高中生物1.1.3 蛋白质工程 教案(1)(中图版选修3)
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高中生物第一章基因工程 1.1.3 蛋白质工程导学案苏教版选修3【课标要求】简述蛋白质工程【教学目标】1、简述蛋白质工程的基本原理2、举例说出蛋白质工程的应用和发展【教学过程】知识点一、蛋白质工程的概念和原理1、蛋白质工程是指通过_____________与______________等技术了解蛋白质的_________和__________,并借助计算机辅助设计、_____________和_____________改造_________,以__________改造天然蛋白质,甚至创造自然界中___________________的技术。
2、蛋白质工程一般是先创造出适合人类需求的____________,然后使其表达出具有特定的____________和__________的蛋白质。
3、_____________是蛋白质工程中的关键技术。
因此,蛋白质工程也被称为第二代_________。
4、实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质的__________和___________的关系。
5、蛋白质的空间结构极其复杂,应用_________________可以测定其三维空间结构,利用________________可以了解其构象。
此外,随着DNA和蛋白质测序技术的自动化,已能快速测定大量蛋白质分子的一级结构(氨基酸序列)。
6、蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质________的特定需求,对蛋白质的________进行分子设计。
7、蛋白质工程的基本途径:预期蛋白质功能→设计出预期的蛋白质结构→推测应用的氨基酸序列→设计DNA的脱氧核苷酸序列(基因)【思考】对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现?为什么?【拓展】蛋白质工程应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下:(1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。
第三节蛋白质工程1.简述蛋白质工程。
2.蛋白质的分子设计。
(难点)3.蛋白质工程的应用。
(重点)蛋白质的分子设计1.蛋白质工程(1)依据:蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系。
(2)改造对象:利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列或直接对蛋白质进行有目的的改造。
(3)产物:创造出自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子,也就是产生新的蛋白质。
(4)本质:改造控制该蛋白质合成的基因结构。
2.蛋白质的分子设计(1)小X围改造对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换。
(2)蛋白质拼接组装对不同来源的蛋白质进行拼接组装。
(3)蛋白质从头设计从氨基酸的排列顺序出发,设计制造出自然界不存在的全新蛋白质。
3.蛋白质工程的基础蛋白质工程的基础是基因工程。
所以蛋白质工程又叫第二代基因工程。
[合作探讨]蛋白质分子的设计是一项复杂而艰巨的工程,其基本流程可以用下图表示:探讨1:构建新的蛋白质模型是分子设计的关键环节,你认为构建蛋白质模型的依据是什么?提示:构建蛋白质模型的依据是控制这种蛋白质合成的基因以及蛋白质的空间结构。
探讨2:通过DNA合成形成的新基因怎样才能得到准确的表达?提示:通过基因工程技术,将新基因导入大肠杆菌等受体细胞中,新基因在受体细胞中指导合成新的蛋白质。
探讨3:有的学者认为,蛋白质工程本身也是研究蛋白质结构和功能的一种有力工具。
你是怎么看待的?提示:这些学者认识恰当,蛋白质结构直接影响其功能活性,要想研究蛋白质结构与功能的关系,蛋白质工程就是有力工具,利用这种工具可以改变蛋白质的空间结构,探究功能的改变而做出相应的科学结论。
[思维升华]1.蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
2.蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。
蛋白质工程的原理和应用[学习目标] 1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。
2.简述蛋白质工程的基本原理。
1.蛋白质工程(1)基础:蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。
(2)手段:通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质。
(3)目的:获得满足人类生产和生活需求的蛋白质。
(4)困难:蛋白质发挥功能必须依赖正确的高级结构,而蛋白质的高级结构十分复杂。
2.蛋白质工程崛起的缘由(1)崛起缘由①基因工程的实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。
②基因工程的不足:基因工程在原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。
③天然蛋白质的不足:天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
(2)实例:提高玉米赖氨酸含量天冬氨酸激酶(第352位为苏氨酸)――→改造天冬氨酸激酶(第352位为异亮氨酸)二氢吡啶二羧酸合成酶(第104位为天冬酰胺)――→改造二氢吡啶二羧酸合成酶(第104位为异亮氨酸)改造后玉米叶片和种子中游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。
3.蛋白质工程的基本原理(1)目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。
(2)方法:改造或合成基因。
(3)基本思路:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
