课题1 菊花的组织培养

2、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
实验操作
制备MS固 体培养基
（哪 6步？） 各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）
素？）
1、配制各种母液（大量元素、微量元素 2、配制培养基（菊花组培是否添加植物激 3、灭菌（哪种灭菌方法？） 外植体消毒 接种
流水冲洗—无菌纸吸干—70%酒精—无 菌水冲洗—无菌纸吸干—0.1%氯化汞培 —无菌水冲洗至少三次之上 注意接种时的各种无菌操作。 直接移栽到土壤中吗？ （流水是为消毒吗？能消毒的是什么？ 将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？ 无菌水冲洗是为了干啥？） 最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？
2、植物组织培养的原理是什么？
A
。
概念：细胞的全能性指具有某种生物全部遗传信
息的任何一个已经分化的细胞都是有发育成完整 生物个体的潜能。
一、基础知识
(一)植物组织培养的过程 1、观察下图，写出植物组织培养的过程 2、图中标出愈伤组织，脱分化、再分化 3、这种生殖方式属于 无性 生殖
脱 分 化
再 分 化
基本过程:
离体的植物器官、组织 或细胞(外植体） 脱分化（又叫去分化） 愈伤组织 再分化 根或芽等器官 植物体
影响因素： 材料性质、营养物质、 调节物质、环境条件
练习
1.植物组织培养过程中的脱分化是指（ c） A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生 愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 2.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是（B ） A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂 B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用 C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料 D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质

2009年上学期
C、结果分析与评价 1、对接种操作中污染情况的分析
接种3～4 d后，在接种操作中被杂菌污染的 培养物会表现出被污染的现象。适时统计污 染率，分析接种操作是否符合无菌要求。
正常苗
污染苗
2、是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织， 记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培养 基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和 时间。
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高 压蒸汽灭菌 （二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉， 用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗 20min左右。
② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入 体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续 6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清 洗。 ③消毒液处理
（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花。
操作的？ ①培养基的灭菌 （高压蒸汽灭菌） ②外植体的消毒 （酒精、氯化汞） ③接种的无菌操作 （酒精、酒精灯——灼烧） ④无菌箱中的培养； ⑤移栽到消过毒的环境中生 存一段时间。
思 考 在整个过程中，是如何来实现无菌
思 考 （P33）
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配 方有哪些明显的不同？
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持 细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要 是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受 到一定影响后所产生的特殊营养需求。
同一植物材料的年龄、保存时间的长短 会影响实验结果
菊花的组织 培养一般选 择：未开花 植株的茎上 部新萌生的 侧枝。

专题三课题1 菊花的组织培养课题目标1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力1．基础知识知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题：(1)具有某种生物全套的任何一个活细胞，都具有发育成的能力，即每个生物细胞都具有。

但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在条件下，通过基因的，构成不同组织和器官。

(2)植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的 ,保持亲本的遗传性状；培育幼苗,提高作物的产量；可以实现 ,不受季节限制。

活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：(3)细胞分化：个体发育中细胞在上出现差异的过程。

〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？(4)愈伤组织是通过形成的，其细胞排列，高度，呈状态的细胞。

(5)植物组织培养的过程可简单表示为：(6)材料：植物的种类、材料的和等都会影响实验结果。

菊花组织培养一般选择作材料。

(7)营养：常用的培养基是培养基，其中含有的大量元素是，微量元素是，有机物是等。

(8)激素：在培养基中需要添加和等植物激素，其、、等都影响结果。

(9)环境条件：、、光等环境条件。

菊花组培所需PH 为，温度为℃，光照条件为每日用日光灯照射。

2．实验设计活动1：阅读“制备MS固体培养基”，回答下列问题：(1)配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。

使用时根据母液的，计算用量，并加稀释。

(2)配制培养基：应加入的物质有琼脂、、、、和植物激素的母液，并用定容到毫升。

在菊花组织培养中，可以不添加，原因是菊花茎段组织培养比较容易。

(3)灭菌：采取的灭菌方法是。

活动2：阅读“外植体消毒”，填写下列流程图：［思考2］在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？活动3：阅读“接种、培养、移栽和栽培”，填写：(1)前期准备：用消毒工作台，点燃酒精灯。

课堂小结：
菊 花 的 组 织 培 养 基本原理 基本过程 细胞的全能性 脱分化 愈伤组织 再分化
影响因素
操作流程
材料性质、营养物质、调节物质、环境条件
配制MS固体培养基 外植体的消毒
栽培
移栽
培养
接种
课堂练习：
1、生长素比细胞分裂素比值低时 , 则 ( B
A. B. C. D. 有利于根的分化 , 抑制芽的形成 有利于芽的分化 , 抑制根的形成 促进愈伤组织形成 促进根和芽的分化
四、课题延伸
1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进 行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季
练习：
1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的 消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩 枝？
1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物 组织培养的培养基同样适合于某些微生物的 生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前 功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养 的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况 好，容易诱导脱分化和再分化。
（1）培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
（2）外植体的消毒（酒精、氯化汞）
（3）接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧） （4）无菌箱中的培养；
（5）移栽到消过毒的环境中生存一 段时间。
三、结果分析与评价
1、接种3～4d后，统计污染率，分析外植体被污染的原因。 2、观察是否培养出愈伤组织，记录多长时间长出愈伤组 织。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的 比例和时间。 3、做好统计和对照，填好结果记录表，讨论分析实验结 果。 4、统计移栽的成活率，分析生根苗的移栽是否合格？