血液实验10级

实验一红细胞计数一、实验目的：掌握红细胞计数原理及技术。

二、实验原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。

三、实验器材及试剂：显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。

四、实验操作：1、取试管1支，加稀释液3.98ml或1.99ml。

2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。

3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部，再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次，立即摇匀。

4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。

5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。

6、静止2-3分钟，待经红细胞下沉后，用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。

五、计算N(五个中方格内RBC数)×5×10×106×200=N×1012个/升×5：表示5个中方格内RBC数换算为1个大方格内RBC数× 10：1个大方格容积、0.1ul、换算为1ul内RBC数× 106：1ul换算为1升内红细胞数× 200：稀释倍数六、正常参考值正常参考值：成年男性：4.00-5.50×1012/升成年女性：3.50-5.00×1012/升新生儿： 6.00-7.00×1012/升实验二血红蛋白测定一、实验目的：掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。

二、实验原理：血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋（HicN）。

HicN最大吸收峰540nm，最小吸收波谷504nm，在特定的条件下，毫摩尔消光系数为44L.mmol-1 .cm-1 ，因此根据标本的吸光度，即求得血红蛋白浓度。

三、实验操作：1、取指血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中，混匀，静止5分钟。

动物病理学实验指导唐海蓉银梅王选年李敬玺编河南科技学院动物科学学院2011年3月编写说明家畜病理学是一门实践性很强的、重要的专业基础理论课。

为了保证教学质量，使学生不仅能学好基本理论知识，而且能扎实掌握有关的基本技能和实验操作技术，做到理论和实践的有机结合，进而应用于实践中，必须注意加强实验教学。

为此，我们依据教学大纲要求，结合我院实际，在认真总结我院和其他农业高校本课程实验教学经验的基础上，编写了本实验指导。

本实验指导内容包括十一个实验、尸体剖检技术和石蜡切片技术。

由于作者水平有限，我们真诚希望本书的使用者和读者能提出合理的批评和建议，我们先表示衷心的感谢。

2011年3月4日目录前言 (3)实验一淋巴结的屏障机能观察 (6)实验二局部血液循环障碍标本和切片观察 (7)实验三细胞与组织的损伤标本和切片观察 (8)实验四炎症的渗出现象 (9)实验五肿瘤标本和切片的观察 (10)实验六心血管、造血、呼吸系统病理标本和切片观察 (11)实验七消化、泌尿和神经系统病病理标本和切片观察 (12)实验八细菌性疾病病理标本和切片观察 (13)实验九病毒性疾病病理标本和切片观察 (14)实验十寄生虫病和霉菌病的标本和切片观察 (15)实验十一鸡的尸体剖检 (16)附录一尸体剖检技术 (17)一、尸体剖检的准备及注意事项 (17)二、几种动物的尸体剖检技术 (18)附录二石蜡切片技术 (27)前言家畜病理学是兽医学科中一门实践性很强的专业基础理论课程，其任务是以辩证唯物主义哲学思想为指导，通过研究疾病的原因、发病机理和患病机体内所呈现的代谢、机能和形态结构的变化来阐明疾病发生、发展及转归的基本规律，为疾病的诊断和防治提供科学的理论基础。

家畜病理学教学中，实验课占有重要地位，它是学好本门学科基础理论、认识典型病理变化和了解病理学研究基本方法的重要途径。

家畜病理学实验课是理论教学的延续和发展，它的目的不仅是验证理论、加深理解，更重要的是培养学生的观察分析问题能力和独立操作技能。

辅酶Q10经蛋白激酶A/胞浆型磷脂酶A2信号通路抑制血小板血栓素A2的生成牙甫礼1，张春梅2，陈彬林3，谷仕艳1，贾小娥1（1.大理大学公共卫生学院，预防医学研究所，云南大理 671000；2.河口海关，云南河口 661300；3.广西壮族自治区妇幼保健院营养科，广西南宁 530000）摘 要：目的：血小板来源血栓素A2（thromboxane A2，TxA2）可诱发动脉粥样硬化和血栓形成，辅酶Q10（coenzyme Q10，CoQ10）可以抑制血小板活化、聚集和血栓形成。

本实验旨在通过体外实验探讨CoQ10对血小板TxA2生成的影响及其调控机制。

方法：用不同浓度（0、1、10、100 μmol/L）CoQ10与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min，在激动剂激活条件下，采用酶联免疫吸附测定法测定血小板分泌TxB2水平；用Western blot蛋白免疫印迹法检测胞浆型磷脂酶A2（cytosolic phospholipase A2，cPLA2）蛋白的磷酸化水平。

