探索性实验课件--探索性实验动物使用指南

实验动物饲养管理和使用手册第一节研究机构的政策和职责对于科研、测试和教学方面所用的动物，要求以有关动物所必需的知识以及有关科研、测试和教学计划的具体要求条件为基础，做出合乎科学和专业的判断，进行恰当的管理、使用，并以人道精神来对待。

本章所属的各项准则，目的就在于为各研究机构在制定有关动物的管理和使用的各项政策方面提供指导。

每一所研究机构都应建立一套动物管理和使用计划，并为之提供物力、财力。

这套计划须按本《手册》的规定进行操作，并须符合现行联邦、州和地方各级的法律和规章的要求，如《联邦动物福利法规》(AWRs，CFR，1985)和《公共卫生服务政策》中“以人道精神管理和使用实验动物”(PHS Polilcy，PHS，1996)。

为有效地实施本《手册》所提供的建议，还必须建立“研究机构的动物管理和使用委员会”(IACUC)以监督和评定该计划的执行情况。

指导计划执行的职责，一般都授予在实验动物科学和医学方面受过训练或具有经验的兽医人员或其他有资格的专业人员。

至少必须有1名对于实验动物科学和医学或对所用的动物种类具有受过全面训练的有资格的兽医人员参与计划制定。

研究机构负责保管有关IACUC各项活动的记录和实施职业保健和安全性计划。

一、实验动物管理和使用的监督研究机构的动物管理和使用委员会每所研究机构的最高负责人必须委任一个“研究机构的动物管理和使用委员会”(IACUC)(以下称委员会)，由其监督和评定研究机构有关动物的计划、操作程序和设施条件，以保证其符合本《手册》、《AWRs》和《PHS政策》的各项规定。

研究机构的职责，就是提出适宜的指导方针、背景材料，拨发相应的财力和物力，必要时可安排专门培训，以协助IACUC的成员了解和评定委员会所面临的各类问题。

委员会的组成，应包括下列成员：①1名兽医学博士，持有学位证书[参见附录B，“美国实验动物医学学会”(ACLAM)]，或在实验动物科学或医学方面，或在有关动物种类的使用方面受过培训或具有经验的兽医师。

基金项目：　海军军医大学教学模式方法改革课题面上项目（ＪＹＰ２０２０Ｂ０４）作者简介：　汪超，男，１９８７－０８生，博士，讲师，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇｃｈａｏｓｍｍｕ＠１２６．ｃｏｍ收稿日期：　２０２０－１２－２８医学细胞生物学探索性实验教学设计与应用汪　超，张竞予，李嘉言，张红霞，李文林，朱海英△　（海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室，　上海　２００４３３；△通迅作者）摘要：　在医学细胞生物学实验课教学实践中，以个性化、高效率学习为教学目标，结合授课对象实际，采用学生自主设计为主、教师指导为辅的探索性实验教学方法。

教学手段上通过使用智慧树学习平台、数码互动显微成像系统等设备实现学生在实验过程中的自主性。

教学过程中增加实验条件的可选择性进而增强学生探索性体验。

该实验教学设计的主要目的是在达到实验课双基训练要求的同时，发挥实验课在培养学生科研思维、学习科研设计和形成科研规范中的作用。

文章以小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察实验为例介绍海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室的具体做法。

关键词：　医学细胞生物学；　实验教学；　教学改革；　探索性实验中图分类号：　Ｑ２　文献标志码：　Ａ　文章编号：　２０９５－１４５０（２０２１）０２－００９８－０３　ＤＯＩ：１０．１３７５４／ｊ．ｉｓｓｎ２０９５－１４５０．２０２１．０２．０９ 实验课教学是高校教学体系的重要组成部分，实验课教学改革也是经常被讨论的话题。

大家普遍认同的观点是实验课对学生动手能力以及科研基本素质的培养有着不可替代的作用［１，２］。

从顶层设计层面，国家级的虚拟仿真实验项目的设立以及各高校教学实验中心的建设，目的都是从实验条件方面为学生的能力培养搭建更好的平台。

而建立在这些实验条件基础上的更加有效的授课设计是帮助学生逐步建立科研思维、学习科研设计和形成科研规范的重要环节。

目前，ＰＢＬ教学法、发现教学法、对分课堂、翻转课堂、自主性实验等多种教学方式在医学细胞生物学理论及实验教学中得以开展，其目的都是为了实现教学从重教授、重结果、重模式化向重学习、重过程、重个性化的转变［１－３］。

