偏高，都会影响冷混浊等颗粒物质的凝聚沉降，较高的PH还会使发酵液黏度有所上升，影响澄清；f)酵母凝聚性能太差，发酵度太低，制麦过程和糖化过程中蛋白质分解程度不足，或是去除冷、热凝固物效率太低，都会影响发酵液的澄清；g)麦汁或发酵液污染杂菌，发酵液酸化，会使部分凝固物颗粒带有相斥电荷，不能凝聚沉降；h)添加高泡酒的发酵液静置时间太短。
发酵工程名词解释1．分解代谢产物阻遏：指某些物质经过分解代谢产生的物质阻遏某些酶（主要诱导酶）生物合成的现象。
2．反馈阻遏作用：又称末端产物阻遏，指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受阻的现象。
3．摄氧率（OUR）：单位时间内单位体积的发酵液所需的氧量。
4．临界氧浓度：指不影响菌种的呼吸所允许的最低氧浓度。
5．种子扩大培养：指将保存在冰箱中的砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的菌种接入新鲜斜面试管活化后，再经过扁平或摇瓶及种子罐逐级扩大培养，获得一定数量和质量的纯种的过程。
6．固定化酶：与水不溶性载体结合，在一定的空间范围内起催化作用的酶。
7．搅拌热：指搅拌器转动引起的液体之间和液体与设备之间的摩擦所产生的热量。
8．培养基：广义上指一切可供微生物生长繁殖所需的一组营养物质和原料，同时也为微生物提供其他所必需的条件。
9．种龄：指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。
10．接种：接入种子罐后直接移种到发酵罐。
11．双种：两个种子罐中的种子接种到一个发酵罐中。
12．倒种：一部分种子来源于种子罐，一部分来源于发酵罐。
13．诱变育种：经人工手段，利用各种物理或化学诱变剂处理微生物，提高突变频率，再经适当的筛选方法获得优良菌种的育种方法。
14．分批发酵（间歇发酵）：指在一封闭培养系统内含有初始限制量的基质的发酵方式。
15．分批补料发酵：又称半连续培养，指在分批发酵过程中，间歇或连续地向发酵罐中补加新鲜培养基的发酵方法。
16．连续发酵：指发酵过程中，不断向发酵罐中按一定速率添加新鲜培养基，同时以相同的速率释放旧培养基的发酵方式。
17．前体：指在产物合成过程中被菌体直接用于产物合成而自身结构无明显改变的物质。
18．抗体酶：通过改变抗体中与抗原结合的微环境，并在适当的部位引入相应的催化基团，所产生的具有催化活性的抗体。
19．生物需氧量：即BOD，是指在一定期间内，微生物分解一定体积水中的某些可被氧化物质，特别是有机物质所消耗的溶解氧的量。
白酒发酵知识点总结大全一、发酵原料1.主要原料白酒的主要原料是粮食，包括大米、小麦、玉米等。
不同地区和不同品种的白酒采用的主要原料不尽相同，这也决定了不同类型的白酒口感和风味。
2.辅料除了主要原料外，白酒的发酵还需要添加一些辅料，如酵母、曲、水等。
这些辅料在发酵过程中起着重要的作用，能够促进发酵的进行和提高酒的品质。
二、发酵微生物1.主要微生物白酒的发酵主要依靠酒曲和酵母。
酒曲是一种含有多种有益微生物的混合物，包括曲霉、酵母和细菌等。
这些微生物在发酵过程中起着重要的作用，能够将主要原料中的淀粉和蛋白质转化为酒精和香气成分。
2.微生物的作用在白酒的发酵过程中，酵母能够将主要原料中的糖分转化为酒精和二氧化碳，而曲霉和细菌则能够分解淀粉和蛋白质，产生各种有益的发酵代谢产物。
这些微生物相互协同作用，形成了白酒独特的风味和品质。
三、发酵过程1.预处理在白酒的发酵过程中，首先需要对主要原料进行一些预处理，如洗净、蒸煮、研磨等。
这些预处理能够使原料中的淀粉和蛋白质更容易被微生物利用，从而促进发酵的进行。
2.发酵条件白酒的发酵需要适宜的温度、湿度和通风条件。
通常情况下，白酒的发酵温度在20-30摄氏度之间，湿度在50-80%之间。
同时，适当的通风条件能够帮助微生物进行呼吸和代谢，促进发酵过程的进行。
3.发酵时间白酒的发酵时间一般为10-30天，不同类型的白酒和不同的发酵工艺会有所不同。
在发酵过程中，发酵液会产生香气和风味，同时逐渐转化成酒精和其他有益的化学成分。
四、发酵工艺1.固态发酵固态发酵是传统的白酒发酵工艺，也是最主要的一种发酵方式。
在这种方式下，主要原料和酒曲混合后密封发酵，利用原料中的潴留水分和微生物的作用进行发酵。
2.液态发酵液态发酵是一种较新的发酵方式，适用于一些高粱、小麦等原料的发酵。
在这种方式下，主要原料混合水后进行酒曲接种和发酵，发酵过程中需要注意PH值和温度的控制。
