ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法
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ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法第一章设备概述ABI 2720 PCR 扩增仪是一台高性能的PCR(聚合酶链反应)仪器,用于在分子生物学实验中进行DNA扩增。
本文档旨在介绍ABI 2720 PCR 扩增仪的基本操作方法和注意事项。
第二章设备安装与连接1.安装ABI 2720 PCR 扩增仪:________将扩增仪放置在水平且稳定的台面上,确保设备周围有足够的通风空间。
2.连接电源:________将电源线插入扩增仪的电源插座,并插入电源插座。
3.连接计算机:________使用USB线将计算机与扩增仪连接。
第三章扩增方案设计1.确定扩增反应的目标基因或序列。
2.设计引物:________根据目标序列设计适当的引物。
建议使用专业软件进行引物设计,以确保引物的特异性和扩增效果。
第四章扩增反应操作1.准备反应组分:________按照扩增方案中确定的反应体系配制扩增反应液。
注意使用无菌操作和避免污染。
3.密封试管或板:________将PCR管或96孔板使用相应的封闭盖密封。
4.放置样品:________将PCR反应容器放置在ABI 2720 PCR 扩增仪的样品块中。
5.设置PCR程序:________使用计算机控制软件设置PCR 程序,包括温度和时间的设定。
6.开始扩增:________确认PCR程序设置正确后,启动扩增程序。
第五章扩增结果分析1.扩增结束后,取出PCR反应容器。
使用凝胶电泳等方法对扩增产物进行分析。
2.根据实验的需要,可以进行进一步的数据分析和结果解读。
第六章注意事项1.操作前请务必阅读设备使用手册,了解设备的安全注意事项和操作规程。
2.注意无菌操作,避免污染样品和反应体系。
3.注意实验室安全,正确处理和处置反应液和废弃物。
4.在设置PCR程序时,请确保温度和时间的设定符合实验需求。
本文档涉及附件:________附件1:________ABI 2720 PCR 扩增仪使用手册本文所涉及的法律名词及注释:________扩增:________聚合酶链反应(Polymerase Chn Reaction),一种用于扩增DNA片段的技术。
PCR仪器的使用及注意事项PCR仪器(聚合酶链式反应仪)是用于在体外合成DNA的关键仪器,其具有高灵敏度、高特异性和高效率的特点。
在科研领域,PCR仪器被广泛应用于基因克隆、基因表达分析、基因突变分析等实验中。
本文将介绍PCR仪器的使用方法及注意事项。
1.使用方法(1)准备样品:将需要进行PCR的DNA模板、引物、dNTPs和聚合酶按照配比加入PCR反应管中,并确保样品完全溶解。
(2)设置PCR程序:根据实验需要设置PCR程序,包括温度梯度、循环次数等参数。
(3)装载PCR反应管:将混合好的PCR反应管放入PCR仪器的样品槽中,注意不要产生气泡。
(4)运行PCR程序:启动PCR程序,跟踪反应过程中的温度变化,确保程序正常运行。
(5)分析PCR产物:将PCR产物进行电泳分析或其他实验操作,检查PCR反应的效果。
2.注意事项(1)严格遵守无菌操作规范:在进行PCR实验前,必须保证实验操作环境和操作工具的无菌干净,以防止外源DNA的污染影响PCR反应结果。
(2)避免反应管交叉污染:在操作PCR反应管时,要避免反应液的溅出和反应管之间的交叉接触,保持每个反应管的PCR反应独立进行。
(3)严格控制温度:PCR反应的温度是影响反应结果的重要因素,必须严格控制PCR仪器的温度梯度和循环次数,避免因温度波动导致PCR 反应不稳定。
(4)避免电泳误判:在对PCR产物进行电泳分析时,要注意区分PCR产物和非特异产物,避免因PCR产物的数量或大小而误判实验结果。
(5)及时清理PCR仪器:使用完PCR仪器后,要及时清理反应槽和反应管槽,避免因污染影响下次实验的结果。
总之,PCR仪器的正确使用方法和注意事项对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
科研人员在使用PCR仪器时,务必严格遵守操作规范,保证实验操作的准确性和可重复性,从而获得稳定可靠的实验数据。
PCR技术的应用将为生物学、医学和其他领域的研究提供重要支持和帮助。
