扶桑花中槲皮素含量的HPLC法测定

HPLC法测定桑椹配方颗粒中槲皮素的含量任菲菲;郑艳青;马斐;张静;李智慧【摘要】目的建立用高效液相色谱法测定桑椹配方颗粒中槲皮素的含量的方法。

方法色谱柱为Krcomasil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.4%磷酸（43∶57）;流速：1.0 mL·min-1;检测波长：360 nm。

结果槲皮素进样量为0.003 424-0.017 12μg（r=0.999 7）范围内与线性关系良好;平均回收率为98.16%,RSD为1.6%（n=6）。

结论该方法简便、准确、重复性好,可用于桑椹配方颗粒中槲皮素的测定。

【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2015(034)007【总页数】3页(P396-397,413)【关键词】高效液相色谱法;槲皮素;桑椹配方颗粒【作者】任菲菲;郑艳青;马斐;张静;李智慧【作者单位】德州市食品药品检验检测中心,山东德州253020;;;;;【正文语种】中文【中图分类】R927.2桑椹配方颗粒是以符合炮制的桑椹饮片为原料，经现代工艺提取、浓缩、干燥、精制而成的颗粒［1］，具有生津止渴、补肝益肾、滋阴补血、乌须黑发、聪耳明目、延缓衰老、安神养心、润肠通便等功效［2］。

与传统桑椹饮片相比桑椹配方颗粒即保持了传统饮片的所有特征，又优于传统煎煮，药效成分更加稳定。

便于服用、携带，在临床用药中可随证组方［3］。

近年来，配方颗粒在国内外受到了广泛追捧，但目前的标准都相对滞后，有必要对其质量标准进行研究。

本文采用高效液相色谱法(HPLC)对桑椹配方颗粒中的槲皮素进行了测定［4，5］，该法简便、快速、重现性好，可以有效地对桑椹配方颗粒的质量进行控制，并为桑椹配方颗粒标准的提升提供了依据。

1 仪器与试药1.1 仪器 Model 9960D超声波清洗机;ML204电子分析天平;Agilent 1200高效液相色谱仪(美国Agilent公司);在线真空脱气机(G－1332A);高压四元泵(G－1311A);紫外检测器;Agilent 1200 Series色谱工作站;标准自动进样器(G－1329A);色谱柱恒温箱(G－1316A);可变波长检测器(G－1314B)。

高效液相色谱法测定叶下珠中槲皮素的含量
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和定量分析方法，可用于测定槲皮素在叶下珠中的含量。

以下是一种可能的测定方法：
1. 样品准备：将适量的叶下珠样品粉碎并通过筛网去除杂质。

2. 提取：将粉碎的样品加入适量的提取剂中，如乙醇或醋酸甲酯，并进行超声处理或搅拌提取一段时间。

3. 过滤：将提取液经过滤纸或微孔膜过滤，以去除悬浮物和杂质。

4. 色谱条件：
- 色谱柱：使用C18反相色谱柱，柱长为150 mm，内径为4.6 mm。

- 流动相：以甲醇和水为流动相，并逐渐调整它们的比例，以优化槲皮素的分离和检测。

- 流速：一般为1 mL/min。

- 检测波长：选择适当的波长进行检测，一般为254 nm。

5. 标准曲线制备：准备一系列不同浓度的槲皮素标准溶液，并注入色谱仪中进行分析。

使用标准溶液的峰面积和浓度之间建立标准曲线。

6. 叶下珠样品分析：取一定量的提取液注入色谱仪中进行分析。

通过标准曲线
可以计算出样品中槲皮素的含量。

需要注意的是，在进行分析之前，可以根据实际情况对方法进行优化和改进，以获得更准确和可靠的结果。

HPLC 同时测定桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量邸学，谷丽艳，王海波，许亮，包琳琳( 辽宁中医药大学，辽宁大连11660)［摘要］目的: 建立桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量的方法，对不同来源的桑叶药材质量进行评价。

方法: HPLC 同时测定Therm o OD S色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm)，柱温35 ℃，流动相为磷酸乙腈溶液( 0. 1% ，A)和磷酸( 0. 16% )-三乙胺( 0. 18% )水溶液( B)梯度洗脱，流速1. 0 mL·min －1，检测波长360 nm。

结果: 桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素5 种活性成分在60 min 内分离效果理想，线性范围分别为0. 32 ～13. 73 μg ( r = 0. 999 6) ，0.05 ～3. 13 μg ( r = 0. 999 8) ，0.03 ～9. 50 μg( r = 0. 999 4) ，0.03 ～5. 60 μg ( r = 0. 999 5) ，0.001 ～0. 05 μg ( r = 0. 999 7) ; 帄均加样回收率在99. 61%～106. 09%，ＲSD≤2. 8%。

