气相色谱法测定茶叶中有机氯类农药残留量

学术专业人文茶趣　

２５　茶叶中有机氯类农药残留检测的优化法　

江慧清　

（国家茶叶质量监督检验中心（福建）　安溪３６２４００）　

摘要：本文采用石油醚提取，硫酸磺化法净化，建立毛细管气　

相色谱法，测定茶叶中六氯苯等４种有机氯农药残留量。结果：添　

加水平在０．０　４～０．４０ｍｇ／ｋｇ时，回收率在８１．０％～１１　８．５％之间，变　异系数在０．８　７％～４．１　１％之间，检测限在Ｏ．０　５～０．０９Ｐ，ｇ／ｋｇ之间。表　明本方法快速、准确、回收率高、稳定性好，是目前茶叶有机氯农　

残检测的较优方法。　关键词：茶叶；有机氯类农药；硫酸磺化法；气相色谱法　

近年来由于国内外市场的要求，对茶叶的卫生质量　的控制也越来越严格。主要在生产源头上，对高毒高残　

留的农药受到禁用。但一些上世纪七十年代已经禁用的　

农药，因早期大量使用，且半衰期长降解缓慢，仍可能　在农作物和茶叶上残留。因此，对农产品中各种有机氯　农药残留量的监测一直倍受关注。　

对于茶叶中有机氯残留的检测技术与方法，专业部　门长期来致力于探究与摸索中。因茶叶中所含生化物质　

非常丰富。造成其萃取物检测背景非常复杂，使净化过　

程成为茶叶中农药残留检测的难点。故以往采用固相萃　取、小柱净化法…步骤繁琐，且对颜色较深的茶叶试　样，色素无法完全去除；而现有标准通常采用液一液萃　

取、柱层析净化等手段及填充柱气相色谱法［２－３】，也不　

能满足茶叶中农药残留快速检测的要求。本文采用硫酸　磺化法净化，有效去除了茶叶复杂的基质背景和色素，　

并利用毛细管柱程序升温技术分离检测，具有样品处理　

快速简单、有机溶剂用量少，分析速度快、灵敏度高、　回收率高、结果准确的特点。　１主要仪器和试剂药品　１．１主要仪器　Ａｇｉｌｅｎｔ　６８９０Ｎ气相色谱仪附６３Ｎｉ电子捕获检测器（ｕ　