化学领域的探索性实验常 用于研究化学反应的机理 和过程，以深入了解反应 的本质和规律。
药物研发
在药物研发过程中，探索 性实验可以帮助科学家发 现新的药物候选分子，并 研究其药理作用和机制。
在医学领域的应用
疾病机制研究
通过探索性实验，医学家可以研 究疾病的发病机制和病理过程， 为疾病的预防和治疗提供科学依
保护个人信息
在进行涉及个人信息的实验时，应确保个人信息的 安全和保密，避免泄露和滥用。
尊重知识产权
在使用他人的研究成果或数据时，应遵循知 识产权法规，确保合法使用和引用。
实验废弃物处理
分类处理废弃物
根据废弃物的性质和危害程度进行分类，并采取相应的处理措施 。
合理处置化学品
对于有毒有害的化学品，应按照相关规定进行安全处理和处置， 避免对环境和人员造成危害。
推断性统计分析
根据实验目的和数据特征，选择 适当的推断性统计分析方法，如 回归分析、方差分析、卡方分析 等，以揭示数据之间的内在联系 和规律。
结果解释与报告
解释实验结果
根据数据分析结果，对实验结果进行 解释，揭示实验变量之间的内在联系 和规律。
撰写实验报告
按照规范的格式和要求，撰写实验报 告，包括实验目的、方法、结果、结 论等部分，以便向其他研究人员或同 行进行交流和分享。
微生物培养
在生物学领域，探索性实 验常用于微生物培养和鉴 定，以研究微生物的生长 规律和代谢机制。
生态学研究
通过探索性实验，生态学 家可以模拟自然环境，研 究生物与环境之间的相互 作用和生态平衡。
在化学领域的应用
材料合成
通过探索性实验，化学家 可以合成新型材料，探索 其性质和应用前景。
反应机理研究

2.弗里施对蜜蜂色觉的研究
弗 里 施
奥地利动物学家。 1886年11月20日生于维也纳, 1982年6月12日卒于慕尼黑。
如果相信蜜蜂是色盲，就等于承认花 卉的鲜艳色彩对蜜蜂并无吸引作用。 于是他用颜色卡片进行了一系列简单 的实验，证明了蜜蜂的确能分辨不同 的颜色。
3.廷伯根对银鸥幼雏求食行为的研究
秋北师大八年级生物上册教学课件动物行为的研究PPT
看看上面图片涉及动物 的什么行为？
1.初步学会用观察法研究一种常见小动物的行为。 2.学习并领会科学的研究方法，并将这些方法应用 到实践中。
重点探究
【活 动】三刺鱼的生殖行为
1.三刺鱼在繁殖季 节有什么样的行为 表现? 2.科学家是如何研 究三刺鱼生殖行为 的?
【思考与讨论】
你知道科学家们是怎样研究动物行为的吗？
探究主题 一 研究动物行为的案例
1.法布尔对昆虫的研究 法布尔是用观察法研究昆虫生 活的第一位科学家，他观察每一种 昆虫都花去大量的时间，如观察土 蜂20年、地胆过渡变态25年、隧蜂 30年、蜣螂(屎壳郎)40年，最后才 写成《昆虫记》。
蜣螂发现了一堆粪便后，便会用腿将部分粪便制成一个 球状，将其滚开。它会先把粪球藏起来，然后再吃掉。蜣螂 还以这种方式给它们的幼仔提供食物。一对正在繁殖的蜣螂 会把一个粪球藏起来，但是这时雌蜣螂会用土将粪球做成梨 状，并将自己的卵产在梨状球的颈部。幼虫孵出后，它们就 以粪球为食。等到粪球被吃光，它们已经长大为成年蜣螂， 破土而出了。
(4)本实验设计的不足之处是

实验蚂蚁数量太少或没有设置重复实验
。
业精于勤而荒于嬉，行成于思而毁于随。 ——韩愈
银鸥幼雏啄亲鸟的喙 求食的行为是由亲鸟 喙上的红斑引起的

纳洛酮和葛根素对乙醇中毒小鼠的催醒作用1、立题依据：中国酒文化有着悠久的历史，随着生活节奏加快，社会的进步，饮酒的人越来越多，随之因为饮酒过度导致酒精中毒的人也越来越多。

