agilent高效液相色谱仪使用维护保养操作规则

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。

为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器，以下是一些规范操作的步骤和注意事项。

1.仪器准备-开启仪器电源，并等待仪器自检完成。

-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。

-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净，并按需更换柱筒。

2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品，并确保其纯度和浓度符合实验要求。

-制备规范的稀释液或内标溶液，以便进行质量控制和校准。

3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。

-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。

-根据实验要求选择合适的检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）。

4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱，并将柱安装在柱底座上。

-将导线连接到柱温控制系统，并设置柱温。

-选择适当的流动相溶剂，用它们预平衡柱，以确保柱达到稳定状态。

5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。

-定期进行质控分析，以检验仪器的准确性和精确性。

-根据需要，进行合适的质量控制和校正操作。

6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式（如自动进样器、手动进样器等）。

-通过进样器吸取样品，并确保进样量准确无误。

-进行一定的进样准备，如过滤、稀释等。

7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置，样品进样准备完毕，并进行柱的平衡。

-点击“开始”按钮，启动分析程序。

-监测分离曲线或结果，确保分析结果的准确性与可靠性。

8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。

-对结果进行后处理和数据分析，如绘制色谱图、峰面积计算等。

-存储数据，以备后续分析和查阅。

9.仪器维护与清洁-使用完毕后，关闭仪器并断开电源。

-清洗注射器和柱等关键部位，以防止残留的样品引起交叉污染。

高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。

为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果，正确的操作和科学的维护是非常重要的。

本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法，以帮助用户正确使用该仪器。

一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前，需要先进行一些准备工作。

首先，检查仪器是否处于稳定的工作环境中，以确保仪器不受外界干扰。

其次，检查所有的连接与密封件是否完好，确保流体不会泄漏。

最后，检查溶剂和样品的储存条件，保证其符合要求。

2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。

开机前，需要检查电源和其他外部连接。

按照仪器的说明书，按顺序打开电源和其他必要的开关。

关闭仪器时，应按照相反的顺序关闭开关，并断开电源。

3. 样品准备与进样在进行进样操作前，需要准备好样品和溶剂。

样品准备时，应遵循相应的样品制备方法，确保样品的准确性和稳定性。

进样时，应根据实验需求设置适当的进样方式，并注意定量准确。

4. 仪器参数设置在进行分析之前，需要设置仪器的参数，以调整流速、温度、检测波长等参数。

仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整，确保获得准确的分析结果。

5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后，可以开始进行分析运行。

根据实验要求和样品特性，选择合适的分析方法和梯度程序。

在分析过程中，应定期检查仪器运行状态，注意观察流速、峰面积、保留时间等数据，并记录相关结果。

6. 仪器清洗与维护分析结束后，必须对仪器进行清洗和维护。

首先，关闭流体通道，清除流体残留物和样品残留物。

然后，根据仪器说明书的要求，进行仪器的常规清洗和维护工作。

定期检查和更换液相柱、检测器等易损件，以保证仪器的正常运行。

二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件，需要定期维护和保养。

Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程 已有 179 次阅读 2023-7-17 13:351 目的制定 Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确标准地操作，维护液相色谱仪。

2 适用范围适用于Agilent1100 高效液相色谱仪的使用，维护。

3 编写依据Agilent1100 高效液相色谱仪使用说明书 4 职责QC 相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。

5 内容5.1安全留意事项本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器常常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，制止消灭电火花；配制流淌相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。

5.2仪器组成本仪器由 LC-10ATVP 泵、7725 手动进样器、柱温箱、Agilent1100 紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2023 或其它工作站)。

5.3 日常使用操作步骤 5.3.1 开机翻开计算机，进入 Windows 系统，CAG Bootp Server 程序将自动运行。

翻开 HPLC 1100 各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功〔约 1～2min 〕后，进入 Online 工作站。

5.3.2 系统初始化〔主要目的：排解系统中的气泡〕 5.3.2.1 翻开Purge 阀 5.3.2.2加大泵流量并开启泵，快速冲洗试验通道，至无气泡从废液管排出。

降低流量及溶剂比例成试验初始条件，并单击OK 确认执行；5.3.2.3 关闭Purge 阀，完成系统初始化。

5.3.3 系统平衡〔主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量〕调出本次试验所需方法，保持泵连续工作，以试验初始的流淌相冲洗、平衡柱子一段时间。

