ELSD对比小结

自从２００５年对乙脑减毒活疫苗实施批签发至今，已签发该制品１７００余批，３亿多人份。

总体合格率在９９．７％以上。

对某企业生产的乙脑减毒活疫苗应用趋势分析后发现，该企业生产的乙脑减毒活疫苗质量较为稳定，批间一致性较好。

绝大部分检测结果都在警戒限内，偶尔有超出行动限的结果，在展开详细的调查后，未发现严重影响产品质量的因素。

总体上说明企业的生产工艺较为稳定，质量控制方法也比较稳定，从而保证了乙脑减毒活疫苗质量的稳定性。

标准品的检测结果是判定试验是否成立的关键因素，对标准品和内控品活性的趋势分析，首先可以反映标准品和内控品的稳定性，若其活性降低，不符合要求，则应制备新一代标准品。

其次可以间接反映试验方法的稳定性，试验系统中人员、仪器、试剂等若出现重大的变更或出现重大的操作失误，都可能对标准品的结果有重大的影响，可表现在结果超出警戒限或行动限，此时应溯源整个试验系统，查明原因后及时纠正，以保证试验结果的准确性。

对乙型脑炎病毒滴度参考品滴定结果的趋势分析结果，除反映参考品的稳定性较好，仍可继续分发使用。

也反应中检院和企业的方法都比较稳定，一致性也较好。

除对成品和标准品进行趋势分析外，企业在对原辅材料及工艺用水的质量控制中，也可纳入趋势分析的理念。

对供应商的检定结果及企业的检定结果进行趋势分析，以保证原辅材料的稳定性，从而从源头上保证生产过程的稳定性。

在对生产环境的控制中，也可纳入趋势分析的理念，对空气净化系统及温度控制系统监测结果进行趋势分析，及时发现异常并加以纠正。

在对生产环节的质量控制中，每一质控点的数据都可纳入到趋势分析中，以保证早期发现问题，及时解决问题。

在进行趋势分析时，有时需考虑一些特殊情况。

如标准品换代（特别是用于相对定量的标准品），实验系统、生产工艺中重大改变，都需重新累积批数来计算均值及标准差。

在对趋势分析结果进行分析时，也应考虑检定结果可能来自不连续批次的情况。

本文对乙型脑炎减毒活疫苗质量控制中的趋势分析原则和方法进行了阐述，并通过趋势分析，发现该制品的生产工艺和产品质量较为稳定，检定方法也比较稳定可靠。

美国格瑞斯Alltech 3300ELSD蒸发光散射检测器Alltech ELSD 3300 是Grace公司所生产的用于高效液相色谱系统的蒸发光散射检测器，能分析任何挥发性低于流动相的化合物。

