分析灵敏度(检测限)-冯仁丰

医学实验室ISO 15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。

适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。

本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。

精密度通常用不精密度表示。

可以分别评价连续精密度（批内精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。

本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。

全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。

1、批内精密度（连续精密度）：方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。

计算批内精密度的CV值和SD值。

结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

（2）按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

2、天间精密度（中间精密度）：方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。

要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。

连续测试20天，每天检测1次。

在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。

测试完成后记录检测结果。

结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。

精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

医疗器械产品技术要求编号：葡萄糖检测试剂盒（电极法）1.产品型号/规格及其划分说明序号规格1500ml22×2000ml2.性能指标2.1外观试剂R溶液黄色、无颗粒、无杂质。

2.2净含量试剂盒各试剂装量应不小于标示值。

2.3分析灵敏度灵敏度（检测限）应≤3.31mmol/L。

2.4线性范围在(0～20)mmol/L范围内，其线性相关系数r≥0.990；浓度≥5.0mmol/L时，相对偏差≤20%；浓度＜5.0mmol/L时，绝对偏差≤1.0mmol/L。

2.5测量精密度2.5.1重复性用控制血清重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应≤6.0%。

2.5.2批间差批间差应≤10.0%。

2.6准确度用参考物质进行测试，其相对偏差应≤10.0%。

3.检验方法仪器基本要求a）恒温装置温度：37℃±1℃。

b）全自动生化分析仪。

测试方法按说明书规定，因不同机型使用试剂最终浓度相同。

在此推荐以本公司BECKMAN全自动生化分析仪进行测试。

3.1外观和性状目测检查，试剂R溶液性状应符合2.1的要求。

3.2净含量用通用量具进行测量，应符合2.2的要求。

3.3分析灵敏度用蒸馏水作为空白，测定20次，计算空白平均值和SD，按式（1）计算，结果应符合2.3的规定。

检测低限（LLD）=空白的平均值+2SD (1)注：参照冯仁丰《临床检验质量管理技术基础》58页分析灵敏度（检测限）的操作。

3.4线性范围用接近线性范围上限高浓度（活性）的样品和接近线性范围下限低浓度（活性）的样品，混合成5个稀释浓度（xi）。

分别测试试剂（盒），每个稀释浓度测试3次，分别求出检测结果的均值（yi）。

以稀释浓度（xi）为自变量，以测定结果均值（yi）为因变量求出线性回归方程。

计算线性回归的相关系数（r）。

稀释浓度（xi）代入线性回归方程，计算yi的估计值及yi与估计值的相对偏差或绝对偏差，应符合2.4的要求。

3.5测量精密度3.5.1重复性在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复测试至少10次（n≥10），分别计算测量值的平均值（x）和标准差（s），按公式（2）计算变异系数（CV），应符合2.5.1的要求。

日本积水公司血浆全程C-反应蛋白胶乳免疫比浊法最低检测限和功能灵敏度的确认谢正媛;陈涓涓;祖维磊;李奕晓;李欣;孙虹【摘要】目的对日本积水医疗株式会社全程CRP检测试剂盒的最低检测限和功能灵敏度进行确认.方法参照相关文献,用日本积水医疗株式会社全程C-反应蛋白检测试剂盒和雅培生化分析仪对空白样本和系列稀释的低浓度样本进行C-反应蛋白检测,计算吸光度均值、标准差和变异系数,确定该方法的检测低限和功能灵敏度.结果日本积水医疗株式会社全程C-反应蛋白检测试剂盒的最低检测限0.21 mg/L,功能灵敏度0.27 mg/L.结论各实验室进行hs-CRP检测时,应自行建立所用方法的最低检测限和功能灵敏度,以保证检测结果能够满足临床对心血管疾病危险评估的需要.【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2019(034)003【总页数】3页(P118-120)【关键词】C-反应蛋白;超敏C-反应蛋白;检测低限;功能灵敏度【作者】谢正媛;陈涓涓;祖维磊;李奕晓;李欣;孙虹【作者单位】云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021;云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021;云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021;云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021;云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021;云南省人口和计划生育科学技术研究所西部孕前优生重点实验室云南省生育调节与少数民族优生重点实验室,昆明 650021【正文语种】中文【中图分类】R446.112C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是一种由肝脏合成的蛋白质，因能与肺炎球菌细胞壁C多糖结合而得名，是目前最有价值的急性时相反应蛋白，被广泛应用于感染性疾病[1]、各类心血管疾病的诊断及监测[2-3]。