4.蛋白质工程的应用(1)医药工业方面①科学家通过对胰岛素基因的改造,研发出速效胰岛素类似物产品。
改造干扰素(丝氨酸)②干扰素(半胱氨酸)――→↓在一定条件下,可以延长保存时间③人-鼠嵌合抗体:降低免疫反应强度。
(2)其他工业方面用于改进酶的性能或开发新的工业用酶,如利用蛋白质工程获得枯草杆菌蛋白酶的突变体,筛选出符合工业化生产需求的突变体,提高该酶的使用价值。
(3)农业方面①科学家尝试改造某些参与调控光合作用的酶,以提高植物光合作用的效率,增加粮食的产量。
第三节蛋白质工程1.蛋白质工程是指通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构与功能,并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因,以定向改造蛋白质,甚至创造出自然界不存在的蛋白质的技术。
2.蛋白质工程的关键技术是基因工程。
3.蛋白质工程的一般过程是:预期蛋白质功能→分子设计蛋白质→合成相应基因→基因指导新蛋白质合成。
4.实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系。
5.根据蛋白质被改动部位的多少,可将蛋白质改造类型分为“大改”、“中改”和“小改”。
6.通过蛋白质工程,可获得热稳定性高的酶和新型药物。
对应学生用书P16蛋白质工程概述1.蛋白质工程的概念(1)手段:①通过物理化学和生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能。
②借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因。
(2)目的:定向改造天然蛋白质,甚至创造自然界不存在的蛋白质。
(3)关键技术:基因工程。
蛋白质工程又称第二代基因工程。
2.蛋白质工程的一般过程先根据新蛋白质预期功能设计相关蛋白质结构,进而设计对应的氨基酸序列,在此基础上合成可产生新蛋白质的相关脱氧核苷酸序列(基因),再利用基因工程技术合成新的蛋白质。
3.改造蛋白质的方式改造方式相关操作大改根据氨基酸的性质和特点,设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能中改改变蛋白质分子中某一个多肽片段或一个特定的结构小改通过基因工程中的定点诱变技术,有目的地改造蛋白质分子中某活性部位的一个或几个氨基酸残基,以改善蛋白质的性质和功能1.对天然蛋白质进行改造,是通过直接对蛋白质分子进行操作来实现的吗?提示:不是,由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终必须通过改造基因来完成。
2.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?提示:基因工程是按照中心法则进行的:基因→表达(转录和翻译)→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。
高二年级第二学期生物学科总第 4 课时导学案课题第一章基因工程第三节蛋白质工程使用时间:主备人:方娟一、学习目标:1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。
2.简述蛋白质工程的基本原理。
3.举例说出蛋白质工程的应用和发展。
4. 尝试运用逆向思维分析和解决问题。
二、知识构成:1.蛋白质工程的概念是什么?2.为什么说蛋白质工程是第二代基因工程?3.蛋白质工程的基本原理是什么?4.实施蛋白质工程的前提条件是什么?5.如何测定蛋白质的三维空间结构和构想?6.在基因水平上如何实施对蛋白质的改造?7.什么叫做“大改”“中改”“小改”?8.改变蛋白质结构的核心技术是什么?9.蛋白质工程的目的是什么?10.蛋白质工程中改造酶结构的目的是什么?11.在提高酶的稳定性时是如何操作的?12.蛋白质工程在生物制药方面也有广泛的应用,可以通过改造什么来提高对肿瘤细胞的杀伤力?13.什么叫做蛋白质组学?它包括哪些步骤?14.蛋白质芯片上什么?它有什么作用?三、学法和自检:1. 蛋白质工程的基本流程正确的是①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列A ①→②→③→④B ④→②→①→③C ③→①→④→②D ③→④→①→②课题第一章基因工程第三节蛋白质工程四、达标检测1.蛋白质工程的操作是在下列哪种水平对蛋白质的改造()A 细胞水平B DNA分子水平C 核酸水平D 蛋白质水平2.蛋白质工程又称为第二代基因工程。
下列所列举的酶,在蛋白质工程操作中被使用而在基因工程操作中没有被使用的是()A 限制性内切酶B DNA连接酶C DNA多聚酶D DNA解旋酶3.蛋白质工程的核心技术是()A 基因工程B 基因的定点诱变C 蛋白质的结构预测与设计D 蛋白质的纯化4.蛋白质工程操作程序的基本思路是()A DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能B 确定蛋白质的功能→蛋白质应用的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→蛋白质应有的氨基酸序列→蛋白质应有的碱基排列→蛋白质C mRNA→蛋白质→折叠产生功能D mRNA→DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能5.蛋白质工程在治疗肿瘤方面起着重要作用。
1.3 蛋白质工程学案苏教版选修三
一、蛋白质工程崛起的缘由
生物产生的天然蛋白质是在长期进化过程中形成的,它的结构、性能不能完全满足人类生产和生活的需要。
二、蛋白质工程的概念与原理
1.概念:又被称为,即
2.蛋白质工程的基本原理:
天然蛋白质合成的过程都是按照中心法则进行的:即基因→表达(转录和翻译)→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能。
蛋白质工程却与之相反,它的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质→推测应有的序列→找到相对应的序列(基因)→具有预期功能的蛋白质(如图所示)。
思考:蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?
