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上海市进口火龙果软腐病病害分析

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上海市进口火龙果软腐病病害分析火龙果(Hylocereus undatus Britt.et Rose)属仙人掌科三角柱属植物, 原产于西半球赤道附近中美洲热带雨林区域, 人工栽培遍及中美洲、以色列、越南、泰国、美国南部、我国台湾地区和海南、广东等地。

火龙果的经济价值高, 营养丰富,功能独特, 含有一般植物少有的植物性白蛋白、花色素、可溶性膳食纤维和多种矿物质营养元素及人体所必需的8 种氨基酸, 具有美容和保健的双重功效。

近年来, 火龙果作为一种营养价值高且口感好的水果, 受到消费者的广泛青睐, 然而, 国产火龙果数量远远满足不了人们的需求, 大量火龙果需要依赖于进口。

仅2010 年1?4 月, 越南、泰国等东盟国家通过广西口岸出口到我国的火龙果就达3.4 万t。

上海市水果市场销售的火龙果也主要依赖于从国外进口。

我们在对进口水果市场病害调查的过程中发现, 进口火龙果上存在大量的市场病害, 如镰刀菌(Fusarium spp.)、链格孢菌(Alternaria spp.)、炭疽菌(Colletotrichum spp.)等都能够危害市售进口火龙果。

前人对火龙果病害的研究多集中在采前田间病害, 而在采后病害方面报道很少, 仅马腾飞等的研究表明, 镰刀菌(Fusarium spp.)和链格孢菌(Alternaria spp.)是市售进口火龙果的主要市场病害, Taba 等的研究表明, Bipolaris cactivora 是日本火龙果的主要市场病害; 另外, 卢琨等研究认为火龙果采后贮藏病害主要是砖红镰刀菌(Fusariumlateritium Nees)、黑曲霉(Aspergillus niger V. Tiegh)和黄曲霉(Aspergillus flavus Link)。

由于火龙果的消费需求不断扩大, 其来源又主要依赖于进口, 因此对进口火龙果病原物的检验检疫和分析鉴定, 减少采后流通过程中的损失极为重要。

本研究以上海市水果市场销售的进口火龙果为研究对象, 通过病原形态学与分子生物学相结合的方法, 对进口火龙果市场病害进行分离与鉴定, 发现尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是引起进口火龙果采后软腐的最主要病原菌, 此外, 我们还对该菌的重要生物学特性进行了研究, 探明影响其正常生长的环境条件, 从而丰富了国内关于进口火龙果市场病害的研究, 为进一步研究其发病机理提供理论依据, 也为制定更健康环保的果蔬保鲜措施提供新思路。

1 材料与方法1.1 材料供试进口火龙果于2009 年3 月至2010 年7 月购自上海市水果销售市场(农工商超市、好又多大卖场、鲜果多水果超市)。

1.2 方法1.2.1 病原真菌分离及其致病性鉴定: 从病组织边缘切取病健交界处组织块(约4 mm×6 mm)和果实内部健康果肉进行表面灭菌, 放入马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板培养基中25 ℃条件下培养2?3 d。

当菌落直径长至1 cm 时, 用接种针挑取菌落边缘幼嫩菌丝转入另一PDA 平板内继续培养, 重复3 次即可获得纯化菌种。

无菌打孔器取直径5 mm的待鉴定菌菌碟, 并分别以有伤与无伤两种方法接种健康火龙果果实, 放入无菌干燥器内, 25 ℃条件下饱和湿度放置7 d, 记录致病症状并镜检观察病原菌的孢子形态。

接种用病原菌的制备、被接种果实的准备及有伤、无伤接种方法参考许玲等方法。

1.2.2 病原真菌的形态学鉴定: 观察感病火龙果外观发病症状, 体视显微镜下观察发病组织中有无病原菌菌丝。

在PDA 培养基上培养观察其菌落特征,诸如颜色、气味、生长速度、气生菌丝形态等; 用合成低营养培养基(SNA)[22]或Bilay 培养基[23]培养观察镰刀菌属真菌的显微特征, 镰刀菌种的鉴定所依据的显微特征主要包括大、小型分生孢子的产生情况及其形态; 厚垣孢子的有无和产生方式; 产孢细胞的类型等等。

