DNA的鉴定

《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质，承载着生物体的遗传信息。

对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。

DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术，下面我们就来详细了解一下。

二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。

2、学习 DNA 的鉴定方法。

三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。

利用这一特点，可以使 DNA 从细胞中析出。

2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。

3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。

四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（也可以使用菜花、洋葱等材料）2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。

五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，离心或静置沉淀，除去上清液，得到鸡血细胞液。

2、破碎细胞，释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加蒸馏水到 100mL，搅拌均匀。

然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞破裂，释放出 DNA。

3、去除杂质（1）过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液，取滤液。

（2）去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，搅拌 1min，使核蛋白充分溶解。

然后缓慢加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L，此时 DNA 会析出，用多层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。

4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中，搅拌，使DNA 沉淀。

然后用玻璃棒卷起沉淀，放入试管中。

5、 DNA 的鉴定（1）向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。

亲子鉴定的六种方法亲子鉴定是一种通过分析DNA信息来确定两个人是否具有亲属关系的方法。

它广泛应用于法律、医学、社会福利等领域，特别是在解决争议和确立父母子女关系方面。

下面将介绍六种常见的亲子鉴定方法。

1.核酸序列比对法：这是目前最常用的亲子鉴定方法。

其原理是通过提取参与鉴定的双方的DNA样本，并通过特定技术对其DNA进行核酸序列测定，然后将两个样本的核酸序列进行对比。

如果两个样本的核酸序列存在大量相同的碱基序列，则可以推断两个人之间存在亲属关系。

2. STR分型法：它是一种通过分析DNA中的短串联重复序列（short tandem repeats, STRs），来进行亲子鉴定的方法。

STR是一种特殊的DNA序列，由重复单元组成，每个人的STR序列都是独一无二的。

利用PCR技术扩增STR区域后，通过比对被测人物和参照样本的STR图谱，来判断两者之间是否存在亲属关系。

3. SNP分析法：SNP是指单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism），它是DNA序列上最常见的变异形式。

SNP分析法通过寻找被测人物和参照样本之间的SNP位点差异来判定亲子关系。

该方法的优点是需要较少的基因座，但SNP位点较多，数据处理较为复杂。

4.Y染色体鉴定法：Y染色体只有男性有，因此这种方法主要用于男性亲子鉴定。

通过对被测人物和参照样本的Y染色体进行分析，如果两者的Y染色体完全一致，那么可以确认两者之间存在亲属关系。

这是因为Y 染色体遗传基本不发生突变，所以父与子之间的Y染色体序列几乎完全一致。

5.X染色体鉴定法：X染色体鉴定法适用于女性或男性亲子鉴定。

女性有两条X染色体，而男性只有一条，因此通过对被测人物和参照样本的X染色体进行分析，可以确定是否存在亲属关系。

6.高级DNA测序技术：随着DNA测序技术的不断发展，高级DNA测序技术如全基因组测序、外显子测序等也逐渐应用于亲子鉴定领域。

这些技术能够对被测人物和参照样本的整个基因组进行测序，从而更全面、准确地判断两者之间的亲子关系。

DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理：
1、析出DNA 的原理：DNA 在NaCL 溶液中的溶解度是随着NaCL 浓度的变化而变化的，当NaCL 的物质的量浓度为0.14mol/L 时，DNA 的溶解度最低，高于或低于这一浓度溶解度都会增高。

