柠檬烯的提取实验报告

12食安2班201230600629杨巧宇201230610201陈境俊201230610202陈庆鸿201230610203陈泽敏201230610204陈志廉201230610205代文豪

菠萝蛋白酶的提取、初步分离纯化及活性测定

12食安2班陈志廉

摘要

本文阐述了通过运用高速离心法提取粗酶，盐析分离提纯，透析除杂等方法

提取出了菠萝蛋白酶并将其初步分离纯化且测定了各个步骤的酶活性的过程。

关键词

菠萝蛋白酶纯化酶活性

前言

菠萝蛋白酶（Bromelain，EC3.4.22.3）简称菠萝酶，是从凤梨属植物菠萝

中提取的一组复合的半胱氨酸巯基蛋白水解酶，1891年Mercaro于菠萝的汁中首

先发现。

在食品工业中菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂，能分解蛋白质、肽、酯和酰

胺等，可用于肉质嫩化、水解蛋白、啤酒澄清、干酪生产等。菠萝蛋白酶来可以

用来增加豆饼和豆粉的PDI值和NSI值，从而生产出可溶性蛋白制品及含豆粉的早

餐、谷类食物和饮料。其它还有生产脱水豆类、婴儿食品和人造黄油；澄清苹果

汁；制造软糖；为病人提供可消化的食品；给日常食品添味等。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症，并有助消化，健胃消食等功能。

菠萝蛋白酶属于糖蛋白，是由巯基蛋白酶和非蛋白酶组分构成的复杂复合

物，因含有一个不稳定的游离巯基，所以菠萝蛋白酶极易被氧化而使其酶活下降。

本文主要验证了从新鲜菠萝皮中提取菠萝蛋白酶并将之纯化的方法，以求改进工

艺等。

1实验材料与仪器

1.1实验材料与试剂

新鲜菠萝、0.1mo1/LpH7.8磷酸缓冲液（PBS）、0.01mo1/LpH7.8磷酸缓

冲液（PBS）、1％酪蛋白、激活剂、10％三氯乙酸(TCA)、牛血清白蛋白、考马

斯亮蓝G250

12食安2班201230600629杨巧宇201230610201陈境俊201230610202陈庆鸿201230610203陈泽敏201230610204陈志廉201230610205代文豪1.2实验仪器

实验九 水蒸气蒸馏及柠檬烯的提取（5学时）

一、实验目的

1．学习水蒸气蒸馏的原理及其应用。

2．认识水蒸气蒸馏的主要仪器，掌握水蒸气蒸馏的装置及其操作方法。

3．学习柠檬烯的提取方法。

二、实验原理

水蒸气蒸馏（Steam Distillation）是将水蒸气通入不溶于水的有机物中或使有机物与水经过共沸而蒸出的操作过程。它是用来分离和提纯液态或固态有机化合物的一种方法。

适用范围：

（1）从大量树脂状杂质或不挥发性杂质中分离有机物；

（2）除去不挥发性的有机杂质；

（3）从固体多的反应混合物中分离被吸附的液体产物；

（4）常用于蒸馏那些沸点很高且在接近或达到沸点温度时易分解、变色的挥发性液体或固体有机物，除去不挥发性的杂质。

利用水蒸气蒸馏对，被提纯物质必须具备以下几个条件：

（1）不溶或难溶于水；

（2）在沸腾时不与水起化学反应；

（3）在100℃左右时，必须具有一定的蒸气压（蒸气压至少~1333Pa，即5~10mmHg）。

根据分压定律：当水与有机物混合共热时，其总蒸气压为各组分分压之和。即：p= pH2O + pA，当总蒸气压（p）与大气压力相等时，则液体沸腾。有机物可在比其沸点低的多的温度，而且在低于100 ℃的温度下随蒸气一起蒸馏出来，这样的操作叫做水蒸气蒸馏。

馏出液组分的计算： 假定两组分是理想气体，则根据pv= nRT = mRT / M

得mA / m(H2O) = MApA /M(H2O)p(H2O)。

例：苯甲醛（. 178℃），进行水蒸气蒸馏时，在℃沸腾。

这时pH2O = mmHg

pC6H5CHO = = mmHg，M(C6H5CHO) = 106， M(H2O) = 18，代入上式得：

m(C6H5CHO)/m(H2O) =106× / 18× = (g)

即每蒸出 (g) C6H5CHO，需蒸出水的量为1 g，若蒸10 mL C6H5CHO，需出水量（理论）：10× / = / = 22 mL（H2O）

一、实验目的

1. 了解柠檬烯的提取原理和方法；

2. 掌握柠檬烯提取实验的步骤；

3. 通过实验，提高对有机化学实验技能的掌握。

二、实验原理

柠檬烯是一种天然存在于柑橘类水果中的萜类化合物，具有较强的香气和抗氧化作用。本实验采用溶剂萃取法提取柠檬烯，利用其易溶于有机溶剂的性质，通过萃取、分离、纯化等步骤，获得纯净的柠檬烯。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：新鲜柠檬、无水硫酸钠、无水乙醇、正己烷、石油醚等；

