果王素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆功能的改善作用
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核桃叶提取液对衰老模型小鼠记忆力的影响【摘要】[目的]观察核桃叶提取液对小鼠记忆功能的影响. [方法]将84只小鼠随机分为空白对照组、模型组、维生素E组和核桃叶提取液大、中、小剂量组,每组各为14只.给予小鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,核桃叶提取物各剂量组灌胃给予相应剂量的核桃叶提取液,30 d后利用Morris水迷宫仪观察小鼠记忆能力. [结果]与模型组比较,核桃叶提取液各剂量组小鼠搜索站台的潜伏期均明显缩短,而穿越站台的次数则明显增加. [结论]核桃叶对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的记忆功能具有一定的改善作用.【关键词】抗衰老药(中药);植物,药用;小鼠ABSTRACT: OBJECTIVE To observe the effects of the Walnut leaf for memory in mouse. METHODS The senescence model of mice was established by subcutaneous injection with the D-galactose. Total 84 mice were randomly divided into control group, model group, Vitamin E group and large, medium and small dose of the Walnut leaf extract groups. The mice were given by intragastric administration with different dose of the Walnut leaf extract for thirty days, and then the ability of memory was examined by the Morris water maze. RESULTS The latent period of searching platform was shortened and exploratory behavior was enhanced in every medication group as compared with the model group. CONCLUSION The Walnut leafextract has some effects of improvingthe memory in senescence model of mice induced by D-glactose.Key words:antiaging drugs(TCD);plants, medicinal;mice核桃叶别名为胡桃叶,为胡桃科植物胡桃(Juglans regia L)的叶.研究表明,核桃叶具有较好的体外抗菌作用,还具有抑制肿瘤细胞生长的作用[1,2].本实验采用D-半乳糖制作小鼠衰老模型,利用Morris水迷宫仪观察了核桃叶提取液对小鼠记忆功能的影响,旨在为核桃叶的临床应用提供依据.1 材料与方法1.1 材料实验动物取健康昆明种小鼠,雌雄各半,体重为(20±2)g,由延边大学医学部实验动物科提供.核桃叶水提取液:采集长白山地区核桃叶,晒干,粉碎,加水浸泡24 h,水煎提取4次,合并提取液,浓缩得质量浓度为10 g/L的核桃叶生药;D-半乳糖为国药集团化学试剂有限公司产品;维生素E为浙江医药股份有限公司产品.Morris水迷宫视频分析系统及Dig Behv动物行为分析系统为上海吉量软件科技有限公司产品.1.2 方法1.2.1 动物分组及处理取84只健康昆明种小鼠,雌雄各半,适应环境1周后按体重随机分为6个组,即空白对照组、模型组、维生素E组和核桃叶提取液大、中、小剂量组,每组各为14只.每日给予除空白对照组外的其他各组小鼠皮下注射D-半乳糖0.12 g/kg,给予空白对照组小鼠皮下注射50 mL/kg生理盐水.同时,每日分别灌胃给予核桃叶水提取液大、中、小剂量组小鼠核桃叶水提取液12,6,3 g/kg,灌胃给予维生素E组小鼠维生素E 100 mg/kg,模型组和空白对照组每日灌胃给予100 mL/kg蒸馏水,连续30 d.于第31日起利用Morris 水迷宫视频分析系统和Dig Behv动物行为分析系统软件测试记忆能力.1.2.2 动物的训练与测试本实验所用的通用Morris水迷宫是直径为120 cm,高为50 cm的圆形水池,其内壁为黑色,池内水深为22 cm,水温保持在(22±2)℃,房间内光照恒定,无光线反射在水面.池壁上以4个等距离点,即东(E)、南(S)、西(W)、北(N)将水池分为4个象限,分别称为SW,NW,SE,NE象限.在NE象限正中,距池壁30 cm处放置1个直径为6 cm,高为21.5 cm的圆形黑色站台,站台低于水面0.5 cm,迷宫上方安装着连接显示系统的摄像机.训练时间为4 d,每日分上、下午时间段,其中上午为8:00~10:00,下午为13:00~15:00,每个时间段内每组小鼠均连续训练2次,其间隔不短于10 min.训练时将小鼠在南(S)点面向池壁放入水中,开始计时,若小鼠在60 s内搜索到站台并停留10 s,则以其后的时间为潜伏期;若小鼠在60 s 内未搜索到站台,则将其引至站台并停留10 s,潜伏期记录为60 s [3].于实验第6日检测各组小鼠长时程记忆功能,内容包括定位游泳和空间搜索.游泳实验时选择SW象限的中心作为入水点,将小鼠面向池壁放入水中,检测小鼠寻找站台的潜伏期.间隔10 min后撤除站台,进行空间搜索实验.将站台撤除后,同样选择SW象限的中心作为入水点,将小鼠面向池壁轻轻放入水中,观察并记录60 s内小鼠穿越原站台位置的次数.1.2.3 统计学处理小鼠运动轨迹及测试结果的显示处理均采用上海吉量软件科技有限公司研制的动物行为分析软件.所有数据从Morris水迷宫分析系统数据库中调出,以均数±标准偏差(±SD)表示,组间比较采用t检验,统计学处理采用SPSS 10.0软件进行.2 结果2.1 各组小鼠定向游泳时潜伏期的比较各组小鼠不同训练时段的潜伏期见表1.模型组与对照组相比较,第1~4日的潜伏期及平均潜伏期间无显著性差异(P>0.05);核桃叶提取液大、中、小剂量组小鼠第1日的潜伏期较模型组明显缩短,相比较均有显著性差异(P<0.05),第2,3,4日的潜伏期及平均潜伏期间无显著性差异(P>0.05).2.2 各组小鼠记忆力的比较于实验第6日检测小鼠形成的空间记忆,结果见表2.由表2可见,与空白对照组相比,模型组小鼠搜索站台的潜伏期和穿越站台的次数不同程度地延长和增多,其中搜索站台潜伏期的变化间有显著性差异(P<0.05),提示模型制作成功.与模型组比较,维生素E组小鼠穿越站台的次数明显增多,组间比较有显著性差异(P<0.01),但搜索站台的潜伏期间无显著性差异(P>0.05);各剂量核桃叶提取液组小鼠穿越站台的次数均明显增加,搜索站台的潜伏期均明显缩短,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01).表1 各组小鼠定向游泳实验中潜伏期的比较表2 各组小鼠空间搜索能力的比较3 讨论学习记忆是脑的重要功能,药物可直接作用于各种记忆过程,同时机体的各种精神活动如情绪、动机、内分泌、活动水平及应激状态等也可间接影响记忆过程.D-半乳糖对学习记忆能力的影响在于代谢产物半乳糖醇在体内不能被进一步代谢而堆积在细胞内,影响渗透压导致细胞肿胀、代谢紊乱及体内活性氧水平升高,导致细胞膜脂质受损,出现脑神经元退行性变化,包括神经元数目减少、脑组织中SOD 活性下降、MDA及脂褐素浓度升高、B型单胺氧化酶(MAO-B)活性增高等变化,表现为学习记忆能力下降,这种变化与自然老龄小鼠相似[4].学习记忆过程较复杂,而它的神经基础是神经元之间的连接,并依靠突触结构、形态和功能的可塑性及合成学习记忆信息传递的载体,如乙酰胆碱、儿茶酚胺、γ-氨基丁酸、神经肽等神经递质有关[5].这些学习记忆过程中必需的神经递质又与各种营养素紧密相关,所以摄食调结在一定程度上可改善或促进记忆力.核桃叶内含有没食子酸、缩没食子酸、油酸、柠檬烯、胡桃叶醌、胡桃甙、5-羟色胺及黄酮等多种化学成分[6,7],具有抗氧化作用[8].目前,国内外多采用建立条件反射的方法检测动物的行为和脑的高级功能,其中水迷宫法的应用较为广泛.本研究结果表明,各剂量核桃叶提取液组小鼠在早期搜索站台潜伏期均明显缩短,增加小鼠穿越站台的次数,提示核桃叶水提取液可明显改善衰老模型小鼠空间位置觉和方向觉(空间定位),改善记忆功能.【参考文献】[1]姚振生,叶荷平,陈杰,等.野核桃叶提取物的体外抗菌作用[J].江西中医学院学报,2001,13(3):122.[2]宋华,包永明,张红梅,等.核桃楸叶提取液对肿瘤细胞的抑制作用[J].大连轻工学院学报,2001,20(2):109.[3]张莉,于玮,韩太真,等.不同训练方式建立大鼠空间记忆后海马结构NMDA受体表达的变化[J].生理学报,2006,58(5):442.[4]骆静,郑陶冶,莫扎拜,等.火麻仁提取液对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆及代谢产物的影响[J].北京师范大学学报(自然科学版),2003,39(3):386.[5]徐项桂,桑虎,陆俊.螺旋藻对小白鼠生长发育过程中学习记忆能力的影响[J].中华临床医学卫生杂志,2005,3(11):1.[6]江苏新医学院.中药大词典[M].上海:上海科学技术出版社,2003.1 546.[7]翟梅枝,张凤云,高绍棠,等.核桃液总黄酮提取方法研究[J].陕西林业科技,2000,27(1):5.[8]尉芹,马希汉,韩学文,等.核桃叶抗氧化作用的研究[J].食品科学,2001,22(7):81.。