三、蛋白质工程的进展和前景
1.蛋白质工程可通过改造,有目的地提高酶的热稳定性。
2、合成抗体。
3、改变蛋白质的活性。
思考:蛋白质工程是一项非常成熟的技术吗?。
可编辑修改精选全文完整版选修3 1.1.3 蛋白质工程教学设计一、本节教学设计理念在新课程理念的指导下,我们要注重对学生能力的培养,不断提高学生的科学素养。
在教学中一方面要注重对学生进行探究性学习的培养,引导学生积极思考、主动探究,引导学习尝试通过所学知识来解决生产生活中的实际问题,使学生学得充实,并在学习中领悟终身学习的道理。
二、教材分析《蛋白质工程》是中图版普通高中课程标准实验教科书生物选修3《现代生物科技专题》中第一章基因工程和蛋白质第3节的内容。
蛋白质工程与基因工程联系密切,被称为第二代基因工程,同时又与必修教材中已学习过中心法则及蛋白质具有复杂的空间结构等知识密不可分。
由于蛋白质工程是基因工程的延伸和发展,因此我采用“问题—探究—新问题—再探过程结果联系目标操作核心操作起点蛋白质工程基因工程项目目的基因预期的蛋白质功能基因表达载体基因获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与表达预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测核苷酸序列→合成DNA →表达出蛋白质定向改造生物的遗传特性,获得人类所需的生物类型或生物产品定向改造或生产人类所需的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。
因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因的修饰或基因的合成。
生产自然界没有的蛋白质四、基因工程的应用1. 蛋白质工程可通过改造酶的结构,有目的地提高(蛋白质)酶的热稳定性。
(T4溶菌酶改造)2.改变蛋白质的活性。
如教材中的组织纤溶性酶原激活物(t-PA )的改造等;3. 在生物工程制药领域、蛋白质工程有着广泛的应用。
如:制备鼠-人嵌合抗体减少因机体高度过敏而引起的副作用。
让学生认识到科学探究之路的漫长、艰辛和永无止境。
五、蛋白质工程的进展和前景蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的最新成就,将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代,为蛋白质和酶在工业、农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景!作业与练习1.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?解决本课的难点课内与。
蛋白质工程一、教学目标1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。
2.简述蛋白质工程的原理。
3.尝试运用逆向思维分析和解决问题。
二、教学重点和难点1.教学重点(1)为什么要开展蛋白质工程的研究?(2)蛋白质工程的原理。
2.教学难点蛋白质工程的原理。
三、教学策略1.建议采用“问题—探究—新问题—再探究”的教学模式。
本节内容是基因工程的延伸和发展。
由于蛋白质工程刚刚起步,学习内容较少。
如何学得充实,又让学生悟出些终身学习的道理,建议采用“问题—探究—新问题—再探究”的教学模式。
新课一开始,可以带领学生回忆原有知识:要想让一种生物的性状在另一种生物中表达,在种内可以用常规杂交育种的办法实现,但要使有生殖隔离的种间生物实现基因交流,就显得力不从心了。
基因工程的诞生,为克服这一远缘杂交的障碍问题,带来了新的希望。
于是取得了丰硕成果:大肠杆菌为人类生产出了胰岛素,牛的乳腺生物反应器为人类制造出了蛋白质类药物,烟草植物体内含有了某种药物蛋白……至此,人们也只是实现了世界上现有基因在转基因生物中的表达。
但一个新问题出现了,生物产生的天然蛋白质是在长期进化过程中形成的,它的结构、性能不能完全满足人类生产和生活的需要。
为了加深这一点的认识,可调动学生从书中找实例(干扰素例子、工业用酶的例子)加以佐证。
于是要对现有蛋白质进行改造,制造出目前从天然蛋白质中找不到的蛋白质。
这样人们又开始了新一轮的探索,蛋白质工程应运而生了。
2.建议加强与已有知识的联系,用逆向思维的方法解决新问题。
学生在必修课中已学习过中心法则及蛋白质具有复杂的空间结构等知识。
中心法则告诉我们遗传信息的流动方向如图1-4所示。
图1-4 遗传信息的流动方向这是学习新知识的基础。
既然蛋白质的功能是由DNA决定的,那么要制造出新的蛋白质,就要改造DNA。
所以蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推。
结合课本中插图,可以较明确地说明这一点。
还有两点教学建议需要说明。
第一,蛋白质工程的诞生是有其理论与技术条件支撑的,正如课本中开头描述的,它是随着分子生物学、晶体学以及计算机技术的迅猛发展而诞生的,也与基因组学、蛋白质组学、生物信息学的发展等因素有关(本书“前沿动态”中有简要介绍)。
第二,说明蛋白质工程目前的现状:成功的例子不多,主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构,而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。
