果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾液腺细胞染色体的标本制备和观察实验报告
摘要:在本实验中取大果蝇(Drosophila virilis)的三龄幼虫的唾液腺细胞进行标本制备,观察其染色体特征并进行辨认。大果蝇属双翅目,幼虫期唾腺细胞很大,染色体个体大、具横纹。
关键词:大果蝇 巨大染色体 唾液腺细胞
材料方法
动物材料为大果蝇三龄幼虫,试剂包括0.7%的生理盐水、改良品红试剂、1mol/L盐酸。进行实验时先解剖幼虫取出唾液腺置于生理盐水中,解离3min,染色压片后用400倍显微镜进行观察。
结果
大果蝇三龄幼虫唾液腺细胞染色体形态见图一。其型号巨大,有横纹和明显的染色中心。
图1 大果蝇(Drosophila virilis)唾液腺细胞染色体
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一项相对简单的实验,能帮助我们深入地分析生物体的遗传信息。它有助于研究基因的定位,可以直接检测果蝇多种遗传现象,如基因重组、遗传连锁等。同时,它也可以用于对果蝇染色体进行染色,以指导染色体的解剖研究。本文将对果蝇唾腺染色体的制备及观察实验进行综述,并简要说明该实验的主要操作步骤。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验的前期准备较松散,需要准备的主要物品有果蝇、固定液或甲醛、盐酸和对果蝇唾腺染色体染色所需要的染色剂。在准备过程中一定要保证果蝇是新鲜及易于收集的,以确保实验结果的准确性。
接下来是正式操作步骤:
(1)采集已经准备好的果蝇,在蝇斗背部用盐酸麻醉后放置在显微镜上;
(2)选择感兴趣的唾腺,将其夹紧,用毛笔蘸取染色剂,缓慢地涂抹到唾腺上;
(3)将果蝇用固定液或甲醛固定后放入、在水夹中放置,让蝇子充分固定;
(4)把固定好的果蝇放入蒸气器中,以上水蒸气状态来加强染色剂的渗入,再以滴管仔细煮沸果蝇,使其外皮脱落;
(5)放入固定液或甲醛中,然后仔细观察标本,观察其染色情况;
(6)最终,用酒精把标本浸泡清除染色剂,待它恢复原色后,将标本用45%乙醇中保存,打包发成图片,保持它的完整性。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一种非常有用的实验,能够帮助我们更好地理解果蝇的染色体,并且可以应用到许多方面,如分子进化学研究等等。但是,该实验也有许多潜在风险,如暴露在有毒药物、辐射等环境中可能会对果蝇造成不良影响,所以在实验过程中非常注意安全措施,严格控制暴露时间和剂量。
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察
一.实验目的
通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法,了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二.实验原理
唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体,它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。由于其染色体DNA经过多次复制(可达210~215次),但并未发生细胞核分裂,同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会,重复复制后的染色体聚集在一起,所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多,又称多线染色体。
三.实验用品
1.实验材料:普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水
2.实验器材和试剂:双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI
四.实验方法和步骤
1. 幼虫的培养
为了在解剖镜下便于操作,使用的幼虫应发育充分而且个体较大。在实验中,人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养,因此在培养瓶内放置的亲本不易过多,否则将产生过多的卵而造成养分不足。
B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些,一般可控制在16~20℃范围内,低温下生长的果蝇个体较大。果蝇属于完全变态的昆虫,成虫交尾后将卵产在培养基内。在适宜的温度下,卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后,三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹,为了能够在实验时获得较多的幼虫,可以分批将亲本放入培养瓶。实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2. 剖取唾腺
用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上,并滴加1滴生理盐水。将载片放在载物台上,用解剖镜进行观察。首先将幼虫的头尾分清,果蝇的头部有一黑点(口器),头部不断作伸缩状。解剖时,双手各持一个解剖针,一支针先压在幼虫身体的前1/3处,另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动,即可将头部与身体拉开,仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。果蝇的唾腺是单层细胞构成的,因此在解剖镜下可以看出其细胞界限。如果唾腺没有被拉出来,可用解剖针轻压虫体的断开处,把唾腺挤压出来。操作时解剖针一定要轻轻拨动,切不可将肠管、神经管等全部截断从而影响视线。由于果蝇唾腺几乎透明,但是其上连带的脂肪体为乳白色,因此还是容易辨认出来的。
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察
摘要:多线染色体广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。为遗传学,尤其是果蝇研究带来不少便利。不论在经典细胞遗传学时代,还是当今的基因组时代,多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。本次实验中,我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。分辨了果蝇的不同染色体,练习了果蝇唾腺染色体标本的制备与观察。
染色体研究通常面临两个困难:一是染色体很小;一是初级少数动植物,如玉米祖先期的染色体上具有染色体里这样的结构可以作为识别或定位的标志外,大多数生物的染色体都没有标志。而作为遗传学研究的模式生物黑腹果蝇,有丝分裂中期的染色体格外小。多线染色体就是在这样的背景下被重新发现的。
多线染色体最早在要闻幼虫的唾液腺中发现。广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。这些戏胞发育到一定阶段后,停止在间期,,但紧密配对的同源染色体不断复制。,而复制后产生的染色体彼此不分开而形成。少数植物中也发现有多线染色体,但没有昆虫体内的大。
多线染色体为遗传学,尤其是果蝇研究带来不少便利。一个重要进展是Pardue等1907建立了双翅目昆虫多县染色体的原位杂交方法。有了这种方发,确定一条RNA或DNA序列在染色体上的位置就变得非常简单。不论在经典细胞遗传学时代,还是当今的基因组时代,多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。
在本次实验中,我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。
1.实验步骤
1.1试验材料
显微镜,双筒体式显微镜,解剖针两只,小毛笔一只,眼科镊,载玻片,盖玻片,滤纸片,香柏油,镜头纸,果蝇三龄幼虫,卡宝品红染液,盐酸1mol/L,蒸馏水,生理盐水。
1.2试验方法
1.2.1三龄幼虫的饲养
培养基富含营养;虫口密度要小;低温培养。
1.2.2剥去唾液腺
选取果蝇三龄幼虫放在载片上,加一滴0.7%生理盐求,幼虫以体型大、虫龄长的为好。将载片置双筒解剖镜下。解剖针不宜过于尖锐,避免用力时刺破头部,拉不出唾腺,反而不便第二次拉取了。左手持解剖针按在虫体后1/3处,右手持解剖针按在头部黑点状口器的后侧,下按不宜太重,主要是平稳往外用力拉,撕下头部并带出唾腺,它是位于消化道前端两侧的两个半透明的长囊状腺体。如唾腺被拉断或未被拉出,可用解剖针在虫体前部1/3处向前轻压出来。唾腺是一对透明的棒状腺体,外有白色的脂肪组织(不透明)。去除幼虫其它组织部分,并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。