酒精中毒造成各个系统损害，因此及时解酒十分必要。

有文献表明解酒首选药纳洛酮联合氟马西尼有良好的解酒作用，而中药葛根也有解酒的功效，且中药有不良反应少的优点。

因此本实验主要探讨纳洛酮、葛根素及二者合用对乙醇中毒小鼠的解酒效果，旨在探寻更好的解酒方法。

2、实验方案：2.1实验动物：健康小白鼠40只，雌性各半, 18~22 g。

2.2实验药品与器材：盐酸纳洛酮注射液、葛根素注射液、50%无水乙醇、天平、1ml注射器及针头4套、小鼠笼、灌胃针头。

2.3实验步骤：（1）取体重18~22g的健康小白鼠40只，随机分为4组，每组10只: 生理盐水0. 1 m l/10 g组( NS 组)、纳洛酮2mg /kg组( A组)、葛根素2mg /kg 组( B组)、纳洛酮1mg /kg+葛根素1mg /kg组( C组)。

各组均按15m l/kg 体重灌胃给予50%无水乙醇。

（2）观察小白鼠的活动情况，待小鼠翻正反射消失后，NS 组腹腔注射生理盐水，A组腹腔注射2 mg /kg纳洛酮，B组腹腔注射1 mg /kg葛根素注射液，C组腹腔注射1mg /kg 纳洛酮后再腹腔注射1 mg /kg葛根素注射液。

观察小鼠翻正反射消失的持续时间即睡眠时间（单位：min）并记录入表1。

表1 不同药物对乙醇中毒小鼠的催醒作用组别睡眠时间（每组从第1到底10只依次记录）NS组A组B组C组2.4结果处理：采用统计学方法进行数据分析，计量资料用（ X±S）表示，实验结果各小组之间的比较均采用单因素方差分析和q检验，检验水准：α=0.05。

3、可行性分析：本实验的基本操作有小鼠捉拿、腹腔注射、灌胃等，比较简单易行，能计较顺利地完成，器材与药品也不多，若部分药品如葛根素注射液实验室未备有，可以去药店采购。

第二节 性别鉴定
一、大、小鼠的性别鉴定
二、兔的性别鉴定
Female
Male
第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）
日龄/d 1 3 4 5 8
外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落
能翻身 能爬行
日龄/d 10
9～11 13～15 18以后
年龄 2个月以下 2～4个月 4～6个月 6～10个月 1岁 2岁 3岁 4～5岁 6～8岁 9～10岁 10岁以上
犬齿更换和磨损情况 仅有乳齿(白、细、尖) 更换门齿 更换犬齿(白，牙尖圆钝) 更换臼齿 牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突 下门齿尖突部分磨乎 上、下门齿尖突大部分磨平 上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄 门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损 唇部、胡须发白 门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白
妊娠检查方法有
① 外部检查法 ② 摸胎法 ③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法 ⑦ 青蛙试验
第五节 分组与编号
动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组 和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。
一、随机分组 （一） 当分为二组时 例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依 次编为1，2，3，…，12号，试用完全随机的方法， 分为甲、乙两组。 分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第 21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个 随机数字，如下：
组 别： B C A B C B C C A A C A
动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
随机数字：78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41