这样学习,可以使学生认识到科学探索之路的漫长、艰辛和永无止境。
四、答案和提示(一)思考与探究1.蛋白质工程是应怎样的需求而崛起的?提示(供教师在教学中参考):蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要。
而结构生物学对大量蛋白质分子的精确立体结构及其复杂的生物功能的分析结果,为设计改造天然蛋白质提供了蓝图。
分子遗传学的以定点突变为中心的基因操作技术为蛋白质工程提供了手段。
在已研究过的几千种酶中,只有极少数可以应用于工业生产,绝大多数酶都不能应用于工业生产,这些酶虽然在自然状态下有活性,但在工业生产中没有活性或活性很低。
这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在,反应温度较高,在这种条件下,大多数酶会很快变性失活。
提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课题。
一般来说,提高蛋白质的稳定性包括:延长酶的半衰期,提高酶的热稳定性,延长药用蛋白的保存期,抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等。
下面举一个如何通过蛋白质工程来提高重组β-干扰素专一活性和稳定性的例子。
干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。
将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达,产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg,只相当于天然产品的十分之一,虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多,但多数是以无活性的二聚体形式存在。
为什么会这样?如何改变这种状况?研究发现,β-干扰素蛋白质中有3个半胱氨酸(第17位、31位和141位),推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。
研究人员将第17位的半胱氨酸,通过基因定点突变改变成丝氨酸,结果使大肠杆菌中生产的β-干扰素的抗病性活性提高到108 U/mg,并且比天然β-干扰素的贮存稳定性高很多。
在基础理论研究方面,蛋白质工程是研究多种蛋白质的结构和功能、蛋白质折叠、蛋白质分子设计等一系列分子生物学基本问题的一种新型的、强有力的手段。
通过对蛋白质工程的研究,可以深入地揭示生命现象的本质和生命活动的规律。
2.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?答:基因工程是遵循中心法则,从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。
蛋白质工程是按照以下思路进行的:确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列,可以创造自然界不存在的蛋白质。
3.你知道酶工程吗?绝大多数酶都是蛋白质,酶工程与蛋白质工程有什么区别?提示:酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用,借助工程学的手段,应用于生产、生活、医疗诊断和环境保护等方面的一门科学技术。
概括地说,酶工程是由酶制剂的生产和应用两方面组成的。
酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业以及医药工业中。
α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡萄糖异构酶这三个酶连续作用于淀粉,就可以代替蔗糖生产出高果糖浆;蛋白酶用于皮革脱毛胶以及洗涤剂工业;固定化酶还可以治疗先天性缺酶病或是器官缺损引起的某些功能的衰竭等。
至于我们日常生活中所见到的加酶洗衣粉、嫩肉粉等,就更是酶工程最直接的体现了。
通常所说的酶工程是用工程菌生产酶制剂,而没有经过由酶的功能来设计酶的分子结构,然后由酶的分子结构来确定相应基因的碱基序列等步骤。
因此,酶工程的重点在于对已存酶的合理充分利用,而蛋白质工程的重点则在于对已存在的蛋白质分子的改造。
当然,随着蛋白质工程的发展,其成果也会应用到酶工程中,使酶工程成为蛋白质工程的一部分。
(二)正文中讨论题某多肽链的一段氨基酸序列是:…—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸—苯丙氨酸—…讨论:(1)怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。
(2)确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因(DNA)?答:(1)每种氨基酸都有对应的三联密码子,只要查一下遗传密码子表,就可以将上述氨基酸序列的编码序列查出来。
但是由于上述氨基酸序列中有几个氨基酸是由多个三联密码子编码,因此其碱基排列组合起来就比较复杂,至少可以排列出16种,可以让学生根据学过的排列组合知识自己排列一下。
