液质使用操作规程

液质操作规程一、开关机A开机（需要使用前一天）1、打开空气发生器2、打开氮气发生器3、打开质谱4、打开电脑5、按次序打开A泵、B泵、柱温箱B关机（一周以上时间不用时，或停电时）1、vent按住5s2、等30min关主机电源3、按次序关柱温箱、B泵、A泵二、检查仪器状态1、空气发生器压力0.6-0.8大气压。

2、氮气发生器3个指针正常3、空气罐排水（每周）4、液质无报警状态5、液相压力稳定、质谱真空状态约0.6~0.8大气压三、配置流动相1、超纯水达到国标二级水标准，每天更换。

A管路。

2、有机相每月换一次，每次不要配太多。

B管路。

3、清洗液为1:1甲醇水。

R0、R1、R2管路放在清洗液内。

4、使用前超声5分钟或过滤抽真空。

5、A泵B泵内有洗液，用10%异丙醇，稀释液为超纯水。

每日更换。

6、更换流动相及每天使用前必须purge。

四、配置标准品1、最少吸取100ul进行稀释。

2、一次稀释倍数不超过100倍。

3、根据化合物特性选择稀释液。

4、做标准曲线，1、2、5、10、20、50ppb的曲线（建议配方）5、在前处理前加内标物100ppb，每个样品加50ul。

（建议配方）五、液相部分1、建立液相方法build Acquisition Method2、安装色谱柱，详见色谱柱使用规范六、质谱部分1、建立质谱方法build Acquisition Method2、调谐manual tuning（质量轴校正、offset电压校正）3、优化化合物manual tuning（母离子、子离子、最优DP、CE电压）七、上样build acquisition batch1、要加入空白对照2、要加入清洗流程八、结果计算MULTIQUANT软件九、出报告create report十、使用完成维护机器1、每次用完清洗色谱柱，先用高比例水相冲，再用高比例有机相冲，最后装在100%乙腈中。

建议整个过程2小时以上。

水相不能是含0.1%的甲酸。

第一部分开关机A A、开机1打开UPS电源，打开氮气发生器（气瓶），确认Curtain gas的输入压力为0.4MPa, gas1/2为0.7MPa，exhuast为0.4MPa。

2. 打开机械泵电源开关（5500系列直接打开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵）3. 等机械泵工作至少30min5. 打开质谱主机电源开关6. 过夜抽真空B B、关机1•停止输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线（一般质谱主机Sta ndby后液相系统也自动待机，输液泵自动关停，但建议操作人员再次确认，必须保证没有任何液体再泵入质谱）2•使仪器待机，并灭活配置2•关闭质谱仪主机电源开关（5500系列只需按下电源开关旁的VENT按键排放真空）3•机械泵继续工作至少30min4•关闭机械泵上的电源开关（5500系列会自动关停机械泵，待机械泵停止后即可关闭5500系列主机上的电源开关）5•关闭气体发生器或气瓶第二部分调谐1、PPG就是正离子校正液，PPG3000负离子调谐液，本台仪器只用两瓶校正液，正离子一瓶，负离子一瓶。

洗液一瓶50%的甲醇水。

调谐前先用洗液洗针两次。

吸校正液的时候慢慢吸，避免吸入气泡，吸好以后将针泵卡住。

再将高度调到5，将管路重新连接。

不再连接六通阀，由质谱直接进样，且将针泵的速度调到10卩L/m。

2、调谐液弄好后在仪器面板工具栏上：TOO H项目一创建项目。

此项目为一个文件夹，文件夹里面包括所有此次采集的信息，方法、序列等，且所有采集的项目都固定在一个文件夹下面：D:/A nalyst Data/Project。

新建项目的时候，弹出窗口中有个Add All，可以创建孙文件夹。

3、联机：软件打开后在左上方硬件配置（单机选中，双击打开）-只需选中仪器MB active profile。

图标变为绿色，表示联机成功。

调谐只需要选中质谱。

仪器的实时状态可以点击右下方的图标，质谱和液相都是单独观察，质谱要注意真空度，为0.5.4、调谐—手动调谐—项目（文件夹）选中下拉菜单中的Installation 20161102（为系统默认的调谐文件夹），先Q仔start syring pump （打开针泵）—start （质谱），开始采集以后观察基线是否平衡，若等两分钟还未平衡好，则手动将针泵往上抬。

液质联用操作规程完整
一、安全
1、确保正确连接液质联仪表电源，避免接触潮湿、高温环境；
2、操作前，请将样品材料与仪表一起放置在室内温度稳定的实验室中，以避免因温湿度异常导致的测量结果不精确；
3、使用时请确保所有有接触仪表的手都清洁，不要碰触仪器面板上的按钮；
4、确保仪表工作室内正常，避免尘埃和液体渗入仪表内；
二、准备工作
1、检查仪表电源电压和电源线，确保电源正常，如满足电源正常，将仪表正确接入电源；
2、检查样品的电导率是否符合要求，如果不符合要求，请使用试剂校准仪表；
3、将可调电位器旋转至“进样”位置，确保样品流通，样品槽内有样品，并完全填满样品槽；
4、可以调节温度设置以满足实验要求；
三、操作
1、确认样品的电导率符合要求，点击“测量”按钮；
2、将仪表开机，等待样品流过可调电位器；
3、点击“设定”按钮，并调节温度设置以满足实验要求；
4、点击“测量”按钮，开始测量；
5、测量完成后，可以将测量结果记录在仪器上，供后续分析参考；
四、收尾工作
1、根据实验要求，调节可调电位器，将样品流出样品槽；。