五、发酵后处理1.蒸馏在白酒发酵完成后，需要进行蒸馏过程，将发酵液中的酒精和香气成分提取出来。
1、发酵工程的基本定义？发酵工程：是利用微生物的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需产品过程的理论和工程技术体系，是生物工程与生物技术学科的重要组成部分。
发酵工程也称作微生物工程，该技术体系主要包括菌株选育与保藏、菌种的扩大生产、微生物代谢产物的发酵生产和分离纯化制备，同时也包括微生物生理功能的工业化利用。
2、提出研发一个发酵新产品的可能路线发酵生产工艺流程除某些转化过程外，典型的发酵工艺过程大致可以划分为以下6个基本过程①用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制；②培养基、发酵罐及其附属设备的灭菌；③扩大培养有活性的适量纯种，以一定比例将菌种接入发酵罐中；④控制最适的发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物；⑤将产物提取并精制，以得到合格的产品；回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。
3、发酵工业的特点①常温常压下进行的生物化学反应，条件较温和②较廉价的原料生产较高价值的产品③通过生物体的自适应调节来完成，反应专一性强，可以得到较为单一的代谢产物④可以产生比较复杂的高分子化合物⑤不受地理、气候、季节等自然条件的限制，可以根据订单安排通用发酵设备来生产多种多样的发酵产品1、为什么需要进行微生物菌种改良？①提高目标产物的产量生产效率和效益！②提高目标产物的纯度，减少副产物可有效降低产物分离成本。
③改良菌种性状，改善发酵过程改变和扩大菌种所利用的原料范围、提高菌种生长速率、保持菌株生产性状稳定、提高斜面孢子产量、改善对氧的摄取条件并降低需氧量及能耗、增强耐不良环境的能力（如耐高温、耐酸碱、耐自身所积累的过量代谢产物）、改善细胞透性以提高产物的分泌能力等。
④改变生物合成途径，以获得高产的新产品2、你认为菌种筛选过程中最关键的环节是什么？筛选方法（1）平皿快速检测法肉眼可观察的变化。
显色法、变色圈法、透明圈法、生长圈法和抑制圈法…（2）形态变异的利用（3）高通量筛选(high throughput screening)3、如果尽量保持菌种不发生退化？（1）控制传代次数基因的变化往往发生在复制和繁殖过程中，繁殖越颇繁，复制的次数越多，基因发生变化的机会也就越多。
发酵工程考试整理1. 引言发酵工程是研究微生物在繁殖、代谢和生物转化过程中的应用技术，广泛应用于食品工业、医药工业、化工工业等领域。
发酵工程考试是对学生在发酵工程学习中所掌握的理论知识、实践操作和问题解决能力的考察。
本文将对发酵工程考试内容进行整理，帮助同学们更好地复习和备考。
2. 理论知识2.1 发酵微生物•常见发酵微生物有酵母菌、乳酸菌、曲霉菌等。
其特点、分类、培养条件和应用需牢记。
•发酵微生物的生长曲线、生长速率和生长限制因素是发酵工程研究的重要内容。
•在发酵过程中，微生物会产生代谢产物，如乳酸、酒精、酸碱等，理解产物的生成途径和影响因素很重要。
2.2 发酵罐的设计和操作•发酵罐的设计包括体积、氧气传递、搅拌、温度、pH值等因素，掌握其设计原理和参数调控方法。
•掌握发酵罐的清洁和消毒操作，避免污染和细菌感染。
2.3 发酵工艺•主要发酵工艺包括批次发酵、连续发酵、半连续发酵等，了解各工艺的特点和优缺点。
•发酵工艺参数的确定是保证发酵过程顺利进行的重要步骤，涉及培养基的配方、气体供给、搅拌速度等因素。
3. 实验操作3.1 培养基的配制•掌握培养基中各成分的配比和消毒操作，保证培养基的质量。
•培养基的pH值的调节和测定是常见的实验操作，了解调节方法和相关仪器的使用。
3.2 各类发酵系统的操作•批次发酵系统的操作包括发酵罐的准备、培养基的接种、参数的调控等。
•连续发酵系统的操作需要了解进料和出料的流程控制和稳定性维护。
•半连续发酵系统的操作涉及在连续发酵的基础上，添加某些原料以实现特定产物的生产。
3.3 检测和分析技术•发酵过程中需要对微生物代谢产物进行定量分析，如pH值的测定、温度的测量等。
•常见的微生物代谢产物分析方法有高效液相色谱、气相色谱和质谱分析等，了解其原理和操作流程。
4. 问题解决和应用展望4.1 问题解决能力•发酵工程中会出现一些常见问题，如微生物感染、发酵罐温度控制失常等，能够快速定位问题并解决是考察的重点。