枸杞对半乳糖致衰老小鼠学习记忆影响(一)【摘要】目的观察枸杞对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。
方法建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,跳台实验检测其学习记忆能力,同时测定其大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,用黄嘌呤氧化酶法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥法测定大脑丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用枸杞汁后上述指标变化。
结果与D-半乳糖模型组比较,各实验组均可提高小鼠的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大脑SOD 活性、降低MDA含量(P<0.05或P<0.01),可显著升高大脑AchE活性(P<0.05,或P<0.01)。
结论枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能,其机制可能与枸杞的抗氧化自由基作用有关。
【关键词】枸杞阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病,其发病有增加的趋势〔1〕。
枸杞(Fructuslycii)是我国传统的药材,它含有丰富的营养成分和药理活性成分。
现代医学已证实,枸杞可调节免疫、延缓衰老和清除自由基等功能。
本实验采用半乳糖所致衰老小鼠模型,研究AD 小鼠学习记忆能力、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化及枸杞对这些指标的影响,并分析其作用机制,为临床应用提供理论依据。
1材料与方法试验动物及分组昆明小鼠雄性75只,体重(24g±2)g(包头医学院动物室)。
随机分为5组,每组15只,即对照组,D-半乳糖模型组,低、中、高3个枸杞汁剂量组。
饲养过程中对照组和模型组各死亡3只,枸杞汁剂量组各死亡2只。
药物与仪器枸杞(包头市奇力康医药公司)。
D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司,批号030406)。
AchE试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
752C紫外-可见分光光度计、721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
STT-2型跳台仪(中国医科院药研所);德国来卡2135型切片机、加样器(上海伟业有限公司)。
苦参总黄酮对D—半乳糖致衰老小鼠的影响该文研究了苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对D-半乳糖致衰老小鼠的影响,并探讨其作用机制。
将60只小鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组(阳性对照组)、苦参总黄酮低、中、高剂量组。
采用D-半乳糖(160 mg·kg-1)颈背部皮下注射连续30 d建立亚急性衰老小鼠模型,造模同时,苦参总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃苦参总黄酮(150,300,600 mg·kg-1),连续30 d。
采用跳台试验、避暗试验来检测小鼠的学习记忆能力,检测脑组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶-B(MAO-B)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并且HE染色,光镜下观察脑海马齿状回区组织结构的变化。
结果发现,与模型组比较,苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能明显延长避暗潜伏期、跳台潜伏期,苦参总黄酮各剂量组及脑复康组均减少避暗错误次数,苦参总黄酮高剂量组及脑复康组可减少跳台错误次数(P<0.05或P<0.01)。
苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能提高衰老小鼠脑组织中SOD和Na+-K+-ATP 酶活性,降低脑组织中MAO-B的活性、MDA及TNF-α含量,降低衰老小鼠血清中LDH活性(P<0.05或P<0.01)。
苦参总黄酮各剂量组及脑复康组脑组织中Ca2+-ATP 酶活性增强,同模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
病理可见模型组海马齿状回细胞数目减少,细胞排列稀疏,细胞形态欠完整,胞浆稀少,胞核与胞浆界限欠清晰,细胞核深染,固缩不规则形,核仁不明显。
苦参总黄酮组及脑复康组海马组织形态较模型组改善。
可见,苦参总黄酮能改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与通过减少TNF-α含量而增强抗氧化作用,从而稳定细胞膜、降低脑内MAO-B活性有关。
西归为伞形科凹乳芹属植物西藏凹乳芹Vicatia thibetica de Boiss.的根,又名独脚当归、野当归等,主要分布于云南、四川、西藏等地。
其性温,味甘、微苦,具有补气、补血、调经等功效。
在云南大理的鹤庆、剑川及永平县有人工栽培,并常将其与猪脚、鸡肉等炖煮作为滋补菜肴食用[1-3]。
目前研究发现,西归具有抗痛经、抗疲劳、抗氧化、增强免疫、促智等药理作用,但未见其抗衰老作用的研究报道[4]。
笔者等通过探究其对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用及免疫器官指数的影响,初步评价抗衰老作用,为下一步开发研究提供参考。
1 材料与方法1.1 仪器IKA RV 10 数显型旋转蒸发仪(德国IKA 集团);SQP 型电子天平(赛多利斯科学仪器股份有限公司);1730 台式高速冷冻离心机(丹麦Labogene 公司);Agilent cary 60 紫外可见分光光度计(安捷伦科技(中国)有限公司)。
1.2 药品与试剂西归(购于云南省大理州鹤庆县马厂乡,经保山中医药高等专科学校中药教研室杨发建老师鉴定为伞形科凹乳芹属植物西藏凹乳芹的根);维生素E 注射液(上海通用药业股份有限公司,批号20150419);D-半乳糖(上海国药集团化学试剂有限公司,批号20150814);羧甲基纤维素钠(CMC -Na,上海国药集团化学试剂有限公司,批号20150513);超氧化物歧化酶(SOD,批号20160905)、丙二醛(MDA,批号20160926)试剂盒均购于南京建成生物技术研究所。
1.3 动物昆明种小鼠,雄性,体质量18~22 g,由昆明医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(滇)2011-0004。
1.4 方法1.4.1 西归浸膏的提取取干燥西归粗粉996.42 g,用95%乙醇回流提取3 次,合并滤液,经减压浓缩,得浸膏160.03 g,其提取效率为16.06%,即1 g 浸膏相当于6.23 g 的生药。
2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价D-半乳糖是一种广泛应用于动物衰老研究的试剂,通过注射D-半乳糖可以诱导实验动物产生类似自然衰老的生理和生化变化。
在本研究中,我们采用了连续注射D-半乳糖的方法,以制造大鼠衰老模型。