液质联用仪安全操作及保养规程液质联用仪（LC-MS）是一种高精度的仪器，能够用于分析样品中的化合物。

为了保证操作人员的人身安全、先进设备的正常运行，以及获得准确、可靠的分析数据，必须遵循相关的安全操作及保养规程。

本篇文档将详细介绍液质联用仪的安全操作与保养。

一、液质联用仪的安全操作1.1 仪器安装液质联用仪安装之前，需要确保安装环境具备以下条件：•清洁：安装区域表面应当清洁，以保证样品的净度；•干燥：湿度必须控制在30%以下；•空气流通：确保仪器周围有良好的空气流通，以保证仪器正常运行；•电源稳定：仪器必须连接到稳定的电源上，以保证仪器的正常运作；•温度稳定：仪器的温度应控制在15℃~35℃以内。

1.2 样品准备在样品进样之前，需要注意以下事项：•样品必须清洁干燥，以免污染仪器系统；•样品必须标注清楚，以防止因信息不清晰导致分析出错；1.3 仪器的操作在仪器的操作过程中，需要严格遵守以下安全操作规程：（1）对于新手操作员，必须接受正规培训，掌握液质联用仪的操作规程；（2）操作员必须穿戴实验室安全防护用品，避免身体受到有机化学品的腐蚀或其他危害；（3）操作员应在仪器泵、零部件等开启空间附近贴上相关的注意事项标识，以避免因操作不规范破坏仪器零部件；（4）分析后样品的废液必须安全妥善处理，以免对环境产生污染。

二、液质联用仪的保养2.1 仪器维护积极的仪器维护能够延长仪器使用寿命，保障分析结果的准确性和可靠性。

为此，应该采取以下介绍的维护措施：（1）按照生产厂家的指示或建议，及时清洁各类零部件和工作表面；（2）防止离子泵出现气氛污染，减小离子泵的压强，延长离子泵的寿命；（3）按照正确的方式进行气象传感器、液质泵等的维护，以保证其正常性能，并及时更换。

2.2 仪器存储在存储仪器的过程中，应遵守以下规则：（1）仪器必须存放在干净、干燥和通风的环境中，以确保其安全运作。

（2）应尽量避免仪器受到震动、投掷、或者运输中的冷震、热冲击，超范围使用等损害。

精心整理第一部分开关机AA、开机1.打开UPS电源，打开氮气发生器（气瓶），确认Curtaingas的输入压力为0.4MPa，gas1/2为0.7MPa，exhuast为0.4MPa。

2.打开机械泵电源开关（5500系列直接打开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵）主机有“扑”声音，表明进入调谐状态。

此时右下角质谱状态显示绿色。

双击ManualTuning，进入质谱参数设置及运行窗口。

4.使用1mL玻璃进样针吸取适当标准溶液，置于进样针座上。

点击MSMethod下拉菜单，选择SyringePumpMethod，设定针泵流速FlowRate为10μL/min。

5.点击StartSyringePump按钮开针泵进样。

6.返回MSMethod，选择扫描模式ScanType为Q1MS，设定扫描速度ScanRate为10Da/s，设定扫描范围Start——Stop设定为50——化合物分子量。

DP预输入60。

7.点击start开始采集数据。

运行稳定后，注意观察是否有预期的母离子出现，并控制其响应值在约E4以下。

点击stop，选择第一个峰（后面是同位素峰）的平稳段，双击，选中母离子。

点击右键，选择DeletePane。

8.设定Scantype为产物离子扫描ProductIon（Ms2），扫描速度200Da/s，选择扫描正/负离子，输入母离子（productof），设定扫描范围start——stop为50——MW+20，覆盖可能的子离子质量范围，点击compoud标签，设定（DP）60，（CE）5。

9.点击start，开始采集数据，注意观察是否有预期的母离子出现。

手动调节CE，以5eV为步长，10.选择（ms）为50，11.点击每个，调[文件名一、1、(液相2、右边显示对应的参数，确认synchronizationmode选择LCSync,表示液质同步。

3、设置MRM参数：点击方法模板左侧的MRM,在模板右侧ScanType下选择MRM；在polarity 下选择化合物极性：Positive(正离子)、Negative（负离子）；Duration为15min(与液相分离相同的时间)；表格中Q1：母离子分子量，Q3(Da)：子离子分子量，Time（msec）：50，ID栏：化合物名称（离子对名称后空格加1为定量，空格加2为定性），在表格中右键分别单击DP、CE，点击工具栏的OPEN打开之前优化的方法参数，调出DP,CE值，选中整行，Ctrl+c(复制)参数，关闭窗口，再Ctrl+v(粘贴)参数）；最后点击Editparameter设置离子源参数：Source/Gas项用以下推荐值：CUR35，IS:5500(正离子)或-4500（负离子），TEM600，GS160，GS270，点击OK。