如图：
2、提纯DNA 的原理：
DNA 不溶于冷酒精，而细胞中某些物质可溶于冷酒精。

3、鉴定原理：DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。

二、方法步骤：
材料准备：常用鸡血细胞液
柠檬酸钠(抗凝剂)+鸡血−−−→静置或离心
血浆(弃去)+鸡血细胞液。

如图：
说明：①柠檬酸钠防止血液凝固。

②弃去上清液，是因为DNA 存在于血细胞中，血浆很少(没有)。

③用鸟类血细胞是因为鸟类成熟红细胞含DNA ，而哺乳动物成熟红细胞不含DNA ，所以不能用。

④本实验还可以用菜花或动物肝脏等作实验材料。

第一次在2中，使DNA与蛋白质分离
①两次加入高浓度NaCL
第二次在5中，DNA再溶解
第一次在1中，使细胞吸水涨破
②两次加入蒸馏水
第二次在3中，降低DNA的溶解度
第一次在1中，取滤液(含核物质)
③三次过滤第二次在4中，取黏稠物质
第三次在6中，取滤液
说明：在第一、三次取滤液时，纱布1—2层，第二次取黏稠物时纱布应多层。

④5次搅拌均要求超一个方向，轻缓，防止DNA断裂。

(二
璃制品表面带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNA。

【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。

1.1 实验材料必须准备充足。

本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。

每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。

宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。

也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。

（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。

因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。

1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。

1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。

1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。

1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。

教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。

进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。

2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。

一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。

DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。

为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。

蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。

DNA鉴定方法DNA鉴定方法DNA鉴定是一种通过对DNA序列的比较分析，确定个体之间的亲缘关系或确认身份的方法。

DNA鉴定在刑侦、亲子鉴定、遗传病诊断等领域有广泛应用。

本文将介绍DNA鉴定的基本原理和常用方法。

DNA鉴定的原理在于人类DNA的独特性和遗传性。

DNA是一种包含遗传信息的分子，由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成，它们按照一定的规则排列成两条螺旋状的链。

每个人的DNA序列都是独一无二的，除了一些双胞胎之外。

鉴定方法主要利用DNA的这种独特性，通过比较个体的DNA序列，确定是否具有亲缘关系或是否为同一人。

常用的DNA鉴定方法包括：1. RFLP（限制性片段长度多态性）分析：RFLP分析是DNA鉴定的经典方法之一。

它通过利用限制性内切酶将DNA切割成多个不同长度的片段，然后使用凝胶电泳将这些片段进行分离，并利用射入探针的杂交方法进行检测。

不同个体之间的DNA序列差异会导致不同的片段长度，从而可以通过比较片段长度来确定个体之间的亲缘关系。

2. PCR（聚合酶链式反应）分析：PCR是一种快速有效的DNA复制技术，可以从微量DNA中扩增出足够数量的DNA片段用于分析。

PCR分析常用于亲子鉴定、法医学和遗传病诊断。

PCR分析通常配合其他技术如序列分析、飞行时间质谱和DNA芯片等来进行。

3. STR（短串联重复）分析：STR分析是目前最常用的DNA 鉴定方法之一。

STR序列是由2-6个碱基重复单元组成的，不同个体之间的STR序列重复单元数目存在差异。

STR分析通过PCR扩增DNA片段，然后利用凝胶电泳分离，并通过比较STR重复单元数目来鉴定个体之间的亲缘关系或身份。

DNA鉴定的过程包括取样、提取DNA、扩增DNA片段、分离和检测。

取样可以采用血液、口腔拭子、毛发等样品。

提取DNA需要将样品中的DNA从细胞核和细胞器中分离出来。

DNA扩增通过PCR技术，可以在短时间内从微量DNA样品中复制出大量DNA片段。

dna亲子鉴定结果dna亲子鉴定结果dna亲子鉴定结果 DNA亲子鉴定是目前最准确的亲权鉴定方法，对于结果如何判断呢;假如小孩和测试男子的DNA形式在一个或多个的DNA探针上不吻合, 那么被测试男子便被100%排除, 即他是0%可能是亲生父亲. 他不可能是孩子的生父.一般来说，父母一方参与检测便可以得到准确的结果，但是假如在条件允许的情况下，建议父亲、母亲、孩子三方都参加检测，因为对于三联体鉴定相对于单亲鉴定来说有更高的准确率，尤其是父母同时参与时，可以更大程度的鉴定出是否医院报错了孩子等情况。