结论: 该方法操作简单，结果准确，专属性强，可为桑叶药材的质量控制标准提高提供参考。

［关键词］桑叶; 绿原酸; 芦丁; 异槲皮苷; 紫云英苷; 槲皮素［中图分类号］Ｒ284. 1［文献标识码］ A［文章编号］ 1005-9903( 2014) 15-0092-04［d oi］ 10〃 13422 / j〃 cnki〃 s yf j x〃 2014150092Simultaneous Determination of Chlorogenic Acid，Ｒutin，Isoquercetin，Astragalin and Quercetin in Mori Folium by HPLCDI X ue，GU Li-yan，WANG H ai-bo，XU Liang，BAO Lin-lin( School of Pharmaceutical Sciences，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600)［A b s t rac t］Ob j ective: To establish HP LC method f or simultaneous determination of chlor ogenic acid，rutin，isoquercetin and astragalin quercetin in M ori Folium〃Method: A HP LC equipped w ith a T herm o OD S［收稿日期］ 20130715( 007)［第一作者］邸学，硕士，实验师，从事中药品种鉴定评价研究，E-mail:di x_email@ 163〃c o m檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶［5］廖玉麟〃中同动物志棘皮动物门海参纲［M］〃北京:［参考文献］［1］南京中医药大学〃中药大辞典〃下册［M］〃上海:上海科学技术出版社，2006: 2724.［2］Sév erine V D， Pasca l G， Patrick F〃 Qualitati v e and quantitati v e sap o nin c o ntents in f i v e sea cucumbers f r o mthe Indian Ocean［J］〃M arine Dru g s，2010，8( 1): 173. ［3］张淑瑜，汤海峰，刘世君，等〃海参中海参烷型皂苷的研究进展［J］〃药学实践杂志，2008，26( 5): 321.［4］ Xia o qian Hu，Y umin g W an g，J in gf en g Wan g，e t al〃D ietar y sap o nins of sea cucumber alle v iate o r o ticacid- induced f att y li v er in rats v ia PPAＲαand SＲEBP-1c si g nalin g［J］〃 Lipid s in H ealth and Disease，2010，9 ( 1): 25.科学出版社，1997: 108.［6］刁小琴，田晓菊，关海宁，等〃以齐墩果酸为标准品测定大豆皂甙的研究［J］〃中国油脂，2009( 11): 53.［7］张小鸿，吴杨峥，徐先祥〃不同显色剂对牛膝总皂苷含量测定的影响［J］〃中国实验方剂学杂志，2013，19( 21): 113.［8］董帄〃革皮氏海参皂苷化合物的分离鉴定、结构修饰及活性研究［D］〃青岛:中国海洋大学，2008.［9］董帄，薛长虹，盛文静，等〃海参中总皂苷含量测定方法的研究［J］〃中国海洋药物杂志，2008，27( 1): 28.［责任编辑顾雪竹］( 4.6mm×250mm，5μm) column and UV detection w as used〃 T he column temperature w as at35℃and the f l ow rate1.0m L·min－1 〃 T he mobile phase w as consisited of phosphoric acid in acetonitrile ( 0.1%，A) and phosphoric acid ( 0.16% ) and triethylamine ( 0.18% ) in w ater ( B ) w ith gradient elution〃T he detection w avelength w as set at360nm〃Ｒes u l t: T he good saperation of f ive f l avo noids w as achieved w ithin60min〃 L inear calibration curves w ere obtained w ith0.32-13.73μg ( r=0.9996) ，0.05-3.13μg ( r=0.9998) ，0.03-9.50μg ( r = 0. 999 4 ) ，0. 03-5. 60 μg ( r = 0. 999 5 ) ，0. 001-0. 05 μg ( r = 0. 999 7 ) ; the average recovery was 99.61%-106.09%，ＲSD≤2.8%〃Con cl u si on: T he proposed method is simple，accurate，repeatable，and can be used f or qualit y control as w ell as a pow er f ul t ool t o evaluate the processing of M ori Folium〃［K ey w ords］Mori Folium; chlorogenic acid; r utin; isoquercetin; astragalin; quercetin桑叶始载于《神农本草经》，为桑科植物桑Morus a l ba L〃的干燥叶。