平均ABP尿量（ml/min)
血肌酐（Cr）含量 尿肌酐（Cr）含量
• 内生肌酐清除率：
•
Ccr =
尿肌酐浓度 血肌酐浓度
×尿量 (ml/min)
6
血浆、尿中肌酐的测定
血
0.1ml肝素、2ml全血 5000r/min，2min
取血浆0.2ml 加入试剂二2ml
5000r/min,2min, 取上清,按下表测 定
尿液中Cr含量(μ mol/L)
=
测定管OD值－空白管OD值 × 标准管浓度 ×201 ※ 标准管OD值－空白管OD值
测试尿液稀释倍数 取原尿0.01ml加入蒸馏水2ml混匀则稀释201倍
8
201※
数据记录表
1.静脉滴注KCL溶液：
滴注前 动脉血压/mmHg 呼吸频率/min 呼吸幅度 心电图 高钾血症时 药物救治后
7
510nm处，以蒸馏水调零，测样品OD值。
血浆、尿中肌酐的测定
计算公式：
血浆中Cr含量(μ mol/L) ＝ 测定管OD值－空白管OD值 标准管OD值－空白管OD值 × 标准管浓度 ×11 ※
11※ 测试血浆稀释倍数 取血浆0.2ml加入试剂二2ml混匀则稀释11倍
☆标准管OD值、空白管OD值和标准管浓度，实验室提供！
家兔高钾血症
实验目的
1.掌握家兔高钾血症模型的复制方法 2.观察高钾血症时家兔心电图变化的特征 3.探索双侧肾衰复制高钾血症模型 4.强化机能实验相关操作技能
2
实验流程
麻醉固定 左颈总动脉 插管/取血
右颈外静脉插管/补液
记录各项指标
观察指标： 动脉血压 呼吸频率 呼吸幅度 心电图变化
缓慢滴注KCL溶液 观察心电图变化 直至出现高钾血症的典型波形 10％氯化钙2ml/kg 4％碳酸氢钠5ml/kg 葡萄糖－胰岛素溶液7ml/kg

新药临床试验之探索性临床试验探索性临床试验为人们的新药研发活动提供了一种高效的研究方法，对于新药IND申报来说，其可以获得一手的人体临床数据。

这一优势为探究药物在人体中的生理药理特性、了解受试人群的体征及测试药物对疾病的治疗程度提供了便利。

此临床试验的开展能够有效地节约资源，缩短研发时间，提高新药研发的效率。

探索临床试验通常是在I期临床试验早期进行的，它不以治疗为目的，也不侧重于检测药物的临床耐受性，如人体的最大耐受量，在研究过程中只涉及到少数人群并使用有限剂量，最终通过有限的人体暴露获取相应的临床参数。

探索性临床试验是新药IND申报的评价内容，其可以探索药物的初步安全性和有效性，了解剂量与效应的关系，明确药物治疗的最小有效剂量和最大耐受剂量，为确证性试验推荐给药方案。

新药在被用于人体临床试验之前，申请者必须向FDA递交新药研究申请（IND申报），其主要目的是向FDA提供数据证明该药物具备用于早期临床试验的合理性与安全性。

美迪西临床注册(IND)申报服务平台深入了解中国和美国法规政策环境以及其对化药的技术要求，能为国内客户提供CFDA的IND申报，USFDA的IND/ANDA申报服务；能为国外客户提供CFDA的IND/ANDA申报服务。

美迪西临床注册申报平台的服务对象不仅包括在美迪西做整套临床前研究的客户，还包括有单独临床注册申报需求的药界同行。

1、探索性试验的研究人群首次在患者中进行以探索有效性为目的临床试验时，可认为是探索性临床试验的开始。

探索性临床试验通常对受试者进行严格筛选，以保证受试者人群的同质性，并对受试者进行严密监测。

研究人群可以选择健康人或患者。

选择健康人的优点在于入组较快、获得的数据较为均一和整齐，干扰因素少，并且受试者耐受性好。

弊端在于受试者没有治疗获益，有些药物毒性较大，选择健康人作为受试者存在安全性风险，存在有悖伦理的情况。

健康受试者的药代动力学和药效学与患者也存在一定差异。

动物实验的基本操作 和操作技术
第一节 常用的实验动物
实验动物？
是指经人工饲育，对其携带的微生物、寄 生虫实行控制，遗传背景明确或来源清楚 的，用于科学研究、教学、鉴定及其他科 学实验的动物。
2
实验动物必须具备4个条件：？ 敏感性 均一性 易获得性 稳定性
3
动物实验：？ 是以实验动物为实验对象的科学实验，包括
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2、注射给药法
(1) 皮下注射 (s.c., H.) (2) 腹腔注射 (i.p.) (3) 肌肉注射 (i.m.) (4) 静脉注射 (i.v.) (5) 淋巴囊注射
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腹腔注射 (i.p.)
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家兔静脉注射：一人固定兔身和兔头，另 一人在使兔耳边缘血管(耳缘静脉)扩张后， 从静脉末端刺入血管，左手拇指和食指固 定针头和兔耳，右手注药(见图)。注药量一 般为2 ml/kg，等渗液可达10 ml/kg。
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青蛙与蟾蜍（Frog and Toad）
青蛙与蟾蜍属两栖动物， 其一些基本生命活动与 哺乳动物近似，其离体 组织和器官所需的生理 环境比较简单 (无须供氧 和恒温)。
青蛙与蟾蜍常用于神 经生理、肌肉生理、心 脏生理，微循环等实验。
特点和应用： 离体心脏能较持久地有节律地搏动，常用于
观
主要特点：体温调节稳定
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家兔也是实验生理科学教学实验中最 常用的动物。
发热实验及热原实验、免疫学实验、 心血管实验、生殖实验、眼科实验、 皮肤实验等。
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犬(Dog )
在以犬为实验动 物的研究成果中， 只有应用Beagle 才能被国际公认。
常用于观察药物对心脏泵功能和血流动力 学的影响，心肌细胞电生理研究，降压药 及抗休克药的研究等。犬还可以通过训练， 用于慢性实验研究，如条件反射、高血压 的实验治疗、胃肠蠕动和分泌实验、慢性 毒性实验。