结果：CoQ10显著抑制多种激动剂（如凝血酶、胶原和Convulxin）诱导的血小板TxA2生成；Western blot结果显示CoQ10下调凝血酶和胶原诱导的血小板cPLA2磷酸化水平；cPLA2特异性抑制剂苯乙酮与CoQ10联合使用时，对血小板TxA2的生成没有协同效果；此外，蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）特异性抑制剂H89可完全逆转CoQ10对激动剂诱导的血小板cPLA2 磷酸化和TxA2生成的抑制作用。

结论：CoQ10具有显著抑制激动剂诱导的血小板TxA2生成的作用，其机制主要是调控PKA/cPLA2介导的信号通路。

关键词：辅酶Q10；血小板；血栓素A2；胞浆型磷脂酶A2；心血管疾病Coenzyme Q10 Attenuates Platelet Thromboxane A2 Generation through Regulating theProtein Kinase A/Cytosolic Phospholipase A2 Signaling PathwayYA Fuli1, ZHANG Chunmei2, CHEN Binlin3, GU Shiyan1, JIA Xiao’e1(1. Institute of Preventive Medicine, School of Public Health, Dali University, Dali 671000, China;2. Hekou Customs of the People’s Republic of China, Hekou 661300, China;3. Department of Nutrition, Maternity and Child Health Care of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Nanning 530000, China)Abstract: Objective: Thromboxane A(TxA2) derived from platelets can facilitate atherosclerosis and thrombosis. Previous2studies have demonstrated that coenzyme Q10 (CoQ10) attenuates platelet activation, aggregation and thrombus formation.Our present study aimed to investigate the effect of CoQ10 on TxA2 generation and to clarify the underlying mechanisms.Methods: Gel-filtered platelets prepared from heathy adults were incubated with different concentrations of CoQ10 (0, 1, 10 and 100 μmol/L) for 50 min. After agonist activation, the level of TxB2 secreted from platelets was determined by enzyme-linked immunosorbent assay. The phosphorylation of cytosolic phospholipase A2 (cPLA2) was measured by Western blot. Results: CoQ10 significantly inhibited platelet TxA2 generation induced by several agonists, including thrombin, collagen and convulxin. Western blot showed that CoQ10 significantly down-regulated thrombin- and collagen-induced cPLA2 phosphorylation. Moreover, pyrrophenone, a cPLA2 specific inhibitor, showed no any additive effects on TxA2 generation when combined with CoQ10. Furthermore, the inhibitory effect of CoQ10 on agonist-induced platelet cPLA2 phosphorylation and TxA2 generation was almost completely reversed by protein kinase A (PKA) inhibitor H89.Conclusion: CoQ10 can attenuate agonist-induced platelet TxA2 generation, and the mechanism is mainly through regulating the PKA/cPLA2 signaling pathway.Keywords: coenzyme Q10; platelet; thromboxane A2; cytosolic phospholipase A2; cardiovascular diseasesDOI:10.7506/spkx1002-6630-20200608-108中图分类号：R151.4 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2021）09-0130-07收稿日期：2020-06-08基金项目：大理大学2020年度高层次人才科研启动基金项目（KY2096107240）；大理大学2018年度博士科研启动基金项目（KYBS2018006）第一作者简介：牙甫礼（1989—）（ORCID: 0000-0002-7810-4403），男，讲师，博士，研究方向为营养与慢性病防治。

抽血技术的操作流程及评分标准抽血是临床上常见的操作之一，用于获取人体血液样本进行化验或其他诊断检查。

正确的抽血技术操作对确保实验室结果的准确性以及患者的安全至关重要。

本文将介绍抽血技术的操作流程，并提供一些评分标准以确保每次抽血操作的质量。

一、抽血技术的操作流程1.准备工作：a.检查抽血所需的材料是否齐全，包括一次性使用的针头、注射器、试管、消毒棉球、适量的试验物等；b.检查抽血设备是否完好无损；c.与患者进行沟通，解释抽血的目的和过程，并得到患者的同意；d.检查患者的身份信息，确保与申请单上的信息一致；e.选择适当的抽血部位，如经常使用的前臂部位。