依据上述指标参照Booth和邵力平等真菌形态学鉴定手册方法鉴定分离所得致病菌的种类。

1.2.3 病原真菌的分子生物学鉴定: (1) 基因组DNA 的提取。

称取0.05 g 在PDA 培养基上生长7 d 的待鉴定病原菌菌丝, 参考刘少华等的方法提取病原真菌基因组DNA, ?20 ℃条件下保存备用。

(2) 病原真菌rDNA-ITS 序列测定及其系统发育地位分析。

利用通用引物ITS1 (5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)扩增病原真菌基因组上保守的ITS 序列, 用以在分子水平上鉴定病原菌。

20 μL PCR扩增体系如下: 10×buffer 2 μL, MgCl2 2μL, 2.5 mmol/LdNTPs, 1.0个单位Taq DNA 聚合酶( 均购于TIANGEN 公司), 1 μL D NA 模板, 引物浓度均为0.2 μmol/L。

依照以下反应程序进行扩增: 94 ℃3 min; 94 ℃ 1 min, 55 ℃30 s, 72 ℃ 1 min, 30 个循环;72 ℃20 min。

扩增产物于1.0%琼脂糖凝胶电泳检测, 之后用胶回收试剂盒(上海莱枫生物技术有限公司)回收纯化, ?20 ℃保存备用。

回收纯化产物委托上海桑尼生物公司测序, 测序结果在 的数据库中进行比对,将病原菌鉴定到种, 并构建致病真菌的分子系统树,明确其进化地位。

(3) Fusarium oxysporum 种特异性片段的扩增分析。

为证明所得病原真菌是否属于F. oxysporum, 利用该菌的种特异性扩增引物FOF1(5′-ACATACCACTTGTTGCCTCG-3′)和FOR1(5′-CGCCAATCAATTTGAGGAACG-3′)扩增所得病原真菌的保守序列,以尖孢镰刀菌标准菌株(购买编号ACCC30069)为阳性对照进行比较, 同时以实验室菌种库中的灰霉菌(Botrytis cinerea: B.C.0510、B.C.0023)、禾谷镰刀菌(F. graminearum, 中国科学院植物生理生态研究所唐威华老师馈赠)、链格孢菌(Alternaria alternata, 购买编号ACCC310001)、芽枝霉(Cladosporium sp.)作为阴性对照。

1.2.4 环境因素对优势致病菌致病性的影响分析:(1) 温度对优势致病菌菌落生长和致病性的影响。

取25 ℃培养7 d 直径5 mm 的菌碟至PDA 平板, 分别置于5 ℃、15 ℃、25 ℃、35 ℃和45 ℃培养箱中恒温培养, 每24 h 测量菌落直径, 连续测量7 d。

每一处理设3 个平行, 共重复3 次。

(2) 温度对优势致病菌致病性的影响。

取25 °C培养7 d 直径5 mm的菌碟接种已表面消毒的健康火龙果表面, 分别置于5 ℃、15 ℃、25 ℃、35 ℃和45 ℃恒温条件下的无菌干燥器中, 饱和湿度放置,以不接菌的健康火龙果为空白对照。

7 d 后统计不同温度条件下的病斑直径、发病率和菌丝侵染深度,比较温度因素对致病优势菌致病性的影响。

(3) 光照对优势致病菌致病性的影响。

1.2.4(2)方法接种健康火龙果, 分别置于持续光照条件和持续黑暗条件下, 7d 后统计光照和黑暗条件下的病斑直径、发病率、菌丝侵染深度和果实硬度, 比较光照对致病优势菌致病性的影响。

1.2.5 优势致病菌株对其它果蔬的致病性比较: 取25℃培养7d 直径5 mm 的菌碟以有伤和无伤两种方式接种于已表面灭菌的健康葡萄、香蕉、番茄、黄瓜和茄子表面, 放入无菌干燥器内25℃恒温饱和湿度培养, 7d 后统计优势致病菌菌落直径和病斑直径, 明确优势致病菌是否具有广寄主性而造成严重危害。