液相色谱液质简易操作规程一、实验目的液相色谱是一种广泛应用于化学分析领域的分离和检测技术，本实验旨在通过液相色谱液质的简易操作规程，熟悉和掌握液相色谱仪的基本操作方法，以及液相色谱分析的操作流程和技巧。

二、实验仪器和试剂1.实验仪器：液相色谱仪、注射器、样品进样器、柱温箱、检测器等。

2.实验试剂：样品溶液、色谱级溶剂、标准品溶液等。

三、实验步骤1.准备工作（1）检查液相色谱仪的电源、气源以及其他连接装置，确保正常工作。

（2）检查注射器、样品进样器、柱温箱等装置是否安装正确，是否连通。

（3）准备好实验所需的试剂和标准品溶液，根据需求调配好溶液浓度和pH值。

2.调试液相色谱仪（1）打开液相色谱仪电源，启动液相色谱仪，等待系统初始化结束。

（2）调试检测器灵敏度和零点，根据所选择的检测器类型和检测波长进行设置。

（3）设置进样器操作参数，包括进样量、进样速度等，根据需要进行调整。

（4）根据样品特性，选择合适的柱和流动相，设置柱温箱的温度。

3.样品进样（1）将样品溶液加入注射器或样品进样器中，注意避免气泡的产生。

（2）调节进样器的操作参数，如进样量、进样速度等。

（3）将进样器连接到液相色谱仪的样品进口处。

4.液相色谱分析（1）启动液相色谱仪，开始分析。

（2）设置流动相的流速和梯度条件，根据柱型和样品特性进行设置。

（3）记录实验过程中的所需数据，如进样时间、流程时间、流速等。

（4）观察检测器信号的变化，记录检测结果。

5.数据处理（1）根据实验需求，选择合适的数据处理方法，如峰面积计算、峰高计算等。

（2）对实验数据进行统计分析，绘制实验结果的曲线或图表。

（3）比对样品的检测结果和标准品的检测结果，判断样品中目标物质的含量或浓度。

四、实验注意事项1.操作前应仔细阅读液相色谱仪的操作手册，并按照规程操作。

2.注意检查液相色谱仪的连接装置是否牢固，避免发生泄漏或松动。

3.在加样时，应注意避免产生气泡，避免对实验结果的影响。

液相色谱-质谱联用仪操作规程(Waters Alliance 2695/Quattro Micro)一、准备流动相：配制所需流动相，并且放入超声波中脱气10分钟以上。

标准或样品：按要求对样品进行前处理，配制好标准。

检查：检查氮气压力，气源压力不低于6-7bar(相当于0.6-0.7Mpa)。

检查质谱后机械泵中的泵油不得低于最低线。

检查电源是否连接好。

二、开机打开液相色谱（仪器左侧右上角）和质谱电源（仪器底部）开关。

打开计算机。

仪器完成自检后，双击计算机屏幕上MassLynx图标。

液相部分1. 换上所需流动相：管路A：可换为无机盐溶液或水；管路B：请保持为甲醇；管路C：可换为乙腈；管路D：其他有机溶剂。

2. 控制面板上显示Idle，进入面板控制模式。

按Menu/Status键，进入主显示屏“Status（1）”界面。

3.通过方向键，把主显示屏上的亮白条移到“Degasser”的“Mode”“Off”按“Enter”键，选为“On”，再按“Enter”，打开脱气开关。

4.把亮白条移到“Composition”，设定所用其中一个流动相（例如A）的比例为100％，“Enter”回车后，再按右下角“Direct Functions”键，出现另一对话框，选择“Wet P rime”，设定流速和时间（5mL/min，3min即可），按“O K”键，排出管路气泡。

结束后，在“Composition”中移动亮白条，依次设定所用的其他流动相B、C、D为100％，重复上述操作。

5. 同样，在主显示屏上设定流动相A百分比为100％，进入“Direct Functions”对话框，选择“Purge Injector”，按“Ok”。

之后依次设定流动相B、C、D，重复此操作。

6. 设定流动相比例：把亮白条移到“Composition”，依次设定所用流动相A、B、C、D的百分比，按“Enter”。

7.将柱温箱打开，换上所用色谱柱（注意色谱柱流向），将二极管阵列检测器（PDA）的“out”出口接废液瓶；如未使用PDA，可直接将柱子流出端的PEEK管接废液瓶。

第一部分开关机A A 、开机1.打开UPS电源，打开氮气发生器（气瓶），确认Curtain gas的输入压力为0.4MPa，gas1/2为0.7MPa，exhuast为0.4MPa。

2.打开机械泵电源开关（5500系列直接打开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵）3.等机械泵工作至少30min5.打开质谱主机电源开关6.过夜抽真空B B 、关机1.停止输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线（一般质谱主机Standby后液相系统也自动待机，输液泵自动关停，但建议操作人员再次确认，必须保证没有任何液体再泵入质谱）2.使仪器待机，并灭活配置2.关闭质谱仪主机电源开关（5500系列只需按下电源开关旁的VENT按键排放真空）3.机械泵继续工作至少30min4.关闭机械泵上的电源开关（5500系列会自动关停机械泵，待机械泵停止后即可关闭5500系列主机上的电源开关）5.关闭气体发生器或气瓶第二部分调谐1、PPG就是正离子校正液，PPG3000负离子调谐液，本台仪器只用两瓶校正液，正离子一瓶，负离子一瓶。