一、发酵工程与传统酿造、化学工程相比特点是：发酵是生物体自身进行的反应与传统酿造相比：1、发酵过程以生命体的自动调节方式进行，数十个反应过程能够在发酵设备中一次完成；2、反应通常在常温常压下进行，条件温和，耗能少，设备较简单；3、原料通常以糖蜜、淀粉等碳水化合物为主，可以是农副产品、工业废水或可再生资源，微生物本身能有选择地摄取所需的物质；4、容易生产复杂的高分子化合物，能高度选择地在复杂化合物的特定部位进行氧化、还原、官能团引入或去除等反应；5、发酵过程中需要防止杂菌污染，大多情况下设备需要进行严格的冲洗、灭菌，空气需要过滤等。
二、与化学工程相比（发酵工程的一般特征）：1）作为生化反应，通常在常温常压下进行，因此没有爆炸之类的危险，各种设备都不必考虑防爆问题，还有可能使一种设备具有多种用途；2）原料通常以糖蜜、淀粉等碳水化合物为主，加入少量的各种有机或无机氮源，只要不含毒物，一般无精制的必要，微生物本身就有选择地摄取所需物质；3）反应以生命体的自动调节方式进行，因此数十个反应过程能够像单一反应一样，在称为发酵罐的单一设备内很容易地进行；4）能够容易地生产复杂的高分子化合物，是发酵工业最有特色的领域；5）由于生命体特有的反应机制，能高度选择性地进行复杂化合物在特定部位的氧化、还原、官能团导入等反应；6）生产发酵产物的生物物质菌体本身也是发酵产物，富含维生素、蛋白质、酶等有用物质。
因此，除特殊情况外，发酵液等一般对生物体无害；7）发酵生产在操作上最需要注意的是防止杂菌污染8）通过微生物的菌种改良，能够利用原有生产设备使生产飞跃上升。
三、微生物发酵技术反应过程中的特点：1、条件通常温和（常温、常压、弱酸、弱碱）。
2、原料来源广泛，以糖、淀粉等碳水化合物为主。
3、反应以生命体的自动调节方式进行，单一反应器内进行。
4、发酵产品（多为小分子产品，也容易生产出复杂的高分子化合物）5、高度选择性地进行复杂化合物在特定部位的反应。
让知识带有温度。
甘蔗渣怎么做肥料发酵整理甘蔗渣怎么做肥料发酵甘蔗渣是甘蔗制糖后剩下的肥料，大量的集中于西南地区，甘蔗渣的用途有许多种，可以作为锅炉燃料、制浆造纸、生产人造板、生产绿色环保餐具等，这些是针对大型糖厂，而中小型的糖厂产生的甘蔗渣可以用来发酵制作有机肥料。
甘蔗渣怎么做肥料发酵第一步：发酵，加入腐熟剂将甘蔗渣进行高温腐熟发酵，将大量的纤维素进行分解，发酵后的有机肥的各种元素含量符合国家要求标准。
其次步：发酵后的有机肥进行粉碎，粉碎后的粒度达到造粒要求第三步：将粉碎后的有机肥添加其他微量元素进行匀称的搅拌。
第四步：搅拌匀称的有机肥进行造粒，由于甘蔗渣中纤维含量比较多，可以选用搅齿造粒机或者是搅齿转鼓三组合造粒机。
第五步：造粒后的颗粒进行烘干，使多余的水分蒸发掉第六步：利用冷却机将有机肥颗粒的温度快速降下来，使其能够进快的包装。
第七步：利用筛分机将不合格的颗粒筛分出去。
第八步：利用包膜机将颗粒外面包裹一层防结块剂和亮光剂。
第1页/共3页千里之行，始于足下。
第九步：成品有机肥颗粒进行定量的分包装并入库。
甘蔗渣的好处可以改善土壤的板结：一旦把甘蔗的残渣进行发酵以后，就会变成细小的碎渣，这时可以直接埋入花盆，让土壤变得更加疏松、透气，还能起到爱护根部的作用，就像使用的松树针一样，效果特别好，同时还能让土壤达到足够的透气性，不简单导致花盆中产生积水，再也不会消失板结的现象。
能使土壤保持微酸特性：我们家庭养殖的许多花草，都喜爱微酸性的土壤。
例如栀子花、茶花、杜鹃花等，对土壤酸性的要求都比较高，要是用中性或者碱性土壤栽种，就会生长不良或者枯死。
用发酵好的甘蔗渣养花，能长时间维持土壤的微酸特性，有利于花草生长。
可以带来更多的养分：任何花卉的生长都离不开养分的补充，只有养分足够的均衡，才能让它枝繁叶茂，花开得多姿多彩，使用甘蔗的残渣可以带来更丰富的养分，无论是根部还是枝条还是花朵，都有更好地关心，既省钱肥效作用又好。
发酵重点资料整理————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期：名词解释:工业发酵的含义:通过微生物的生长繁殖以及代谢活动，产生和累计人们所需要的产物的生化反应。
发酵工程的含义:利用微生物的某种特定功能,通过现代工程技术手段，给微生物提供适宜的生长条件,生长。
出所需要的产物的生物反应工程代谢控制发酵:有意识地改变微生物的代谢途径，最大限度地积累产物。
利用有机酸和氨基酸的代谢控制。
巴斯德效应：氧气对发酵的抑制作用。
巴斯德发现,在酵母菌发酵时，通入氧气，呼吸作用增强，发酵作用降低。
初级代谢产物与次级代谢产物：初级代谢产物是微生物通过代谢活动,产生与自身生长繁殖必须的物质；次级代谢产物是生成对自身无明确影响的产物。