HPLC法同时测定繁枝补血草中槲皮苷和槲皮素的含量叶力夏提·达那别克;舒合拉·朱马别克;杜曼·那毕;阿斯亚·拜山伯【摘要】Objective To establish an HPLC method for the determination of quercitrin and quercetin in Limonium myrianthum (Schrenk)O.Kuntze.Methods Quercitrin and quercetin in Limonium myrianthum (Schrenk) O.Kuntze were determined by HPLC using Agilent C18 column (250 mm×4.6 mm,5.0 μm) at 360 nm of detection wavelength.The mobile phase was methanol-4 mL·L-1phosphoric acid solution (50∶50), the flow rate was 1.0 mL·min-1 , the column temperature was 25 ℃,and the injection volume was 10 μL.Results The linear ranges of quercitrin and quercetin were 4.912-98.24 and 12.833-102.667 μg·mL-1, respectively.The regression equations were y=30.434x-11.864,r=0.999 6 and y=43.358x-45.586,r=0.999 7, respectively.The average recoveries were 100.73% and 100.47% respectively,and RSD was1.82%(n=6),1.35%(n=6),respectively.Conclusion The developed method is simple,rapid,and accurate with good reproducibility,and therefore suitable for the quantitative analysis of quercitrin and quercetin in Limonium myrianthum (Schrenk) O.Kuntze.%目的建立同时测定繁枝补血草中槲皮苷和槲皮素含量的HPLC法.方法采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0 μm);流动相为甲醇-4 mL·L-1磷酸水溶液(50∶50);流速为1.0 mL·min-1;检测波长为360 nm;柱温为25 ℃;进样量为10 μL.用外标法计算其含量. 结果槲皮苷质量浓度在4.912~98.24 μg·mL-1范围内与峰面积有良好的线性关系,回归方程y=30.434x-11.864(r=0.999 6);槲皮素质量浓度在12.833~102.667 μg·mL-1范围内与峰面积有良好的线性关系,回归方程y=43.358x-45.586(r=0.999 7).槲皮苷的平均回收率为100.73%,RSD值为1.82%(n=6);槲皮素的平均回收率为100.47%,RSD值为1.35%(n=6).结论该方法操作简便、快速、准确、误差小、重复性好,可作为繁枝补血草中槲皮苷和槲皮素的定量分析方法.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2017(032)005【总页数】4页(P551-554)【关键词】槲皮苷;槲皮素;繁枝补血草;含量测定;民族药材;HPLC法【作者】叶力夏提·达那别克;舒合拉·朱马别克;杜曼·那毕;阿斯亚·拜山伯【作者单位】新疆维吾尔自治区哈萨克医药研究所,乌鲁木齐 830004;新疆维吾尔自治区哈萨克医药研究所,乌鲁木齐 830004;新疆托里县哈萨克医医院,托里县834500;新疆医科大学基础医学院药理教研室,乌鲁木齐 830011【正文语种】中文【中图分类】R282繁枝补血草(Limonium myrianthum (Schrenk) O.Kuntze)是蓝雪科补血草属多年生草本植物，生长于平原荒漠带的沙质盐碱土、沙地及河流岸边的盐化土，主要分布在我国新疆北部的伊犁、塔城和阿勒泰地区[1-3]，全草和根均可入药，是哈萨克族传统药材之一。

HPLC法测定对坐叶片中槲皮素的含量周旭美，蓝英妮(遵义医学院药学系，遵义市 563003)摘要目的：建立高效液相色谱法测定对坐叶片中槲皮素含量的方法。

方法：色谱柱（250 mm×4.6mm ，5µm），流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液用Dikma-ODS C18（53：47），流速为1.0ml·min-1，检测波长为370nm，柱温35℃。

结果：槲皮素检测在 1.31-9.17µg·ml-1的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998），平均加样回收率为97.81%，RSD为0.98％（n=5）。

结论：该方法用于测定对坐叶中槲皮素含量简便、快速、准确，为建立对坐叶片的质量控制方法提供科学依据。

关键词：对坐叶片槲皮素含量测定高效液相色谱法Determination of quercetin in Duizuoye Tablet by HPLCZhou Xu-mei, Lan ying-ne (Dept.of pharmacy,Zunyi medical college ,Zunyi 563003,China)Abstract Objective : To establish a method of HPLC determination of quercetin in Duizuoye Tablet.Method : HPLC analysis was carried out on Dikma-ODSC I8 column(250 mm×4．6 mm，5µm) and the methanol- 0.4％phosphoric acid solution (53：47) as mobile phase，the flow rate was 1.0 ml·min-1, the detection wavelength was 370nm and the column temperature was 35℃. Results : The calibration curve was linear in the range of 1.31~9.17µg·ml-1(r=0.9998). The average recovery was 97.81％, with RSD of 0.98％(n=5)．Conclusion : The HPLC method is simple，rapid and accurate of the determination of quercetin in Duizuoye Tablet，and it can be used for the quality control of Duizuoye Tablet．Key word: Duizuoye Tablet; quercetin ; determination ; HPLC对坐叶片是由对坐叶单味药制成的片剂，具有清热解毒，利湿止泻的功效，用于胃肠湿热所致的腹泻、腹胀、腹痛、里急后重以及痢疾、急性胃肠炎等症[1]。