但是在dna亲子关系鉴定无法进展的时候，对于结果应该如何判断呢。

比方在司法案件中，假如被鉴定人中的一方不同意进展亲子鉴定，经过法院的调解和做思想工作仍然是不同意的情况下，应该通过什么证据来认定亲子关系。

在法律上规定：亲属法上的身份权是根据血亲(包括拟制血亲)产生，血缘亲生关系的存在是身份权的根底，父母、子女之间的血亲关系是身份关系的根底，主张身份权的当事人应当首先就父母、子女之间存在亲子关系进展举证。

对于亲子关系的证明可通过父母之间的婚姻或同居事实进展推断判别，婚姻关系或同居关系存续期间所受孕胎儿，无论是否于婚姻关系或同居关系存续期间所生，如无相反证据证明，便可以与该婚姻关系或同居关系双方存在亲子关系。

对于亲子鉴定结果在无法做dna的情况下如何判断便可以通过这种推断的方法进展认定。

如今，物证鉴定技术早已不再是破获刑事案件的专利，它更广泛地被应用于我们的生活当中。

今天，北京华大方瑞司法物证鉴定中心主任邓亚军博士将要为我们讲述的这起案例，就是属于民事案件中常见的一类——亲子鉴定。

故事，还得从一个生疏女人的出现开场……生疏女人从天而降年近60的程文凯一直和儿子程宇生活在一起。

半年前，程老爷子得了一场重病，导致半身不遂，卧床不起，爷儿俩之间的角色有了很大的转换，儿子程宇越来越懂事了，开场挑起照顾父亲和家庭的重担。

亲子鉴定的几种方法亲子鉴定是通过一系列科学方法来确定亲子关系的一种技术手段。

它可以帮助解决争议，确定父母与子女之间的生物学关系。

亲子鉴定的方法多种多样，包括DNA亲子鉴定、血型亲子鉴定、骨骼亲子鉴定等。

下面将对这几种常见的亲子鉴定方法进行介绍。

一、DNA亲子鉴定DNA亲子鉴定是目前最常用的方法，也是最准确可靠的一种方法。

它通过提取样本中的DNA，比对样本间的遗传信息，从而确定亲子关系。

DNA亲子鉴定可以通过唾液、血液、毛发、指甲等样本进行，其结果具有99.9%以上的准确率。

这种方法的优点在于不受样本来源的限制，鉴定结果可靠。

二、血型亲子鉴定血型亲子鉴定是通过比对父母和子女的血型来确定亲子关系的一种方法。

血型遗传具有一定的规律，不同的血型组合会产生不同的血型后代。

通过比对父母和子女的血型，可以初步判断亲子关系的可能性。

然而，血型亲子鉴定的结果并不具备绝对的准确性，因为某些血型组合的后代血型可能与父母的血型不完全匹配。

三、骨骼亲子鉴定骨骼亲子鉴定是通过比对父母和子女的骨骼特征来确定亲子关系的一种方法。

每个人的骨骼特征都是独特的，而且骨骼特征往往会在亲子间遗传。

通过对父母和子女的骨骼特征进行比对分析，可以初步判断亲子关系的可能性。

然而，骨骼亲子鉴定需要专业的骨骼分析技术和设备，操作复杂，耗时较长。

四、其他亲子鉴定方法除了上述提到的三种常见的亲子鉴定方法，还有一些其他的亲子鉴定方法，如指纹亲子鉴定、声纹亲子鉴定、眼睛彩照亲子鉴定等。

这些方法都是通过比对父母和子女的指纹、声纹、眼睛彩照等特征来确定亲子关系的。

这些方法在一定程度上可以提供一些线索，但其准确性和可靠性相对较低，需要结合其他方法进行综合分析。

亲子鉴定的方法多种多样，每种方法都有其独特的优势和局限性。

DNA亲子鉴定是目前最常用、最准确可靠的方法，被广泛应用于法医学、法律领域以及个人亲子关系确认等方面。

血型亲子鉴定和骨骼亲子鉴定虽然具有一定的局限性，但在一些特定情况下仍然可以提供一些参考信息。