具体方法如下:首先,选择健康成年大鼠作为实验对象,并将其随机分为实验组和对照组。
实验组大鼠每天接受一定量的D-半乳糖溶液注射,而对照组则注射等量的生理盐水。
注射时间持续数周至数月不等,以便充分诱导衰老效应。
在注射过程中,我们严格控制了注射剂量和频率,以确保实验结果的可靠性和可重复性。
同时,我们还密切观察了大鼠的生长状况、体重变化以及行为表现,以便及时发现并处理可能出现的异常情况。
二、大鼠衰老指标评估为了评估D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响,我们选取了一系列衰老指标进行测定。
这些指标包括体重、毛发状况、皮肤弹性、肌肉力量、运动能力、记忆力和学习能力等。
通过定期测量大鼠的体重,我们发现实验组大鼠的体重增长速度明显减缓,甚至出现了体重下降的情况。
此外,实验组大鼠的毛发变得稀疏、干燥且失去光泽,皮肤弹性也显著下降。
这些外观上的变化表明D-半乳糖注射对大鼠的衰老产生了明显的影响。
在评估肌肉力量和运动能力方面,我们采用了抓握力测试和跑步机测试等方法。
结果显示,实验组大鼠的抓握力和运动能力均较对照组明显降低,表明其肌肉力量和运动能力受到了损害。
在记忆力和学习能力方面,我们使用了迷宫测试和条件性反射等方法进行测定。
实验组大鼠在迷宫测试中的表现较差,需要更长的时间才能完成任务;而在条件性反射测试中,实验组大鼠的反应速度和准确性也低于对照组。
这些结果表明D-半乳糖注射对大鼠的神经系统功能产生了负面影响。
三、组织病理学检查为了更深入地了解D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响,我们进行了组织病理学检查。
通过采集大鼠的肝脏、肾脏、心脏和脑组织等样本,我们观察了这些器官的组织结构和细胞形态变化。
结果显示,实验组大鼠的肝脏和肾脏出现了明显的病理变化,如肝细胞脂肪变性、肾小球硬化等。
D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究鞠文博1,于春艳1,陈建光2【摘要】摘要:目的探讨应用D-半乳糖制作小鼠衰老模型,并进行指标检测.方法D-半乳糖连续皮下注射42 d制作小鼠衰老模型,同时进行体质量变化测量、行为学测试和形态学衰老指标的测定.结果与正常对照组相比,造模4周后,D-半乳糖致衰老小鼠体质量显著降低(P<0.01);D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力减弱,水迷宫探索路径长度、搜台潜伏期均显著延长(P<0.01);形态学观察显示各器官组织结构出现衰老改变.结论D-半乳糖可以成功制作小鼠衰老模型.【期刊名称】北华大学学报(自然科学版)【年(卷),期】2015(000)002【总页数】4【关键词】D-半乳糖;衰老;行为学检测;形态学检测老龄人口的增多促使人们更加关注衰老的研究,脑衰老是人衰老的最明显表现.脑衰老是一个非常复杂的过程,导致脑结构与功能的改变,是由多种因素引起的,学习和记忆能力的减退是其最重要的表现之一[1].D-半乳糖是一种机体内正常的营养成分,能够在正常机体代谢中转变为葡萄糖,从而参与葡萄糖代谢,如果摄入过量则会导致代谢紊乱.在半乳糖氧化酶作用下,D-半乳糖转化成醛糖和过氧化氢,从而产生大量的超氧化阴离子自由基,使多种生物大分子氧化损伤,对基因的表达和调节系统产生影响,导致细胞转录水平降低而引起衰老改变[2].研究显示:连续在大鼠和小鼠等哺乳动物身上注射D-半乳糖(D-gal)1个月即可造成动物体内糖代谢发生紊乱,导致多种组织细胞出现类似衰老的变化[3-4].因此,应用D-半乳糖建立动物的衰老模型可广泛地应用在衰老机制的研究和抗衰老药物的筛选中.本课题组应用D-半乳糖连续给药6周,造成小鼠衰老模型,通过小鼠体质量的变化、行为学的观测以及组织形态学改变等方面来系统地研究D-半乳糖衰老模型,从而为科学、合理地使用动物衰老模型进行药物抗衰老实验提供依据.1 材料与方法昆明小鼠购自吉林大学实验动物中心,许可证号:SCXK-(吉)2008-005.小鼠适应性饲养1周,按体质量随机分为两组:D-半乳糖模型组和正常对照组,每组12只,雌雄各半,按6只/笼饲养,自由饮食.D-半乳糖模型组小鼠应用5%的D-半乳糖100 mg/(kg·d)从小鼠颈背部皮下注射;正常对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水,给药1次/d,共给药6周.2 观察指标2.1 体质量变化测量实验开始、实验中和实验结束前分别称量每只小鼠的体质量,观察实验小鼠体质量的变化及小鼠外观的变化.2.2 行为学测试第6周造模结束后对各组小鼠进行行为学测试[6-8],包括Morris水迷宫法记忆能力测试和穿梭箱法学习记忆能力测试.2.2.1 水迷宫法测试小鼠的学习记忆能力实验第6周进行记忆能力测试[9-10],水迷宫水池高60 cm,直径110 cm,站台直径8.0 cm,将水迷宫等分成4个分区,每个分区壁上标有东、南、西、北四个入水点.迷宫上方有一摄像机,与计算机相连接,可利用计算机软件对实验小鼠活动进行全程跟踪摄录,能够显示整个活动轨迹,记录小鼠找到站台所需的时间表示小鼠的学习记忆能力.每日将动物头朝池壁按东、南、西、北4个入水点分别放入水池,将站台置于某一分区的中央,实验过程站台位置保持不变.电脑系统自动记录小鼠从入水点到达站台所需时间和摄录在这段时间内的游泳路程,以小鼠找到平台所需时间作为学习和记忆成绩.若在设定时间内小鼠未找到站台,计算机停止跟踪,每次实验以120 s为限.训练中如果小鼠在极限时间120 s内找到站台,允许小鼠在站台上停留20 s,若小鼠未找到站台,实验人员将小鼠放在站台上停留20 s.20 s后将其从平台上拿下,休息1 min后再次开始训练.一般正常动物经5~6个训练日可学会以最快、最佳的轨迹找到平台的正确位置.实验在隔音安静的房间内进行,水温控制在(22±0.5)℃.2.2.2 穿梭箱法测试小鼠的学习记忆能力BA-200避暗仪是利用鼠类的嗜暗习性而设计的,以光、电击的联合刺激使实验动物产生由被动回避转为主动回避的条件反射[11].记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标,从而反映实验小鼠的学习能力、记忆时间的变化.实验第42天开始,每天练习1次,共连续练习3 d,在第4天进行正式测试,记录数据包括小鼠遭受电击次数,遭受电击的总时间和逃避潜伏时间.系统参数设为20次为一个循环次数,间隔时间5 s,电击时间10 s,暗示时间5 s.2.3 病理切片观察在完成MT-200水迷宫和穿梭箱法学习记忆能力测试后,应用2%戊巴比妥钠溶液40 mg/kg腹腔注射麻醉小鼠后,取脑组织、肝脏等重要器官,10%甲醛固定,常规脱水包埋,制作石蜡切片,HE染色.3 结果3.1 体质量变化与正常对照组比,D-半乳糖致衰老小鼠体质量在造模4周后显著降低(P<0.01),并随着造模时间的推移体质量进一步减少(P<0.01).小鼠外观特征为毛色枯黄、行动迟缓、精神萎靡等.见表1.表1 造模前后小鼠体质量的变化Tab.1 Changes in body weight of mice before and after model establishment*:和空白对照组比较,P<0.01.3.2 行为学测试与正常对照组比较,水迷宫实验和穿梭箱法学习记忆能力测试显示:模型组衰老小鼠水迷宫探索路径长度和搜台潜伏期时间均显著延长(P<0.01).见表2.表2 水迷宫实验和穿梭箱法小鼠学习记忆时间Tab.2 The time of learning and memory of mice in water maze and shuttle box experiment#:和空白对照组比较,P<0.01,##:和空白对照组比较,P<0.01.3.3 病理切片观察肝脏组织切片显示:衰老模型组小鼠肝小叶不规整,可见点状或灶性坏死,肝细胞排列紊乱,脂肪样变性较广泛,胞质可见明显疏松、肿胀,门管区紊乱,结缔组织增多,可见炎性细胞浸润.正常组肝小叶结构完整、规则,呈多边形肝细胞排列整齐,胞质丰富,清亮透明,核大,核仁明显,门管区无炎性细胞浸润[12].见图1,2.光镜下可见:模型组轮廓模糊,神经元细胞减少,颜色较浅,模型组可见大量肿胀变性的神经元细胞,分支明显减少,核仁浓缩变小,分叶不清,部分断离,细胞间排列松散,界限模糊[13].正常组小鼠脑组织轮廓清晰,神经元细胞密集,颜色深染,核仁分叶清晰,细胞间排列整齐,界限清楚.见图3,4.4 讨论衰老是一种正常的生理现象,机体发育成熟后,组织器官也逐步发生退行性改变,主要表现为机体功能的下降和紊乱、免疫功能下降、糖脂代谢紊乱和肝肾功能的异常,尤以记忆力减退为主[14].本课题组利用D-半乳糖诱导了亚急性衰老动物模型,模型组小鼠较正常对照组小鼠体质量减轻较多,毛色枯黄,行动迟缓,精神萎靡;光镜下显示多个器官结构均有不同程度的病理损伤变化.