编制审核批准日期日期日期目的:规范ABI 2720型基因扩增仪的使用,减少差错。
范围:ABI 2720型基因扩增仪的使用过程。
职责:ABI 2720型基因扩增仪操作人员。
1 主菜单1.1 打开仪器电源几秒钟后,仪器即显示主菜单界面。
1.2 此时可利用功能键进入各个功能菜单:1.2.1 F1-RUN:运行一个PCR方法1.2.2 F2-Creat:建立一个方法文件1.2.3 F3-Edit:编辑一个方法文件1.2.4 F4-Util:机器内置功能菜单1.2.5 F5-User:用户名菜单2 新增用户名2.1 用户可以在2720里面建立用户名,用来保存自己建立的方法文件。
2.2 在主菜单上按F5-User,进入界面。
2.3 按F2-Creat,进入新建用户名的页面。
2.4 使用导航键和Enter键从界面右上角的字符中选择你所需的字符,组成用户的名字,输入完成按F1-Accept完成用户名的建立工作。
2.5 如果需要用密码保护,按F3-PIN#就可以键入你的密码。
2.6 输入四位数的密码后,按F1-Accept,系统会提示你再输入一次,进行确认。
2.7 再次输入密码后,按F1-Accept,系统提示你是否需要锁定你所编辑的方法。
2.8 如果需要锁定,按F4-Lock按钮,再按一次F1-Accept,新建立的用户名就出现在User界面了。
3 建立新方法文件3.1 在主菜单下,按F2-Creat,进入页面。
3.1.1 页面默认的方法由三个部分组成,第一部分1Hld是预保温,94.0,5:00指的是在94℃保持5分钟,即横线上方的数值表示温度,下方的数值表示时间3.1.2 第二部分3Tmp 25Cycles指此部分是由三个不同温度组成的循环,循环数为25个,具体的温度为94℃保持三十秒,55℃保持三十秒,72℃保持三十秒。
3.1.3 然后进入第三部分2Holds,由两个保温温度组成,分别为72℃7分钟,4℃一直保温。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法简介ABI 2720 PCR 扩增仪是一种常用的实验室设备,用于在分子生物学和遗传学研究中进行聚合酶链式反应 (Polymerase Chn Reaction, PCR) 扩增。
本文档将介绍 ABI 2720 PCR 扩增仪的使用方法,包括设备的启动与关闭、程序设定、样品制备和实验操作等。
设备启动与关闭1. 将 ABI 2720 PCR 扩增仪接入电源,并打开电源开关。
2. 按下设备面板上的启动按钮,等待设备启动完成。
3. 在实验结束后,按下设备面板上的关闭按钮,等待设备自动关闭。
程序设定1. 打开设备面板上的软件界面,或通过连接电脑上的软件进行操作。
2. 在软件界面中选择新建实验,并设置程序参数,包括温度、时间和循环次数等。
3. 确认程序参数无误后,保存程序设定。
样品制备1. 根据实验需要,准备好待扩增的 DNA 样本和其他试剂。
确保样品准备过程在无菌条件下进行。
2. 将待扩增的 DNA 样本加入扩增试剂管中,并轻轻摇匀,确保样品完全溶解。
3. 用离心机将样品离心,移除上清液。
4. 将样品置于保护罩内,避免受到外界温度变化的影响。
实验操作1. 打开设备面板上的保护罩,将样品放置在 ABI 2720 PCR 扩增仪的样品槽中。
2. 确保样品完全密封,并关闭保护罩。
3. 在软件界面中选择之前保存的程序设定,并开始运行。
4. 设备将自动按照设定的程序参数进行 PCR 扩增。
在此过程中,可以通过软件界面查看实时温度曲线和剩余时间等信息。
5. 扩增完成后,设备会自动停止运行。
打开保护罩,取出样品。
6. 根据实验需要,对样品进行后续处理,如凝胶电泳分析或测序。
注意事项- 操作过程中应佩戴手套,避免污染样品。
- 使用前应检查设备面板的温度设置是否正确。
- 扩增试剂管中的试剂应密封保存,避免受到湿气和光线的影响。
- 扩增结束后,及时清理设备并关闭电源。
PCR仪使用及维护方法
1、打开PCR仪开关,输入密码后按Enter键进入主页面。
2、根据自己所PCR基因的特性,设置变性、复性、延伸的温度以及扩增次数和其温度。
3、按下START按钮,进行PCR扩增。
4、扩增完成后,按下Enter键结束PCR过程,并及时取出扩增产物。
5、最后终止反应的降温过程使用10℃即可(建议将所有程序最后一步都改为10℃)
6、使用完毕后清理台面,收拾并带走自己的东西(包括使用过的封口膜,如果有封口膜粘在PCR仪盖子上,一定要及时清理)