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健康实验动物基本标志
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1．动物的购入
购入或领取实验动物时，实验人员应向供应部门索取所 用动物相应等级的由国家主管部门所颁发的质量合格证书， 动物的遗传背景资料、动物微生物检查资料及动物年龄和健 康等方面的资料。 若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气 过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，并严格检查其 密封状况。
1

一、动物实验与实验动物

二、动物实验前准备

三、实验动物的抓取固定与编号标记方法

四、实验动物的随机分组方法

五、实验动物被毛的去除方法

六、实验动物给药途径和方法

七、实验动物用药量的确定及计算方法

八、实验动物的麻醉

九、实验动物采血方法

十、急性动物实验中常用的手术方法

十一、实验动物的急救措施
⑴ 硫化钠3g、肥皂粉1g，淀粉7g，加水适量调成糊状。 ⑵ 硫化钠8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g，加水 75ml。 ⑶ 硫化钠8g，溶于100ml水中。
2. 适用于狗等大动物的脱毛配方 硫化钠10g、生石灰15g，溶于100ml水内，此配方适用
于狗等大动物的脱毛。
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使用以上各种脱毛剂，都应事先剪短被毛，以节省脱毛 剂，并减少对皮肤的刺激反应，应用时用棉球蘸脱毛剂，在 所需局部涂一薄层，2-3分钟后，用温水洗去脱落的被毛，以 纱布擦干局部，涂一层油脂即可。
3. 对大鼠而言，当大鼠向前爬行时，用左手食指和中指 夹住大鼠颈部，同时拇指和无名指滑向其左右腋下，分开前 肢，拿起动物反转为仰卧位，即可进行实验操作。
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50个儿童探索性实验随着儿童对科学的兴趣不断增长，为他们提供探索性的实验经历可以激发他们的好奇心，培养他们的科学思维能力。

在这篇文章中，我们将介绍50个适合儿童进行的探索性实验，帮助他们发展实验设计、观察和分析的能力。

实验1：磁铁吸力实验材料：磁铁、各种不同材质的物体（如铁制品、纸张、塑料等）过程：让孩子观察不同材质物体对磁铁的吸引程度，并记录观察结果及其比较分析。

实验2：浮力实验材料：水、各种不同形状的物体（如纸张、玩具等）过程：孩子通过观察和实验，了解物体浸泡在水中时产生的浮力效应。

实验3：酸碱颜色变化实验材料：红、黄、蓝色的酸碱试剂（如红、黄、蓝色的葡萄酒，碱性清洁剂等）过程：将不同颜色的酸碱试剂混合，观察颜色变化，并了解酸碱性质的基本原理。