ELSD 的分析应用领域包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。

ELSD 3300 提供当今最先进的蒸发光散射检测技术。

它能提供纳克级范围的灵敏度。

直接基于Windows的软件界面可提供一系列直观的菜单选?项来执行检测器的操作，包括用于简化方法开发过程的方法优化向导、多种语言和诊断测试及故障排除功能。

ELSD 3300还有紧凑、易于摆放的特征，能将其很容易的放置在有限的试验室空间。

报价：150000元奥泰的市场占有率比较高，不错，有800、2000、2000ES、3000的，还有惠泽的和英国PL 的经济些灵敏噪音低，有极好的基线稳定性检测限可低至纳克级简单一步一步的方法指导可以帮您"傻瓜式"的建立检测器设置参数可以很方便的取出需要清洁或维护的部件小巧小巧的体积设计占有最小的空间位置ELSD的检测过程3300ELSD技术指标光源配有平行光路校正的激光二极管，650nm，30mV输出，IIIB级别检测器元件硅光电二极管加热温度范围室温~120℃，步进1℃雾化气体首选氮气；校正至4.0L/min输入压力60-80psig典型的操作范围 1.0-2.0L/min气流控制数字式质量流量控制通入流动相流速不大于3.0mL/min模拟输出满量程为1V或10mV通讯输入端：TTL/接触关闭为自动归零、关闭气体、启动和待命输出端：接触关闭为错误条件和常规事件下关闭泵数据端口：USB,RS232，以太网（Ethernet）用户界面全色、基于Microsoft Windows ?的图式LCD（液晶显示器），带有数字键盘电源120/240V,50/60Hz尺寸29.5cm高×26.2cm宽×49.5cm深重量16KgIEC/FDA分级级别1激光产品，符合21 CFR Subpart J生产标准满足所有适用安全性和EMC标准，经CE,UL和CSA认证操作控制安装驱动后可由Agilent Chemstation和EZChrom Elite/EZ Start控制SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器产品详细信息SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器技术参数光源：LED（470nm）检测元件：高灵敏度光电倍增管,数字信号处理检测限：100pg（十二醇聚氧乙烯醚 C12EO8 micro-H PLC）典型定量检测量：0.5 - 5ug蒸发温度：室温到100ºC，调节精度1ºC蒸发温度：两种基本设定，即可满足绝大多数要求流动相流量：100uL/min-5mL/min可选喷雾头种类：4种（HPLC，CC，Micro，UPLC）气体消耗量：<3.0L/min气体要求：>5L/min的氮气或空气，2 - 4.5Bar基线噪音：水相低于1毫伏/小时，非水相低于3毫伏/小时（GAIN）信号输出：0 - 1VGAIN值：1 - 12（2'' 2048）数据传输：100Hz计算机接口：RS-232软件控制：可选，控制所有参数，可编程Agilent驱动软件：可选触发信号控制：零点，自动关机，定时关机GLP规范：审核、密码、管理模式操作参数显示：内置微处理器，通过面板控制，LCD显示安全保护：全内置，无需额外辅助保护载气流速调节：无需，已最优化设计维护：自动清洗功能，可视，方便操作分析技术：HPLC，LC/MS，制备色谱检测样品范围：半挥发性物质、不挥发性物质、热不稳定化合物典型应用：高灵敏度，方法开发和优化体积和重量：250 x 480 x 550 mm，18.5 Kg （40lbs）电源：230V/50Hz 1.7A特点：改进的光学设计，大大提供灵敏度。

蒸发光散射检测器(ELSD)简介前期，在「talk」和「Applications」上介绍了蒸发光散射检测器，许多读者来信要求「进一步介绍ELSD」。

这次，就ELSD进行谈话。

■使用ELSD？ELSD（Evaporative Light Scattering Detector）是柱洗脱液进行喷雾，流动相溶剂蒸发，留下的不挥发成分用光照射，检测它的散射光的检测器。