本实验研究的结果发现:D-半乳糖诱导衰老小鼠模型表现为小鼠活动次数明显减少,学习记忆力显著下降,体力和耐力等能力降低,并随着时间的推移衰老症状逐渐加重,与人类的自然衰老症状和衰老进程比较类似,这个实验结果可为人类衰老机制研究以及抗衰老药物的筛选提供参考[15-19].参考文献:[1] Finkel T,Holbrook N J.Oxidants,oxidative stress and the biology of ageing[J].Nature,2000,408:239-247.[2] Cui X,Zuo P,Zhang Q,et al.Chronic systemic D-galactose exposure induces memory loss,neurodegeneration,and oxidative damage in mice:protective effects of R-alpha-lipoic acid [J].J Neurosci Res,2006,83:1584-1590.[3] 张熙,李文彬,张炳烈.D-半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变[J].中国药理学与毒理学杂志,1990,4(4):309-310.[4] 梁纪伟,田庆伟,王永明,等.大豆异黄酮对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究[J].中国老年学杂志,2004,24(1):42-43.[5] Song X,Bao M,Li D,et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model [J].Mech Ageing Dev,1999,108:239-251.[6] Li Y,Qin H Q,Chen Q S,et al.Neurochemical and behavioral effects of the intrahippocampal coinjection of betaamyloid protein 1-40 and ibotenic acid in rats[J].Life Sci,2005,76:1189-1197.[7] Hua X,Lei M,Zhang Y,et al.Long-term D-galactose injection combined with ovariectomy serves as a new rodent model for Alzheimer’s disease [J].Life Sci,2007,80:1897-1905.[8] Lei H,Wang B,Li W P,et al.Anti-aging effect of astragalosides and its mechanism of action[J].Acta Pharmacol Sin,2003,24:230-234. 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[11] Zhang H T,Huang Y,Suvarna N U,et al.Effects of the novel PDE4 inhibitors MEM 1018 and MEM 1091 on memory in the radial arm maze and inhibitory avoidance tests in rats[J].Psychopharmacology(Berl),2005,179(3):613-619.[12] 徐辉,魏晓东,欧芹,等.D-半乳糖衰老模型大鼠肝脏形态学及抗氧化能力变化的研究[J].黑龙江医药科学,2005,28(5):26-27.[13] 吴力萍,陶连方,谢辉,等.亚急性衰老模型大鼠脑海马显微结构的变化[J].中国老年保健医学杂志,2008,6(6):23-25.[14] 刘汴生.衰老过程中的病理生理[J].实用老年医学,2002,16(2):64-68.[15] Hua X,Lei M,Zhang Y,et al.Long-term D-galactose injection combined with ovariectomy serves as a new rodent model for Alzheimer’s disease[J].Life Sci,2007,80(20):1897-1905.[16] Song X,Bao M,Li D,et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging mode[J].Mech Ageing Dev,1999,108(3):239-251.[17] 徐智,吴国明,钱桂生,等.大鼠衰老模型的初步建立[J].第三军医大学学报,2003,25(4):312-315.[18] 汤晓丽,张鹏霞,魏晓东,等.何首乌对D-gal致衰大鼠学习记忆能力及海马内突触素含量的影响[J].中国老年学杂志,2004,24(12):1189-1190.[19] Ho S C,Liu J H,Wu R Y.Establishment of the mimetic aging effect in mice caused by D-galactose[J].Biogerentology,2003,4(1):15-18.【责任编辑:陈丽华】基金项目:吉林省教育厅科学技术研究项目(2013-194);吉林市科技发展计划项目(201464064).【引用格式】鞠文博,于春艳,陈建光.D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究[J].北华大学学报:自然科学版,2015,16(2):199-202.。
D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究鞠文博;于春艳;陈建光【期刊名称】《北华大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】Objective To explore the application of D-galactose in establishing aging mice model,and to detect the related indexes. MethodD-galactose was given to the mice continuously by subcutaneous injection for 42 days to make aging model. During this period,their changes in weight,behavior and senescence indications were measured as well. Results Compared to the control group, the body weight of the aging mice decreased significantly after 4 weeks modeling (P<0. 01). Besides,both exploration path length and escape latency were seriously prolonged inthe water maze experiment (P<0. 01),indicating that the ability of learning and memory retarded in the aging mice. Morphological observations showed aging changes in the structures of several organs and tissues. Conclusion D-galactose can successfully establish aging mice model.%目的:探讨应用D-半乳糖制作小鼠衰老模型,并进行指标检测.方法 D-半乳糖连续皮下注射42 d制作小鼠衰老模型,同时进行体质量变化测量、行为学测试和形态学衰老指标的测定.结果与正常对照组相比,造模4周后,D-半乳糖致衰老小鼠体质量显著降低(P<0.01);D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力减弱,水迷宫探索路径长度、搜台潜伏期均显著延长(P<0.01);形态学观察显示各器官组织结构出现衰老改变.结论D-半乳糖可以成功制作小鼠衰老模型.【总页数】4页(P199-202)【作者】鞠文博;于春艳;陈建光【作者单位】北华大学基础医学院,吉林吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林吉林 132013;北华大学药学院,吉林吉林 132013【正文语种】中文【中图分类】R32【相关文献】1.槲皮素对D-半乳糖致衰老小鼠模型学习记忆及脑内炎症的影响 [J], 王德杰;郑傲2.补骨脂提取物对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型血清SOD、MDA的实验研究[J], 林昶;杨长福;吴大梅3.结合基因芯片和生物信息学工具构建D-半乳糖致衰老小鼠模型的分子调控网络[J], 王晶;赵翊;王勇;陈彻;李海龙4.维药高孜班提取物对D-半乳糖致衰老小鼠模型的作用 [J], 阿娜古丽·马合木提;热比姑丽·伊斯拉木;曼尔丹·尼牙孜5.基于高通量测序分析黄酒对D-半乳糖致衰老小鼠模型肠道微生物菌群的影响 [J], 刘蓉; 栾春光; 王德良; 覃思; 郝飞克因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