2 结果与分析2.1 病原菌的分离从供试的市售感病进口火龙果发病部位共分离出32 株真菌和5 株细菌, 将分离得到的病原菌依照柯赫氏法则反接种鉴定证明, 5 株细菌均不具致病性, 20 株真菌具有致病性, 其中12 株病原真菌能够不同程度地导致火龙果采后腐烂, 经形态学初步鉴定属于镰刀菌属(Fusarium)、链格孢菌属(Alternaria) 、炭疽菌属(Colletotrichum) 和曲霉属(Aspergillus)等4 个属, 表2 为6 株代表菌株的致病性强弱比较, 其中2 株病原真菌的致病性最强, 可导致火龙果果实表面形成黄褐色病斑、病斑凹陷且边缘清晰, 果实褐变软腐, 与市售感病火龙果的典型发病症状相符合(图1B)。

由此确定进口火龙果的采后软腐病主要由这两种病原真菌侵染引起, 分别编号为EXHC-1 和EXHC-2。

2.2 病原菌的形态学鉴定致病菌 EXHC-1 在25 ℃条件下生长迅速, PDA培养基上生长7 d 菌落直径即可以达到8.0 cm,EXHC-1 在生长初期可形成白色絮状菌丝体,随后菌丝中央转变为淡紫色, 在PDA 培养基中分泌淡紫色或紫红色色素。

该菌可形成两种类型分生孢子, 大型分生孢子镰刀形、多细胞、具3?5隔,(27?46) μm×(3.0?4.5) μm;小型分生孢子卵圆形至椭圆形、透明、单胞、平直或弯曲, (4?7)μm×(2.5?4.0) μm ;厚垣孢子在菌丝短侧枝上呈链状着生, 球形。

相同培养条件下EXHC-2 的菌落直径可达6.0 cm, 其在PDA 培养基上培养7 d的菌落呈橘黄色, 可形成致密的淡黄色气生菌丝, 在培养基中分泌黄色至橘黄色色素。

该菌大型分生孢子很少, 小型分生孢子的形态为宽新月状, 无色透明、中间有分隔, (10?17) μm×(3?4) μm,产孢方式为瓶梗式。

根据致病症状和病原菌的菌落及显微形态特征, 参照真菌分类鉴定手册可初步确认, 这两种致病真菌为镰刀菌属的种。

2.3 致病菌的分子生物学鉴定2.3.1 致病菌的rDNA-ITS 序列测定及其系统发育地位分析: 采用真菌 rDNA-ITS 分子标记法将进口火龙果上分离得到的强致病性镰刀菌鉴定到种。

以病原真菌的基因组DNA 作为模板, 利用通用引物扩增得到EXHC-1 的rDNA-ITS 序列505 bp,EXHC-2 的rDNA-ITS 序列523 bp。

BLAST 比对结果表明, EXHC-1 的rDNA-ITS 序列(GenBank 注册号HQ271449)与半知菌亚门、从梗孢目、瘤座孢科、镰刀菌属的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)(GenBank 注册号DQ535184)的ITS 序列100%同源,而EXHC-2 的rDNA-ITS 序列则与单隔镰刀菌(Fusarium dimerum, GenBank 注册号EU926284)的同源性为99%, 由此可确定, 进口火龙果上的主要致病菌为尖孢镰刀菌和单隔镰刀菌。

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火龙果种植的茎腐病防治

火龙果种植的茎腐病防治

火龙果种植的茎腐病防治
【火龙果种植的茎腐病防治】火龙果是一种有着很好的营养价值的水果，对我们的生活也有着不小的帮助，但是在种植的时候却经常会引发病虫害的危害，其中常见的病害有茎腐病的危害，我们要及时的对其进行防治，下面，小编就给大家介绍一下火龙果茎腐病的防治技巧。