ＥＣＤ），ＤＢ一１　７０１毛细管柱（３０．Ｏｍ×３２０￣ｍ　Ｘ　Ｏ．２５ｇｍ），　粉碎机，振荡器，离心机。　

１　２试剂药品　主要试剂：石油醚（沸程：３５～６０ｏｃ，美国ＴＥＤＩＡ）；　

76 食品安全导刊 2023年4月（上）分析检测气相色谱法测定蔬菜中有机氯、拟除虫菊酯类农药的基质效应邓一蕾，谢圆丰，曹倩玉，武寒梅，何焕肖，郭海谦（石家庄市农产品质量检测中心，河北石家庄 050000）摘　要：本文采用NY/T 761—2008中蔬菜和水果中有机氯、拟除虫菊酯类农药多残留的测定部分中的处理方法将7种蔬菜经过提取、净化得到相应的基质溶液，用其配制浓度为0.1 µg·mL-1的基质标，分析不同农药在不同蔬菜基质中的基质效应。结果表明，15种有机氯、拟除虫菊酯类农药在7种蔬菜基质中的基质效应强弱程度不同。对大量蔬菜进行例行监测过程中，有基质增强效应的农药可以用溶剂标进行初筛，有基质减弱效应的则需要配制基质标进行初筛，确保不会发生漏检。关键词：气相色谱法；基质效应；农药残留；例行监测Determination of Matrix Effects of Organochlorine and Pyrethroid Pesticides in Vegetables by Gas ChromatographyDENG Yilei, XIE Yuanfeng, CAO Qianyu, WU Hanmei, HE Huanxiao, GUO Haiqian(Shijiazhuang Agricultural Products Quality Testing Center, Shijiazhuang 050000, China)Abstract: In this paper, 7 kinds of vegetables were extracted and purified to obtain the corresponding matrix solutions by using the processing methods in the determination of organochlorine and pyrethroid pesticide residues in vegetables and fruits in NY/T 761—2008. Matrix markers with a concentration of 0.1 µg ·mL-1 were prepared to analyze the matrix effects of different pesticides in different vegetable matrices. The results showed that the matrix effects of 15 organochlorine and pyrethroid pesticides were different in 7 vegetable substrates. In the process of routine monitoring of a large number of vegetables, the pesticide with matrix enhancement effect can be used for initial screening with solvent label, and the pesticide with matrix weakening effect needs to be prepared for initial screening with matrix standard solution to ensure that there will be no missed detection.Keywords: gas chromatography; matrix effect; pesticide residue; routine monitoring农药的使用可以有效地防治病虫害，提高效率和增加产量。但是，在使用农药后，一些化学物质不能完全分解，残留物会在蔬菜、土壤、水体中聚集。这些物质包括农药原体、降解物、有毒代谢物质等，统称为农药残留[1]。农药残留对人们的健康有很大的威胁。残留农药会污染食品和饮用水，导致人们摄入过量的有毒化学物质，进而可能引起多种慢性疾病如心血管疾病、糖尿病、肝硬化、不孕不育症、基因突变和恶性肿瘤等。因此，随着生活水平的不断提高，人们越来越关注农药问题，并对农药残留检测结果的准确性提出了更高的要求。气相色谱仪常用于痕量检测，具有分离能力较强、灵敏度高、检测速度快、操作简单方便以及检测成本低等优点[2]，已广泛应用于蔬菜农药残留检测。然而，在农药残留检测过程中，经常出现基质效应。基质效应指的是基质在对所研究物质的分析过程中有显著的影响，从而影响分析结果的准确性[3]。基质效应的出现与农作物样品的特征密切相关，如含水量、含油量、酸碱度、营养元素的含量等，因此不同的蔬菜和不同的农药之间都有不同的基质效应。近年来，随着农药使用规模的逐步扩大，农药残留问题也日益突出。