也就是说，与流动相在一起但未蒸发的物质基本上都可检测，因此称为「Universal Deteetor」。

实际上，这种ELSD，早在20多年前已经出现，但由于存在灵敏度和稳定性等难点，未能广泛普及。

近年来，特别是由于药品部门的需求提高，经过多次改良，性能也显著提高，再次受到注目。

■ELSD的原理图1表示的是岛津ELSD-LT的检测原理。

ELSD的检测过程分①柱洗脱液的喷雾，②流动相的蒸发和③不挥发成分散射光的检测三步。

柱洗脱液在喷雾器中用氮或空气进行喷雾。

然后进入称为漂移管的温度调节管中，流动相蒸发去除，只将不挥发成分送入检测器。

在检测器用光照射这些成分，它的散射光用光电倍增管进行检测。

图2是检测部的构造图。

■ELSD vs RID没有UV吸收，也都能检测……这句话，想起示差折光检测器（RID）。

RID是利用试样成分与流动相的折射率的差进行检测，而通常由于它们的折射率多少都有些差，基本上什么都能检测。

然而，如果检测原理完全不同的ELSD与RID相比较，会是怎样呢？[ELSD的优点]首先是灵敏度。

利用糖类分析进行比较时，ELSD高5-10倍S/N。

其次，使用RID时易产生烦恼的基线漂移。

由于RID是检测流动相与试样的极小的折射率差，流动相的折射率必须经常固定，处于稳定状态。

但是由于折射率受微小的温度变化和流量变化的影响，即使最新的装置在高灵敏度分析时也很难取得笔直的基线。

何况，梯度洗脱还有许多意想不到的情况。

而ELSD就没有这些烦恼的事情。

特别是适用于梯度洗脱，这点是没有UV吸收的多成分分析中强有力的检测手段。

主要品牌蒸发光散射检测器（ELSD）参数对比和设计原理蒸发光散射检测器(ELSD检测器)是一种通用型的色谱检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，蒸发光散射检测器ELSD工作时在辅助气体作用下，将流动相雾化，形成的液雾通过加热而蒸发，此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成微颗粒物，这些微颗粒物由辅助气体推动进入光束通道，造成光束散射。

通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量，从而测定样品纯度。

蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。

蒸发光散射检测器已被广泛应用于中药成分分析、碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。

蒸发光散射检测器技术的主要优点：·可检测挥发性低于流动相的任何样品；·流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；·广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰；·辅助载气提高了检测灵敏度，保持检测池内的清洁，避免污染；·高精度雾化和蒸发温度控制，保证高精度检测；·可与任何HPLC系统连接。

二、主要品牌蒸发光散射检测器ELSD基本结构依据ELSD的设计原理，ELSD的结构由三大部分组成：即雾化处理结构，蒸发结构和散射光检测结构。

第一步：雾化处理结构，流动相与辅助气混合，在辅助气的压力作用下从一小孔中喷出而形成浓雾，整个装置称为喷嘴或称雾化器。

流动相雾化后形成的液雾（雾珠）由于均匀性及一致性差，因此必须进行处理，否则影响其有效蒸发，此过程称为分流。

低温分流技术设计，实现了低温挥发，特别有利于半挥性化合物的测定及高水相流动相的应用。

第二步：蒸发结构，经过第一部处理的雾珠进一步流向经加热处理的区域，此时雾珠在热的作用下不断挥发形成气体，挥发性差的样品从流动相雾珠中析出而形成颗粒物。

这一装置称为蒸发区或漂移管。

漂移管也有两种设计方式，即螺线管式和直管式设计。

ELSD工作原理ELSD（Evaporative Light Scattering Detector）是一种无标记检测器，常用于液相色谱（HPLC）系统中测定不含紫外吸收或荧光的化合物。

