草地早熟禾高频再生体系建立

好 的 组织 培 养 条 件 和 高 效 的植 株 再 生 体 系 仍 具 有 重 要
成愈伤组织 ， ４周后挑 取愈伤组织 于继代培养基 中 ， ２ 每
周继代培养 １ 。 次
１２３ 愈伤组织分化 愈伤组织继代培养 ６ ．． 周后 ， 挑取 浅黄色、 紧密 、 颗粒状胚性愈 伤组织 于分化培养基 中。 １２４ 再生植株 的生 根和移栽 ．． 分化 出 ｌ ｍ 的芽 ～２ ｃ
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生物技术 ・
北 方 园 艺 ２ ８ ）９ ２ ０ （ ：８ ０ ０ ？ １～ ０
草 地 早 熟 禾 ， 频 生 体 系 建 立 高 再
麻 冬 梅 杨 亚 亚 杨 赛 飞 ， ， ， 许 兴
（． １宁夏 大 学 农 学 院 ， 宁夏 银 川 ７０２ ；． 夏大 学 生命 科学 学 院 ， ５ ０１２宁 宁夏 银 川 ７０２ ） ５０ １
荫， 耐寒能力强 ， 有 生长速 度慢 ， 需经 常修剪 、 具 不 耐践 踏、 绿色期长 、 季保绿性和春季返青性能好 、 寒能力 秋 抗
子放人三角瓶 中， 加人 ５ 的浓硫 酸 ， ２０ ／ ｎ摇床 Ｏ 在 ０ ｍｉ ｒ
震荡 ２ ３ｍ ｎ后 ， ７ 酒 精 中浸 泡 １ ｎ 然 后 用 ～ ｉ 在 ５ ， ｍｉ
０ １／ ． 氯化汞 消毒 ８ ０ｍｉ， ９ ５ ～１ ｎ 最后 用无 菌水 冲洗 ５ ～７
强、 用途广等 优 点 ， 已是 混 播草 坪 的 主栽 品种 ， 抗旱 但
性、 耐热性、 耐盐能力差 ， 易受病 、 虫危害￣ ］这些性状可 １ ， ２ － ３
次 。消毒好的种 子置 于不 同激素 配 比的诱 导愈 伤组织
草地早 熟禾 （ ｏ ｒｔ ｓ ＿ 为禾本科 早熟 禾属 Ｐ ａｐ ａｅ ｉ Ｌ ） ｎｓ 多年生草本 植物 ， 世界 广泛 种植 的重要 草坪草 种＿ 。 是 ｌ Ｊ
计 发 芽率 。
１２２ 愈伤组织诱 导与继代培养 ＿．
选取饱 满成熟的种
草地早熟禾许 多 品种 是优 良的草 坪用 草 ， 喜光 也 耐 既ｌ ຫໍສະໝຸດ 料 与方法 １１ 材料 ．
选用早熟禾 主栽 品种肯塔基 、 哥莱德 、 新 优异 和午
２ 结果 ２ １ 早熟禾种子愈伤组织的诱导 ．
发芽试验 中， 早熟禾 种子 ３ ～５ｄ萌发 ，～８ｄ长出 ５ 小芽 ， 周后统计种 子的发芽率达到 ９ 以上 。 ２ ３／ ９ ６
夜的成熟种子为外植 体。
１２ １ 种子发芽试 验 选取 肯塔 基 、 哥莱德 、 ．． 新 优异 和 午夜各 ５０ 饱满 的成熟种 子置于放 有湿 润滤 纸的培 ０粒 养皿 中， 每皿 ｉ０粒种 子 ， ０ 培养温度 （５ ） ２ ２ 土１ 。 周后统 Ｃ，
第 一 作者简 介 ： 冬 梅 （ ９ ８） 女 ， 麻 １ ７ ～ ， 宁夏 贺 兰人 ， 士 ． 教 ， 从 硕 助 现