火龙果种植之茎腐病危害火龙果茎腐病主要是由真菌引起的病害。

其主要危害火龙果茎基部或地下主侧根，病部开始为暗褐色，以后绕茎基部扩展一周，使皮层腐烂，地上部叶片变黄、萎蔫，后期整株枯死，病部表面常形成黑褐色大小不一的菌核。

火龙果种植的茎腐病防治方法①选用对茎腐病具有较强抵抗力的火龙果品种，以减少病害的发生。

②加强园区管理，合理施肥，合理密植，降低土壤湿度等，增强植株抗病能力，减少茎腐病的发生。

③合理轮作，深翻土地，清除病残和不施用未腐熟的有机肥，减少田间菌源的传播。

④喷施38%恶霜嘧铜菌酯1000倍液或30%甲霜-恶霉灵800倍液或福美双500倍药液进行药剂防治。

这些就是小编整理的一些火龙果种植的茎腐病防治技巧了，大家学会了吗？。

火龙果常见病害及其防治

火龙果常见病害及其防治

２ ． ２ 控 制 土壤传 播 ， 坚持 实行 轮 作
病 茎最初 出现 水渍 状 圆形斑 点 ，紫褐 色 ，直径 ０ ． ５ ￣ ２ ｅ ｍ， 散 生 凹陷 ， 很 快 干枯成 黑 色 ， 外 围有黑 紫色 晕圈， 病斑 上散 生黑 色小 点 。果 实上发 病 ， 初 为暗绿 色水 渍状 小点 ， 扩 大后为 圆形 或椭 圆形 凹陷 ， 暗褐 色
大小 的小 黑点 ，小黑 点散 生或 呈 不规 则 的轮纹状 （ １ ） 炭疽病 、 茎枯 病 ： 可 选用 ７ ０ ％甲基 托 布 滓 ８ ０ ０倍 液 、 ５ ０ ％多 菌 灵 粉 剂 ６ ０ ０ ￣ ８ ０ ０倍 液 、 ５ ０ ％退 菌
特 １ ０ ０ ０倍 液 喷雾 防 治 ； （ ２ ） 枯萎病 ： 可选用 １ ０ ％双 效灵 水 Ｎ２ ｏ ｏ倍 液 或 ５ ％治萎 灵水 剂 ２ ０ ０倍 液 ， 在植
２ ． ３ 加 强 田 园管理
至黑 褐色 ， 凹陷处龟 裂 、 皱缩 ， 腐烂 或 畸形 、 脱落 。
１ ． ２ 枯 萎病
整个 生育期 均可 发 生 ， 开 花 到结果 期最 重 。 病株
生长 缓慢 ， 植株 茎节 失水 褪绿 变黄 萎蔫 ， 前 期 白天萎 蔫 夜 间恢复 ， 病 部 形成 褐 色 长 条形 病 斑 ， 常纵 裂 ， 分
少 病原 菌 累积 ； 及 时 中耕 除 草 ， 加 强植 株 调整 ； 清除 枯 死 的主 茎 和部 分侧 枝 ， 适 时去 顶 ， 防止倒 伏 ； 田间
操作 过程 中切 勿伤 根 ，以免造 成伤 口让病 菌有 可乘
多发 生于 中下部 茎 节 ，最初 形成 针刺 状乳 白色
针尖 大小 的小 斑点 ，病 斑逐 渐褪 绿变 为 中间色泽 较
【火龙果病虫害防治】火龙果软腐病防治方法,火龙果软腐病特效药有哪些？

【火龙果病虫害防治】火龙果软腐病防治方法,火龙果软腐病特效药有哪些？

【火龙果病虫害防治】火龙果软腐病防治方法，火龙果软腐病特效药有哪些？火龙果软腐病是由欧文氏杆菌引起的病害，主要发生在火龙果的茎干，具有严重的危害，近期有种植火龙果的网友咨询：火龙果软腐病图片是怎么样，火龙果软腐病症状是如何识别？火龙果软腐病发生规律是怎么样，火龙果软腐病发生原因是什么？火龙果软腐病防治方法有哪些，火龙果软腐病防治特效药有哪些？以下就作简单介绍，供网友们参考。

一、火龙果软腐病症状及危害火龙果受到软腐病危害后，在茎干处形成病斑，病斑初期呈浸润状半透明，后期病部呈水渍状，为黏滑软腐状，发出腥臭，并且蔓延至整个茎节,最后只剩茎中心的木质部。