洗液一瓶50%的甲醇水。

调谐前先用洗液洗针两次。

吸校正液的时候慢慢吸，避免吸入气泡，吸好以后将针泵卡住。

再将高度调到5，将管路重新连接。

不再连接六通阀，由质谱直接进样，且将针泵的速度调到10μL/ml。

2、调谐液弄好后在仪器面板工具栏上：TOOl→项目→创建项目。

此项目为一个文件夹，文件夹里面包括所有此次采集的信息，方法、序列等，且所有采集的项目都固定在一个文件夹下面：D:/Analyst Data/Project。

新建项目的时候，弹出窗口中有个Add All，可以创建文件夹。

3、联机：软件打开后在左上方硬件配置（单机选中，双击打开）→只需选中仪器MS→active profile。

图标变为绿色，表示联机成功。

调谐只需要选中质谱。

仪器的实时状态可以点击右下方的图标，质谱和液相都是单独观察，质谱要注意真空度，为0.5.4、调谐→手动调谐→项目（文件夹）选中下拉菜单中的Installation 20161102（为系统默认的调谐文件夹），先Q1→start syring pump（打开针泵）→start （质谱），开始采集以后观察基线是否平衡，若等两分钟还未平衡好，则手动将针泵往上抬。

第一部分开关机A A 、开机1.打开UPS电源，打开氮气发生器（气瓶），确认Curtain gas的输入压力为，gas1/2为，exhuast为。

2.打开机械泵电源开关（5500系列直接打开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵）3.等机械泵工作至少30min5.打开质谱主机电源开关6.过夜抽真空B B 、关机1.停止输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线（一般质谱主机Standby后液相系统也自动待机，输液泵自动关停，但建议操作人员再次确认，必须保证没有任何液体再泵入质谱）2.使仪器待机，并灭活配置2.关闭质谱仪主机电源开关（5500系列只需按下电源开关旁的VENT按键排放真空）3.机械泵继续工作至少30min4.关闭机械泵上的电源开关（5500系列会自动关停机械泵，待机械泵停止后即可关闭5500系列主机上的电源开关）5.关闭气体发生器或气瓶第二部分调谐1、PPG就是正离子校正液，PPG3000负离子调谐液，本台仪器只用两瓶校正液，正离子一瓶，负离子一瓶。

洗液一瓶50%的甲醇水。

调谐前先用洗液洗针两次。

吸校正液的时候慢慢吸，避免吸入气泡，吸好以后将针泵卡住。

再将高度调到5，将管路重新连接。

不再连接六通阀，由质谱直接进样，且将针泵的速度调到10μL/ml。

2、调谐液弄好后在仪器面板工具栏上：TOOl→项目→创建项目。

此项目为一个文件夹，文件夹里面包括所有此次采集的信息，方法、序列等，且所有采集的项目都固定在一个文件夹下面：D:/Analyst Data/Project。

新建项目的时候，弹出窗口中有个Add All，可以创建孙文件夹。

3、联机：软件打开后在左上方硬件配置（单机选中，双击打开）→只需选中仪器MS→active profile。

图标变为绿色，表示联机成功。

调谐只需要选中质谱。

仪器的实时状态可以点击右下方的图标，质谱和液相都是单独观察，质谱要注意真空度，为.4、调谐→手动调谐→项目（文件夹）选中下拉菜单中的（为系统默认的调谐文件夹），先Q1→start syring pump（打开针泵）→start（质谱），开始采集以后观察基线是否平衡，若等两分钟还未平衡好，则手动将针泵往上抬。

一、开关机A A 、开机1.翻开UPS电源，翻开氮气发生器〔气瓶〕，确认Curtain gas的输入压力为0.4MPa，gas1/2 为0.7MPa，exhuast 为0.4MPa。

2.翻开机械泵电源开关〔5500 系列直接翻开质谱主机电源，仪器自动启动机械泵〕3.等机械泵工作至少30min5.翻开质谱主机电源开关6.过夜抽真空B B 、关机1.停顿输液：关停针泵或液相泵，或断开输液管线〔一般质谱主机Standby 后液相系统也自动待机，输液泵自动关停，但建议操作人员再次确认，必需保证没有任何液体再泵入质谱〕2.使仪器待机，并灭活配置2.关闭质谱仪主机电源开关〔5500 系列只需按下电源开关旁的VENT 按键排放真空〕3.机械泵连续工作至少30min4.关闭机械泵上的电源开关〔5500 系列会自动关停机械泵，待机械泵停顿后即可关闭5500 系列主机上的电源开关〕5.关闭气体发生器或气瓶二. 仪器校准与调谐本节包括如何在Analyst 软件中进展手动质量校准，一般仪器在开关机后才需要做调谐或每个季度例行调谐。