首先应该根据三联密码子推出mRNA序列为GCU(或C或A 或G)UGGAAA(或G)AUGUUU(或C),再根据碱基互补配对规律推出脱氧核苷酸序列:CGA (或G或T或C)ACCTTT(或C)TACAAA(或G)。
(2)确定目的基因的碱基序列后,就可以根据人类的需要改造它,通过人工合成的方法或从基因库中获取。
(三)异想天开能不能根据人类需要的蛋白质的结构,设计相应的基因,导入合适的细菌中,让细菌生产人类所需要的蛋白质食品呢?提示:理论上讲可以,但目前还没有真正成功的例子。
一些报道利用细菌生产人类需要的蛋白质往往都是自然界已经存在的蛋白质,并非完全是人工设计出来而自然不存在的蛋白质。
主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂,人类对蛋白质的高级结构和在生物体内如何行使功能知之甚少,很难设计出一个崭新而又具有生命功能作用的蛋白质,而且一个崭新的蛋白质会带来什么危害也是人们所担心的。
(四)旁栏思考题1.你知道人类蛋白质组计划吗?它与蛋白质工程有什么关系?我国科学家承担了什么任务?提示:人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后,生命科学乃至自然科学领域一项重大的科学命题。
2001年,国际人类蛋白质组组织宣告成立。
之后,该组织正式提出启动了两项重大国际合作行动:一项是由中国科学家牵头执行的“人类肝脏蛋白质组计划”;另一项是以美国科学家牵头执行的“人类血浆蛋白质组计划”,由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕。
“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上第一个人类组织/器官的蛋白质组计划,由我国贺福初院士牵头,这是中国科学家第一次领衔的重大国际科研协作计划,总部设在北京,目前有16个国家和地区的80多个实验室报名参加。
它的科学目标是揭示并确认肝脏的蛋白质,为重大肝病预防、诊断、治疗和新药研发的突破提供重要的科学基础。
人类蛋白质组计划的深入研究将是对蛋白质工程的有力推动和理论支持。
2.对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现?答:毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下:(1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。
如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。
(2)对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。
前沿动态1.动物乳腺生物反应器1987年美国科学家戈登(Gordon)等人首次在小鼠的奶中生产出一种医用蛋白──tPA(组织型纤溶酶原激活物),展示了用动物乳腺生产高附加值产品的可能性。
利用动物乳腺生产高价值产品的方式称为动物乳腺反应器。
为什么要用动物乳腺作为反应器生产高价值的蛋白质产品呢?这是因为动物乳房是一种高度分化的专门化腺体,合成蛋白质的能力非常强,尤其是一些经过长期的遗传改良,专门产奶的乳用动物品种,蛋白质合成能力更是惊人。
一头优质奶牛,一年可产奶10 000 kg。
即便是一只奶山羊,一年也可产奶2 000 kg。
动物乳腺生物反应器归纳起来有四大优点:①产量高,且易收获目标产品,可以随乳汁分泌而排出动物体外;②目标产品的质量好。
动物乳腺组织不仅具有按遗传信息流向合成蛋白质的能力,而且具备一整套对蛋白进行修饰和加工的能力,如糖基化、羧化、磷酸化以及分子组装等,而微生物和植物系统都不具备这种全面的蛋白质后加工能力;③产品成本低;④从奶牛中提取产品,操作比较简单。
正因为利用动物乳腺生物反应器生产高附加值的产品有上述优点,目前利用动物乳腺生物反应器生产医用蛋白质已成为一种风险投资产业,受到科学家、商界和医药界的高度重视。
目前瞄准的目标医药产品有:①血液蛋白质,如表1-2所示,这些血液蛋白质有巨大的经济效益,其中利用奶牛生产的凝血酶Ⅲ已通过第三期临床实验,即将投放市场。
②第二代医用蛋白质,主要有抗体、降钙素、人的生长激素、胰岛素等药物蛋白,乳白蛋白、乳铁蛋白等营养蛋白,疫苗,组织修复物等。
③生产“人源化牛奶”,即用成人的乳蛋白基因替代牛的乳蛋白基因,使牛奶变成像人奶的一种基因工程奶。
表1-2 一些医用蛋白质的需求情况第8因子第9因子C蛋白凝血酶Ⅲ抗胰蛋白酶血纤蛋白原白蛋白市场需求量304 g 4 kg10 kg21 kg 5 t150 kg 315 t单价(美元/g)290万4万1万7 000500 1 000 3.50总价值(亿美元)8.82 1.60 1.00 1.50 2.50 1.50 11.20动物乳腺生物反应器的做法与转基因动物的操作是相同的,只是为了将目标产品在乳汁中形成,需要使用乳腺组织中特异表达的启动子,即在目标产品蛋白质编码框的前面加上乳腺组织中特异表达的启动子等,构建成表达载体后通过注射导入受精卵中,再将其送入母体动物内,发育成动物个体,这个转基因动物就会在奶中产生所需要的目标产品。