果王素对D-半乳糖致衰老模型大鼠空间学习记忆的影响摘要】目的研究果王素对D-半乳糖致衰老大鼠空间学习记忆的影响。
方法将雄性S-D大鼠(150-250g),30只,SPF级,随机分为3组:正常对照组,模型组以及果王素干预组,每组10只。
正常对照组采用常规饲养;模型组采用5%D-半乳糖(D-gas)皮下注射,持续42天;果王素干预组在皮下注射D-半乳糖的同时,采用200mg/kg剂量的果王素灌胃。
morris水迷宫观察大鼠行为学的变化。
结果行为学观察:模型组与正常对照组相比,水迷宫中逃避潜伏期明显延长(P<0.01),果王素干预组与模型组相比水迷宫中逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);模型组距离百分比明显短于其他两组(P<0.01)。
结论果王素具有明显改善衰老大鼠空间学习记忆的功能。
【关键词】果王素空间学习和记忆大鼠引言果王素(即猕猴桃果仁油脂肪酸) 为猕猴桃果仁经临界CO2萃取法提取的果仁油,主要成分为а亚麻酸,还含有一定量的维生索E及微量元素硒等物质。
具有很好的药效作用和保健价值[1]。
其中а亚麻酸及其代谢产物具有抗炎作用[2] 和抗脂质过氧化作用。
以往在研究果王素的作用中很少从行为学上进行研究,且选择的动物一般都是小鼠。
本实验通过morris水迷宫,观察果王素对D-半乳糖致衰老大鼠行为学的影响,从而为临床上老年痴呆提供实验依据。
1 材料和方法1.1 动物雄性,SD大鼠(150g-250g),由长江大学医学院动物房提供。
自由摄食和饮水,在实验环境中适应3天后进行实验。
大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组和果王素干预组。
1.2 方法1.2.1 试剂与仪器 D一半乳糖为上海国药集团化学试剂有限公司产品(批号:F20090711)。
Morris水迷宫为一组电脑自动摄像装备系统(成都泰盟)1.2.2 造模每日上午给予模型组和干预组100mg/kgD-半乳糖皮下注射,共42d。
正常对照组每天注射等量生理盐水。
大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆调节作用李会【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2010(29)5【摘要】目的观察大蒜素对D-半乳糖(D-ga1)致小鼠衰老模型学习记忆的调节作用.方法小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、大蒜素低剂量组(10 mg/kg·d)、中剂量组(20 mg/kg·d)、高剂量组(40 mg/kg·d),连续给药8周后采用Y型迷宫、跳台实验检测小鼠学习记忆能力及体内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平. 结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠跳台错误次数和迷宫错误次数明显增多,体内MDA含量升高,SOD活性下降;大蒜素组小鼠跳台错误次数减少,迷宫测试潜伏期缩短,体内MDA含量下降,SOD活性升高,并呈现剂量依赖性.结论大蒜素能改善衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与抗氧化作用有关.【总页数】3页(P627-629)【作者】李会【作者单位】滨州职业学院,山东滨州,256600;青岛科技大学,山东青岛,266042【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响 [J], 于洋;刘师兵;李松岩;徐冶;2.大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响 [J], 于洋;刘师兵;李松岩;徐冶3.丹参红花提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆的调节作用 [J], 邵荣姿;刘召红;张俭俭4.月柿果醋改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力 [J], 俞小珍;赵琴;梁莹莹;王子锃;李晶晶5.白术对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆和抗氧化能力的影响 [J], 翟春梅;薛迎凤;郭鹏飞;白晨曦;石雅维;孟永海;高利权因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
无瓣海桑果实提取物对衰老小鼠学习记忆能力的影响及其机制研究作者:易湘茜李家怡杜正彩高程海郝二伟邓家刚来源:《广西植物》2019年第11期摘;要:无瓣海桑果实为真红树无瓣海桑的果实。
研究无瓣海桑果实不同提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力影响及其作用机制。
采用Morris水迷宫实验测量无瓣海桑果实不同提取物对小鼠的学习记忆能力影响,HE染色观察各组小鼠脑部神经细胞的变化情况,并测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、一氧化氮(NO)含量和单胺氧化酶(MAO)活力。
结果表明:与模型组相比,无瓣海桑果实不同提取物处理组小鼠在水迷宫实验中逃避潜伏期明显缩短(P关键词:无瓣海桑果实, D-半乳糖,学习记忆能力,神经细胞,抗氧化活性中图分类号:Q946, R285.5文献标识码:A文章编号:1000-3142(2019)11-1534-07Abstract:To study the effects and mechanism of different extracts of Sonneratia apetala fruit on learning and memory abilities of aging mice induced by D-galactose, the learning and memory abilities of mice were measured by Morris Water Maze Test and the changes of brain nerve cells were observed by HE staining. The activities of superoxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px), nitric oxide(NO) content, and monoamine oxidase(MAO) activity in brain tissue were measured. The results showed that compared with the model group, the escape latency of the mice treated with different extracts from the S. apetala fruit was significantly shorter than that of the model group(P<0.05), and the residence time of the target quadrant was significantly increased(P<0.05) in the water maze experiment. Compared with the model group, the brain nerve cell injury of the mice treated with different extracts was significantly decreased, and