自发突变与诱发突变：自发突变是微生物在一定情况下自身发生的变异;诱发突变是人为地有意识地将生物置于诱变因子当中,该生物发生突变。
自然选育：根据自然变异从自然界选出符合生成要求的菌种。
诱变育种：用人工方法引起菌体变异,再筛选出适合的菌种。
营养缺陷型菌株:野生菌株通过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养物的能力。
在缺乏改种营养物的培养基时,不能生长。
发酵培养基：满足大量菌体生长、繁殖以及产物积累的培养基。
C/N比：培养基中的碳源及氮源的比值。
DE 值:葡萄糖当量值，是指糖化液中还原糖占干物质的比例。
生长因子：生长所必须的微量的有机物。
前体物、产物促进剂:前体物以及产物促进剂可以促进产物的积累。
前体是可以直接被微生物合成到产物,促进剂能改改变细胞渗透性。
过滤介质除菌:利用过滤介质的除菌方法。
分为绝对过滤介质除菌,深层过滤介质。
绝对过滤介质是利用微生物大于过滤孔径的机制。
深层过滤介质是利用重力沉降、扩散运动、惯性冲击、阻截、静电吸附。
实罐灭菌（实消）、空消:实罐灭菌又称分批灭菌，将培养基输入到发酵罐，一同灭菌。
一、名词解释啤酒：啤酒以大麦、酒花、水为主要原料，经过制麦芽、糖化、啤酒酵母发酵等工序制成的富含营养物质和二氧化碳的低度酒精饮料。
葡萄酒：含有一定糖分和水分的果实，经过破碎、压榨取汁、发酵等工艺酿制而成的低度饮料酒都可称为果酒。
蒸白酒:白酒是以曲类、酒母等为糖化发酵剂，利用粮谷或代用料、经蒸煮、糖化发酵、蒸馏、贮存、勾兑而成的蒸馏酒。
白酒以前叫烧酒、高粮酒，建国后统称白酒。
浸麦度:指大麦浸渍后所含水分的百分数。
发芽率:露出根芽的麦粒所占的百分数。
胚乳溶解:大麦发芽期间由于一些列酶的催化作用使得胚乳中的蛋白质淀粉等物质不断溶解，低分子的氨基酸糖类不断增加，从而使胚乳的结构由坚韧而变得疏松的过程。
库值:蛋白分解强度=生产麦汁含氮量/标准协定麦汁含氮量×100煮沸强度:表示每小时内蒸发出水分的百分率煮沸强度=混合麦汁量-最终麦汁量/（混合麦汁量×煮沸时间）×100% 啤酒的生物稳定性:由于微生物的原因而造成啤酒稳定性变化的现象。
啤酒的非生物稳定性:在贮存过程中，由于化学成分的变化，引起的浑浊、沉淀现象称为啤酒的非生物稳定性。
啤酒发酵度(外观发酵度、真实发酵度):发酵度：即麦汁中浸出物浓度下降的百分率。
发酵度（ %） =E-E´/E╳100%E—发酵前的麦汁浓度 E´—发酵后的发酵液浓度真正发酵度:发酵后，排除酒精后的浸出物浓度下降的百分率一般 60％-70％外观发酵度:发酵后，不排除酒精后的浸出物浓度下降的百分一般为 75％-87％外观发酵度一般比真正发酵度约高20％葡萄糖阻遏效应:由于葡萄糖常对分解利用其他底物的有关酶的合成有阻遏作用，故分解代谢产物阻遏又称为葡萄糖效应。
巴斯德效应:酵母菌酒精发酵时通入氧气，发酵减慢，停止产生乙醇，葡萄糖消耗速率下降。
氧对发酵的这种抑制现象称为巴斯德效应。
反巴斯德效应:发现某些组织，如视网膜以及多种癌瘤细胞在葡萄糖充足时，不管供氧条件如何都有很强的酵解如而有氧氧化相对减弱。
发酵工艺优化发酵工艺优化从摇瓶试验到中试发酵罐试验的不同之处1、消毒方式不同，摇瓶是外流蒸汽静态加热（大部分是这样的），发酵罐是直接蒸汽动态加热，部分的是直接和蒸汽混合，会因此影响发酵培养基的质量，体积，PH，透光率等指标。
扩大时摇考虑2、接种方式不同，摇瓶是吸管加入，发酵罐是火焰直接接种（当然有其他的接种方式），要考虑接种时的菌株损失和菌种的适应性等。
3、空气的通气方式不同，摇瓶是表面直接接触。
发酵罐是和空气混合接触，考虑二氧化碳的浓度和氧气的融解情况。
4、蒸发量不同，摇瓶的蒸发量不好控制，湿度控制好的话，蒸发量会少。
发酵罐蒸发量大，但是可以通过补料解决的。
5、搅拌方式不同，摇瓶是摇转方式进行混合搅拌，对菌株的剪切力较小。
发酵罐是直接机械搅拌，注意剪切力的影响和无菌的影响。
6、PH的控制，摇瓶一般通过碳酸钙和间断补料控制PH，发酵可以直接流加控制PH，比较方便。
7、温度控制，摇瓶是空气直接接触或者传热控制温度，但是发酵罐是蛇罐或者夹套水降温控制，注意降温和加热的影响。
8、注意染菌的控制方法不一样，发酵罐根据染菌的周期和染菌的类型等可以采取一些必要的措施减少损失。
9、发酵罐可以取样或者仪表时时检测，但是摇瓶因为量小不能方便的进行控制和检测。