〔一般约 30min ，可自己依据本人的仪器配置状况计算，要求至少以色谱柱几何体积 5～10 倍体积的流淌相冲洗、平衡系统。

〕 5.3.4在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。

文件制修订记录1.目的建立高效液相色谱（荧光检测器）的操作规程，使检验员正确使用高效液相色谱，确保实验结果准确性。

2.适用范围适用于检验人员使用高效液相色谱。

3.操作规程3.1开机：按下输液泵和检测器模块电源开关，蜂鸣器短暂鸣响，进入自检界面，然后进入程序主界面。

打开柱温箱，设置柱温。

3.2排液：将进液管及过滤头放入相应流动相，将排液阀旋钮以逆时针方向旋转180°，以打开排液阀。

开启purge键，以9mL/min的流速开始排空，3min后自动停止排空。

3.3流量设定：在输液泵模块，按“Func”光标在“流量设定”字段中闪烁，按照标准要求，输入0.8或1.0mL，按“Enter”确认。

开始走基线，以低流速运行30min左右。

3.4波长设定：在检测器模块，按“Func”键，光标闪烁，根据国标输入标准中要求的Ex和Em波长，按“Enter”确认。

按“CE”回到初始界面。

按“zero”基线归零。

3.5登录在线用户：电脑开机，打开色谱工作站软件“N2000+在线”，点击仪器1登陆，阶层：管理员，密码：123456。

3.6设置实验方法：点击“实验信息”编辑项目、单位、简介，设置保存路径，勾选是否扣除背景。

点击“方法”设置仪器配置、组分表、计算、谱图显示、报告编辑。

在“仪器配置”菜单下的“仪器描述1”模块中设置波长、流速、柱温等仪器信息，在“进样阀”模块下设置进样体积、结束时间和标题格式（样品批号），点击“采用”，保存方法。

下次可直接调用方法。

3.7设置积分方法：在“采集数据”模块下，点击“零点校正”下方的按钮，可显示隐藏菜单，在“方法：全局参数”的积分参数表中设置峰宽、峰高、最小面积、锁定时间、漂移、负峰阈值、扣除背景，点击“采用”完成设置并保存。

在“方法：手动积分”模块下，可以对谱图进行手动积分。

在“结果”模块下，可以查看谱图积分结果。

3.8数据采集：在进样信息模块下输入样品批号后，点击“采集数据”，进入采集界面，点击“查看基线”，待基线走稳后，点击“零点校正”，并在检测器上按“zero”按钮，使基线归零。

1.目的本文件规定了SPD-10A型高效液相色谱仪的操作及维护保养程序。

以规范高效液相色谱仪的操作及维护和保养，保证仪器正常使用，延长仪器使用寿命。

2.适用范围适用于SPD-10A型高效液相色谱仪的操作及维护保养。

43.内容3.1 方法简述3.1.1 高效液相色谱法是一种现代液体色谱法，其基本方法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，作为流动相，用泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理，得到测定结果。

3.1.2 由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高，分析速度快的特点。

3.1.3 高效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的药品的分析测定，特别是多组分药品的测定、杂质检查和大分子物质的测定。

3.2 仪器组成本仪器由公司泵，UVD检测器(190～600nm)和N-2000工作站组成。

3.3 使用前准备3.3.1 接入稳压电源将稳压电源的交流电源的输入插口插在固定的插板上。

打开稳压电源工作电源开关。

3.3.2 更换泵头里清洗瓶中纯化水更换蠕动泵清洗瓶中的纯化水(如果仪器经常使用则建议每周更换两次，如果仪器使用很少则每次使用前必须更换)。

3.3.3 清洗手动进样阀的定量环首先将手动进样阀的扳手反时针扳到头，手动进样阀将处于“Load”状态，用平头医用注射器吸入约1～2ml的50%的甲醇后，从手动进样阀的进样口注入，进行手动进样阀的清洗。