the activities of SOD and GSH-Px in the brain of the mice were increased significantly(P<0.05). The content of NO and the activity of MAO in the brain decreased significantly(P<0.05). Different extracts of S. apetala fruits can improve the learning and memory abilities of aging mice induced byD-galactose. Different extracts of S. apetala fruits may reduce the damage of nerve cells in the brain of aging mice and increase the endogenous antioxidant enzymes(SOD, GSH-Px) activity,decreased brain NO content and MAO activity, which can increase learning and memory in aging mice.Key words:Sonneratia apetala fruit, D-galactose, learning and memory, nerve cells,antioxidant capacity衰老是生命過程中不可抗拒的自然规律,衰老发生的重要表现之一就是机体抗氧化能力下降(Wickens, 2001)。
作者:王浩张庆乐徐晓燕王晓丹高永峰高允生【摘要】目的观察蜂胶总黄酮对d 半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆的影响,并对其作用机制进行了探讨。
方法小鼠颈背部皮下注射d 半乳糖42 d,制备衰老模型。
通过小鼠学习记忆能力、脑组织中超氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽过氧化物酶(gsh px)、丙二醛(mda)、脂褐素(lf)水平的测定,评价蜂胶总黄酮的抗衰老作用。
结果与空白对照组相比,d 半乳糖(150 g/kg,sc,42 d)使小鼠学习记忆能力降低,脑组织中sod、gsh px活性下降,mda、lf含量增加,而蜂胶总黄酮30 mg/kg、60 mg/kg和90 mg/kg三个剂量组对上述病理变化具有不同程度改善作用。
结论蜂胶总黄酮能改善d 半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆功能障碍,其机制可能是抗氧化调节自由基代谢。
【关键词】蜂胶;黄酮;学习记忆;脂褐素;衰老蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干采集的蜂蜜,混入蜜蜂上颌腺分泌物和蜂蜡后加工制成的芳香味的胶状固体物质。
蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分,其中主要是黄酮类化合物,研究发现蜂胶黄酮具有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤、免疫调节、清除自由基等生物学活性〔1,2〕。
而蜂胶黄酮对学习记忆的影响少见报道。
本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对各种学习记忆障碍模型小鼠具有明显保护作用〔3〕。
本文在此基础上,采用超声法提取蜂胶总黄酮,观察了其对d 半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能的影响,并从抗氧化角度对其作用机制进行了初步探讨,以期为蜂胶的抗衰老作用提供实验依据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 蜂胶原胶由山东省实验种蜂厂提供。
参照文献〔4〕,超生法提取蜂胶总黄酮,临用前0.15%吐温80溶解,配成所需浓度备用。
参照文献〔5〕,以芦丁为标准品,用比色法测定总黄酮含量。
1.1.2 昆明种小鼠体重18~22 g,由泰山医学院实验动物中心提供,合格证号:鲁动质字020103。
1.1.3 材料及仪器 d 半乳糖,amresco生产,上海贝基生物技术有限公司分装,临用前用生理盐水配制合适浓度;超氧化物歧化酶(sod)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(gsh px)试剂盒、丙二醛(mda)试剂盒、脂褐素(lf)试剂盒、考马斯亮蓝测定试剂盒,购自南京建成生物工程研究所;芦丁标准品,购自中国药品生物制品检定所。
2021年半乳糖致衰老小鼠学习记忆论文【摘要目的观察枸杞对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。
方法建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,跳台实验检测其学习记忆能力,同时测定其大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,用黄嘌呤氧化酶法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥法测定大脑丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用枸杞汁后上述指标变化。
结果和D-半乳糖模型组比较,各实验组均可提高小鼠的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P <0.05或P<0.01),可显著升高大脑AchE活性(P<0.05,或P<0.01)。
结论枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能,其机制可能和枸杞的抗氧化自由基功能有关。
【枸杞阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病,其发病有增加的趋向〔1〕。
枸杞(Fructuslycii)是我国传统的药材,它含有丰富的营养成分和药理活性成分。
现代医学已证实,枸杞可调节免疫、延缓衰老和清除自由基等功能。
本实验采用D半乳糖所致衰老小鼠模型,探究AD小鼠学习记忆能力、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化及枸杞对这些指标的影响,并分析其功能机制,为临床应用提供理论依据。
1材料和方法11试验动物及分组昆明小鼠雄性75只,体重(24g±2)g(包头医学院动物室)。
随机分为5组,每组15只,即对照组,D-半乳糖模型组,低、中、高3个枸杞汁剂量组。
饲养过程中对照组和模型组各死亡3只,枸杞汁剂量组各死亡2只。
12药物和仪器枸杞(包头市奇力康医药公司)。
D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司,批号030406)。
AchE试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒(南京建成生物工程探究所)。
752C紫外-可见分光光度计、721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
STT-2型跳台仪(中国医科院药研所);德国来卡2135型切片机、加样器(上海伟业有限公司)。