Westgard的方法确认汇集冯仁丰按照目前对临床实验室的管理要求，实验室在购入新的检测系统后，必须对该系统厂商提供的分析性能声明予以验证，确认临床实验室在自己的环境条件下，具有厂商声明的分析性能，确保检测结果符合要求。

但是，在具体如何实施验证时，应该如何设计和实施说法不一。

其实在接受实验室认可的审核时，经常有一句话：“写你所做的，做你所写的。

”这句话已经很清楚地告诉我们，只要实验室从患者的利益、临床的需求等出发，做我们认为符合要求的，应该是认可的精神。

因此，为了让大家能够了解更多的验证实验做法，我再次认真阅读Westgard的“基础方法确认（Basic Method Validation）”第三版（2008）一书。

从中摘录Westgard对方法验证的观点和做法，供大家参考。

还是这句话：一切主意由你自己拿，怎样的做法最符合你实验室的确认要求，请自行决定。

以下为该书的一些内容的摘录。

一、方法的确认（Method Validation）在最终CLIA法规公布前，许多实验室均回避了应确认它们方法性能的要求。

1992年2月28日的法规，对进行中度复杂检测项目检验的，使用了未经修改的FDA批准的分析方法和系统的实验室提供了例外，即不需对方法性能的确认。

这些情况接受了厂商的性能说明书，以替代实验室自己进行方法确认的工作。

直至2003年1月24日签发最后的CLIA最终法规后，现在所有非简易检测方法（中度和高度复杂方法）被要求在实验室内进行方法性能的验证。

到2008年1月1日起实验室必须符合方法性能验证要求，否则实验室将被传讯在这个问题上的缺陷。

1、方法验证和检验项目的分类由FDA批准的非简易（也可翻译为非豁免）检验项目。

今天在实验室进行操作的大多数项目均在此类型内，因此大多方法的验证工作应按照下列第§493.1253节：§493.1253节：建立和证实性能指标。

(b)(1)性能指标的证实。

医学实验室ISO 15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。

适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。

本方案从准确度、精密度、参考围、线性围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。

精密度通常用不精密度表示。

可以分别评价连续精密度（批精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。

本方案采用批和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。

全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。

1、批精密度（连续精密度）：方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。

计算批精密度的CV值和SD值。

结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

（2）按照国际推荐标准：批精密度应在CLIA88允许误差的1/4以，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

2、天间精密度（中间精密度）：方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。

要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。

连续测试20天，每天检测1次。

在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。

测试完成后记录检测结果。

结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。

精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

诊断学砰论与实践２００２年第１卷第４期超敏Ｃ反应蛋白测定在动脉粥样硬化疾病诊治中的应用鄢盛恺中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科（１００７３０）中图分类号：Ｒ５４１．４文献标识码：Ａ文章编号：１６７１—２８７０（２００２｝０４—０２６７—０３近来大量临床和实验研究资料表明，动脉粥样硬化（ａｔｈｅｍｓｃｌｅｍｓｉｓＡＳ）不是简单的动脉壁脂质沉彤｛｜生疾病，炎症反应枉ＡＳ的形成和发展过程中也起着关键作用，Ｃ一反应蛋白（Ｃ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＰ）是目前临床用于检测Ａｓ中炎症反应常用的标志物，是反映周身炎症的非特异性标志【ｌｌ。

近年采用一屿新的敏感方法十龟测血清超敏ＣＲＰ（ｈｉｇｈ—ｓ—ｎｓｉ—ｒｉｖｅＣＨＰ．ｈｓ—ＣＲＰ），发现其轻度升高与冠状动脉事件、中风及周围血管病相关．是一独立危险因素８卅。

ｈｓ—ＣＲＰ在冠心病等ＡＳ性疾病诊治中的应用价值已越来越受到临床重视。

ＣＲＰ的生物化学ＣＲＰ于１９３０午由ＴｉＵｅｔｔ和Ｆｒａｎｃｉｓ等首先发现，他们观察到在一些急性炎症病人的血清中存在一种能与肺炎链球菌的荚膜Ｃ多糖结合的蛋白质。

１９４１年Ａｂｅｒｎｅｔｈｙ等正式将其命名为ＣＲＰ。

其由５个相同的亚单位（２３ｘ１０３ｕ）以非共价键聚集形成的环状五聚体蛋白，分子量为１１５ｘ１０、｜．半寿期为１９ｈ，多由白细胞介素一６（ＩＬ－６）等炎性分子刺激肝脏细胞合成。