3.3.4 流动相的混匀与过滤3.3.4.1 若流动相为非单一溶剂，配好后要用玻璃棒或其它工具搅匀。

3.3.4.2 如果使用的流动相非色谱纯的、水相或配好的混合溶液，需要用0.45μm的一次性过滤膜过滤(纯有机相或含一定比例有机相的就要用有机系的滤膜，水相或缓冲盐的就要用水系滤膜)。

3.3.5 流动相的超声脱气过滤后的流动相需要超声脱气，一般超声约10～20分钟。

安捷伦液相操作维护保养规程一、安全操作规范：1.操作前必须穿戴个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等。

2.在操作液相设备时，要保证周围环境干燥、清洁无尘。

3.不得将有机溶剂直接排放到下水道中，应按照相关规定进行处理。

4.避免与有机溶剂发生直接接触，防止引起火灾和爆炸。

在操作过程中要小心避免溢漏。

二、操作准则：1.严密密封液相系统，避免泄漏。

2.在使用气溶胶短管时，注意定期更换新管，并将废弃管进行妥善处理。

3.当不使用设备时，要关闭电源，并将设备清洁干净，避免灰尘和污渍。

4.设备放置时要水平摆放，不可放置在湿润或有机溶剂易波及的地方。

5.使用过程中，要定期检查设备的密封部分是否正常，如有破损应及时更换。

三、操作流程：1.根据实验要求，合理选用相关仪器设备，并调整好设备的参数。

2.操作前先进行设备的预热，保持设备恒定的温度。

3.将待测样品注入进样装置中，确保样品完全进入进样管。

4.打开进样阀，将样品注入到色谱柱中，观察色谱曲线并记录相关数据。

5.实验结束后，使用合适的溶剂将色谱柱进行洗脱，防止发生堵塞现象。

6.将设备进行清洗，除去可能残留下来的污物。

7.对设备进行维护检查，保证下次使用时设备处于良好状态。

四、设备保养：1.定期检查设备的电源线和数据线，如有破损应及时更换。

2.定期清洗仪器的进样口和进样管，防止堵塞。

3.对仪器设备进行定期润滑，确保设备的正常运转。

4.定期校准仪器的测量参数，确保仪器的准确性。

5.确保仪器设备的周围环境干燥，避免设备受潮。

五、事故及处理方法：1.发生溢漏情况时，立即关闭设备，及时清理溢漏物，并通风排气。

3.发生火灾或爆炸时，迅速撤离现场，并使用灭火器等灭火工具进行灭火。

六、员工培训和操作技能提升：1.新员工入职时，进行液相操作培训，包括安全操作规范、设备操作流程等方面的培训。

2.定期组织员工进行操作技能培训和考核，提高员工的操作技能和专业知识水平。

3.鼓励员工参加相关培训和学习，提升专业水平和操作技能。

高效液相色谱仪安全操作及保养规程前言高效液相色谱仪（HPLC）是一种用于化学分析和检测的重要工具。

为了确保高效液相色谱仪的安全运行和最佳性能，需要遵守一系列的安全操作和保养规程。

本文档提供了详细的操作和保养步骤，以协助用户正确地使用和保护高效液相色谱仪。

安全操作规程操作前1.确保操作人员已经接受了高效液相色谱仪的操作培训并掌握了正确的操作方法。

2.在操作前检查仪器的电源是否正常，仪器的机械结构是否稳定，是否有明显损坏或松动的部件。

3.确保试剂和溶剂的选择和准备符合分析要求，并遵守相关安全规程，如使用防护手套和护目镜。

4.加载样品前必须确定样品的性质和浓度，并根据需要适当稀释和过滤。

操作时1.操作人员应当始终注意安全。

在操作过程中避免直接接触样品和溶剂，避免口误和吞咽样品或溶剂。

2.操作过程中，若发现异常状况，如机器停滞或跑偏、压力急剧增高等，应立即停止操作并检查仪器或相关部件。

3.调整某些参数时，如流速、温度、压力等，应尽量保持小幅度调整，避免快速快速调整。

4.操作结束后，必须关闭仪器并注销相关操作，清理工作区域和操作台面，清洗使用的管道、器皿和附件，并将物品归位。

操作恢复1.若长时间未使用高效液相色谱仪，请在使用前仔细检查机器各部位是否存在异常。

2.重新启动仪器时，请按照操作手册上的步骤重新进行仪器的初始化和调试。

废物处理高效液相色谱仪所使用的溶剂和其他化学废物，必须按照当地的环保规定进行处理和处置。