ELSD工作原理基于样品分子的蒸发和散射光的检测，并通过电子学运算将散射光信号转化为检测响应。

ELSD的主要组成部分包括气体源、蒸发室、光学系统和检测器。

首先，氮气或惰性气体被送入系统并通过蒸发室。

蒸发室中设置了一个加热元件，用于将液相中的溶剂快速蒸发，只保留化合物分子。

当样品溶液进入蒸发室时，溶剂迅速挥发，将溶质分子悬浮在气氛中。

这些分子经过蒸发后会形成一束细小的微粒，其大小与分子的平均相对分子质量有关。

较大的分子通常会形成较大的微粒。

接下来，微粒通过光学系统。

光学系统包括灯源、散射角度选择器和检测器。

灯源发出一束特定波长的光，通常是红外或可见光。

光线通过散射角度选择器，该装置会选择一定的散射角度范围内的光，而排除其他角度的光。

散射角度取决于微粒的大小。

散射角度选择器使光线只与微粒发生散射，而其他物质（如溶剂）则不发生散射。

通过这种方式，可以消除背景信号，只检测到溶质微粒的散射光信号。

最后，散射的光线进入检测器。

检测器通常是光敏电阻器，测量散射光信号的强度。

这个信号以电流形式传递给电子学运算器。

电子学运算器会将检测信号转化为设定的比例信号，通常是以示数形式显示。

这个比例信号的大小与溶质微粒的浓度成正比。

可以通过调整散射角度选择器和检测器的增益来控制信号的灵敏度和范围。

ELSD的工作原理具有以下优点：1.无需标记：ELSD不需要分析物分子具有特殊的标记或荧光性质，适用于广泛的化合物分析。

2.线性响应：ELSD检测信号与样品浓度成线性关系，有助于准确测定溶质的浓度。

3.广泛检测范围：ELSD可以检测到大分子和小分子，具有广泛的应用范围。

4.低检测限：ELSD的检测限相对较低，使得它在分析灵敏度要求高的情况下很有用。

主要品牌蒸发光散射检测器（ELSD）参数对比和设计原理蒸发光散射检测器(ELSD检测器)是一种通用型的色谱检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，蒸发光散射检测器ELSD工作时在辅助气体作用下，将流动相雾化，形成的液雾通过加热而蒸发，此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成微颗粒物，这些微颗粒物由辅助气体推动进入光束通道，造成光束散射。

通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量，从而测定样品纯度。

蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。

蒸发光散射检测器已被广泛应用于中药成分分析、碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。

蒸发光散射检测器技术的主要优点：·可检测挥发性低于流动相的任何样品；·流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；·广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰；·辅助载气提高了检测灵敏度，保持检测池内的清洁，避免污染；·高精度雾化和蒸发温度控制，保证高精度检测；·可与任何HPLC系统连接。