7、长时间10℃保存时,取出PCR产物后要及时轻柔擦去盖上的冷凝水。
8、严禁在通风口前放置东西,如果发现有异物在通风口附近,要及时清理。
ABI 2720 简易操作手册Applied Biosystems 2720 Thermal Cycler 中文说明书ABI 2720 简易操作手册目录一. 运行环境及电源要求 -------------------------------------------------------------二. 电源插座及开关 -----------------------------------------------------------------3 3三. 控制面板 -------------------------------------------------------------------------- 3 四. 主菜单 ---------------------------------------------------------------------------五. 添加用户名 ----------------------------------------------------------------------4 5六. 建立 PCR 程序 -------------------------------------------------------------------- 6 七. 编辑存储的程序 ------------------------------------------------------------------8八. 运行 PCR 程序 --------------------------------------------------------------------- 9 九. 其他功能 --------------------------------------------------------------------------- 11ABI 2720 简易操作手册 易一. 运行环境和电源要求 运行环境和电源要求 可 5℃~40℃的环境下安全使用,最适环境温度为 为 15℃~30℃, 1.请勿在冰室或冰箱中运行。
PCR仪操作指南
引言:
PCR(聚合酶链反应)是一种常用的分子生物学技术,用于检测和扩
增特定DNA序列。
PCR仪是进行PCR实验的必备设备之一,本操作指南将
详细介绍PCR仪的使用流程和操作注意事项,旨在帮助使用者正确操作PCR仪,提高实验的成功率。
一、实验前的准备工作:
1.根据实验需要,选择合适的引物,设计PCR反应体系。
2.准备好PCR反应物,包括DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三
磷酸、聚合酶等。
3.根据PCR仪的使用手册,检查设备的工作状态,保证设备正常运行。
4.准备PCR反应管,确保干净无污染。
二、操作步骤:
1.打开PCR仪电源,启动设备。
根据使用手册,设置合适的温度和时
间参数,并选择合适的热启动模式(立即开始或延迟开始)。
2. 调整PCR仪的温度设置。
根据PCR实验需要,设置热循环的温度
范围和时间参数,包括Denaturation(变性)、Annealing(退火)和Extension(延伸)步骤的温度和时间。
3. 预热PCR仪至所需的初始温度。
根据实验需要,将PCR仪的温度
调整至Denaturation步骤所需的温度(通常为95℃)。
4.添加PCR反应物至PCR反应管中。
按照预先设计的PCR反应体系,
将DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三磷酸、聚合酶等加入PCR反应
管中。
5.将PCR反应管放置在PCR仪的样品架中。
确保PCR反应管放置稳定,避免管内反应物溢出。
6.关闭PCR仪的上盖。
ABI 2720 PCR 仪操作规程1.准备工作1.1 操作人员:实验室检测人员。
1.2 使用前将电源线插紧,确保使用过程中电源的连接。
2.运行程序2.1 接通电源,打开电源开关。
2.2 功能键(F1-F5):用这些键选择显示屏上对应位置的功能。
比如在上图这个界面中 F1 键是运行、F2 键是创建。
在不同显示界面中,功能键发挥不同的功能。
在多数显示界面中都可以利用光标去选择区域,2.3 选择区域:用上【↑】、下【↓】、左【←】、右【→】键移动显示屏上光标至相应的位置。