在处理前应该咨询相关专业人员。

保养规程日常检查和保养1.每天开始操作前，检查仪器的所有零部件是否齐全，零部件是否完整，清洁状态如何。

2.操作后，每天对样品室、管路等部位进行清洁，确保无污物堆积和管路没有堵塞现象。

3.每周对色谱柱进行洗涤和清洁，可以使用去离子水和乙醇为主要清洗溶剂，以确保柱子的性能和使用寿命。

4.定期对机械结构和电子部件进行检查和保养，保证设备运行的稳定性。

液路检查和保养1.定期检查操作中常温箱的工作状态和温度。

安捷伦液相色谱仪操作维护清洁规程1.目的依据厂家指导说明书及仪器资料建立仪器操作规程，详细规定安捷伦液相色谱仪仪器使用方法，以及仪器设备的维护、保养和卫生清洁，确保仪器不受损坏，检测稳定性好，正常运行。

2.适用范围本规程适用于安捷伦液相色谱仪的操作、维护、保养和卫生清洁。

3.职责由质检部检测人员负责。

4.相应记录表格《仪器使用清洁记录》《仪器维护保养记录》5.仪器：安捷伦高效液相色谱仪（安捷伦1220）6.用途：检测物质组分及含量检测7.环境要求7.1 稳定无震动的安放位置。

7.2 避免阳光直射，强烈的温度变化，电磁干扰。

8.系统组成高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、手动进样器、检测器等部件组成。

9.程序9.1 准备流动相9.1.1流动相配置：按产品需要配置9.1.2 抽滤将抽滤瓶连接好并放上滤膜，将娃哈哈水倒入最上层开口瓶中，启动泵的按钮即开始抽滤，抽滤一半时将电源关掉（防止抽滤时间过长将滤膜抽破，以免达不到过滤的效果），让水慢慢流入接收瓶内。

抽滤两遍，用蓝盖瓶装好，即过滤完，加入少许乙腈（占总体积10%）即可。

磷酸盐缓冲液同以上方法抽滤即可。

新倒出来的乙腈与甲醇不用过滤，按需要量直接倒入蓝盖瓶内即可。

若乙腈或甲醇是头一天剩下的第二天再用时需过滤，方法同上。

（水相与磷酸盐缓冲溶液时用0.22UM的水系滤膜（蓝色盒装），抽滤有机相时用0.22UM的有机滤膜（红色盒装））抽滤流动相的多少根据当天的检测量来定。

9.1.3 超声将已抽滤好的流动相（水相，磷酸盐缓冲液，乙腈，甲醇）置超声波清洗仪上超声20分钟，超声完后，将流动相至仪器顶端的流动相盒内，换下头一天的流动相，A管路放在水相瓶子内，B管路放在乙腈瓶子内，准备开机。

9.1.4开机先打开仪器电源，打开电脑桌面上的【1220联机】图标，进入软件视图介面，双击【控制】图标下的【仪器状态】图标，点视图介面上的【开启】图标，待视图介面各状态都变成绿色后，先打开【冲洗阀】排除系统中的气泡，光标移到视图菜单【梯度泵】，右键点击【方法】将【流量】改成3ML/MIN,溶剂A （100%）、B（100%）各放空冲洗3－5分钟后（无气泡），关闭【冲洗阀】。

公司标准操作规程编号：STD-SOP－EM－018－00题目高效液相色谱仪使用维护与保养规程颁发部门分析测试中心制定日期审核日期批准日期分发分析测试中心研发部目的：建立（安捷伦）Agilent1120型高效液相色谱仪使用、维护与保养规程范围：（安捷伦）Agilent1120型高效液相色谱仪职责：分析测试中心对本规程的实施负责正文：1. 系统组成：本系统由溶剂输送泵、手动进样器、VWD紫外可见检测器、内置EZChrom色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

2. 准备2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45（或0.22）μm滤膜过滤，超声脱气10～15min。

2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。

2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时临用配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