ＣＲＰ不能穿过胎盘，在正常人血清中其含量极徽。

ＣＲＰ能与多种物质如Ｃ－多糖、磷酸胆碱、纤维蛋白原及电小板激活因子等结合而发挥训别、调理和效应器功能等作用．钙离子和ＣＲＰ的结合是后者产生作用的前提１５一。

ＣＲＰ足急性时相反应蛋白之一，在感染后６—８ｈ开始升高．２４，－４８ｈ达到高峰。

比正常值高数百倍甚至上千倍，升高幅度与感染的程度呈正相关。

在疾病治愈后其含量急速下降，ｌ周内可恢复正常。

病毒感染时，ｃＲＰ不增高（除一些严重侵袭导致组织损伤的病毒如腺病毒、疱疹病毒等）。

医学实验室ISO15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性,特制定本方案.适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证,包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目.本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价.一、精密度<Precision>：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度,表示测定结果中随机误差大小程度的指标.精密度通常用不精密度表示.可以分别评价连续精密度<批内精密度>、重复性不精密度<中间精密度,包括批间、日间精密度等>和再现性精密度.本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价.全部实验过程使用同批号试剂和质控品,并且保证检测当日质控在控.1、批内精密度<连续精密度>：方法：在检测患者标本过程中,连续运行高低水平质控品各20次,记录检测结果.计算批内精密度的CV值和SD值.结果评价<1>厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD,精密度指数要求小于等于1,或者实测CV小于等于厂家要求的CV,两者符合其一即可.具体见《精密度评价》表格.<2>按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求.2、天间精密度<中间精密度>：方法：同样使用两个水平的质控品,若需复溶冻干质控品做实验,要注意选择产品的稳定性和瓶间差.要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法.连续测试20天,每天检测1次.在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号,是否需要重新定标则取决于实验室.测试完成后记录检测结果.结果评价<1>厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值,并计算精密度指数=验证SD/厂商SD.精密度指数要求小于等于1,或者实测CV小于等于厂家要求的CV,两者符合其一即可.具体见《精密度评价》表格.<2>按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/3以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求. 二、准确度准确度〕accuracy〔指检测结果与被测量物真值之间的接近程度.是分析测量范围、分析灵敏度以及生物参考区间评价的基础.准确度的评价方法很多,比如检测定值参考物质,同参考方法进行比对,同有溯源性的检测系统进行方法学比对,卫生部临检中心质评的汇报结果均可以作为评价准确性的方法之一.本方案采用测定定值标准物质的方法来评价各个检测项目的准确度.定值标准物质采用厂家定值标准品.方法：（1）试验期间保证机器状态正常,保证试验当日室内质控在控.（2）按厂家要求准备各个项目的新批号定标品<要与定标时使用的定标品批号不同>各一套,按照标准复溶.（3）记录该新批号定标品的定值.（4）在设备上检测各个定标品<多水平>的相关项目,每个水平重复2次,记录检测结果,将检测结果录入《准确度评价》表格. 结果评价：（1）厂家标准：按照各定标品各水平的定值和不确定度<厂家提供>,来确定准确度的偏倚范围.计算实测均值的各项目各水平定标品的偏倚,与偏倚范围相比较,来判断偏倚是否可以接受.详见《准确度评价》表,实测的均值如果落在该限度内,则为其准确度认为可被接受.（2）按照国际推荐标准：准确度偏倚应该在CLIA88允许误差的1/2以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求.三、参考范围验证参考 NCCLSC28一A2文件,本方案仅对厂家提供的或者实验室正在使用的各个项目的参考范围进行验证.方法：<1>选择20个能够代表实验室的健康总体的标本.<2>保证试验系统运行正常,依照标准操作程序检测标本.<3>运行该20份标本,记录结果,将结果填入《参考区间验证》表格. 结果评价如果20个参考个体中不超过2例的检测值在验证的参考限之外,厂商或提供参考区间的实验室报告的95%参考区间可以接受.如果3例以上超出界限,再选择20个参考个体进行验证,若少于或等于2个观测值超过原始参考值,则可接受,若还有3个超出参考限,需要重新检查各种条件,决定是否建立自己的参考区间.四、线性范围分析测量范围即定量检测项目的线性范围,是整个检测系统<包括仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序、检验人员等>对应于系列分析浓度的仪器最终输出的信号间是否呈恒定比例的性能,是一个很重要的仪器性能分析指标.本实验通过测定不同配比比例的高低值新鲜患者标本,以验证实测值和理论值的线性关系,来评估每个检测项目的线性范围.方法：（1）实验室人员必须十分熟悉仪器的操作、质量控制和定标方法,以及正确的收集样本.试验期间保证仪器状态良好下,质控在控.（2）全部实验数据尽可能在较短的时间内收集,如可能,单个分析试验最好在一天内做完.（3）用于验证线性范围的标本类型应与临床测试所用的标本类型相同或相类似,所有标本应不含厂家所标定的干扰因素<如溶血、黄疸、脂血等>.如果上述条件不可避免,则应在最后的报告中注明在评价实验中所用的标本处理方法或基质类型.