Nanophotometer操作指南

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Nanophotometer Pearl操作指南

 Step1 插上电源,按 键开机。

 Step2 开机后,见如下页面:按字母数字键选择所需功能。

○1 微量级测量 (常用方法测RNA,DNA 和蛋白质)

○2 常规比色皿测量 (核酸,蛋白质,细胞浓度)

○3 其他功能 (全波长扫描,动力学测定等)

○4 用户自建方法

○5 相关设置 (时间,打印机等)

 Step3○1 选择数字键1 进入微量级测量,如下页面:

○1 核酸分析 (dsDNA, ssDNA等)------Nucleic Acid

○2 蛋白分析 ----------------------Protein

Step4○1按数字键1进入核酸分析界面

Step5按数字键1进入dsDNA---双链DNA分析

Step5---第1步

选择不同的Lid Factor---光程盖,有5倍、10倍、50倍、100倍、250倍可选,机器标配一般是10倍和50倍,先选50倍,如果提示浓度太低再换10倍的 Step5---第2步

选择右边的Units浓度单位,一般选ng/ul

Step5---第3步

按绿色Sample键进入分析界面,先用水或缓冲液点样,按Blank键做空白校正,然后用搽镜纸把点样台和光程盖搽干净,把样品点到点样台中间的小镜子上,盖上光程盖,按绿色Sample键3.5秒内显示测量结果

Step5---第4步

1、查看测量结果,左上角显示230nm、260nm、280nm的吸光度,如果吸光度在0.01—1.5之间,结果是可以信赖的,在0.3是最准确的,在0.01—1.5范围之外的结果不可信赖

2、左下角给出的比值如果在1.8—2.0之间说明客户提的核酸比较纯,小于1.8说明有蛋白质干扰,大于2.0说明有RNA干扰;

注:

DNA:260/280=1.8---2.0,小于1.8说明有蛋白质干扰,大于2.0说明有RNA干扰;

RNA:260/280=2.0---2.5, 小于2.0说明有蛋白质干扰,大于2.5说明有寡聚RNA;

蛋白质中所含核酸很少,对蛋白质的影响忽略不计。

 Step4② 选择数字键2进入蛋白测量,如下页面:

①Protein UV普通蛋白分析

②Protein Dye染色蛋白分析

Step5按数字键1进入普通蛋白分析,如下页面:

Step5---第1步

选择不同的Lid Factor---光程盖,有5倍、10倍、50倍、100倍、250倍可选,机器标配一般是10倍和50倍,先选50倍,如果提示浓度太低再换10倍的

Step5---第2步

选择右边的Protein,有五种可选,一种自建CUSTOM,一般选BSA

选择Units浓度单位,一般选ng/ul

Step5---第3步

按绿色Sample键进入分析界面,先用水或缓冲液点样,按Blank键做空白校正,然后用搽镜纸把点样台和光程盖搽干净,把样品点到点样台中间的小镜子上,盖上光程盖,按绿色Sample键3.5秒内显示测量结果

Step5---第4步

1、查看测量结果,左上角显示230nm、260nm、280nm的吸光度,如果吸光度在0.01—1.5之间,选择或输入相关参数 结果是可以信赖的,在0.3是最准确的,在0.01—1.5范围之外的结果不可信赖

 Step3○2 选择数字键2进入常规比色皿测量,步骤和方法同Step3○1。

 Step3○3 选择数字3进入其他功能界面,如下界面:

 Step4 选择相应功能进行实验。

○1 单波长扫描 (Abs, T%)

○2 浓度测量 (Lambert-Beer-定律)

○3 全波长扫描 (200—900nm)

○4 动力学计算

○5 标准曲线制作

○6 多波长扫描

○7 吸光度比率

 Step3○4 选择数字键4 进入用户自定义方法界面,如下界面:

 Step4 选择数字键1 进行方法建立。

(能够储存9种方法)

 Step3○5 选择数字键5进入其他设置。页面如下所示:

 Step4 选择相应数字进入相关设置。

○1 时间设定

○2 数据格式设定

○3 打印/输出设定

○4 基线等设定

○5 屏幕亮度设定

①dsDNA 双链DNA

②ssDNA 单链DNA

③RNA RNA

④Oligo 寡核苷酸

⑤dsDNA Dye 染色双链DNA

⑥ssDNA Dye 染色单链DNA

⑦RNA Dye 染色RNA

⑧Oligo Dye 染色寡核苷酸