3. 开机：打开打印机、电脑显示器、主机等操作系统；接通HPLC电源，按下电源开关。

等待HPLC1120泵及检测器自检完毕。

3.1 启动EZChrom工作站：在桌面双击EZChrom 图标，进入EZChrom 的主界面。

在主界面双击配置好的仪器，比如下面的HPLC“安捷伦1120”，进入EZChrom 的控制界面。

如果需要打开Offline 的工作站(即只处理数据不控制仪器)，可以右键点击仪器的图标，选择离线打开。

3.2 打开泵：点击菜单栏项下的“控制”选择“仪器状态”，即出现单元泵和VWD检测器独立操作界面。

点击单元泵操作界面的泵的图标，开启泵。

将输入法切换至英文输入状态。

点击该界面左侧溶剂瓶（A），根据实验一般要求，输入“实际体积、总体积、溶剂操作”等相关应用数据，确认即可。

点击“流量ml/min”右侧的数据，在英文输入法下输入相关的流量，确定即可完成流量设定。

3.3 打开检测器的氘灯：点击菜单栏项下的“控制”选择“仪器状态”，即出现单元泵和VWD检测器独立操作界面。

Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）操作规程1.目的建立高效液相色谱仪（四原泵）使用维护保养标准操作规程，确保测量结果准确、可靠。

2.适用范围本SOP适用于Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）的使用。

3.责任者化验员应严格遵照该操作规程，管理方负责监督本规程的实施。

4.定义无5.规程5.1准备在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相、供试品及对照品。

流动相装入溶剂储液瓶，确认吸滤头已置于液面以下，供试品溶液和对照品溶液均用0.45μm的膜过滤。

5.2开机5.2.1打开电脑；5.2.2打开1200各模块电源；5.2.3等待各模块就绪后，双击桌面上的工作站图标，进入化学工作站；5.2.4旋开泵上的purge阀（逆时针转动，旋松即可，不要转动太多。

），将流速设置为5.0ml/min，将准备排气的管道的流量设置为100%（如：流路A比例则是100%-B-C-D），在工作站中打开泵，则开始排除管路中的气泡（时间约为5min）；其他通道同理操作。

5.2.5排气完成后，关闭purge阀（顺时针旋转，旋紧即可，不必旋的太紧。

）。

5.2.6连接色谱柱，用适宜的流动相冲洗色谱柱。

如果使用有盐的流动相，要先用80%的水过渡。

5.2.7更换方法规定的流动相。

冲洗约30分钟。

5.3设置方法5.3.1设置新方法5.3.1.1（自动进样器参数设定：单击工作站中“进样针”图标，选择“设置进样器”（一般选择洗针进样，清洗瓶位置一般为100位），单击“确定”按钮即可；5.3.1.2泵参数设定（四元泵）：单击工作站中“泵”图标，选择“设置泵”。

①在“流速”处输入流速（如1.0ml/min）；②在“停止时间”处设定所需采集时间；③在时间表中插入时间列表，编辑梯度；④在压力限处可设定最大耐高压，以保护色谱柱，单击“确定”按钮即可；5.3.1.3检测器参数的设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如280nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min（2s）。

高效液相色谱系统的维护与保养大连依利特分析仪器有限公司１．　流动相Ø保持贮液瓶清洁，定期清洗或更换；Ø尽量使用ＨＰＬＣ级溶剂和试剂；Ø含有缓冲盐和非ＨＰＬＣ级的流动相一定要过滤；Ø含有缓冲盐的流动相应现用现配，防止微生物生长和组分改变。

更换流动相注意事项高效液相色谱常用的流动相包括多种有机溶剂、水、各种缓冲溶液等，它们之间存在互溶性的问题，同时也存在缓冲溶液盐析出的问题。

将新流动相置于储液瓶中。

１．打开放空阀，启动泵使新的流动相从放空阀出口流出２０ｍＬ左右。

２．关闭放空阀，然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开，用小容器放置于进样阀的出口处。

３．启动恒流泵，让流动相从进样阀出口流出１０ｍＬ左右。

４．重新连接色谱柱，设定适当流速，当流动相流出约３０倍于色谱柱体积，并且检测器基线平衡后，流动相更换完毕。

更换非互溶性流动相１．用中介溶剂更换泵中的旧流动相（不要接色谱柱）。

２．如果色谱柱中流动相也需要更换，用该溶剂冲洗色谱柱。

３．用新流动相更换中介溶剂。

１．用５％～２０％甲醇水更换色谱系统中缓冲液（包括色谱柱）　。

（非常重要）２．用新流动相更换过渡溶剂。

３．由于一般缓冲液遇到甲醇、异丙醇等高含量有机溶剂混合液时容易将缓冲液中的盐结晶出来，而结晶盐对密封圈、柱塞杆以及进样阀内部转子和定子都有很大的损坏，也容易阻塞输液管路，因此要特别仔细操作。