在例行监测过程中，需要对蔬菜中多种农药进行监测，如果每种农药都用不同基质溶液配制标准溶液定量蔬菜中的农药残留，能提高检测结果的准确性，但在实际操作过程中工作量巨大，不太容易实现。因此，为了节省时间和成本，研究人员通过分析不同农药在不同蔬菜基质中的基质效应，探索能否用一个蔬菜或某种溶剂作为Copyright©博看网. All Rights Reserved. Apr. 2023 CHINA FOOD SAFETY 77分析检测标准溶液，进行初步筛查。本实验通过分析油菜等7种蔬菜对百菌清、乙烯菌核利等15种农药的基质效应，以验证这种方法的可行性。若要完成本次实验，需要先选择正确的蔬菜作为基质溶液。对于蔬菜的选择，需要考虑其含水量、含油量、酸碱度以及营养成分等因素。1　材料与方法1.1　材料、试剂与仪器选取油菜、菜花、南瓜、大白菜、生菜、小白菜和根大7种蔬菜，按照国家标准将样品切成合适大小，然后采用四分法对其进行缩分，将缩分好的样品放入食品调理机中制成待测样品[4]。乙腈（HPLC级）；正己烷（HPLC级）；丙酮（HPLC级，重蒸）；淋洗液（丙酮+正己烷，1∶9）；氯化钠（140 ℃烘烤4 h）；弗罗里矽柱；农药标准品：百菌清、乙烯菌核利等15种标准品购于农业农村部环境质量监督检验测试中心（天津），浓度为 100 µg·mL-1。实验室常用玻璃器皿；食品调理机（匈牙利BRAUN 3205）；电热鼓风干燥箱（天津泰斯特101-2AB）；电子天平（上海良平YP3001）；高速匀浆机（美国omni 17106）；恒温水浴锅（天津泰斯特DK-98-1）；氮吹仪（天津恒奥HSC-24A）；气相色谱仪（美国安捷伦7890N，自动进样器和ECD检测器）；DB-1毛细管柱（0.32 mm×0.25 µm×30 m）。1.2　实验方法1.2.1　空白基质制备参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 761—2008[5]，按照有机氯、拟除虫菊酯类农药多残留的测定部分中前处理方法，经过提取、净化后得到配标液所需的基质溶液。上机测定后，确定其中不含有百菌清、腐霉利等15种有机氯、拟除虫菊酯类农药。1.2.2　色谱操作条件色谱柱：DB-1毛细管柱（30 m×320 μm×0.25 μm）；进样量：1 μL；进样方式：分流进样；分流比：1∶1；进样口温度：220 ℃；检测器温度：290 ℃；色谱柱升温程序：初始温度150 ℃，以50 ℃·min-1速度升至200 ℃，保持0.5 min，以10 ℃·min-1速度升至250 ℃，保持2 min，以40 ℃·min-1速度升至270 ℃，保持 13 min。1.2.3　计算方法（1）标准品配制。由于部分标准品的出锋时间相近，在图谱中不能完全分离，所以将农药标准品分为两组，即百菌清、乙烯菌核利、三唑酮、腐霉利、异菌脲、甲氰菊酯、氟氯氰菊酯和氰戊菊酯为混标1，六六六、五氯硝基苯、三氯杀螨醇、丁草胺、滴滴涕、联苯菊酯和氯菊酯为混标2，用正己烷配制浓度为 1 µg·mL-1的混合标液，分别用正己烷和样品基质溶液稀释至0.1 µg·mL-1，定义为溶剂标和基质标。用气相色谱仪ECD检测器进行测定，重复3次。通过基质标和溶剂标峰面积的相对比值乘以百分百来评价其基质效应的强弱[6]。（2）基质效应研究。ME＞100%称为基质增强效应，ME＜100%称为基质抑制效应，ME在80%～120%的为弱基质效应，基质效应不明显；在70%～80%和120%～130%的区域称为较强基质效应，基质效应略显著；在区域之外称为强基质效应，基质效应显著[7]。2　结果与分析2.1　15种农药的色谱图由图1可知，在1.2.2色谱条件下，混标1与混标2能够完全分离。2.2　7种蔬菜基质中15种有机氯、拟除虫菊酯类农药残留的基质效应由表1可知，油菜中15种农药的基质效应在83.5%～306.9%，差别很大。其中，五氯硝基苯、六六六、滴滴涕、氯菊酯、丁草胺均是弱基质抑制效应，其强度依次增加；腐霉利、氟氯氰菊酯、乙烯菌核利、联苯菊酯、甲氰菊酯是弱基质增强效应，最大值是113.9%；三唑酮、百菌清、氰戊菊酯、异菌脲、三氯杀螨醇均是强基质效应，特别是三氯杀螨醇达到了306.9%。其他6类蔬菜同油菜类似，对不同种农药有不同的基质效应。由表1可知，除三氯杀螨醇外，在不同的基质中农药的基质效应的强弱基本相同，具体分析如下。①百菌清、三唑酮、异菌脲、氰戊菊酯基质增强效应显著，其中异菌脲的基质增强效应最显著在197.2%～243.5%，在例行监测过程中，可以用溶剂标定量，不会发生漏检，在确定有检出后，配制相应的基质标进行准确定量，最后再依据《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）判定是否超标。②乙烯菌核利、腐霉利、甲氰菊酯、氟氯氰菊酯、六六六、五氯硝基苯的基质效应在96.8%～131.4%。在例行监测过程中，可以用Copyright©博看网. All Rights Reserved. 78 食品安全导刊 2023年4月（上）分析检测