1 1 、翻开analyst 软件，双击Hardware Configure，在硬件配置Hardware Configure 菜单下单击ma ssSpecOnly ( 只连质谱机)，单击Active profile 激活仪器。

硬件配置表中massSpecOnly 消灭绿勾后，表示质谱仪主机与计算机通讯正常，关闭Hardware Configuration Editor。

3、双击左边工具菜单Navigation Bar 中的Manual Tuning，翻开一个空白质谱参数设置及运行窗口，进入手动调谐模式：4、在project 工具条中选择installation- -开头的工程文件夹5、点击File open6、选择Acquisition Method 翻开四极杆校准方法文件列表(如：Q1PosPPG.dam，Q1NegPPG.dam，Q3PosPPG.dam，Q3NegPPG.dam 方法文件，文件名有可能不同)。

1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪,适用于食品、药品中各种有机物(de)定性、定量分析,是一种具有高灵敏度(de)检测仪器,仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成.2. 职责操作人员按照本规程操作仪器,认真填写实验使用记录.保管人员负责对仪器进行定期维护和保养.科室负责人负责监督检查规程(de)执行.3．操作程序日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告.注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪,使其保持真空.建立新方法和project(de)操作步骤：准备UPLC —→建立新(de)project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告.开机：3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接 ,开氮气发生器、开氩气,小表<.打开计算机电源 > 等待windows正常启动 >电脑界面右下角网络图标红叉.打开UPLC自动进样器电源,等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号.打开UPLC泵电源,等约30s或者是有响声.打开质谱电源 ,等待5min,离子源透视镜里面亮.打开Masslynx软件,masslynx主界面 -----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80.至少抽真空4个小时 > 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度 >达到 e-5mbar .3.1.2 日常开机顺序（仪器未关闭）开氮气发生器、开氩气,小表<,打开Masslynx软件,进入工作站.建立项目点击file下(de)project wizard ,出现对话框,单击yes 出现对话框 ,输入project ,location 为C:\MS DATA ,单击next ,选择create existing project as template,并以c:\masslynx\ 为模板,单击finish .点击OK.准备UPLC系统准备液相(de)一般流程：准备流动相> 准备样品> 灌注二元泵 > 灌注自动进样器 > 建立液相方法> 平衡液相3.3.1. 准备流动相用(de)膜过滤缓冲液,所有(de)缓冲液和超纯水都要新配制,超纯水和缓冲液使用不得超过二天,缓冲盐一定要是可挥发(de),而且浓度不要大于10mM.3.3.2.样品要求所有样品都要用流动相初始梯度比例(de)溶剂来溶解,并用(de)膜过滤. 3.3.3灌注二元泵在Masslynx 主界面,单击MS Console,进入UPLC交互显示界面, 点击左栏Acquity UPLC System> Control > Start Up System ,单击QSM,选择需要用到(de)流动相位置,如A 和B,选择seal wash,时间设为3分钟.单击SM,选择 Strong Wash 5 cycles , Sample syringe 20单击 Equilibrate to Method,将流速设为0 ,单击 Start 开始灌注. 时间大约为9min 左右.设定流速,平衡液相在Masslynx主界面,单击Inlet Method 图标 ,打开液相方法编辑窗口,单击status > ACQUITY Additional Status ,进入液相控制台,单击A 或B 或流速(de)位置,出现流速、比例设定对话框, 设定液相流速与比例,单击对勾,开始平衡液相,如果后面要做调谐,可设定流速min,有机相与水相(de)比例为50:50.准备质谱3.4.1. 计算化合物单同位素质量数Masslynx主界面> 单击Tools> Molecular Weight Calculator, 输入化合物(de)分子式（大写-注意Cl、Br等正确(de)输入方法） ,注意选单同位素Monoiso ,Ion Mode:离子化模式,+ve 正离子,-ve 负离子 ,单击Calculate.3.4.2 用Intellistart进行自动调谐在Masslynx 主界面单击MS Tune图标,打开调谐窗口, 单击 Ion Mode> ES+ 或 ES- ,单击 API Gas 图标打开氮气, 单击打开高压选择MS Mode 图标 ,设定液相流速min, 水：乙腈(de)比例为50:50.把标准品调谐液放入质谱仪塑料瓶位置处(de)A（或B或C）号位(注:浓度在200ppb左右)单击Fluidics ,选择Reservoir为A ,Flow State 为LC 模式,点击Purge 图标.Purge 结束后,将Flow State 改为Combine 模式,设定Function 为MS1scan, Mass为计算出化合物(de)质量数,span 为5,点击进样 ,开始进样,直到离子(de)响应比较稳定.