10、原材料不一样，发酵所用原材料比较廉价而且粗旷，工艺控制和摇瓶区别很大等等发酵工艺中补料的作用补料分批培养(fed—batch culture简称FBC)是指在分批培养过程中、间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法、与传统的分批集中补料培养相比、它有以下优点：(1)可以避免在分批发酵中因—次投料过多造成发酵液环境突变，造成菌丝大量生长等问题，改善发酵液流变等性质，使得发酵过程泡沫得以控制，节省消泡剂，并提高了装罐系数。
(2)可以控制细胞质量，以提高芽抱的比例，并使pH得以稳定。
(3)可以解除底物抑制，产物反馈抑制和分解阻遏。
(4)可以使“放料和补料”方法得以实施。
发酵的制备操作规程以20桶为例：一、菌种制备20桶（200kg/桶）需要乳酸菌液100L、枯草杆菌液50L、酵母菌液20L。
培养100L乳酸菌液需要4000ml乳酸菌菌种，50L枯草杆菌液需要2000ml枯草杆菌菌种；20L酵母菌液需要1000ml酵母菌菌种。
保存菌种时以斜面保存。
使用时先活化，将斜面接种至液体培养基，首先将接种环灭菌，挑取1~2环接种至500ml液体培养基中，乳酸菌为厌氧菌静置培养即可，枯草杆菌与酵母菌为需氧菌，无摇床情况下，培养过程中间隔一段时间应进行轻轻有规律的摇晃，培养1~2天后，可以作为菌种进行下一步扩大培养。
保存菌种时应用斜面置冰箱内保存，一个月左右进行一次菌种复壮，视菌种保存情况采用直接斜面划线或稀释涂布平板后，挑取生长较好菌株进行划线保存。
二、配制培养基1、（培养枯草杆菌）营养肉汤培养基：牛肉膏：0.3%蛋白胨：1%氯化钠：0.5%葡萄糖：0.5%2、（乳酸菌）MRS培养基：牛肉膏：1%蛋白胨：1%酵母膏：0.5%柠檬酸：0.2%葡萄糖：2%硫酸镁：0.058%硫酸锰：0.028%磷酸二氢钾：0.3%乙酸钠：0.5%吐温-80：0.01%3、（酵母菌）土豆培养基：取新鲜去皮土豆200g切碎，加热煮沸20min，四层纱布过滤后，加葡萄糖20g，加水定容至1000ml,既得。
配制固体培养基，配制方法与液体培养基相同，只需在培养基内按 1.5%左右加入琼脂粉，加热溶解，即可。
三、按各培养基要求，准备相应的试剂，准备好电子天平，以及装量用的烧杯、试管等。
1、称量按培养基配方比例依次准确地称取各种药品，放在称量纸上称量，蛋白胨等易吸潮，在称取时动作迅速。
另外，称药品时严防药品混杂，称取一种药品后，药匙应洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2、溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅拌均匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
第一章1．发酵工程：是指利用微生物的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需产品过程的理论和工程技术体系，是生物工程与生物技术学科的重要组成部分。
该技术体系包括菌种选育和保藏、菌种的扩大生产、微生物代谢产物的发酵生产和分离纯化制备，同时也包括微生物生理功能的工业化利用等。
2.发酵工业的范围：微生物菌体酶制剂代谢产物生物转化3.工业发酵的类型：按微生物对氧的需求分为：需氧发酵、厌氧发酵、兼性厌氧发酵按培养基物理性状分为：液体发酵、固体发酵4.发酵生产工艺流程：1）用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制；2）培养基、发酵罐及其附属设备的消毒灭菌；3）扩大培养出有活性的适量纯种，以一定比例接种入发酵罐中；4）控制最适发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物；5）将产物提取并精制，以得到合格的产品；6）回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。
第二章1.发酵工业常用微生物可分为：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌四大类。
2.菌种分离筛选的步骤：样品采集→样品的预处理→目的菌富集培养→菌种初筛→菌种复筛→菌种发酵性能鉴定→菌种保藏3.初级代谢：微生物产生的对自身生长和繁殖必需的物质，如：蛋白质、核酸、多糖、脂类。
次级代谢：对自身生长和繁殖没有影响的物质，如：抗生素、生物碱、色素、毒素等。