GC法测定30种黔产中药材中11种有机氯农药残留

摘要：建立了气相色谱法测定中药材饮片中11种有机氯农药残留的方法。色谱柱为LD-OV-1701（30 m×0.32 mm× 0.32 μm），配备电子捕获检测器。结果表明，在0.02～0.30 μg/mL范围线性关系良好（r>0.995），平均回收率为83.13%～112.18%，RSD为3.85%～11.57%。本方法检出限高、准确、快速，适用于30种黔产中药材中11种有机氯农药的测定。

关键词：气相色谱；有机氯农药残留；黔产中药材

有机氯农药是一种广谱高毒杀菌杀虫剂[1]，曾被广泛使用，但由于毒性强、难分解，我国在20世纪80年代末宣布禁止使用DDT、六六六等有机氯农药[2，3]。目前，我国中药材中有机氯农药的检出率较高[4-9]，不仅是中药材质量安全的重要隐患，也是制约我国中药材走向国际市场的主要障碍[10]。2007年我国共有11批枸杞及其相关产品因农残超标而被美国FDA拒绝入境[11]。贵州省是4个国家中药现代化科技产业基地建设省份之一，有中药材资源4 290种，对贵州经济发展至关重要。目前，贵州中药材GAP基地的26种中药材和土壤中的9种有机氯农药残留已有报道，但是黔产中药材饮片中的有机氯农残报道较少。本试验采用气相色谱法测定了黔产30种中药材饮片中11种有机氯农药的残留含量，旨在为中药材饮片中有机氯农药残留分析提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

30种中药材：花椒、桔梗、吴茱萸、黄柏、天麻、金银花、杜仲、薏苡、五倍子、苦荞头、白花前胡、何首乌、淫羊藿、茯苓、石斛、白芨、重楼、半夏、太子参、白术、厚朴、鱼腥草、钩藤、天冬、黄精、板蓝根、玄参、瓜蒌、喜树、毛慈菇（以上样品均购于贵阳药材市场）。

分析纯丙酮、正己烷、二氯甲烷、石油醚（60～90 ℃），购于天津科密欧化学试剂有限公司；无水硫酸钠，研细450 ℃烘4 h，购于上海广诺化学有限公司；浓硫酸（优级纯），购于国药集团；水为去离子水。

实验三 1 实验三 气相色谱法测定农药残留量

一、实验目的

掌握色谱分离组分的原理，掌握氢火焰离子化检测器的检测原理；学会色谱仪的操作；了解色谱分离操作条件的选择方法；学会农药残留量的测定方法。

二、仪器、试剂

Agilent 6890气相色谱仪，自动进样器，进样针，毛细管柱，FID检测器，空气泵，H2钢瓶，N2钢瓶，甲基对硫磷标样

三、 实验原理

当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相溶解或吸附。随着载气的不断通入，被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附，挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被固定相溶解或吸附。随着载气的流动，溶解、挥发，或吸附、脱附的过程反复地进行。最终实现了组分的分离。

四、操作步骤

（一） 开机

1. 打开载气(N2或He)，空气，氢气等气瓶的总阀开关。

2. 打开气相色谱仪的电源开关，待GC自检完成后，启动电脑进入Windows 系统。

3. 双击电脑桌面的Instrument 1 Online图标进入GC化学工作站。

（二） 建立数据采集方法

1. 编辑完整的方法

2. 进样器参数设定——

点击“Injector”图标，进入进样器参数设定画面。选进样器的位置。

3. 分流不分流进样口参数设定

点击“Inlets”图标，进入进样口设定画面。点击“Apply”上方的下拉式箭头，选择进样口的位置；

4. 柱温箱温度参数设定

点击“Oven”图标，进入柱温箱参数设定。

5. FID检测器参数设定：

点击“Detector”图标，进入检测器参数设定。点击“Apply”上方的下拉式箭头，选择检测器的位置；

6. 点击“Method”菜单，选中“Save Methods As…”，输入方法名，点OK。

7. 点火，并建立顺序表，开始测样。

（三） 关机

1. 把FID检测器的Flame(点火)关掉。

2. 把进样口（Inlet），检测器（Detector）和炉子（Oven）的温度关掉。