４．用缓冲液作流动相或一段时间不使用泵，照以上步骤更换溶剂，然后用纯甲醇或乙腈冲洗。

２．泵头泵的密封圈是泵最易磨损的部件泵的密封圈的维护保养：Ø每天要把泵中的缓冲液冲洗干净，防止盐沉积；Ø用ＨＰＬＣ级试剂；Ø用烧结不锈钢吸液过滤头；３．　进样阀Ø最易磨损：转子密封Ø保养事项：１、样品进样前要过滤；２、停机后要用溶剂冲洗干净进样器内残留样品和缓冲盐；３、不要用气相色谱用的尖头针进样。

４．　检测器Ø保持检测器清洁，每天与色谱柱一同清洗；Ø用脱过气的流动相，防止空气卡在检测池内；Ø检测器灯有一定寿命，不用时不要打开灯。

Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程（美国安捷伦公司）一、准备工作1．更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。

各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。

2．打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。

3．依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机”图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。

4．将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。

5．打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。

若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%的比例各排液5min。

（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。

将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。

6．点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。

同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。

二、数据采集1．点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。

2．点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。

选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。

3．点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。

如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。

目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。

范围：适用于Agile nt 1260 HPLC。

责任：色谱检验工程师负责本规程执行。

内容：1开机1.1 打开电脑。

1.2打开液相色谱各个模块的电源。

1.3 双击桌面“仪器一联机，进入联机界面。

1.4 排气：1.4.1手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。

1.4.2 右键单击“泵”图标区域，选择“方法…”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min （—般为3 -5ml/min ），点击“确定”1.4.3 右键单击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中ON:点击“确定”则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

1.4.4 右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，设流速：0ml/min , 手动旋紧冲洗阀。

1.4.5 右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。

1.4.6同理右键单击“柱温箱；“检测器”图标，点击“方法…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制”选项，ON”打开柱温箱和检测器。

2编辑方法2.1点击“方法”—“编辑完整方法”开始编辑完整方法。

2.2选中除“数据分析”外的三项，进入下一选项卡。

2.3方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。

进入下一选项卡。

2.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量如1.0ml/min，停止时间：如10 min （该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水= 75 :25 , A为水，B为乙腈，则设置B: 75%即可。

进入下一选项卡。

2.5自动进样器参数设定：选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。

2.6柱温箱参数设定：在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。

agilent高效液相色谱仪使用维护操作规程英文Agilent High Performance Liquid Chromatography Maintenance Operation RegulationsAs a user of the Agilent HPLC system, it is critical to follow proper maintenance and operation protocols to ensure accurate results and prolong the lifespan of the instrument. This paper aims to provide a comprehensive guide on the usage, maintenance, and operation of an Agilent HPLC system.1. UsageBefore using the HPLC system, ensure that all components are clean, dry, and properly connected. Check that the sample injection system is functioning correctly, and that the column is properly packed and free from any blockages. Turn on the system and allow it to stabilize for at least 30 minutes before use.When preparing samples for injection, ensure that they are properly filtered and free from any debris that could foul the column. Use awellmaintained syringe and needle to ensure a clean injection.During analysis, monitor the system regularly to ensure that the pressure remains constant and there are no leaks or blockages. Record any anomalies in the system logbook for future reference.2. MaintenanceTo ensure the longevity and accuracy of the HPLC system, it is essential to perform regular maintenance. This includes routine cleaning of the column, replacement of worn or damaged components, and periodic calibration of the system.Cleaning the column involves flushing it with a suitable solvent to remove any clogs or accumulated debris. Replace worn or damaged components such as tubing, fittings, and seals to prevent leaks and ensure consistent performance.Calibration should be performed regularly to ensure the system remains within specification. This includes verifying the accuracy of the detector, flow rate, system pressure, and wavelength accuracy.3. Operation RegulationsIt is essential to follow operation protocols to ensure safe andconsistent usage of the HPLC system. These include wearing personal protective equipment (PPE), following proper waste disposal procedures, and avoiding any unauthorized modifications to the system.Wear appropriate PPE, including gloves, lab coats, and safety glasses to protect against chemical exposure. Properly dispose of any waste generated during system usage, including solvents, used columns and any other materials that may be contaminated.Avoid any unauthorized modifications to the system, as these can compromise performance and safety. Record any modifications made to the system in the logbook for future reference.ConclusionThe Agilent HPLC system is a highperformance instrument that provides reliable and accurate results. Following the guidelines outlined in this paper will help ensure the longevity and optimal performance of the system, as well as provide a safe and consistent working environment. Remember to perform regular maintenance, follow approved procedures, and update the system logbook accordingly.。

Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。

2 适用范围适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。

3 责任与监督检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。

4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。

注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

4.2仪器操作4.2.1系统组成：本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。

4.2.2操作前准备：4.2.2.1流动相的选择分类：组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。

（溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。

4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。

4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。

对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。

4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。

Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。

2 适用范围适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。

3 责任与监督检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。

4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。

注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

4.2仪器操作4.2.1系统组成：本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。

4.2.2操作前准备：4.2.2.1流动相的选择分类：组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。

（溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。

4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。

4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。

对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。

4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。

Agilent 1260—LC液相色谱仪使用、维护操作规程目录一、目的 (2)二、适用范围 (2)三、内容 (2)四、附件 (18)五、变更历史 (18)一、目的明确Agilent 1260 LC型液相色谱仪硬件使用、维护保养操作方法,使质量部检验人员有章可循。

二、适用范围本规程适用于公司Agilent 1260—LC型液相色谱仪使用、维护保养操作。

三、内容1.制定依据《Agilent 1260 LC system Operating Manual》《Agilent OpenLAB Control Operating Manual》2.工作原理：2.1.高效液相色谱法是用高压输液泵,将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品,由流动相带入色谱柱内,在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由色谱工作站进行记录处理。

利用色谱图色谱峰面积或峰高大小可对待测样品进行定性定量分析.Agilent 1260 LC型液相色谱仪主要由G1329B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316柱温箱、G4212B二极管阵列检测器和Open LAB色谱工作站等部件组成。

3.基本操作步骤3.1.开机准备3.1.1.启动计算机：打开计算机电源，登陆windows操作系统。

3.1.2.启动工作站：打开Agilent1260LC各模块电源。

待Agilent 1260LC各模块自检完成后（各模块右上角指示灯为黄色或者无色），点击屏幕左下角“开始",选择“所有程序"，选择”Agilent Technologies"选择“OpenLAB"，选择OpenLAB Control，或单击桌面图标则会进入到上图的界面。

上面步骤如果已经配置过，则不需要操作.3.2.仪器配置：3.2.1.通过点击菜单左上方的，可以分别创建位置和仪器，得到如下的界面：3.2.2.输入相关信息，注意仪器类型一栏要选择Agilent LC System，输入完后点击确定。

部门：药学部题目：高效液相色谱仪（Agilent 1260 VWD）操作规程文件编号：BG—GZ—01102 起草人：日期：审核人：日期：批准人：日期：生效日期：颁发部门：分析室分发部门：分析室变更记载：修订号： 01 修订日期：批准日期：变更原因及目的：目的：建立高效液相色谱仪（Agilent 1260 VWD）使用及保养规程范围：所有分析仪器使用人员依据：《Agilent化学工作站操作培训教材》负责人: 分析室主任内容：操作方法及使用注意事项1.开机1.1打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。

1.2打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。

待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。

（注意：在“仪器1脱机”关闭的情况下，“仪器1联机”方能打开。

）1.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。

1.4确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。

单击“确定”。

（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。

1.5轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。

右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。

设流量，从0 ml/min 逐渐变为3ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。

右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。

1.6右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。

设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。

2.数据采集方法、系列编辑：2.1.编辑完整方法：2.1.1.从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。