2. 实验仪器：锥形瓶、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、蒸馏装置、冷凝管、磁力搅拌器等。

四、实验步骤

1. 准备新鲜柠檬，将其洗净、去皮、去核，切成小块，备用；

2. 将柠檬块放入锥形瓶中，加入适量的无水乙醇，浸泡一段时间，使柠檬中的柠檬烯充分溶解；

3. 将浸泡好的柠檬块和乙醇溶液转移到分液漏斗中，加入适量的无水硫酸钠，充分振荡，使柠檬烯与水相分离；

4. 静置分层，待水相与有机相分层清晰后，将有机相（含柠檬烯）分离出来；

5. 将分离出的有机相转移到烧杯中，加入适量的石油醚，充分振荡，使柠檬烯与石油醚相分离；

6. 再次静置分层，待水相与有机相分层清晰后，将有机相（含柠檬烯）分离出来；

7. 将分离出的有机相转移到旋转蒸发仪中，加热浓缩，使溶剂蒸发，得到柠檬烯固体；

8. 将柠檬烯固体转移到干燥器中，待其冷却后，称量质量，计算提取率。

五、实验结果与分析 1. 实验结果：通过以上步骤，成功提取出柠檬烯固体，质量为0.5g；

2. 提取率计算：提取率 = (提取的柠檬烯质量 / 柠檬质量) × 100% = (0.5g /

100g) × 100% = 0.5%；

3. 分析：本实验提取的柠檬烯提取率为0.5%，说明提取效果较好。

六、实验总结

1. 本实验成功提取了柠檬烯，验证了溶剂萃取法在提取柠檬烯方面的可行性；

2. 通过实验，掌握了柠檬烯提取的实验步骤和操作技巧；

3. 在实验过程中，应注意安全操作，避免溶剂挥发和爆炸事故；

第1篇

一、实验目的

1. 学习水蒸馏法提取柠檬烯的原理和方法。

2. 掌握水蒸气蒸馏装置的使用和操作步骤。

3. 熟悉柠檬烯的物理性质和化学性质。

二、实验原理

柠檬烯是一种具有柠檬香味的萜类化合物，广泛存在于柑橘类植物的果皮中。水蒸气蒸馏法是一种常用的提取方法，其原理是利用水蒸气将柠檬烯携带出来，然后通过冷凝、分离等步骤得到纯净的柠檬烯。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：新鲜橘皮、水、无水硫酸钠、蒸馏装置等。

2. 仪器：电子天平、烧瓶、冷凝管、锥形瓶、酒精灯、温度计等。

四、实验步骤

1. 称取新鲜橘皮，切成小块，放入烧瓶中。

2. 向烧瓶中加入适量的水，加热至沸腾。

3. 保持沸腾状态，收集蒸馏出的液体，直至收集到预定体积。

4. 将蒸馏液冷却，静置，分层。

5. 分离出油层，加入无水硫酸钠，静置过夜。

6. 过滤，得到纯净的柠檬烯。

五、实验结果与分析

1. 柠檬烯为无色透明液体，具有柠檬香味，沸点为174-176℃。

2. 通过水蒸气蒸馏法，成功提取出柠檬烯，出油率为2.5%。

3. 实验过程中，温度控制在100℃左右，延长蒸馏时间有助于提高出油率。

六、实验讨论 1. 水蒸气蒸馏法是一种简单、有效的提取方法，适用于提取柠檬烯等挥发性较强的有机物。

2. 实验过程中，注意控制温度和时间，以确保提取效果。

3. 柠檬烯具有多种应用，如食品、化妆品、医药等领域。

七、实验总结

本次实验成功提取出柠檬烯，掌握了水蒸气蒸馏法的原理和操作步骤。通过实验，加深了对柠檬烯物理性质和化学性质的认识，为后续研究奠定了基础。

第2篇

一、实验目的

1. 了解水蒸气蒸馏法的原理和操作步骤。

2. 学习从橙皮中提取柠檬烯的实验方法。

3. 掌握提取柠檬烯的纯化、鉴定和定量分析方法。

二、实验原理

水蒸气蒸馏法是一种常用的分离和提纯有机物的实验方法。该方法利用水蒸气将挥发性较强的有机物携带出来，形成油水混合物，然后冷却、分层，将油层分离出来即可得到较纯的有机物。橙皮中的柠檬烯具有挥发性，因此可以通过水蒸气蒸馏法进行提取。