4.代谢工程育种：通过特定突变型的选育，达到改变代谢通路、降低支路代谢终产物的生产或切断支路代谢途径及提高细胞膜的透性，使代谢流向目的产物积累的方向进行。
组成型突变株：指操纵子或调节基因突变引起酶合成诱导机制失灵，菌株不经诱导也能合成酶，或不受终产物阻遏的调节突变型，称为组成型突变株。
5.工业上常用的菌种保藏方法？①斜面低温保藏法；③矿油封藏法；④冷冻真空干燥法；⑤液氮超低温保藏法第三章发酵工业上常用的氮源：氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。
常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。
1、无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。
白酒试题1.白酒的定义？答：以高粱等粮谷为主要原料，以大曲、小曲或麸曲及酒母等为糖化发酵剂，经蒸煮、糖化、发酵、蒸馏而制成的蒸馏酒。
或是以淀粉原料或糖质原料加入糖化发酵剂(糖质原料无须糖化剂)，经固态、半固态或液态发酵、蒸馏、贮存、勾调而制成的产品。
1.简答固态法白酒生产特点？答：（1）低温双边发酵：采用较低的温度，让糖化作用和发酵作用同时进行，即采用边糖化边发酵工艺，优点:可防止发酵过程中的酸败；防止酶在高温下钝化；有利于酒香味的保存和甜味物质的增加。
（2）配醅蓄桨发酵：一般新料与醅的比例为1：3-4.5。
作用：既可使淀粉得到充分利用，又能调节淀粉和酸的浓度，还可以增加微生物营养和风味物质。
（3）多菌种混合发酵:固态法白酒在整个生产中都是敞口操作，各种渠道都能将大量的、多种多样的微生物带入到醅中，它们将与曲中的有益微生物协同作用，产生出丰富的香味物质。
（4）固态蒸馏：固态法白酒的蒸馏是将发酵后的固态酒醅装入传统的蒸馏设备——甑，进行蒸馏。
具有雾沫夹带作用，蒸出的白酒质量较好。
（5）界面效应:在固态法白酒的生产过程中，窖内同时存在气相、液相、固相三种状态，这种状态有利于微生物的繁殖与代谢，从而形成白酒特有的芳香。
2.大曲的定义？答：以小麦或大麦和豌豆为主要原料，将其粉碎、加水、压制成砖状的曲胚，在一定温度和湿度下使自然界的微生物进行富集和扩大培养，再经风干而制成的含有多种菌的一种糖化发酵剂。
4.低温、中温、高温曲分别对应哪种香型？哪个的糖化力最高？答:低温曲——清香型；中温曲——浓香型；高温曲——酱香型。
低温曲的糖化力最高。
5.浓香型采用什么工艺？香味成分以什么为主，哪些为辅？答：采用典型的混蒸续渣法；以己酸乙酯为主，辅以适量的乳酸乙酯、乙酸乙酯、丁酸乙酯，乳酸乙酯/己酸乙酯＜1。
6.清香型对大曲——清茬：红心：后火的比例要求是？加大曲加多少？主要香味成分以什么为主？答：清茬：红心：后火=3：3：4；加曲量为9-11%；主要以乙酸乙酯为主。
1,1833年，法国化学家Anselme Payen (佩恩)和 Jean-Francois Persoz (帕索兹) :用酒精处理麦芽抽提液，得到淀粉酶(diastase) 。
2,1926年，美国康乃尔大学的“独臂学者” Sumner(萨姆纳) 博士从刀豆中提取出脲酶结晶，并证明具有蛋白质的性质。
在此后的50多年，对一系列酶的研究，都证实了酶的化学本质是蛋白质。
3，1983年，Sidney Altman(阿尔特曼)等人发现核糖核酸酶P(RNase P)的RNA组分(M1 RNA)具有加工tRNA前体的催化功能。
而RNase P中的蛋白组分没有催化功能，只是起稳定构象的作用。
4，酶分为蛋白类酶和核酸类酶1蛋白类酶包括 1氧化还原酶2转移酶3水解酶4裂合酶5异构酶6合成酶或连接酶2核酸类酶包括 1分子内催化核酸类酶2分子间催化核酸类酶.3分子内催化核酸类酶包括 1自我剪切酶2自我剪接酶4分子间催化催化核酸类酶包括 1 RNA剪切酶2DNA剪切酶3多肽剪切酶4多糖剪切酶5多功能核酸类酶5系统类酶的命名法采用四码编号方法，第一个号码表示该酶属于6大类酶中的某一大类，第二个号码表示属于该大类的某一亚类，第三个号码表示亚类中的小类，第四个号码表示在小类中的序号。
6分类原则 1按催化作用的类型，将蛋白类酶分为6大类2每个大类中，按照酶作用的底物，化学键或基团的不同，分为若干亚类3每一亚类中再分为若干小类4每一小类中包含若干个具体的酶。
7酶活力的测定方法：化学测定法、光学测定法、气体测定法8酶活力测定的基本步骤：1根据酶催化的专一性，选择适宜的底物，并配成一定浓度的底物溶液2根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度，PH,底物浓度，激活剂浓度等反应条件。