注意：收集的高浓度标本应尽可能的接近线性范围高限.（4）按照《线性评价》表格要求配比标本.将H 和L 样品按: 5L 、4L+IH 、3L+2H 、2L十3H 、lL十4H 、5H 关系各自配制棍合,形成系列评价样品.（5）难以收集到低限样品,可收集高值样品,用相应稀释液作系列不同程度稀释,形成系列评价样品.（6）在《线性评价》表格记录检测结果.结果评价：将数据填入《线性评价》表格,以X表示各样品的预期值,以Y表示各样品的实测值,得出散点图.若所有实验点呈明显直线趋势,用直线回归对数据进行统计,得直线回归Y=bX+a,若r2>0.95,斜率b在1.00±0.03范围内,可直接判断测定方法在实验所涉及的浓度范围内成线性.五、用患者标本进行方法比对及偏倚评估实验室准备用一个新的检测系统或测定方法〕或新的试剂盒、新仪器进行病人标本测定前,应与原有的检测系统或者公认的参考方法-起检测一批病人标本,从测定结果间的差异了解新检测系统或方法引人后的偏倚.如果偏倚不大,或者偏倚量在允许误差范围内,说明两检测系统或方法对病人标本测定结果基本相符,新检测系统或方法替代原有检测系统或方法不会对临床引人明显偏倚,这样的实验称为方法学比较实验.在方法学比较中,常将新方法称为实验方法,与之比较的方法称为比较方法.试验方法：（1）各种仪器处于良好的工作状态,严格按SOP操作.（2）检验人员有足够的时间熟悉检测系统的各个环节,熟悉评价方案.（3）在整个实验中,保持实验方法和比较方法都处于完整的质量控制之下,始终对实验结果有校准措施.（4）实验时间至少做5天,时间长一些更好,可以客观反映实际情况. （5）至少做40份病人标本,多一点更好.（6）尽可能使50%的实验标本分析物的含量不在参考区间内,各个标本分析物含量越宽越好.（7）不要使用对任一方法有干扰的标本.（8）每份标本应有足够的量,以便使实验方法和比较方法都能做双份测定.例如,第l次序号为1 、2..3..4 、5..6 、7 、8 ,第2次序号为8 、7 、6 、5 ,, 4 、3 、2...1 .两方法都按此实验.（9）应在2个小时内两种方法对同批标本分别开始实验,最好使用当天采集的标本.（10）实验结束后,记录数据.保留原始数据.结果评价：（1）不采用已明确有人为误差的结果.（2）将所有无明显误差的实验结果记录下来.但是,若两种方法结果的各自差值大于任一方法的批内不精密度,应查对标本,并重新实验.若找不出原因,应保留数据备考.（3）整个实验一定要有内部质量控制,失控时结果必须重做.（4）对实验数据的初步筛查：①设比较方法测定结果为X 值,实验方法测定结果为Y 值.在《方法学比对》表格上录入检测数据,若有40个标本,则有 80个 X 和Y 的结果.②检查每一方法内现份测定值有无离群表现,先计算每一标本每一方法成对结果的差值和差值的均值.以4 倍的各方法差值的均值为判断限,各方法内标本的成对差值都应在限值内,说明双份测定结果符合要求.③若原数据仅40 例病人标本的结果,剔除的数据应另做实验补上.若有1 例以上需剔除,应检查原因是标本原因,其他数据仍可使用.无法找出原因,则保留使用所有数据.若最大差异超过临床允许误差,应从仪器、试剂、方法上寻找原因,停止继续实验.<5>在《方法学比对》表格上,以X均值、Y 均值和〕Y-X〔、X作图,通过这两种图了解线性关系,即有无明显离群点,是否呈恒定变异等情况.如果实验结果具良好线性关系,继续处理数据.<6>X 、Y 关系实验点有无离群表现先看图在无明显离群点.若无,可作以后的统计；若有,应对X 、Y 配对值作离群值计算.将每一个标本两个方法的前后两个测定值一一对应,求出第1 个X 与第1 个Y 的差值和第2 个X 与第2 个Y 的差值,并计算出所有标本总的平均差值,以4 倍的平均差值为判断限值.所有差值都不应超出限值.若有,为离群点,仅一点离群点,剔除.有一点以上离群点,需查原因,判断是否保留数据.若原因不清,不能随意剔除,全部保留作统计分析,或者用一批新标本重做评价.凡有剔除的,应另用标本补做.（7）标本内分析物含量分布是否适当的检验.相关系数r 常用来表示两个变量间互相关系密切的程度.在直线回归统计时,除所有实验点和回归线间的离散度会影响r值的大小外,实验点对应的分析物含量分布宽度也会明显影响r 值的大小.若实验点过于密集,尽管离散度不大,但r 值偏小.因此,可用r 检验X 取值范围是否适当.一般要求r 大于或等于0.975 〕或r2大于或等于0.95〔 ,认为X 范围是适合的.若r 小于0.975时,应再多做实验,扩大数据范围.<8>线性回归统计可用直线回归分析来估计斜率和截距.数据以回归式Y=bX十a,表示这些数据的直线趋.这是以X 方法为准,Y 方法与之配合的关系式.式中b 为斜率,a为截距.两方法理想状态的回归式应为Y=X,即b =1 ,a=0.根据临床使用要求,可在各个临床医学决定水平浓度 Xc 处,了解Y方法引人后相对于X方法的系统误差〕SE〔 , SE == | 〕b -1〔Xc +a |.<9>以美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求允许误差的1/2为判断依据,由方法学比较评估的系统误差〕SE〔不大于允许误差,认为系统误差在可接受水平内.备注：1、各个实验室应该根据自己的实际情况,建立性能验证的方法和标准.该方法适用于科室内所有生化设备的验证.2、上述试验方案可用于强生 Vitros 系列产品,仅供实验室参考.参考文献：1、临床检验质量管理技术,冯仁丰 ,**科学技术文献2、临床检验方法学评价 ,杨有业张秀明,人民卫生3、NCCLS, Method Comparison and Bias Estimation UsingPatient Samples;Approved Guideline—Second Edition 4、NCCLS,Evaluation of the Linearity ofQuantitativeMeasurement Procedures: AStatisticalApproach; Approved Guideline5、NCCLS,Evaluation of Precision Performance ofQuantitative Measurement Methods; ApprovedGuideline—Second Edition。