摘 要 ： 究 了草地早熟禾愈伤组织的诱 导和分化 的最适培养基 ， 研 建立 了早 熟禾 高频率的再 生体 系。结果表明 ： 品种优异的胚性愈伤诱导率最高， 中含 ２０ ｇ ｇ ２４Ｄ和 ０ ２ｍｇ ｇ６ Ａ 其 ． ／ ，一 ａ ｒ ． ／ － Ｂ
的培养基 处理胚性愈伤组织的诱导频率最大 ， 可以达到 ６． ６ 。早熟禾 品种肯塔基 、 ５ ２ 午夜 、 优异
与 新 哥 莱德 最适 分 化 激 素 浓 度 与 配 比 分 别 为 ６Ｂ ｌ ０ ＫＴ ． 、 一 Ａ ． ＋ ２ ４ Ｄ ． 、 － Ａ 一 Ａ ＿ ＋ ０ ２ ６Ｂ ２ ０ ，一 ０ １ ６Ｂ
１Ｏ ， Ｄ ０２Ｋ ． ， 伤组织分化 率分 剐达到 ２ ．３ 、２ ３ 、６６ ％和 ６ 。早 熟禾再 ． ＋２４ ． 、 Ｔ ２０愈 一 ７９ ５．８ ６ ．７ Ｏ
生芽在 １２ＭＳ ． Ａ培养基 上生根率可达到 ｉ０／ ／ ＋Ｏ２ＮＡ ０ 。 ９ ６ 关键词 ： 早熟禾 ； 愈伤组织 ； 高频再生体系 中图分类号 ： ８ ．０． 文献标识码 ： 文章编号 ：０１ ００ （０８Ｏ 一Ｏ９ 一Ｏ ｓ６８４ ３６ Ａ ｉ０ － ０９ ２０ ）７ １８ ３
子出愈率 为 ２．９／ ５４ ， ４５ ～３．５ 因此 ， ９ ５ 选定 种 子为诱 导 愈伤组织 的外植体 材料 。比较 ４个 品种 愈 伤组织 的诱
导情况 ， 品种优异 的胚 性愈伤诱导率最高 ， Ｊ５４ ， ｉ ３ ５ ￣ 该 品种的组培再生性略好于品种肯塔 基 、 夜与 新哥莱 午
培养基 中， 温度 （５ ） 暗培养 １ ２ ±２ 。 Ｃ， 周后去芽 ， 以诱 导形
通过基 因工程 手段进 行 品种改 良。植 物再 生体 系建立 是遗传转化 的前 提工 作 ， 在草地 早熟禾 再生体 系 中， 存 在着出愈时间长 、 愈伤组织诱导率低 、 因型限制 、 因 基 基
型的再 生能力差［ｓ 分化率低［ ］ 问题 ， ４、 － ］ ６等 － ７ 从而延 长了遗 传转化 的时 间， 降低了遗 传转化 效率 ， 响了草 坪草 品 影 种改 良的基 因工程研究 。因此 ， 究一个草地早熟禾 良 研
１ ２ 方法 ．
２ １１ 不 同外植体对 愈伤组织再 生频 率 的影 响 将成 ．． 熟种子消毒 处理后 ， 接到 ＭＳ基本 培 养基 中 ， 到无 菌 得 苗， 取叶片 、 根及胚轴 接到愈伤组织诱导培养基 ， 同时将
成熟种子接 到相同培养基 。结果 表 明（ 见表 １ ， ） 叶片 与 根没有诱 导出愈伤组织 ， 胚轴愈伤诱 导率仅为 ７ ４ ， ． 种
转至 １２ＭＳ ． Ａ 的生根培 养基 中。１ ／ ＋０２ＮＡ 个月后把
生 根 的植 株 移 到 室外 ， 遮 光 的 ５ 的 自然 光 下 不 打 开 在 Ｏ
的意义 ， 研究 旨在建立 早熟禾 高频率 的再 生体 系， 下 为
一
瓶 口练苗 ２ 后移栽至土壤 中。 ～３ ｄ
步早熟禾遗传转化和分子育种 的研究奠定基础。