实验4：材料的伸缩实验材料：橡皮筋、塑料杯等。

过程：让孩子通过实验观察材料受力后的伸缩变化，并了解不同材质的特性。

实验5：气体实验材料：苏打水、醋、可乐等。

过程：将不同的气体与气球接触，观察气球膨胀及其原因。

实验6：种子发芽实验材料：毛巾、种子等。

过程：将种子放在湿毛巾上观察其发芽的过程，并记录发芽速度的差异。

实验7：水的净化实验材料：容器、污浊的水等。

过程：通过不同方法（如过滤、沉淀等）清洁污浊的水，了解水净化的基本工艺。

实验8：声音传递实验材料：弹性绳、罐子等。

过程：孩子通过将弹性绳拧紧后，将其与罐子相连，用手轻拍弦，产生音波传输，从而观察声音传递的原理。

实验9：光的折射实验材料：水、玻璃杯等。

过程：将玻璃杯倒置浸入水中，观察光线在水-玻璃界面的折射现象。

实验10：风的能量实验材料：吹风机、气球等。

过程：让孩子通过吹风机吹气球，观察风的能量对气球的影响。

实验11：食物的分解实验材料：食物残渣、容器等。

过程：将食物残渣放入容器中，观察自然环境下食物分解的过程。

实验12：叶绿素实验材料：植物叶片、酒精等。

过程：将植物叶片置于酒精中，观察叶绿素的提取和变化。

探索性实验开头先说点别的。

一，由于今年江门华支睾吸虫大规模流行，因此寄生虫考试很可能考这个；二，找这类学习的文章可以点击分组“学习心得”，不过我只把比较新的给归类了，很老的由于每次都要编辑验证码，我比较懒，就不做了。

好，那么就说说这个探索性实验。

其实探索性实验的流程比较简单，经过分子医学技能的锻炼之后，大家就已经明白了从选题到开题报告这个阶段要怎么做了，而探索性实验，就是多了将之实践并完成论文这一步。

不过，由于是真刀真枪上场了，个中有很多细节是跟分子技能不一样的。

我们一步步来看这一整个过程，不过我本人并非科研类的牛人，也并不对此有很大的兴趣，所以仅仅是根据自身体验所写，难免有疏漏和偏颇。

第一步：组队探索性实验都是以团队为单位进行实验的，团队成员由于要陪你完成整个实验，所以磨合度很重要，常言道，不怕狼一样的对手，就怕猪一样的队友，虽然探索性实验不存在什么竞争，但是找好合作伙伴是肯定要的，不和谐的团队往往会造成1+1<2的结果，耽误实验又伤感情。

怎么选队友不需要教，关键是成为一个团队之后，就应该有共同的目标，起码是完成实验，队伍里的每个人都应该要有责任心和毅力，而队长则尤其重要，不仅仅是要有责任心和毅力，还要有良好的统筹能力，沟通能力。

队长要做的事情比队员要多上不少，比如联系老师，制定实验计划等，因此最好选有经验的或者是能力强的人做队长，不需要害怕自己能力不够什么的，有时候确实会产生什么都不会的团队，但是不会是可以学的，要对自己有信心。

我自己觉得队友应该选互相沟通比较方便的组合，比如说我们班由于女生和男生住不同的宿舍，而且有个门禁，有什么事未必能立即找到，有时候就不是很方便。

组员应该有较为明确的分工，比如说实验数据的记录应该从头到尾都是由一到两个人来进行，这个人同时还应该有比较强的数据分析能力，另外像什么实验器材药品的管理，定期查看动物等工作，都应该有明确的分工，不要小看这一步，相信我，不分工的话一做起实验来必定天下大乱。

10级临床1班探索性第一阶段实验结果和下阶段方案1.结果分析（见表1）：①雌性大空间23ºC低体重组的LD50在设定的剂量范围，结果理想（过去药学学生实验就用这个剂量），雄性大空间23ºC高体重组和雄性小空间23ºC低体重组也在设定的剂量范围。

三组均可计算LD50。

雄性大空间23ºC低体重组（对照组）因只有1个有效组，计算不出LD50，提示LD50波动范围小。

应进一步减小Dm和Dn间距。

②雄性大空间16ºC低体重组只有2个有效组，计算不出LD50。

原因是Dm设置剂量偏低。

应提高Dm和Dn值。

重新设计如下：③雄性大空间29ºC低体重组也只有2个有效组。

同对照组一样，原设计剂量的Dm和Dn范围偏大。

表1 第一阶段实验结果组别剂量(mg/kg)雄性雌性小空间大空间23ºC 16ºC 29ºC 23ºC16-27g 31-40 g 16-27g总数死亡数总数死亡数总数死亡数总数死亡数总数死亡数总数死亡数1 500 8 8 8 8 10 10 8 6 8 8 9 92 375 8 7 8 8 10 9 83 8 8 10 93 281 8 5 8 5 10 7 8 0 8 7 10 74 211 8 1 8 0 105 8 0 8 3 10 25 158 8 0 8 0 10 0 8 0 8 0 10 06 120 8 0 8 0 10 0 8 0 8 0 10 0 LD50(mg/kg体重) 271.4 214.06 256.35 95%Range(mg/kg体重) 234.6-314.0 155.44-294.79 222.89-294.83 2.实验设计2.1.实验材料2.1.1.实验动物：小鼠220只（取240只）。