保存调谐文件：File > Save As至已建(de)项目下.在Masslynx主界面,选择Ms Console> Xevo TQ MS Detector选择Intellistart ,选择 Sample Tune and Develop Method ,ES+单击 Start 图标 ,出现Intellistart 自动调谐编辑窗口,选择Switch toAdvancedmode ,输入Compound name (化合物名称) ,Molecular Mass/Formula (分子量或分子式) Adduct A+（[ M+H] +, 选择 Load Existing Sample Tune ,在Sample Tune Name 方框后(de)“...”处调用开始保存(de)调谐文件,在Develop MRM Method 前(de)方框打钩,并在方框出输入MRM 方法(de)文件名 ,路径为已建(de)项目下.在Print Report 前方框打钩,Cone Voltage ,Collision Energy 处为默认值,Fluidics 下(de)Flow Path 选择Combined 模式,Sample Reservoir 和Sample Flow Rate 参数与Fuldics 下Combined 模式下(de)进样参数保持一致.单击右边(de)Start 开始自动调谐.调谐成功,会有绿勾出现 ,查看intellistart 报告3.4.3 查看intellistart 中自动生成(de)质谱方法：从MassLynx 主窗口,单击 MS Method,出现MS Method 编辑对话框 , 选择File > open, 选择Intellistart 中保存(de)质谱方法(de)文件,双击方法,如发现自动调谐生产(de)质谱方法中部分参数有误,则可以在Channels 窗口手动修改参数,填写 relentinon window 中(de)end时间 ,此时间必须与液相色谱方法运行时间保持一致,选择Auto Dwell,单击OK,点击File> Save As, 保存质谱方法文件.建立液相方法3.5.1编辑液相方法在液相方法编辑窗口,单击Inle t ,输入溶剂名称,run time 及梯度洗脱程序,梯度洗脱程序中最后阶段时间必须与run time 符合,单击OK, 选择File > Save As 保存方法 ,单击 Load Method ,平衡液相.3.5.2 建立样品列表在Masslynx 主窗口,选择 File > New 建立一个空白(de)表samplelist.输入文件名File Name ,样品信息 File Text ,双击 MS File ,选择质谱方法 ,双击Inlet File, 选择液相方法 ,在Bottle 中输入样品瓶(de)位置 ,在 Inject Volume 中输入进样体积,可右键> Add, 增加样品表(de)行数,保存样品表：File > Save As .数据采集和处理3.6.1.选中要采集(de)样品,单击Run > Start ,选择Acquire Sample Data only,,单击OK 开始进样并采集 .3.6.2在采集过程中,可查看色谱图,点击Chromatogram窗口 ,点击Real-timeUpdate icon . 如果不能见整个TIC图,单击 Default Range 图标.如果方法中包括多个通道,可通过Display > Mass 查看如果方法中包括多个检测器或多个Function,可通过Display > TIC 查看3.6.3处理多个Function(de)数据如果质谱方法中有多个Function,如有三个Function,如想看第二个Function,MS Scan (de)数据.3.6.3.1 在色谱图窗口,点击 Display > TIC,选中MS Scan ,选择 Add trace ,单击 OK.3.6.3.2如想查第二个Function, Daughter Scan 质谱图 ,在色谱图中,选择 Display > TIC, 选择 ScanWaveDS Add trace ,单击 OK.3.6.3.3. 选择 Process > Combine spectra. 分别用右键输入信号和本底噪音. 单击 OK. 得到 Daughter Scan(de)质谱图,单击 Process > Smooth… ,单击 OK.数据处理-外标定量法3.7.1在Masslynx 主页面单击Targetlynx/Edit method,出现定量方法编辑对话框,单击新建方法图标,新建一个定量方法.3.7.2单击Add new compound (添加新(de)化合物)图标,添加一个新(de)化合物.3.7.3单击菜单栏update,选中Quantitation Ion 和Compound Name（前面打勾）在Masslynx 主页面,打开中等偏下低浓度标准品(de)色谱图,Display/Mass chromatogram选出要定量(de)化合物(de)离子对,一般强度高(de)化合物用来做为定量离子,另一个离子对则作为确证离子,用鼠标右键在定量离子对色谱图上拉一下,则compound name, Acquisition Function Number, Quantification Trace, Predicted Retention Time和Retention Time window 将自动输入到定量方法中.