二、主要品牌蒸发光散射检测器ELSD基本结构依据ELSD的设计原理，ELSD的结构由三大部分组成：即雾化处理结构，蒸发结构和散射光检测结构。

第一步：雾化处理结构，流动相与辅助气混合，在辅助气的压力作用下从一小孔中喷出而形成浓雾，整个装置称为喷嘴或称雾化器。

流动相雾化后形成的液雾（雾珠）由于均匀性及一致性差，因此必须进行处理，否则影响其有效蒸发，此过程称为分流。

低温分流技术设计，实现了低温挥发，特别有利于半挥性化合物的测定及高水相流动相的应用。

第二步：蒸发结构，经过第一部处理的雾珠进一步流向经加热处理的区域，此时雾珠在热的作用下不断挥发形成气体，挥发性差的样品从流动相雾珠中析出而形成颗粒物。

这一装置称为蒸发区或漂移管。

漂移管也有两种设计方式，即螺线管式和直管式设计。

elsd检测器工作原理ELS-D检测器工作原理。

ELS-D检测器是一种用于检测微小颗粒的仪器，它能够对颗粒的大小和浓度进行精确的分析。

ELS-D检测器的工作原理基于电动力学分散技术，通过对颗粒施加电场来实现颗粒的分散和检测。

下面将详细介绍ELS-D检测器的工作原理。

首先，样品中的颗粒会被注入到检测器中，然后通过一个细长的管道进入到测量室。

在测量室内，颗粒会受到一个电场的作用，这个电场是由两个电极产生的。

其中一个电极是带有高电压的，而另一个电极则是接地的。

由于颗粒带有电荷，它们会受到电场力的作用而向着相反方向运动，这样就实现了颗粒的分散。

随后，颗粒会经过一个光散射检测器，这个检测器能够测量颗粒散射光的强度。

当颗粒通过时，它们会散射出光线，而光散射检测器会根据散射光的强度来确定颗粒的大小。

通过测量颗粒的散射光强度，ELS-D检测器能够精确地分析颗粒的大小分布。

除了测量颗粒的大小外，ELS-D检测器还可以测量颗粒的浓度。

当颗粒通过测量室时，它们会在电场的作用下分散开来，不同大小的颗粒会有不同的运动速度。

ELS-D检测器可以根据颗粒的运动速度来确定颗粒的浓度，从而实现对颗粒浓度的精确测量。

总的来说，ELS-D检测器的工作原理是基于电动力学分散技术的。

通过施加电场来实现颗粒的分散，然后通过测量颗粒的散射光强度和运动速度来确定颗粒的大小和浓度。

这种工作原理使得ELS-D检测器能够对微小颗粒进行精确的分析，因此在颗粒分析领域有着广泛的应用前景。

总结一下，ELS-D检测器是一种基于电动力学分散技术的颗粒分析仪器，它能够对颗粒的大小和浓度进行精确的测量。

通过对颗粒施加电场来实现颗粒的分散，然后通过测量颗粒的散射光强度和运动速度来确定颗粒的大小和浓度。

ELS-D检测器的工作原理使得它在颗粒分析领域有着广泛的应用前景。

一、蒸发光散射检测器（ELSD）蒸发光散射检测器（Evaporative Light-scattering Detector）是通用型质量检测器，理论上所有的物质都能用ELSD检测出来，但对色谱柱、流动相、化合物本身等有一定的要求。

ELSD的基本原理可概括为3个过程：1、雾化：色谱柱流出液在载气的作用下在雾化室内转变成细小的液滴（气溶胶）。

2、蒸发：载气把液滴从雾化室运送到漂移管进行蒸发，在漂移管中，溶剂完全被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。

3、检测：溶质颗粒（固体）从漂移管出来后进入光检测池，穿过激光光束，即产生散射，再转变成为信号。

注意：由于溶剂在漂移管中完全蒸发，所以有很多气态的溶剂被载气带入检测器，但气体经过光束时，不会影响光的穿透，即不会影响光的散射，不会产生任何信号，所以ELSD的信号中没有溶剂峰。

ELSD目前有两种类型：1、让全部色谱柱流出物都进入直的漂移管，流动相在其中蒸发；2、让全部色谱柱流出物通过一个弯管，在此管中大的颗粒沉积下来流入废气管，其余的小颗粒进入螺旋状的蒸发管。

后一种类型的ELSD检测到的样品量其实比实际的要小，但液滴更均匀。

现在有可以在一台仪器上两种类型互变的ELSD，可根据需要选择。

ELSD的主要影响因素：1、载气：由于色谱柱流出液需要被雾化，且雾化后液滴的大小和均匀性是保证ELSD的灵敏度和重复性的重要因素，所以雾化气流的纯度和压力（流速）会影响检测器的信噪比。

所用的载气要求纯度高，不含颗粒物等非挥发性的物质，当被测物容易被氧化时，不能使用空气而要用氮气做载气；压力也要适中；另外，溶质颗粒在进入光检测池时被辅助载气所包封，避免溶质在检测池内的分散和沉淀在壁上，保证了检测池的清洁。

2、雾化温度：ELSD通过对气压和温度的精确控制，确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸发所需要的温度大大降低，维持了颗粒的均匀性，在不使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全，色谱图基线越好、信噪比越高，但温度太高会导致流动相沸腾，增加背景噪声，溶质部分气化，信号变小，降低信噪比。

美国格瑞斯Alltech 3300ELSD蒸发光散射检测器Alltech ELSD 3300 是Grace公司所生产的用于高效液相色谱系统的蒸发光散射检测器，能分析任何挥发性低于流动相的化合物。

ELSD 的分析应用领域包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。

ELSD 3300 提供当今最先进的蒸发光散射检测技术。

它能提供纳克级范围的灵敏度。

直接基于Windows的软件界面可提供一系列直观的菜单选?项来执行检测器的操作，包括用于简化方法开发过程的方法优化向导、多种语言和诊断测试及故障排除功能。

ELSD 3300还有紧凑、易于摆放的特征，能将其很容易的放置在有限的试验室空间。

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UPLC—ELSD与UPLC—PDA测定山银花中绿原酸的含量对比目的：比较两种检测方法优劣，为丰富山银花药材质量控制方法提供参考。

方法：采用ACQUITY UPLC BEH C18（21×100mm，17μm）色谱柱，流动相乙腈（A）-04%醋酸（B），梯度洗脱（0～2 min，7%A；2～23 min，7%A～28%A；23～10 min，28%A；10～105 min，28%A～7%A），梯度流速（0～2～23～26～28～4～43～45～105min，035～035～025～015～01～02～03～035～035ml/min），PDA（二极管阵列检测器）λ=330 nm；ELSD检测器，漂移管温度60℃，喷雾器48℃，增益值100，气体流速20psi，柱温50℃。