宝乐果(Borojo)水果浓缩粉对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用战静;焦红;王家骥;陈骁熠;孟平【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2013(034)007【摘要】目的:研究宝乐果(Borojo)水果浓缩粉对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用.方法:昆明种雄性小鼠腹腔注射50mg/kg D-半乳糖建立衰老模型,用Borojo水果浓缩粉连续给小鼠灌胃30d,测定各组小鼠血清及肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)的含量.结果:Borojo 水果浓缩粉的中剂量组(4.0g/(kg·d))和高剂量组(6.0g/(kg·d)小鼠血清和肝脏的SOD活力显著提高(P<0.05)、血清MDA含量显著降低(P<0.05);高剂量组小鼠血清和肝脏中GSH-Px活力显著提高(P<0.05),肝脏MDA含量显著降低(P<0.05).结论:Borojo水果浓缩粉具有良好的体内抗氧化作用.【总页数】3页(P293-295)【作者】战静;焦红;王家骥;陈骁熠;孟平【作者单位】广东出入境检验检疫局,广东广州 510623;青岛市食品药品监督管理局,山东青岛 266000;广东出入境检验检疫局,广东广州 510623;广州医学院公共卫生学院,广东广州 510083;广州医学院公共卫生学院,广东广州 510083;广东出入境检验检疫局,广东广州 510623【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.大枣对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究 [J], 羊小胜;胡春威2.泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用 [J], 刘富岗;冯素香;刘炯;杨云3.人参茎叶总皂苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑组织的抗氧化作用 [J], 刘佳;陈丹娜;曾琛;张敬敬4.维生素A对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究 [J], 王俐;冯雪萍;吕柔;岑花鲜;林朝旗;韦金花;谢尤祥;杨敏;郭子鹏;韦芃5.两种甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用 [J], 杨华青;赵磊;徐美利;王鑫;连运河;王成涛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
五味子根茎叶果多糖对D-半乳糖致小鼠学习记忆障碍的影响刘佳乐;方佳慧;李贺;陈建光【期刊名称】《中国老年保健医学》【年(卷),期】2022(20)6【摘要】目的观察五味子根、茎、叶及果多糖对D-半乳糖所致小鼠学习记忆障碍的影响。
方法将雄性ICR小鼠随机分为6组,即空白组、模型组、五味子根多糖组、茎多糖组、叶多糖组及果多糖组,分别给予蒸馏水及总糖含量为35mg/kg的根、茎、叶及果粗多糖灌胃,30min后除空白组皮下注射生理盐水外,其他组均皮下注射300mg/kg剂量D-半乳糖,每日1次,持续6周。
通过避暗实验和Morris水迷宫实验评价改善学习记忆能力。
结果在避暗穿梭实验中,与空白组比较,模型组小鼠避暗潜伏期显著缩短,避暗穿梭次数显著增加(P<0.01);与模型组比较,五味子根、茎和果多糖组小鼠避暗潜伏期显著延长,避暗穿梭次数显著减少(P<0.01)。
Morris水迷宫实验中,与空白组比较,模型组小鼠空间探索潜伏期显著延长,目标象限停留时间显著缩短,穿越平台次数显著减少(P<0.01);与模型组比较,五味子根、茎及果多糖组小鼠空间探索潜伏期显著缩短(P<0.05,P<0.01);五味子茎及果多糖组小鼠目标象限停留时间显著延长(P<0.01),根及叶多糖组目标象限停留时间无统计学差异(P>0.05);五味子茎及果多糖组小鼠穿越平台次数显著增加(P<0.01)。
结论五味子根、茎及果多糖对D-半乳糖所致鼠学习记忆障碍具有改善作用。
【总页数】4页(P75-78)【作者】刘佳乐;方佳慧;李贺;陈建光【作者单位】吉林市中心医院完神经内科;北华大学药学院药理教研室【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.珠子参多糖对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的保护作用2.北五味子木脂素对D-半乳糖致衰小鼠学习记忆能力的影响3.补肾益精方对D-半乳糖致小鼠学习记忆障碍的影响4.龙须菜多糖对D-半乳糖及氯化铝致大鼠学习记忆障碍的影响5.五味子根茎叶果木脂素对D-半乳糖致衰老小鼠运动耐力的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高纯度银杏黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响李利平;王全胜;武变瑛;徐月清;牛培;穆银静【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2005(009)044【摘要】目的:观察高纯度银杏黄酮对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆功能的影响并探讨其作用机制,并与脑蛋白水解物的效果相比较.方法:实验于2004-11/2005-01在河北省职工医学院实验中心动物实验室进行,取ICR小鼠120只随机分为5组,每组24只:①银杏黄酮5,10 mL/kg组:腹腔注射D-半乳糖400 mg/kg,然后腹腔注射银杏黄酮5,10 mL/kg.②脑蛋白水解物组:腹腔注射D-半乳糖400 mg/kg 和脑蛋白水解物注射液5 mg/kg(0.4 mL).③模型组:腹腔注射D-半乳糖400mg/kg和生理盐水0.4 mL.④正常对照组:腹腔注射生理盐水0.4 mL.以上用药均共1次/d,连续8周.8周后跳台实验观察和测定各组小鼠学习记忆能力,然后颈椎脱臼处死小鼠,测定脑组织中乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶和超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量.结果:经补充后120只进入结果分析.①跳台实验结果:银杏黄酮5,10 mL/kg 组和脑蛋白水解物组小鼠学习记忆训练时的错误次数均少于模型组(P<0.05),潜伏期长于模型组(P<0.05),但3组间比较无差异.②脑组织中乙酰胆碱酯酶活力:银杏黄酮5,10mL/kg组和脑蛋白水解物组低于模型组[(14.00±0.53),(11.00±2.90),(18.84±0.49),(24.50±1.96)nkat/g,P<0.05],但银杏黄酮5,10mL/kg组间比较无差异.③单胺氧化酶活力:银杏黄酮5,10 mL/kg组和脑蛋白水解物组低于模型组[(14.49±2.50),(18.43±3.98),(22.32±.86),(26.85±5.46)nkat/g,P<0.05],但3组间比较无差异.④超氧化物歧化酶、丙二醛水平:银杏黄酮5,10 mL/kg组和脑蛋白水解物组高于模型组(P<0.05),但3组间比较无差异.结论:高纯度银杏黄酮治疗可明显改善D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与增强脑组织乙酰胆碱及单胺类递质活性、清除自由基、抗脂质过氧化等作用有关.其作用与脑蛋白水解物相似,但不同剂量间无差异(5,10 mL/kg).【总页数】3页(P97-99)【作者】李利平;王全胜;武变瑛;徐月清;牛培;穆银静【作者单位】河北省职工医学院基础部病理生理教研室,河北省保定市,071000;河北省职工医学院附属医院泌尿外科,河北省保定市,071000;河北省职工医学院基础部病理生理教研室,河北省保定市,071000;河北省职工医学院基础部病理生理教研室,河北省保定市,071000;河北省职工医学院基础部病理生理教研室,河北省保定市,071000;河北省职工医学院附属医院泌尿外科,河北省保定市,071000【正文语种】中文【中图分类】R338.64【相关文献】1.左卡尼汀对 D-半乳糖联合亚硝酸钠致衰老小鼠学习记忆功能的影响 [J], 栾海云2.高纯度银杏黄酮注射液对记忆功能及心肌组织 SOD的影响 [J], 李利平;巴卫松;李玉芝;徐月清;刘素坤;刘立杨3.酸樱桃汁对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆功能的影响 [J], 崔新颖;李香艳4.高纯度银杏黄酮注射液对记忆功能及心肌组织超氧化物歧化酶的影响 [J], 李利平;王全胜;吴素焕;徐月清;牛培;范淑娟5.肾茶水提物喷干粉对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆功能的影响 [J], 汪泽栋;李宜航;陈曦;李光因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
果王素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆
功能的改善作用
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:周卫华,米长忠,吴仕筠,钟飞
【摘要】目的观察果王素对D -半乳糖(D- gal)致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响。