注意：在色谱图上拉(de)时候,要遵循两个原则,拉(de)位置要以色谱峰(de)峰尖左右对称,拉(de)宽度要超过峰(de)起点和终点.3.7.4单击工作曲线图标,在工作曲线设置页面,填入Concentration Units:浓度单位,例如ng/ml, ug/kg,ppb, ppm等.Concentration of Standard: Level –选择.Polynomial Type –选择 Linear. （可根据自己行业(de)规定）Calibration Origin_选择exclude(排除原点),include(包含原点),force(强制过原点)Weithting Function(权重)_1/x （根据自己行业规定）Propagate Calibration Parameters_如果所有(de)化合物均用相同(de)工作曲线(de)参数,选Yes3.7.5打开积分参数列表,选中Apex Track Enabled （打勾,YES）,Integration Window Extent 输入2,选中Propagate Integration Parameters (打勾),如果色谱峰并不是很对称(de)色谱图,可先在色谱图上先设定参数,积分,好积分参数满意之后,process/integrate…/copy ,在Targetlynx 方法中Edit/Past 就可将其粘贴到Targetlynx 方法中.建议用Apex Track 积分方法,Smooth 方法建议用smooth iteration 1,smooth width 2.重复上面(de)过程,把其他几个化合物(de)信息全部加入 ,保存方法：File/Save As, 保存到当前项目(de)MethDB 文件夹中,正确(de)samplelist 表格模板,除了前面进样时(de)选项之外,还要有sample type, ConA, 等选中要处理(de)样品,单击Process Samples,出现下图(de)对话框,确保选中,Integrate 、sample ,calibrate Standard, QuantifySample,选择刚才编辑(de)Targetlynx 方法,单击OK后,出现定量结果对话框.可根据自己(de)需要,用鼠标右键,Chang Column Order 来增加或减少Summary中(de)选项.关机程序3.8.1日常关机：3.8.1.1如果流动相中有缓冲盐必须先将缓冲盐换成水,灌注2分钟,流速设为min,80%水相,冲洗至少30分钟,换成80%有机相,冲洗至少20分钟,停流速,水相,冲洗至少30分钟,换成80%有机相,冲洗至少20分钟,停流速,柱温为室温.3.8.1.2关质谱：主界面mass tune或者电脑下面仪器图标----界面左侧偏上fluidics---flow state选择为waste、关氩气,mass tune界面或者电脑下面仪器图标工具栏第6个> 关高压mass tune界面右下角> 等待去溶剂气温度降低至100度以下mass tune界面或者电脑下面仪器图标左侧偏上.ES+source-----temperature---desolvation > 关氮气 ,点击氮气发生器开启开关.3.8.2彻底关机3.8.2.1 先完成日常关机3.8.2.2泄真空: tune page > vacuum > vent---yes > 等待涡轮分子泵转速降到10以下 ,masslynx主界面 -----左侧instrument----Mass tune---界面左侧偏上diagnostics---vacuum---source turbo speed[%]3.8.2.3退出软件,其他界面先退出,主界面最后退出3.8.2.4关质谱电源 > 关所有UPLC电源,计算机电源 ,仪器三个电源顺序无所谓,关氮气发生器,氩气.3.8.2.5 如果有UPS,关闭UPS电源,计算机电源.4 日常维护、保养及注意事项仪器室要保持整洁、干净、无尘；配套设施布局合理.仪器室温度应相对稳定,一般应控制在20-25℃,保持恒温；相对湿度最好为50-70%,室内应备有温度计和湿度计,一般采用空调和吸湿机调节温度和湿度.气压过滤机械泵油 ,停止样品采集、停止流动相、关闭高压、关闭所有气流,关闭离子源内(de)真空隔离阀.用一字镙丝刀顺时针方向拧开机械泵上(de)Gas Ballast 阀四分之一圈,运行 30 分钟后再把 Gas Ballast 阀旋转到原来关闭(de)位置.对于 ESI源,至少每星期做一次,对于APCI源,每天做一次.开高压之前一定要先开氮气,关氮气之前一定要先关高压.ESI 离子化与溶剂密切相关,在使用某些溶剂和添加物需要注意以下几个方面：三氟乙酸（TFA）多用于蛋白质和多肽分析,但对ESI离子化有抑制效应；三乙胺（TEA）在m/z 102处有较强(de)[M+H]+峰,有可能会抑制某些碱性化合物在正离子ESI条件下(de)离子化,也有可能会增强某些碱性化合物在负离子ESI条件下(de)响应；要避免使用非挥发性(de)盐 (phosphate, borate, citrate, etc.)；表面活性剂、清洁剂和去污剂 (会抑制离子化)；以及无机酸 (sulphuric acid, phosphoric acid etc.)等.连接UPLC泵、色谱柱、注射泵以及ESI探头时,要将仪器置于standby状态..当改变分辨率(de)时候,仪器(de)质量数也会有轻微(de)偏移,所以在不同分辨率(de)条件下,应该做质量数校正.样品贮存在塑料离心管中,其中(de)添加剂很容易混入,尤其是被有机溶剂浸泡时间较长时,会产生干扰物信号.工作站计算机不要安装与仪器操作无关(de)软件,要经常清理计算机磁盘碎片,定期查杀病毒,定期备份实验数据.仪器应定期检查,并有专人管理,负责维护保养及清洁.实验完毕要清洗进样针、进样阀等,用过含酸(de)流动相后,色谱柱、离子源都要用甲醇/水冲洗,延长仪器寿命.定期清洗样品锥孔：关闭隔断阀,取下样品锥孔,先用甲醇：水：甲酸（45：45：10）(de)溶液超声清洗10分钟,然后在分别用超纯水和甲醇各溶液超声清洗10分钟,待晾干后再安装到仪器上.当灵敏度下降时,需要清洗Source、二级锥孔和六级杆.定期（每星期）检查机械泵(de)油(de)状态,如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,要及时更换机械泵油.5 支持性文件Waters Xevo-TQS液质联用仪使用手册.。