一般发生在植株中上部的嫩节，由伤口侵染引起，如修剪伤口和虫咬伤口。

软腐病常造成发病节腐烂甚至向下和向上蔓延至其它茎节，病斑成片状由叶柄向上扩展，终使叶球由外向内，不断腐烂；由根部向上扩展时，叶球则由内向外腐烂，呈乳黄色烂泥状，有臭味，最终失去商品价值。

二、火龙果软腐病传播途径和发病原因1、由于果苗期管理不善，田间土壤湿度过大造成发病。

2、由于伤口侵染引起，如虫咬、修剪等，对果树造成伤口，病菌从伤口侵入致病。

三、火龙果软腐病防治方法1、选用对软腐病具有较强抗性的火龙果品种。

2、培育壮苗，适时定植，合理密植。

雨季及时排水，尤其下水头不要积水。

3、及时喷洒杀虫剂防治棉铃虫等蛀果害虫。

4、剪切伤口干后（剪后一两天），用铜大帅等铜制剂、或农用链霉素、或石硫合剂等单独进行喷雾，一般每隔7～10天喷一次，共喷2～3次。

5、软腐病病害轻或发生在茎节边缘的，用刀把受害部分割掉；病害重或发生在整个茎节的，把整个茎节剪除。

再用方法4进行处理。

6、在雨前雨后及时喷洒72％农用硫酸链霉素可溶性粉剂4000倍液或新植霉素4000倍液、50％琥胶肥酸铜可湿性粉剂500倍液、77％可杀得可湿性微粒粉剂500倍液、47％加瑞农可湿性粉剂800～1000倍液、30％碱式硫酸铜(绿得保)悬浮剂400倍液。

火龙果采后病害与防控技术研究进展

火龙果采后病害与防控技术研究进展

火龙果采后病害与防控技术研究进展火龙果是一种热带水果，其美丽的外观和丰富的营养成分深受人们喜爱。

火龙果在采后容易受到各种病害的侵扰，严重影响了火龙果的质量和保质期。

火龙果采后病害的防控技术研究成为了当前的重要课题。

本文将对火龙果采后病害的现状进行分析，并探讨其防控技术的研究进展。

一、火龙果采后病害的现状火龙果采后易受到青瓢病、炭疽病、变色病、灰霉病等多种病害的侵扰。

青瓢病是火龙果采后最常见的病害之一，主要表现为果实软腐变质、表面出现褐色斑点，从而影响果实的外观和口感。

炭疽病则表现为果实表面出现黑斑，进而蔓延至果肉，严重影响果实的食用价值。

变色病会导致果实的颜色不均匀，影响外观。

灰霉病则主要表现为果实表面覆盖灰色霉斑，果实变软，逐渐腐烂。

这些病害的发生主要受到多种因素的影响，比如采收后的伤害、环境条件、病原微生物等。

火龙果采后的病害还受到果实自身特性的影响，比如果皮的脆弱性、果实的抗病性等。

对火龙果采后病害的防控技术进行研究，对提高火龙果的质量和市场竞争力具有重要意义。

1. 低温贮藏技术低温贮藏技术是目前火龙果采后病害防控的主要方法之一。

通过将火龙果贮存在低温环境下，可以抑制病原微生物的生长，延长果实的保鲜期。

研究表明，火龙果在0-10摄氏度的低温环境下贮藏7-14天，可以有效减少青瓢病和炭疽病的发生，保持果实的质量。

采用适当的包装材料和贮藏条件，也可以提高火龙果的贮藏效果。

2. 生物防治技术生物防治技术是一种环保、安全、高效的病害防控方法，近年来在火龙果采后病害防治中得到了广泛应用。

利用益生菌、拮抗菌等有益微生物，可以有效抑制火龙果病原菌的生长，减少病害的发生。

研究表明，喷施拮抗菌剂可以有效预防火龙果的病害，提高果实的质量和产量。

3. 包装和保鲜技术采用适当的包装和保鲜技术可以有效降低火龙果采后病害的发生。

比如利用透气性好、防水防潮的包装袋包装火龙果，可以减少果实的受伤和病害的侵袭。

采用氧化还原膜、抗氧化膜等新型包装材料，也可以延长果实的保鲜期，提高火龙果的市场价值。