2.4 键入数字:利用数字键(0~9)输入温度、时间等参数,再按【ENTER】键确认,如要取消键入,则按【DELETE】键清除,按【STOP】键,终止一个正在运行的程序。
2.5 开机后进入主菜单,可利用相应位置的功能键进入各个功能菜单:F1-RUN:选择并运行一个保存在仪器中的 PCR 程序;暂停运行;查看条件参数;PCR 运行至最后阶段,查看历史记录。
F2/F3-Create/Edit:在默认 PCR 程序的基础上创建或更改已经保存的 PCR 程序;更改温度、时间和循环数;添加一个循环或一个恒定温度(Hold);定义和添加程序性暂停;删除一个时间/温度段;在每个循环增加或降低时间或温度参数;命名和储存 PCR 程序。
F4-Util:配置仪器参数,如时间、日期、暂停时长等;利用 Tm 计算器;删除一个PCR 程序;查看上一次运行的 PCR 程序;运行硬件诊断程序;运行系统状态测试(升降温速度和循环次数);运行温度验证和温度均一性测试;升级系统。
F5-User:添加用户名;指定一个PIN 数字给某个使用者;锁定或解锁某个使用者名下的所有 PCR 程序;编辑或删除一个使用者。
2.6 建立 PCR 程序2.6.1 在主菜单下,按【F2-Create】键,显示系统默认2.6.2 根据自己的需要,对温度、时间、循环数和恒温状态(Hold)进行修改。
PCR仪的使用步骤及原理引言聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是一种在分子生物学研究中广泛应用的技术。
PCR仪作为PCR操作的关键工具,能够快速无误地扩增目标DNA 序列,为科学研究和临床诊断提供了重要的支持。
本文将介绍PCR仪的使用步骤及原理。
PCR仪的使用步骤以下是PCR仪的使用步骤:步骤一:准备反应体系1.准备PCR反应液,包括DNA模板、引物、核酸酶、缓冲液等。
2.将反应液分配到PCR试管中,确保每个试管的反应体系一致。
3.在一个试管中加入水作为空白对照。
步骤二:设置PCR仪的程序1.打开PCR仪,确保仪器处于正常工作状态。
2.设置PCR仪的反应程序,包括温度、时间等参数。
根据不同的PCR实验设计,设置合适的程序。
步骤三:装载样品1.将准备好的PCR试管放置在PCR仪的样品架上。
2.检查样品架是否放置正确,确保试管紧密接触PCR仪的加热块。
步骤四:运行PCR程序1.关闭PCR仪的盖子,启动程序运行。
2.PCR仪将根据设定的程序依次进行加热、变性、退火和延伸等反应步骤。
3.在PCR反应结束后,PCR仪会保持在设定温度,以保持PCR产物的稳定。
步骤五:PCR产物分析1.关闭PCR仪的电源,打开PCR试管。
2.可通过凝胶电泳、PCR产物可视化试剂等方法对PCR产物进行分析。
3.根据实验需求,进一步处理PCR产物。
PCR仪的原理PCR仪采用了温度循环技术,利用特定的酶(聚合酶)和核酸引物来引导DNA链的复制。
其原理主要包括以下三个步骤:1.变性(Denaturation):通过升高温度(通常为95℃),使DNA双链分离成两条单链DNA。
2.引物结合(Annealing):降低温度(通常为55-60℃),使引物与目标序列的单链DNA互补结合。
3.延伸(Extension):增加温度(通常为72℃),使聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。
通过不断重复这三个步骤,PCR仪可以在短时间内扩增特定的DNA序列。
pcr仪的使用方法和注意事项
技术服务说明书
一、概述
PCR仪是一种高效灵敏的DNA扩增技术,是现代分子生物学的重要组成部分。
其特点是快,灵敏,可靠,并且能够在微量样本中获得大量DNA。
PCR仪是一种可以进行非编码RNA表达水平定量实验的常用仪器,可提供温度控制、计时和编程,以确保每次反应的准确性和精确性。
二、使用方法
1、首先,用户在PCR仪上安装一个放大振荡器,并将PCR反应液和反应封袋放在其上。
2、然后,启动PCR仪,并输入仪器中的相应参数,如温度、时间、复制次数等。
参数各种参数要参照试剂盒中的说明,并以实验需要为准。
3、接着,根据实验要求,将反应液添加到反应封袋中,完成PCR 试剂添加。
4、最后,控制PCR仪的反应参数,稳定的温度、时间、复制量,以及控制PCR仪的加热、稳定时间,以完成PCR实验。
三、注意事项
1、使用PCR仪之前,用户要搞清楚所使用试剂的厂家,以确保试剂的质量。