HPLC法测定妇炎洗液中槲皮素的含量的方法学研究摘要：目的建立妇炎洗液中该制剂槲皮素的含量测定方法。

方法采用高效液相色谱法：色谱柱DiamonsilC18柱（200mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈、水（体积比50.5∶49.5），流速1mL/min，检测波长214nm。

结果槲皮素的进样量在2.768～27.68μg范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.9998；平均回收率99.66%，RSD为2.89%。

结论所建立的方法准确、快速，可用于妇炎洗液的质量控制。

关键词：妇炎洗液；槲皮素；HPLC妇炎洗液由紫花地丁、莪术、败酱草等药物组成，具清热解毒、燥湿止带、杀虫止痒的功效，用于治疗湿热下注、带脉失约、赤白带下、阴痒阴肿及滴虫、霉菌、细菌引起的阴道炎、外阴炎等妇科疾病。

为更好地控制产品的内在质量，提高标准，本文采用HPLC法测定妇炎洗液中槲皮素的含量，获得了满意的结果。

1仪器与试药LC2010A高效液相色谱仪（日本岛津公司），SPDM10Avp二极管阵列检测器，四元梯度泵，自动进样器，BSZZ4S型电子分析天平。

槲皮素对照品（中国药品生物检定院，批号：1187190910，纯度为98%），妇炎洗液（由康洁司乐药业有限公司提供，批号140101、140102、140103），乙腈为色谱纯，水为自制蒸馏水。

2方法与结果2.1溶液的制备2.1.1对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥的槲皮素对照品3.5mg，置25mL量瓶中，加乙醇使溶解并稀释定容至刻度，混匀，制得每1mL含1.4μg的溶液，即得。

2.1.2供试品溶液的制备取本品5瓶中20ml，混匀，精密称定1ml，置圆底烧瓶中，加乙醚50mL浸泡2h，加热回流提取2次，每次1h，滤过，合并滤液挥干，残渣用甲醇溶解并定容至10mL。

用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。

2.1.3阴性对照溶液的制备按处方比例依法配制除莪术以外的阴性制剂，精密称取适量，按“2.1.2”项下方法制备阴性对照溶液。

高效液相色谱法测定旋复花中槲皮素的含量杨玲娟;焦成瑾;葛勐;雍宝霞【摘要】建立了高效液相色谱法测定旋复花中槲皮素含量的方法.该方法采用ZORBAX eclipse XDB C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-磷酸(0.2%),体积比为65:35,检测波长为370 nm.实验结果表明,槲皮素在5.0～100.0μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),测定结果的相对标准偏差为1.2%(n=6),平均加标回收率为97.1%.该法可用于测定旋复花中槲皮素的含量.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2010(019)001【总页数】2页(P65-66)【关键词】高效液相色谱法;槲皮素;旋复花【作者】杨玲娟;焦成瑾;葛勐;雍宝霞【作者单位】天水师范学院生命科学与化学学院,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水,741001【正文语种】中文旋复花为菊科旋复花属的一种多年生草本植物，其性苦、辛、咸、微温，具有降肺胃之气、消痰止咳、清热解毒、止血等作用。

据文献报道[1]，旋复花中含有旋复花素、旋复花内酯，同时含有槲皮素、异槲皮素、咖啡酸、绿原酸、菊糖及蒲公英甾醇等多种甾醇类物质。

研究表明，槲皮素具有抗癌、防癌、抗血小板凝聚、镇痛、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗炎、抗过敏等多种生物活性，且对人体无毒[2]；同时槲皮素具有潜在的抗抑郁作用和增强记忆的功能[3]，因此槲皮素具有很高的药用价值。

随着中药现代化的发展，含有槲皮素的旋复花在中医方面的应用也会越来越广泛，具有很高的药用价值。

据文献报道，已有人测定旋复花中旋复花内酯的含量[4]，但对于旋复花中槲皮素含量的测定仍未见报道。

笔者采用高效液相色谱法对旋复花药材中槲皮素含量进行测定研究，为综合利用与开发旋复花的药用价值及质量监控提供重要的理论依据和实验参考。