Waters Acquity Quattro Premier XE 液质联用仪标准操作规程一、仪器构造Waters Acquity Quattro Premier XE 液质联用仪包括Acquity TM UPLC 液相系统和Premier XE三重四极杆质谱系统。

二、仪器工作原理目标物通过UPLC液相系统进行分离，通过大气压电离技术使目标物离子化，然后经串联四极杆质量分析器进行离子分析，最后到达检测器。

仪器的工作由Masslynx V4.1化学工作站控制。

三、仪器操作3.1开机程序●检查仪器的所有的的电路、气路，确认正常●制备新鲜流动相●打开计算机及网络集线器电源，进入Windows●打开UPLC和MS各部分电源●进入MassLynx软件，打开MS Tune界面，点击Option下拉菜单中的Pump开启机械泵，开始抽真空●待各仪器状态稳定后使用3.2关机程序●确保UPLC的系统及色谱柱中充满有机溶剂●停止UPLC的二元泵，依次关闭MS部分的碰撞气、高压和干燥气●点击Option下拉菜单中的Vent选项，卸空质谱●依次关闭工作站的液相控制台界面、质谱调谐界面及MassLynx界面●关闭LC-MS/MS各组件的电源开关3.3 LC-MS/MS方法建立程序●开启仪器及化学工作站，检查仪器状态、流动相、气体供应等正常●点击MassLynx界面的File下拉菜单中的Project Wizard，按照提示对话框建立一个新的Project●配制适当标准溶液，进行调谐，优化待测物的各仪器参数，包括流动相组成及比例、椎孔电压（Cone）、碰撞能量（Collision）、源温度（Source Temp）、雾化器流速（Desolvation）等仪器参数，使目标物达到最佳灵敏度●建立LC方法和MS方法。

MassLynx选择Shortcut界面，点击InlenMethod,在此界面上建立LC方法并保存，点击MS Method，在此界面上根据调谐优化的各仪器参数建立MS方法并保存●创建Sample List，运行序列，验证方法建立的正确性和可行性3.4 日常样品上机检测程序●在MassLynx界面点击File下拉菜单中的Open Project，打开所检测项目所在的Project●配制新鲜的液相流动相，在MassLynx界面开启Inlet Method界面，并点击液相控制台图标，在液相控制台界面选择ACQUITY UPLC System，点击Control下拉菜单中的Start up，清洗UPLC系统●选择正确的调谐文件和正负离子模式，打开MS调谐界面的API GAS、CDL GAS及Press for Standby按钮，开启气体及高压●调用正确的Inlet Method，平衡系统，检查LC-MS/MS管路是否连接妥当。

液质联用操作规程完整预览说明:预览图片所展示的格式为文档的源格式展示,下载源文件没有水印,内容可编辑和复制1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。

2. 职责2.1操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。

2.2保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。

2.3 科室负责人负责监督检查规程的执行。

3．操作程序日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。

注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。

建立新方法和project的操作步骤：准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。

3.1开机：3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。

打开计算机电源> 等待windows正常启动>电脑界面右下角网络图标红叉。

打开UPLC自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。

打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。

打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。

打开Masslynx软件，masslynx主界面-----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。

至少抽真空4个小时> 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度 >达到 7.x e-5mbar 。

液质操作规程一、开关机A开机（需要使用前一天）1、打开空气发生器2、打开氮气发生器3、打开质谱4、打开电脑5、按次序打开A泵、B泵、柱温箱B关机（一周以上时间不用时，或停电时）1、vent按住5s2、等30min关主机电源3、按次序关柱温箱、B泵、A泵二、检查仪器状态1、空气发生器压力0.6-0.8大气压。

2、氮气发生器3个指针正常3、空气罐排水（每周）4、液质无报警状态5、液相压力稳定、质谱真空状态约0.6~0.8大气压三、配置流动相1、超纯水达到国标二级水标准，每天更换。

A管路。

2、有机相每月换一次，每次不要配太多。

B管路。

3、清洗液为1:1甲醇水。

R0、R1、R2管路放在清洗液内。

4、使用前超声5分钟或过滤抽真空。

5、A泵B泵内有洗液，用10%异丙醇，稀释液为超纯水。

每日更换。

6、更换流动相及每天使用前必须purge。

四、配置标准品1、最少吸取100ul进行稀释。

2、一次稀释倍数不超过100倍。

3、根据化合物特性选择稀释液。

4、做标准曲线，1、2、5、10、20、50ppb的曲线（建议配方）5、在前处理前加内标物100ppb，每个样品加50ul。

（建议配方）五、液相部分1、建立液相方法build Acquisition Method2、安装色谱柱，详见色谱柱使用规范六、质谱部分1、建立质谱方法build Acquisition Method2、调谐manual tuning（质量轴校正、offset电压校正）3、优化化合物manual tuning（母离子、子离子、最优DP、CE电压）七、上样build acquisition batch1、要加入空白对照2、要加入清洗流程八、结果计算MULTIQUANT软件九、出报告create report十、使用完成维护机器1、每次用完清洗色谱柱，先用高比例水相冲，再用高比例有机相冲，最后装在100%乙腈中。

建议整个过程2小时以上。

水相不能是含0.1%的甲酸。

1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。

2. 职责2.1操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。

2.2保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。

2.3 科室负责人负责监督检查规程的执行。

3．操作程序日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。

注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。

建立新方法和project的操作步骤：准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。

3.1开机：3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。

打开计算机电源 > 等待windows正常启动 >电脑界面右下角网络图标红叉。

打开UPLC自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。

打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。

打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。

打开Masslynx软件，masslynx主界面 -----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。

至少抽真空4个小时 > 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度 >达到 7.x e-5mbar 。

3.1.2 日常开机顺序（仪器未关闭）开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa，打开Masslynx软件，进入工作站。