2、使用PCR仪进行实验时,用户要确保设置的参数符合实验要
求,以 make sure 反应结果精准可靠。
3、当使用PCR仪时,要特别注意清洁,避免污染样本,以保证实验数据的可靠性。
4、使用PCR仪时,要定期检查PCR仪内的元件,如放大板,电位器等,使仪器保持良好的工作状态,可以有效的保证实验的效果。
5、当使用PCR仪时,用户要注意安全,应避免曝晒、触碰内部的高温以及电源线,以免造成损伤。
ABI2720型PCR仪操作说明1.准备工作:a.将PCR仪放置在平稳的台面上,确保周围无振动和温度变化。
b.检查PCR仪是否连接电源,并确保电源线连接稳固。
c.打开PCR仪的电源开关,待PCR仪启动并显示正常后即可进行下一步。
2.设定温度程序:a. 按下PCR仪的"Program"按钮,进入温度程序设定界面。
b.根据实验需要,选择合适的温度程序模板或自定义温度程序。
c.使用仪器上的方向键和数字键,调整温度和时间参数。
d. 确认设置后,按下"Enter"按钮保存设定。
3.样品装载与密封:a.准备PCR反应管,将样品和PCR试剂按照实验方案加入反应管中。
b.确保反应管盖子紧密关闭,以防止样品的污染和蒸发。
c.将反应管放置在PCR仪的样品托盘上,确保每个孔位都有反应管。
4.启动PCR反应:a. 按下PCR仪的"Run"按钮,启动PCR反应。
b.监控实验过程中PCR仪的温度变化和反应时间。
c.实验结束后,PCR仪会自动停止并显示反应结果。
5.结果分析:a.将PCR反应产物进行凝胶电泳或其他分析方法,以确认目标DNA的放大效果。
b.根据实验需要,对PCR反应结果进行进一步分析和解释。
6.清洁与维护:a.实验结束后,及时关闭PCR仪的电源开关,并切断电源。
b.使用干净的纸巾或软布擦拭PCR仪的表面,以除去沾染的试剂和污渍。
c.定期检查PCR仪的过滤器和灯管,如有需要,及时更换和清洁。
d.注意PCR仪的内部不可随意拆卸和清洁,以避免损坏仪器。
PCR仪检测操作规程第001版编制:一审:二审:批准:受控状态:文件分发号:PCR仪检测操作规程1 目的规范PCR仪检测方法和过程。
2 范围适用于PCR仪的检测。
3 实验仪器3.1 PCR仪:ABI2720,伯乐T-100。
3.2 移液器:单道:10ul,100ul,200ul,1000ul。
八道:10ul。
3.3 电泳仪;3.4 凝胶成像仪;3.5 离心机:5810R4 实验试剂、耗材4.1 96孔板,酶标板,封口膜,橡胶垫。
4.2 超纯水、DNTP、rTaq酶、10*buffer、扩增模板(约30ng)、正向引物(5p)、反向引物(5P)、琼脂糖、TAE、溴酚黄。
5 实验流程5.1配置MIX,配置比例如下:(100个孔)注:事先把要用的试剂4度解冻后使用。
5.2 将配置好的MIX充分混匀后加入96孔板内,每孔5ul,加封口膜,3000rpm 1min离心。
5.3查看加液量是否足够,将离心后的96孔板更换橡胶垫,上待检测的PCR仪。
程序如下:5.4程序完成后,将96孔板取下,3000rpm 离心1min,查看是否有蒸干现象。
注:如有蒸干现象做好记录,本次检测忽略此孔结果。
如蒸干空位较多,则重新操作5.1-5.35.5 向96孔板内加入溴酚黄,每孔5ul。
混匀后,取混合液6ul加入酶标板内,200rpm短离心5s。
5.6 按照《电泳操作规程》跑电泳,照相。
5.7 结果判定:所有孔位条带清晰可见、亮度均一,判定为PCR仪合格;反之则不合格。
6 相关文件7 相关记录8 本文件变更情况。
PCR基因扩增仪操作步骤
1、首先准备好反应管;
2、打开机盖,将反应管平稳、端正的置入,盖好机盖;
3、打开电源开关,按照机器屏幕显示的提示设定程序,用
proceed键启动扩增,结束时出现“complete”,待风机停止工作,关闭电源。
注意事项:
(1)使用PCR仪时要严格注意本机的使用环境条件和对电源的要求;
(2)打开PCR仪机盖要轻,防止损坏机锁;
(3)PCR基因扩增仪工作时严禁打开机盖;
(4)要定期使用肥皂水清洗仪器的样品槽,不能使用强碱,高浓度酒精和有机溶剂擦洗;
(5)产品出现故障时要请专业的维修人员或厂家维修人员维修
冷冻离心机操作步骤
1、登记离心机使用登记本,检查使用状况。
2、检查箱体内是否有水分。
3、物体离心时应平衡物品:将需要离心的液体导入专
用离心杯内,要求液体的装量不要超过总体积的4/5,
然后在相应的天平进行平衡,旋紧盖筒。
4、装转子:打开离心机上盖,将相应的转子装入,调