【冯仁丰】基质效应和互换性系列故事1：我开始认识基质和基质效应上世纪80年代，上海市临床检验中心（原上海市医学化验所）为了在室内开展质量控制，自行开发制备控制品。

为了防止血清内α脂蛋白在冷冻干燥过程中，因脂蛋白变性使血清在冻融后产生浑浊，在加工中必须首先以葡聚糖硫酸钠沉淀去除脂蛋白，方可使冻干后的血清制品复溶后没有沉淀，非常清晰。

然后，经透析等步骤后，重新加入不少低分子的物质，包括肌酐。

按照血清体积，计算需要添加的肌酐量后，将称量的肌酐直接倒入血清，搅拌后取样，以苦味酸方法检测回收量。

但是，每次对肌酐检测加入前后的样品，总是发现，最后得到的肌酐含量，仅是加入量的85%~90%。

是什么原因造成肌酐含量的下降？1993年，我在中美临床实验室交流第一次会议上，听到了Dr Fred Lasky的报告。

他介绍的就是基质和基质效应。

我顿时被报告吸引了。

原来在对血清内某个分析物检测时，在分析物周围的非分析物（即钙分析物的基质），对检测结果有显著影响。

被称之为“基质效应”。

我立刻就想到，原来的肌酐检测，应该是去除蛋白后再行检测的，这可以完全消除了蛋白对肌酐检测的影响。

这样，可以使用以水配制的肌酐标准，以苦味酸方法检测。

现在，进行血清的直接检测，明显地受到血清内蛋白的严重影响。

蛋白对肌酐检测的影响完全可以称之为基质效应。

因为，以肌酐水溶液为标准，进行血清不除蛋白的肌酐检测时，蛋白作为肌酐检测的基质，它们对肌酐检测结果的可靠性有着严重的影响。

因此，我在配制检测用的肌酐标准液时，不再以水配制，而是直接采用透析完成、即将加入各个添加分析物的血清。

这样在检测时，可以将未添加肌酐的血清为自身空白，将添加过肌酐的血清检测吸光度减去未添加肌酐血清的检测吸光度，即为添加肌酐参与苦味酸反应的吸光度。

按照这样的做法，加入肌酐的回收率为100%。

这是我第一次从基质和基质效应上得到的好处。

我写了文章基质和基质效应。

但是，当时根本没有考虑到原始混合血清与加工处理过的血清间有什么差异。