2.操作步骤：a.戴好手套，洗手并进行手部消毒；b.通过视觉和触觉检查抽血部位的皮肤是否有异常情况，如红肿、破损等；c.使用消毒棉球擦拭抽血部位，保持无菌；d.在患者的静脉位置，使用针头轻轻插入皮肤，进入静脉；e.尝试抽取血液，注意同时松开注射器的柱塞；f.当血液开始顺畅流动，停留足够的时间以确保采集足够的血液样本；g.缓慢地拔出针头，并用消毒棉球压迫抽血部位，以减少出血和形成血肿的可能性；h.丢弃一次性使用的针头和注射器，将采集到的血液样本转移到相应的试管中；i.将试管标记并妥善保存，以便后续的实验室检测；j.清理现场，并嘱咐患者观察抽血部位是否有异常情况。

3.记录与报告：a.及时记录抽血的相关信息，包括日期、时间、抽血部位、采集量等；b.将相关信息报告给临床医生或相应的实验室。

二、抽血技术操作的评分标准为了确保抽血操作的质量和安全性，以下是一些常见的评分标准供参考：1.手部消毒：是否按规定的步骤和时间进行手部消毒。

2.抽血部位准备：是否按规定的方法进行抽血部位的清洁和消毒。

3.插针技术：是否准确判断静脉位置，并采用适当的技术插入针头。

4.采血流畅度：是否成功采集到足够的血液样本，血液是否顺畅流动。

5.针头的拔出及止血：是否轻柔地拔出针头，并采用适当的压迫措施进行止血。

缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素高伟飞（浙江中医药大学滨江学院10级临床专业临滨1班4组20102090114）一、实验目的：1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用2.复制几种类型缺氧的模型，观察血液颜色的特点，分析其机制根据大纲要求：掌握概念：缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧，紫绀、肠源性紫绀。

熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。

熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度，动静脉血氧含量差)。

掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制，掌握各型缺氧的特征（血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化）。

二、实验原理：当组织供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。

不同类型的缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状也不同。

根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。

影响机体对缺氧耐受性的因素很多，如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。

本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。

实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度，观察动物的缺氧耐受性。

三、实验对象：小鼠四、实验材料：电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸；生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等五、实验方法：1、取2只小鼠，注射及处理：1号：亚硝酸钠及美兰0.2ml ，左下腹注射2号：亚硝酸钠及生理盐水各0.2ml ，左下腹注射注射完，观察，2号小鼠立即死亡，1号小鼠仍存活；然后处死解剖，剪下一片肝脏组织放于滤纸上，观察肝的颜色。

2、取2只小鼠称重，编号3、4注射及处理：3号：氯丙嗪0.2ml，左下腹注射4号：生理盐水0.2ml 左下腹注射将3、4号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶，塞上塞子，记录下量筒的液面，连通耗氧装置，开始计时，直至小鼠死亡，记录下时间和量筒下降的液面刻度计算两只小鼠的耗氧量小鼠耗氧率R（ml/min/g) =A/（W*t.）六、实验结果：1、几种类型的缺氧序号注射及处理缺氧类型肝脏颜色1 NaNO2+美兰0.2ml血液性缺氧暗红色2 NaNO2+生理盐水0.2ml血液性缺氧青石板色2、不同条件下小鼠缺氧耐受性序号体重（g）注射及处理存活时间总耗氧量(ml)耗氧率(ml/min/g)3 18.8 氯丙嗪0.2ml（冰浴）27分8 0.0164 20.6 生理盐水（常温）27分18 0.032七、实验分析：1、血液性缺氧：由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。

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1A00-B99传染病和寄生虫病
2C00-D48 肿瘤
3D50-D89 血液及造血器官疾病和涉及免疫机制的疾患
4E00-E90 内分泌、营养和代谢疾病
5F00-F99 精神和行为障碍
6G00-G99 神经系统疾病
7H00-H59 眼和附器疾病
8H60-H95 耳和乳突疾病
9 I00-I99 循环系统疾病
10J00-J99 呼吸系统疾病
11K00-K93 消化系统疾病
12L00-L99 皮肤和皮下组织疾病
13M00-M99 肌肉骨骼系统和结缔组织疾病
14N00-N99 泌尿生殖系统疾病
15O00-O99 妊娠、分娩和产褥期
16P00-P96起源于围生期的某些情况
17Q00-Q99先天性畸形、变形和染色体异常
18R00-R99症状、体征和临床与实验室异常所见，不可归类在他处者19S00-T98 损伤、中毒和外因的某些其他后果
20V01-Y98 疾病和死亡的外因
21Z00-Z99 影响健康状态和与保健机构接触的因素
22U00-U99用于特殊目的的编码。