试转子直到转好为之,盖上转子上盖,旋紧。
5、设置参数,当温度指针移到设定温度时,绿灯亮,
按下“START”键,此时机器开始正式工作。
在预
设时间完成以后,“STOP”键指示灯闪烁,机器停
止工作。
6、等待机器完全停止下来,“STOP”灯熄灭,转速为
零,打开机器上盖,打开转子上盖,取出离心物体,此时离心工作完成。
注意事项:
(1)、离心物体必须平衡,对称放入离心机转子内。
(2)、注意加速度调整,转子大小与加速度成反比。
目录一. 运行环境及电源要求-------------------------------------------------------------- 3二. 电源插座及开关----------------------------------------------------------------- 3三. 控制面板-------------------------------------------------------------------------- 3四. 主菜单---------------------------------------------------------------------------- 4五. 添加用户名----------------------------------------------------------------------- 5六. 建立PCR程序-------------------------------------------------------------------- 6七. 编辑存储的程序-------------------------------------------------------------------8八. 运行 PCR程序 ---------------------------------------------------------------------9九. 其他功能---------------------------------------------------------------------------11一. 运行环境和电源要求1.请勿在冰室或冰箱中运行。
2720可在5℃~40℃的环境下安全使用,最适环境温度为15℃~30℃,最适环境湿度为20~80%。
2.2720 的通风口位于机身正面和背面,为保持通风口的通畅,请勿在仪器的周围堆放杂物,并且必须将仪器的左、右及背面离开墙壁10~15cm。
pcr仪的使用方法和注意事项
PCR仪是一种常用的实验仪器,用于进行PCR技术实验。
使用PCR仪前需要了解以下使用方法和注意事项:
使用方法:
1. 准备RNA或DNA样本:样本的提取方法会影响PCR反应的结果,样本的质量和浓度应该在合适范围内。
2. 准备PCR反应体系:按照PCR实验的要求11,并按照反应体系中每个试剂的浓度准确配制反应液。
3. 加载反应液:将PCR反应液加入到PCR管或PCR板中,注意避免气泡产生,保持空气充分流通。
4. 加载模板DNA:模板DNA可以使用模板DNA的PCR反应液或纯化后的模板DNA提取物,添加到PCR反应液中。
5. 安装PCR反应管或PCR板:将PCR反应管或PCR板安装在PCR 仪中,根据实验需求,安装适当类型的PCR反应器和PCR反应管或PCR 板。
6. 开始PCR实验:选择合适的PCR程序,启动PCR反应,按照PCR实验的要求进行。
注意事项:
1. 仪器使用前应进行检查:需要检查PCR模块是否已经正确连接,PCR块是否有损坏,温度传感器是否正常等。
2. 仪器使用过程中注意安全:需要佩戴符合安全标准的防护眼镜和手套,避免接触高温部件。
3. 清洁仪器:使用后应该清洗PCR仪器,将反应管或板清洗干净并且置于合适的位置。
4. 避免污染:每次实验结束后切勿将酶、试剂和PCR样品留在操作台上,以免细菌或其他污染物感染。
5. 控制反应温度:PCR反应过程中,应根据实验的需要控制反应的稳定温度,以防止PCR反应失败。
ABI2720型PCR仪操作说明步骤1:仪器准备1.将PCR仪器放置在水平平稳的工作台上,并将电源插头插入电源插座。
2.按下仪器背面的电源开关,启动PCR仪。
3.等待仪器预热,一般需要5-10分钟,预热完成后仪器将显示主界面。
步骤2:设置PCR参数1.在主界面上,按下"MENU"按钮进入菜单设置界面。
2. 使用向上和向下按键选择"Parameters"或"PCR Parameters"选项,并按下"ENTER"按钮确认选择。