2.1.2.实验准备：①尼可刹米13只（1.5ml/支×13=19.5ml>19.3ml）② 1 ml注射器若干只③100 ml量筒1个④ 5 ml移液器1个⑤螺纹15ml 试管19个⑥250 ml磨口瓶3个⑦搅拌子1个⑧搅拌器1个⑨温度计3个⑩电子秤1个⑪苦味酸1瓶⑫镊子4把⑬大鼠笼22个⑭小鼠笼20个2.2. 雄性大空间23ºC 低体重组（对照组）设计 Dm=400 mg/kg ，Dn=191 mg/kg。

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（5）角动量守恒演示 【实验引入】
直升飞机起飞视频 无尾翼直升飞机模型起飞视频
【问题思考】
直升飞机尾翼的作用？
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（5）角动量守恒演示 【实验目的】
1、掌握和理解角动量守恒原理，了解直升机尾翼的作用。 2、了解转动力矩平衡的原理。
【实验仪器】
控制器 直升飞机模型
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（5）角动量守恒演示
【实验原理】
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（7）机翼压差实验 【实验引入】
飞机起飞视频 思考：大型飞机如何起飞？基本原理是什么？
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（7）机翼压差实验 【实验目的】
通过实验了解流体的伯努利方程的应用，并了解飞机机 翼因上下压差产生升力的原理。
【实验仪器】
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（7）机翼压差实验
【实验原理】
伯努利方程表述为：对于由不可压缩、非粘滞性流体流线组成的流线
【实验原理】
当一个质点相对于惯性系做直线运动时，相对于 旋转体系，其轨迹是一条曲线。立足于旋转体系，我 们认为有一个力驱使质点运动轨迹形成曲线，这个力 就是科里奥利力。
从物理学的角度考虑，科里奥利力与离心力一样， 都不是在惯性系中真实存在的力，而是惯性作用在非 惯性系内的体现，同时也是在惯性参考系中引入的惯 性力，方便计算。
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探索性实验要求
课前预习：通过图书馆和网络资源了解演示实验内容。 课堂要求：对每个演示实验现象都应认真观察，切记老 师讲解的注意事项，严禁破环仪器。 实验报告书写要求： （1）自己选择感兴趣的实验，深入理解其原理，进行实 验分析，解答思考题，可以通过上网查找资料和视频。 （2）尽可能多的查找相关的实验和应用，进行总结分析 比较，报告中要指出资料的出处。写出自己实验体会。 （3）实验报告请撰写到原始数据纸上，内容不要过于简 单，要求4页纸以上。