方法10%D-半乳糖皮下注射6周建立衰老小鼠模型,同时灌胃给予果王素,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水。
通过跳台实验和Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,同时检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量。
结果与正常对照组相比,模型组小鼠学习记忆能力明显降低(P0.01),灌胃给予果王素后,小鼠上述变化明显改善(P0.01或P0.05)。
结论果王素可改善D-gal衰老模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与果王素具有抗氧化能力有关。
【关键词】果王素; D-半乳糖; 学习记忆
果王素(即猕猴桃果仁油脂肪酸)为猕猴桃果仁经临界CO2萃取法提取的果仁油,主要成分为α亚麻酸,含有一定量的维生素E及微量元素硒等物质,具有很高的药用和保健价值[1],猕猴桃籽油具有抗氧
化作用[2]和延缓衰老的作用而有关果王素对D-乳糖所致的学习记忆障碍是否有改善作用,目前还未见报道。
本实验采用D-半乳糖所致衰老小鼠模型,研究果王素对衰老小鼠学习记忆的影响,旨在筛选对学习、记忆障碍有改善作用的有效物质提供实验依据。
1 材料与仪器
1.1 药品果王素由吉首大学提供,为黄色油性液体,浓度60 %。
1.2 动物昆明种2月龄清洁级小鼠40只,雌雄各半,体质量(20±2) g ,由吉首大学动物中心提供。
1.3 试剂D - 半乳糖,购自sigma公司,用生理盐水配成100 g/L的浓度。
SOD、MDA试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.4 仪器UV-3100紫外可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)。
2 方法
2.1 动物分组随机分为4组(空白组、模型组、果王素高、低剂量组),每组10 只。
2.2 动物模型制备[2]模型组、果王素高、低两个剂量组,每日颈背部皮下注射10%D-半乳糖0. 0125L/kg,持续6周,空白组注射同剂量的生理盐水。
从第1天开始,果王素高、低两个剂量组,分别按0.05,0.2g/ kg·d的剂量灌胃进行实验干预,模型组和空白组也灌胃等量的生理盐水。
2.3 跳台实验各组小鼠处理6周后,将小鼠置于跳台仪中,适应环境3 min,然后底部铜栅通以36 V交流电,记录动物受到电击
后跳上跳台的反应时间和5 min内受电击的次数(错误次数),作为学习成绩。
24 h后将小鼠放入跳台仪中适应3 min,再将其直接放于跳台上,记录其第1次跳下平台的潜伏期和3 min内受电击的次数(错误次数),作为记忆成绩。
2.4 Morris水迷宫实验采用改良的Morris水迷宫实验,参考聂荣庆等[4]的方法,水迷宫为圆形水槽,直径60 cm,高17 cm,水深11 cm,测试过程中室温保持在18~22℃。
在槽壁上等距离地标记4个点分别为N,E,S,W,这4个点作为实验起始点。
在NW象限中间固定位置处放一透明玻璃平台,高9.5 cm,直径6 cm,使其低于水面1.5 cm。
在水面覆盖一层大小相似,直径约为1.5 mm的泡沫颗粒屑,使平台不可见。
水槽周围有丰富的固定不变的参照物(包括试验者本身),以供小鼠定位。
参考Williams等[5]的方法,训练共历时5 d,分为每天上下午两个时段,每个时段训练四次。
训练开始将平台放在NW象限的固定位置处,将小鼠从槽壁四个起始点分别放入水槽中,记录从放入小鼠到小鼠找到平台的时间(逃避潜伏期,escape latency),4次训练分别从不同的起点放入小鼠,小鼠找到平台后,让小鼠在平台上休息30 s,再进行下一次训练。
如小鼠120 s 仍找不到平台,则由实验者将小鼠放置于平台上,逃避潜伏期记为120 s,也让小鼠在平台上休息30 s。
造模成功后,进行定向航行实验,记录每只小鼠潜伏期的平均值。
然后把站台去掉,记录2 min内小鼠穿越站台位点的次数,记为穿越次数。
2.5 SOD、MDA检测实验结束后同一部位的脑组织150 mg,
吸干水渍后置入液氮保存。
测定前称质量,剪取适量心肌组织块,研磨成100 g/L匀浆,低温离心,取上清液,测定上清液中SOD、MDA 含量。
SOD测定采用羟胺法,MDA测定采用TBA法。
按试剂盒说明书进行操作。
试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
2.6 统计学分析利用SPSS 11.50统计软件做统计分析,所有计量资料以±s表示,单因素方差分析,组间进行两两比较。
3 结果
3.1 果王素对小鼠跳台实验成绩的影响对照组的学习成绩和记忆成绩都好于模型组,数据的差异性具有统计学意义(P0.01);与模型组相比,除了低剂量组中的潜伏期数据没有表现出明显差异外,果王素高剂量组和低剂量组的其余结果都差异明显,差异具有统计学意义(P0.05);学习和记忆成绩都好于模型组。
结果见表1 。
表1 果王素对小鼠跳台实验成绩的影响
3.2 果王素对小鼠Morris水迷宫成绩的影响小鼠用D-gal皮下注射连续6周后模型组,逃避潜伏期延长,与对照组相比有显著性差异(P0.01);而灌胃给予果王素后,逃避潜伏期缩短,与模型组相比有显著性差异(P0.05或P0.01)。
表2 果王素对小鼠Morris 水迷宫成绩的影响
3.3 果王素对小鼠脑组织SOD活性、MDA含量的影响模型组小鼠脑组织SOD活性降低,MDA 含量升高,与正常对照组有显著性差异(P0.01) ,果王素灌胃给药后小鼠脑组织中SOD活性升高,MDA 含量降低,与模型组有显著性差异( P0.01)。
表3 果王素对小鼠Morris
水迷宫成绩的影响
4 讨论
D-半乳糖是公认的造成衰老模型的方法,实验结果表明,给予D-半乳糖后,小鼠学习与记忆能力明显下降,模型组与对照组相比,水迷宫和跳台实验成绩均明显处于劣势,这说明衰老模型复制是成功的。
本研究选用跳台实验和水迷宫实验作为学习与记忆能力的评价指标,研究果王素的抗衰老作用。
跳台实验主要反映动物的空间位置感和方向感的学习记忆能力,也可反应小鼠的学习能力;而水迷宫实验主要反映动物的记忆能力,从而使实验评价更为全面。
通过灌胃给予果王素后,小鼠跳台和水迷宫实验均明显优于模型组,这说明果王素能够改善衰老小鼠的学习和记忆能力,而果蝇的生存试验表明,果王素能显著提高雌性果蝇的最高寿命[2],从而表现一定的抗衰老作用。
D-半乳糖属于生理性营养成分,可引起动物痴呆样行为,其发生机制与与氧化应急损伤和自由基的毒性有关[6]。
青年小鼠长期注射D-半乳糖后,其代谢产物半乳糖醇不能进一步代谢而堆积在细胞内,导致细胞肿胀,同时D-半乳糖在体内氧化产生的大量自由基超过机体的清除能力,引发脂质过氧化的链式反应,其分解终产物(如MDA)可与蛋白质、核酸、磷脂等物质结合,破环其结构,影响其功能,引起细胞衰老。
猕猴桃营养丰富,其籽油中富含多种不饱和脂肪酸、脂类、黄酮类、酚类、维生素、微量元素硒以及其它生物活性物质,研究表明经口给予老龄小鼠一定剂量的猕猴桃籽油,能明显提高小鼠血清SOD活性[2],李双杰研究结果显示果王素能增强谷胱甘肽过氧化物
酶、过氧化氢酶(CAT) 、铜-锌-超氧化物歧化酶活力[7],可见果王素能通过某种途径增强机体的抗氧化酶活性,减弱了脂质过氧化反应,有效清除了过量的自由基,使脑组织功能有所恢复,进而表现出对D-半乳糖所致的学习记忆障碍的改善作用。
【参考文献】
[1] 张永康,蒋剑波,陈莉华,等. 猕猴桃果仁油脂肪酸的测定及其利用[J].吉首大学学报(自然科学版) ,2001 ,22 (1) : 37.
[2] 李加兴,陈双平,麻成金,等.猕猴桃籽油保健功能研究[J].食品科学,2005,26(9):511.
[3] 龚国清,徐黻本.小鼠衰老模型研究[J].中国药科大学学报,1991,22(2):101.
[4] 聂荣庆,张进,胡国柱,等. 脑细胞活性因子对小鼠学习、记忆能力的影响[J].中国行为医学科学,2002,11(5):488.
[5] Williams M T,Morford L L,Wood S L,et al. Developmental D-methamphetamine treatment selectively induces spatial navigation impairments in reference memory in the Morris water maze while sparing working memory[J]. Synapse,2003,48(3): 138.
[6] 杨占军.螺旋藻对衰老小鼠学习、记忆障碍的改善作用[J].食品科学,2009,30(7):236.
[7] 陶辉宇,谭小进,李丽,等. 猕猴桃果王素对大鼠阿霉素心肌损伤的保护作用及其机制[J].临床心血管病杂志,2006,22(9):550.。