3. 在"PCR Parameters"界面上,使用向上和向下按键选择所需的PCR参数(如温度、时间等),并使用"ENTER"按钮进行确认。
4.根据实验需求,设置PCR反应的循环次数、片段长度和目标温度等参数,并按下"ENTER"按钮进行保存。
步骤3:加载PCR反应混合液1.打开PCR仪器上方的盖子,将PCR反应试管架放入仪器中。
2.打开PCR反应试管架,按需加载PCR反应混合液。
确保试管中的液体不超过标记线并避免发生交叉污染。
3.关闭PCR反应试管架,再次关闭PCR仪器的盖子。
步骤4:启动PCR反应1.在主界面上,按下"START"按钮启动PCR反应。
2.PCR仪开始进行温度循环,显示当前温度和剩余循环次数等相关信息。
3.完成PCR反应后,PCR仪会发出声音提示。
步骤5:结束PCR反应1.在PCR反应完成后,按下"STOP"按钮停止PCR反应。
2.打开PCR仪器盖子,将PCR反应试管架取出。
3.检查PCR反应结果,可以通过凝胶电泳等方法进行分析。
步骤6:关闭仪器1.按下仪器背面的电源开关,关闭PCR仪。
2.拔出电源插头,结束操作。
总结:ABI2720型PCR仪是一种操作简单、功能强大的PCR仪器。
P C R仪操作指南(共4页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--PCR仪操作指南步骤:1、开机:打开开关,视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后,显示RUN-ENTER菜单:准备执行程序。
2、放入样本管,关紧盖子。
3、一、如果要运行已经编好的程序,则直接按《Proceed》,用箭头键选择已储存的程序,按《Proceed》,则屏幕显示:按《Proceed》选择ENABLE,则开始执行程序。
二、如果要输入新的程序,则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕显示按《Proceed》,1)选择NEW,命名新的程序,最多8个字母,输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。
2)输入程序步骤:名字输入后,显示按《Proceed》则可以输入温度(0~100℃),按《Proceed》确认后,则可以输入孵育时间,用《Select》键移动光标,输入数字,完成后按《Proceed》确认,跳到下一步,输入方式同上。
3)选择GOTO,输入循环步骤时链接到第几步(循环数最多可达9999次)(为实际循环数-1)。
4)选择option,显示再选择increment,按《Proceed》确认,输入初始的温度,确认后输入时间,按《Proceed》确认,然后输入每个循环增加或减少的温度,增加用正值,减少用负值(-℃~6℃),按《Proceed》确认。
选择extend, 按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间(-60~60秒),按《Proceed》确认。
选择slop(指温度上升或下降的速率),输入温度的改变值(-~℃)按《Proceed》确认,然后输入加热或致冷的速度,按《Proceed》确认。
4)选择End,输入结束步骤。
5、输入完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运行。
2720 Thermal Cycler PCR仪操作流程
一、仪器操作界面
数据连接口样板
控制板面仪器开关
二、编写程序
1、打开仪器
2、编辑程序
等几分钟之后会出来主菜单
从主菜单按F5 ,显示使用者的名字
按F2 显示User Name 填入程序名称按F1 保存,按f5 查找你保存的名字
按F2 出现建及编辑界面
按移动键,调整你需要的时间及温度及循环的次数
在点击保存
3、开始
从主菜单按F1键,储存的信息会显示在显示屏上
Test01 就是输入的程序,界面上会突出来
按F1(start)键开始,显示屏显示出时多少ul的体系,
改变反映的体积,按F1,会显示运行的时间
4、停止
按stop键,界面显示已停止
再按stop键,运行终止
按F5返回到主界面
二、关机
使用完仪器之后,如不需要再进行扩增,及时关闭仪器。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法!