3在一定的条件下，将一定量的酶液和底物溶液混匀，适时记下反应开始的时间。
4反应到一定的时间，取出适量的反应液，运用各种生化检测技术，测定产物的生成量或底物的减少量。
9酶活力---指在一定条件下使酶促反应达到某一速度时所需要的酶量。
单位有IU, U,Kat。
10酶的转换数也称为催化常数，表示酶催化中心的活性大小，指单位时间(如每秒)内每一催化中心(或活性中心)所能转化的底物分子数，或每摩尔酶活性中心单位时间转换底物的摩尔数。
11转换数的倒数称为酶的催化周期，是指酶进行一次催化所需的时间。
单位为毫秒(ms)或微秒(μs),即T=1/Kcat12固定化酶的活力测定：1振荡测定法2酶柱测定法3连续测定法13，1960年，法国科学家Jacob和Monod提出的操纵子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，通过酶的诱导和解除阻遏，可显著提高酶的产量。
14，在DNA中，与酶的四种生物合成密切相关的基因有四种，调节基因，启动子，结构基因，操纵基因。
调节基因可产生一种阻遏蛋白。
结构基因与操纵基因，启动子一起组成操纵子。
15，分解代谢物阻遏原理与方法，物质分解代谢释放能量，一些能量存在ATP中，使AMP浓度降低，存在细胞内的cAMP就通过磷酸二酯酶水解成AMP,腺苷酸环化酶的活化受抑制而使cAMP的生成受阻，导致胞内cAMP的浓度降低，使cAMP-CAP的复合物的浓度随之降低，启动子的相应位点没有足够cAMP-CAP复合物结合，RNA聚合酶也就没法结合到启动子的特定位点。
RNA聚合酶也随之结合到相应的位点上，酶的生物合成才能进行。
分解代谢阻遏作用及其阻遏解除，实质上是cAMP通过启动子对酶生物合成的调节控制。
17真核生物酶生物合成的调节1细胞分化改变酶的生物合成2基因扩增加速酶的生物合成3增强子促进酶的生物合成4抗原诱导抗体酶的生物合成。
18抗体酶的制备方法主要有诱导法和修饰法。
诱导法又分为半抗原诱导抗体酶的生成和酶蛋白诱导法19产酶细胞的选择：（1）酶的产量高（2）容易培养和管理(生长速率高、营养要求低)（3）产酶稳定性好，不易退化（4）利于分离提纯（5）安全可靠，无毒性20 （1）不同的细胞，其生长繁殖的最适PH有所不同。
细菌、放线菌：中性或碱性，pH6.5~8.0霉菌、酵母菌：偏酸性，pH4~6植物细胞：偏酸性，pH5.2~5.8 动物细胞：偏碱性，pH7.2~7.6（2）细胞产酶的最适PH与生长最适PH往往有所不同。
细胞生产某种酶的最适pH值通常接近于该酶催化反应的最适pH值。
碱性蛋白酶：碱性（pH 8.5~9.0）中性蛋白酶：中性或微酸性（pH 6.0~7.0），酸性蛋白酶：酸性（pH 4~6）例外：有些酶在其催化反应的最适条件下，产酶细胞的生长和代谢可能受到影响如枯草杆菌碱性磷酸酶，其催化反应的最适pH值为9.5，而其产酶的最适pH值为7.4（3）有些微生物可以同时产生若干种酶，在生产过程中，通过控制培养基的pH，可改变各种酶之间的产量比例。
21调节溶解氧的方法：（1）调节通气量；（2）调节氧的分压；（3）调节气液接触时间；（4）调节气液接触面积；（5）改变培养液性质。
22细胞在一定条件下培养牛长，其生长过程一般经历调整期、生长期、平衡期和衰退期4个阶段23酶生物合成四种类型1同步合成型酶的生物合成与细胞生长同步进行的一种酶生物合成模式(生长偶联型) 。
特点：(1)酶的合成可以诱导，但不受分解代谢物阻遏和反应产物阻遏。
(2)当去除诱导物、细胞进入平衡期后，酶的合成立即停止，表明这类酶所对应的mRNA很不稳定。
举例：例如，米曲霉在含有单宁或者没食子酸的培养基中生长，在单宁或没食子酸的诱导作用下，合成单宁酶或称为鞣酸酶2延续合成型酶的生物合成在细胞的生长阶段开始，在细胞生长进入平衡期后，酶还可以延续合成一段较长时间。
属于该类型的酶可以是组成酶，也可以是诱导酶。
特点：（1）该类酶可受诱导，一般不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。
（2）该酶对应的mRNA是相当稳定的。
举例：黑曲霉合成聚半乳糖醛酸酶3中期合成型是酶的生物合成在细胞生长一段时间以后才开始，而在细胞生长进入平衡期以后，酶的生物合成也随着停止的一种合成模式。
特点：（1）酶的合成受产物的反馈阻遏或分解代谢物阻遏。
（2）所对应的mRNA是不稳定的。
举例：枯草杆菌合成碱性磷酸酶（受磷酸反馈抑制）4滞后合成型滞后合成型又称非生长偶联型，是酶的生物合成在细胞生长进入平衡期以后才开始并大量积累的一种合成模式。
