离体小肠平滑肌生理特性实验报告

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1 实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察

【实验目的】

学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】

消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。

【实验材料】

实验动物：家兔，2.0-2.5kg

实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。

实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。

【实验步骤】

1. 恒温浴槽的准备工作；

2. 标本制备；

3. 仪器连接与设置；

4. 启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。

观察项目

1. 自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性收缩及张力水平。

2. 观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

（1） 乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。作用产生后，洗涤三次，进行下一项实验。

（2） 阿托品的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴，两分钟后，再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。与（1）比较结果后，洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一百度文库

2 项实验。

3. 观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

去甲肾上腺素的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴，观察肠管张力和收缩有何变化。然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。

4．观察钙离子对肠断收缩的影响

向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴，观察肠管平滑肌的反应。然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。

离体小肠平滑肌生理特性实验报告

一、实验目的

1、 学习哺乳动物离体器官灌流的实验方法。

2、 观察小肠平滑肌的一般生理特性，包括紧张性、自动节律性、兴奋性和收缩性。

3、 观察并分析各种理化因素对小肠平滑肌生理特性的影响。

二、实验原理

小肠平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。同时，小肠平滑肌还具有自身的特点，如紧张性和自动节律性。小肠平滑肌的活动受到神经、体液和自身内在因素的调节。

紧张性是指小肠平滑肌经常保持一定的收缩状态，这是小肠进行消化和吸收等生理功能的基础。自动节律性则使小肠平滑肌能够在没有外来神经支配的情况下，自发地产生节律性收缩和舒张。

兴奋性表现为对刺激产生反应的能力，其反应形式包括收缩和舒张。收缩性是小肠平滑肌的重要功能之一，通过收缩和舒张推动食物在肠道内的移动。

各种理化因素，如温度、酸碱度、离子浓度、药物等，都可以通过影响细胞膜的离子通道、受体或细胞内的代谢过程，从而改变小肠平滑肌的生理特性。 三、实验材料与设备

1、 实验动物：健康家兔一只。

2、 实验器材：恒温平滑肌槽、麦氏浴槽、张力换能器、生物信号采集处理系统、氧气袋、注射器、手术器械（剪刀、镊子等）、丝线等。

3、 实验药品：台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品、盐酸、氢氧化钠等。

四、实验步骤

1、 制备离体小肠平滑肌标本

家兔禁食 24 小时，击晕后迅速剖开腹腔，取出一段小肠，置于盛有台氏液的培养皿中。

小心去除肠管表面的系膜和脂肪组织，用剪刀将肠管剪成 2-3cm 的小段。

选取一段肠管，两端用丝线结扎，一端固定于浴槽内的挂钩上，另一端连接张力换能器。

2、 连接实验装置

将张力换能器与生物信号采集处理系统相连，调整张力换能器的位置，使其保持适当的张力。

向浴槽内加入适量的台氏液，保持 38℃恒温，并持续通入氧气。 3、 观察小肠平滑肌的正常生理特性

开启生物信号采集处理系统，记录小肠平滑肌的收缩曲线，观察其紧张性、自动节律性和收缩幅度。

生理实验

第 1 页 共 6 页 实验十三 离体小肠平滑肌的生理特性

一、 实验目的

1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。

2、观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。

3、加深对消化道平滑肌生理特性的理解。

二、 实验原理

消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管以及输精管等均由平滑肌组成。哺乳动物消化管平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特点对维持消化管内一定压力、保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。这些特点在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。

家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。其作用是：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。

下面是各类药品对小肠受体的分别作用：

1、 乙酰胆碱（Ach）：M受体激活剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度增加，蠕动加强。

2、 阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。

3、 肾上腺素(Ad)：α、β受体激活剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），α、β受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。

4、 氯化钡（Bacl2）：Ba2+ 进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩。Ba2+

可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。 生理实验

第 2 页 共 6 页 5、 盐酸（HCl）：加酸可使Ca2+ 内流减少，肌浆网Ca2+ 释放减少，从而Ca2+ 与肌钙蛋白结合减少，因此平滑肌收缩频率和幅度都降低。

1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图2. 洗脱Ach后的小肠运动曲线

由图可知，加入%Ach后，可见离体肠管活动增强，曲线出现收缩频率变快，幅度增加。主要原因和消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M型乙酰胆碱受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。

2. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图3. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图4. 洗去CaCl2后的小肠运动曲线

由图可知，加入2%CaCl2溶液2滴后，离体肠管活动稍有减弱，描记曲线出现收缩幅度略微减弱。可能是因为加入CaCl2后，细胞内Ca2+浓度升高，一直处于较高水平。生成钙调蛋白复合物后激活MLCK，造成肌肉收缩后并没有明显的Ca2+浓度下降，MLCK一直维持活性，横桥与肌动蛋白解离不彻底，肌肉不完全舒张，导致再次收缩时收缩幅度会受到影响，所以收缩幅度略有下降。

3. 加入肾上腺素后的小肠运动曲线

图5. 加入肾上腺素后的小肠运动曲线

图6. 洗去肾上腺素后的小肠运动曲线

由图可知，加入%肾上腺素（E）后，可见离体肠管活动减弱，曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。主要原因是肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体，肾上腺素作用于α抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作用于β受体，它的激活引起①肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，也使肌张力降低；②促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低。 加入肾上腺素