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法,带有相关英文指示步骤的操作
2、PCR技术发展史 PCR原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
聚合酶链式反应第一代:手动/⌝自从1993年到现在很快经历了四代产品:机械手式水浴基因扩增如上图所示,用三个恒温水浴箱,分别将三个水浴温度恒定在三个温度:PCR的高温变性温度(如94℃)低温复性温度(如58℃),适温延伸温度(如72℃)。
再用一个装有PCR标本试管的提篮,用手工在不同温度的水浴箱中依次水浴,标本在每个水浴箱中恒温的时间用秒表计时。
这样PCR标本就能完成下述形式的热循环:94℃ 30S 58℃ 45S 72℃ 60S 40次循环这种方法的特点是:实验人员劳动强度大,容易因疲劳引起差错;而优点是:设备简单,投资少,与自动化基因扩增仪相比,它无须升降温过程,实验时间短,试验更接近理想PCR反应条件,事实表明实验效果还是不错的,但由于标本试管从一个水浴箱往另一个水浴箱移动中要较短暂暴露于空气中,因此如移动速度不够快时也会对标本形成温度干扰,影响结果。
本方法的另外一些缺点包括只能局限三个温阶(某些PCR反应需要多于三个温阶)、液体污染以及在低气压地区水温难以烧到94℃变性温度等。
为改进提高本方法的自动化水平,有人设计了机械手装置,替代上述手工移动标本过程,形成了机械手水浴式基因扩增仪,该改进解决了实验人员的高强度劳动问题,但又带来了一个机械手部件大行程频繁相对运动而引起的高故障。
这种类型的基因扩增仪在九十年代中期我国北京、上海有定型的产品销售,应用也较广,曾为我国的分子生物学⌝的发展做出过积极贡献,而后便逐步被自动化程度更高的扩增仪替代,现在很少有单位使用。
第二代:自动化控制型定性基因扩增仪⌝与上述水浴式扩增仪相比,也有人称该种扩增仪为干式基因扩增仪,它是最具代表性的扩增仪,包括后续介绍的第三代、第四代都是以第二代为基础集成了定量检测部分。
第三代:终点定量/半定量第二代的定性PCR只能判断阴性阳性,而无法评价特定核酸的浓度及定量分析,定量PCR至少能达到定性PCR无法实现的下列功能:•潜伏期病毒浓度探测•感染程度•致病病原体数量变化测定•抗病毒药物疗效评估•恢复期病毒载量检测自从1996年美国ABI公司发明第一台荧光定量PCR仪以来,PCR技术和应用从定性向定量快速发展.终点定量PCR的优点是设备投资少,对于国内经济条件还不能购买昂贵实时荧光定量PCR仪的科研单位和医疗机构,利用现有的第二代常规定性PCR仪,在添加一台专用的单孔PCR终点产物荧光定量检测仪便可开始工作,起到定量的作用。
终点定量PCR技术是从定性向实时定量过渡的一个中间产品,而PCR终点产物荧光定量仪进口产品较少,国产仪器较多,如西安天隆的TL988,上海棱光的DA620型等第四代:实时定量PCR 实时定量QPCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。
见下图:(略)。