许多水解酶的生物合成都属于这一类型。
特点：（1）该类酶受分解代谢物阻遏作用的影响，阻遏解除后，酶才大量合成。
（2）该酶对应的mRNA稳定性高。
举例：黑曲霉酸性蛋白酶(羟基蛋白酶)合成5影响酶生物合成模式的主要因素1）mRNA的稳定性高：可在细胞停止生长后继续合成酶。
低：随着细胞停止生长而终止酶的合成2）培养基中阻遏物的存在不受阻遏：随着细胞的生长而开始酶的合成。
受阻遏：细胞生长一段时间或平衡期后，酶才开始合成。
24细胞生长动力学p56式子莫诺德生长动力学模型S为限制性基质的浓度，Um为最大比生长速率，是指限制性基质浓度过量时的比生长速率，即当S》Ks时，u=um，Ks为莫诺德常数，是指比生长速率达到最大比生长速率一半时的限制性基质浓度。
莫诺德方程与酶反应动力学的米氏方程相似，其最大比生长速率um和曼诺德常数也可以通过双倒数作图法求出。
25固定化细胞发酵产酶的特点。
1产酶率提高——细胞密度增大，生化反应加速，提高产酶率2可以反复使用或连续使用较长时间——细胞不易脱落流失3稳定性好——受载体保护，细胞适应性宽，能稳定发酵4缩短发酵周期，提高设备利用率——可预培养再转入发酵5产品容易分离纯化——细胞不溶于水，发酵液中游离细胞少6适用于胞外酶等胞外产物的生产。
26固定化原生质体(immobilized protoplasts)是指固定在载体上，在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体。
1无细胞壁，减少扩散屏障，可以生产部分胞内酶2原生质体是脆弱的，通过固定化提高其稳定性。
27固定化原生质体发酵产酶工艺条件控制注意点1控制渗透压，添加渗透压稳定剂(发酵结束后，可以通过层析或膜分离等方法与产物分离)2防止细胞壁再生，添加青霉素3保证原生质体的浓度，原生质体增殖缓慢，应保证其浓度达到一定的水平。
28酶的提取分离与纯化------在适宜条件下，将酶从细胞或其他含酶原料溶解到溶剂中，再与杂质分开，而获取酶制品的技术过程。
30酶提取的注意事项1）切记酶是蛋白质或核酸，防止酶失活变性2）跟踪酶分离每一步的总活力和比活力，判别每步方法的可行性。
31酶分离纯化的一般方法1沉淀法2层析法3电泳法、离心法4过滤和膜分离32蛋白质类酶分子的氨基酸残基分为四类1接触残基2辅助残基3结构残基4非贡献残基33酶分子修饰----通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程。
34酶修饰的作用与目的提高酶活力，增强酶的稳定性，降低或消除酶的抗原性。
通过修饰研究和了解了分子中主链，侧链，组成单位，金属离子，和各种物理因素对酶分子空间构象的影响，可以进一步探讨其结构与功能之间的关系。
35酶分子主链修饰的意义通过主链修饰，有可能提高酶的催化效率，降低或消除酶的抗原性，并可以知道酶活性中心在主链上的位置，从而了解主链的不同位置对酶的催化功能的贡献。
36主链切断修饰，主链被切断，可能出现三种情况1引起酶活性中心的破坏，酶将丧失其催化功能，这种修饰用于酶活性中心的位置2断裂后，仍可以维持酶活性中心的空间构象，酶的催化功能可以保持不变或损失不多，但抗原性等特性将发生改变。
这将提高某些酶特别是药用酶的某些价值。
3断裂后，有利于酶活性中心的形成，可使酶分子显示其催化功能或使酶活性提高。
针对有些生物体生物合成得到的不显示酶催化活性的酶原的修饰加工。
37酶分子侧链集团修饰---采用一定的方法使酶的侧链基团发生改变，从而改变酶的催化特性的修饰方法。
38侧链集团修饰的意义1研究各种集团在酶分子中的作用及其对酶的结构，特性和功能的影响，分析酶的活性中心中的必须集团修饰后不引起酶活力显著变化---非必须集团，修饰后引起酶活性显著降低或消失----必须集团2测定某一种基团在酶分子中的数量3提高酶的活力，增加酶的稳定性，降低酶的抗原性，并且可能引起酶催化特性和催化功能的改变，以提高酶的使用价值。
4可以获得自然界原来不存在的新酶种。
39酶根据侧链集团的不同，修饰有区别，1蛋白类酶（含有氨基，羧基，巯基，胍基，酚基，咪唑基，吲哚基）1小分子化学物质修饰2分子内交联修饰（用具有双功能的化合物，如戊二醛，己二胺等）3大分子结合修饰（大分子与酶分子的侧链集团形成共价键，水不溶性大分子与侧链基团结合---酶的结合固定化）4亲和修饰2核酸类酶40氨基修饰----亚硝酸，丹磺酰氯，2，4--二硝基氟苯，2，4，6--三硝基苯磺酸，醋酸酐等羧基修饰----碳化二亚胺，重氮基乙酸盐，乙醇--盐酸试剂等。