结果：PDA检测绿原酸在03045～15225μg（R2=09994）质量范围内线性关系良好，ELSD检测绿原酸在03045～15225μg（R2=09993）质量范围内线性关系良好。

结论：PDA 检测器检测时受噪音影响较小，基线较平稳，测得的数据比ELSD检测器更准确。

标签：超高效液相色谱法；绿原酸；蒸发光检测器；二极管阵列检测器山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand-Mazz.、红腺忍冬Lonicera confusa DC或黄褐毛忍冬Lonicera fulvoto-mentosa Hsu et SCCheng的干燥花蕾或带初开的花[1]。

灰毡毛忍冬主产湖南、重庆和贵州，红腺忍冬主产浙江、江西、福建、广西等地，黄褐毛忍冬主产贵州等地[2]。

其化学成分主要含有挥发油、黄酮、有机酸和三萜类[3]，具有清热解毒、凉散风热的功效[4]。

谷筱玉[5]用HPLC-UV-ELSD法、李红霞[6]用HPLC法测定山银花中绿原酸的含量，二者对山银花中绿原酸的含量测定用紫外检测器；卢凤来[7]用HPLC-ELSD 法、张璐[8]用HPLC-ELSD法测定山银花中绿原酸的含量，二者用ELSD检测器对山银花中的绿原酸含量进行测定。

ELSD检测器原理2.1蒸发光散射检测器原理ELSD原理适用所有待测物的挥发性低于流动相的分离，事实上，新一代ELSD检测器在操作上提供更低的温度，允许半挥发性被分析物的定量，即使检测器的灵敏度可能较低。

不挥发溶质，在分析柱的检测极限可以达到毫微克(ng)水平。

采用SFC，超临界流体（通常是二氧化碳）在周围环境大气压和温度条件大气中进行减压和膨胀，不像HPLC，流动相在减压作用下蒸发，形成气流，运载样品以微小颗粒喷雾的形式采用光散射检测。

应用于SFC的限制和其它形式的液相相同，也就是说，溶剂修饰物必须比被分析物具有更高的挥发性。

图1阐明蒸发光散射检测器依次发生的三个主要步骤：色谱洗脱液的雾化色谱流动相的蒸发对含有待测物的剩余颗粒的光散射每个步骤都具有明确的功能但也会改变，或者是受其它步骤的影响，所有市场上的蒸发光散射检测器都包含以上步骤，但在他们操作方法上会有所不同。

因为ELSD易受非线性响应的影响，所以这篇文章的一部分专门谈到检测器的响应和定量。

图12.1.1雾化这个步骤把大量体积的液体流动相转变成细小的液滴，从而溶剂更易于蒸发；较大的液滴，在蒸发步骤中需要更高的温度。

剩余溶质颗粒越大，散射光的强度就更大。

在所有商业上的ELSD，雾化都是用惰性载气通过文丘里管流动，采用载气同轴包装柱洗脱液，使之通过小孔。

液滴的大小和均匀性对于检测的灵敏度和重复性非常重要。

在一些型号的ELSD，雾化洗脱液立即进入加热的蒸发管，一般情况下是漂移管，在这里开始进行第二步骤。

但是，另一型号的则包含一个雾化室（图1）它被认为可以在三个方面增强检测器的操作。

可形成一个窄的液滴尺寸分布，最大的液滴通过在室的内壁冷凝，然后直接到废物出口或排出，在这里连续地虹吸冷凝液体。

所以，用于蒸发保留的液滴所需要的蒸发温度大大降低。

柱洗脱液直接通过蒸发管的比例变化为，以纯水溶液作为淋洗液的小于10%，以有机溶剂混合液作为正相色谱洗脱液的为90-100%。