6.认可性 现成指标必须有文献依据，自己创立的指标必须经过 温州医学院机能中心 专门的实验鉴定，称、日期、实验者。 2.受试对象 如为动物，应标明种类、品系、体 重、性别、健康状况等。 3.实验环境情况 时间、室温、湿度等 4.实验仪器和药品 主要仪器应标明名称、型号、 厂家；药品应写明名称、厂家、纯度、浓度、 给药剂量、给药时间、给药方法等 5.实验方法和步骤 动物分组、给药及处理方法、 观察方法、测量方法、实验步骤及注意事项 等。 6.实验指标 包括名称、单位、数量及不同时间 的变化等，可预先设计好原始记录表格，数 据整理表格，规定记录的方式。
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三、摘要
国外期刊采用Haynes等提出的格式包括： 目的（objective）、设计(design)、研究场所 （setting）、病人或其他研究对象（patients or other participants）、干预措施（interventions）、 主要结果的测量方法（main outcome measures）、 结果（results）及结论（conclusions）共8项； 我国医学期刊大都将其简化为：目的、方法、结果 和结论4部分，并采用第三人称撰写，不用“本文” 等主语，文字要极其精练，字数限于200-250字左 右。 撰写摘要时必须注意结果部分一定要有具体数据和 统计学显著性检验的内容。
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四、选题的基本原则
1.创新性 立题必须具有创新性，包括提出新规律、 新技术、新方法或对原有规律、技术、 方法的补充和改进。 2.科学性 选题必须要有依据，要符合科学规律 3.目的性 具体地提出要解决的问题，集中解决1~2 个问题，切忌范围过宽。 4.可行性 选题要充分考虑实验的主、客观 条件
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7．生物电、活性观察法 对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观察记录，如心
电、肌电、脑电等； 对动物组织中各种活动物质用生物化学法测定，如各种酶，
激素等。
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8．病理解剖学、组织学观察法
采用肉眼观察、光镜和电镜检查，来观察、分析动物各 种疾病时病理组织学改变。可从组织学的角度来探讨疾 病防治机理，近年来由于电子显微技术的进展，不仅可 以观察到病变时细胞内细胞器等亚细胞结构的变化，而 且也可以运用电子扫描方法对动物器官的微小结构进行 完整的表层观察。
实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察神经系统反 应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用大头针固定在蛙板上。 依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。
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（四）豚鼠的抓取固定方法
豚鼠较为胆小易惊，不宜强烈刺激和受惊，所以在抓取时， 必须稳、准和迅速。一般抓取方法是：先用手掌迅速扣住 鼠背，抓住其肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，另一只 手托住臀部。固定的方式基本同大鼠。
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五、实验动物被毛的去除方法
动物的被毛常能影响实验操作和结果的观察，因此实验中 常需去除或剪短动物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛和 脱毛三种。
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剪毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛 时需注意以下几点：
⑴把剪刀贴紧皮肤剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮肤； ⑵依次剪毛，不要乱剪； ⑶剪下的毛集中放在一个容器内，勿遗留在手术桌和操作
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探索性测试及基本⽤例1 测试决策5要素测试⽬标：所有的重要任务都完成了，⽽剩下没做的事情是⽐较次要的，我们做到这⼀点就可以尽早尽可能地降低发布风险。

测试⽅法：测试是⼀个不断抉择的过程，测试⼈员必须理解运⾏测试⽤例时和分析现有信息所涉及的各种复杂性。

测试决策5要素：⽤户输⼊、状态、代码路径、⽤户数据、执⾏环境。

⽤户输⼊输⼊：环境产⽣的刺激，该刺激导致被测试的应⽤有所响应。

主要分原⼦输⼊(输⼊⼀个数字、按钮)和抽象输⼊（1-25535之间的任何⼀个原⼦输⼊长度值，类似于等价类划分）两类。

考虑各种输⼊之间会相互影响：单独输⼊、混合输⼊。

输⼊值的顺序：组合输⼊。

核⼼功能：接收输⼊、产⽣输出、存储数据、进⾏运算。

[正向测试、逆向测试]错误处理程序[error handler]：输⼊筛选器、输⼊检查、异常处理代码。

常规输⼊[字母和数字]、⾮常规输⼊[⽐如输⼊ctrl+c、shift+c、esc、ctrl键、alt、操作系统的保留字、不同的字符集，本地化的问题]默认输⼊[空格、空⽩、默认值]使⽤输出来指导输⼊。

状态：状态控件中的⼀个点，由所有内部数据结构的取值进⾏决定。

代码路径：⼀连串的代码语句[基于⽩盒]。

⽤户数据：测试数据尽量与上线环境的数据保持⼀致。

执⾏环境：操作系统、当前配置、其他应⽤程序、⽹络拓扑、驱动程序、⽂件系统、⽹络带宽、性能。

2 缺陷检测1.⾃动化测试：通过编写代码来测试⼀个应⽤。

（擅长找到的问题：程序崩溃、系统死机、程序挂起、突发异常、原有能⽤的功能出现问题）2.⼿⼯测试：使⽤程序的⽤户界⾯，⼿⼯输⼊数据进⾏测试。

（缺点:速度慢、没有规律、不可反复使⽤、发现问题也不能重视、⼈员⽔平决定测试质量、使⽤喜欢的测试⽤例⼜缺乏变通）。

测试⽤例的编写不要太使⽤细节的描述，尽量描述⼀些⽤户使⽤场景，同时结合⾃动化测试⼯具进⾏使⽤。

1.需要测试⼈员编写代码。

2.花费太多的时间来开发测试代码，⽽减少了测试项⽬的时间。