生药鉴定的DNA鉴定原理及应用引言随着现代科技的不断进步，生物学领域的研究也取得了长足的发展。

其中，DNA鉴定技术作为生物学研究的一个重要分支，在生药鉴定中扮演着重要的角色。

DNA鉴定通过对生物体内的DNA序列进行分析和比对，能够对生药的真实性和品质进行客观评估，确保生药的质量和安全。

本文将介绍生药鉴定的DNA鉴定原理及应用。

DNA鉴定原理DNA鉴定是一种通过比较DNA序列的方法来识别物种的技术。

其基本原理是通过分析DNA序列中的核苷酸组成、长度、重复序列等特征，确定生物的遗传信息，从而进行物种鉴定。

具体而言，DNA鉴定主要包括以下几个步骤：1.DNA提取：首先从待鉴定的生药样品中提取DNA。

常用的DNA提取方法包括酚/氯仿提取法、颊黏膜细胞法等。

2.PCR扩增：将提取得到的DNA作为模板，在特定的引物的作用下进行聚合酶链式反应（PCR）扩增。

PCR扩增能够在较短的时间内产生大量DNA片段，为后续鉴定步骤提供足够的模板。

3.DNA分离：通过凝胶电泳等方法，将PCR扩增产生的DNA片段分离出来。

根据DNA片段的长度差异，可以判断不同物种之间的差异。

4.比对分析：将待鉴定样品的DNA片段与已知物种的DNA序列进行比对分析。

根据DNA序列的相似性及差异性，可以确定待鉴定样品的物种。

常用的比对工具包括BLAST、CLUSTAL等。

5.结果判断：通过比对分析的结果，来判断待鉴定样品与已知物种是否一致。

一致则表明该生药样品的物种身份得到了验证。

DNA鉴定在生药鉴定中的应用DNA鉴定作为一种快速准确的生物学鉴定方法，被广泛应用于生药鉴定中。

其应用主要体现在以下几个方面：物种鉴定DNA鉴定可以通过比对待鉴定物种的DNA序列和已知物种DNA序列的方法，准确确定生物的物种身份。

在生药鉴定中，通过物种鉴定可以判断生药样品中所含物种是否与产品标签所标明的一直，确保生药的真实性和有效性。

品质评估DNA鉴定可以基于物种的遗传信息，对生药样品的品质进行评估。

dna鉴定方法摘要：1.DNA鉴定的基本原理2.常见的DNA鉴定方法3.各类DNA鉴定方法的优缺点4.应用场景及注意事项正文：DNA鉴定，又称DNA亲子鉴定，是一种通过分析遗传物质DNA序列来判断亲子关系的生物技术。

DNA鉴定在法医学、遗传学、生物学等领域具有广泛的应用。

如今，随着科学技术的不断发展，DNA鉴定方法也日益丰富。

下面我们将介绍几种常见的DNA鉴定方法，以及它们各自的优缺点。

一、DNA鉴定的基本原理DNA鉴定的基本原理是基于孟德尔遗传定律，通过分析亲子间基因型的相似性，从而计算出亲子关系的概率。

鉴定过程中，通常会对比父母和子女的STR（短串联重复序列）基因座，以确定亲子关系。

二、常见的DNA鉴定方法1.短串联重复序列（STR）分析法STR分析法是目前应用最广泛的DNA鉴定方法。

它通过检测特定基因座上的短重复序列，分析亲子间的遗传信息。

STR基因座具有高度多态性，且易于检测，因此准确性较高。

2.SNP（单核苷酸多态性）分析法SNP分析法是通过检测特定位点上的核苷酸变化来判断亲子关系。

与STR 分析法相比，SNP分析法的检测精度更高，但检测过程相对复杂。

3.线粒体DNA分析法线粒体DNA分析法是通过检测线粒体基因序列来判断亲子关系。

由于线粒体DNA具有母系遗传特点，该方法主要用于解决母系遗传纠纷。

4.芯片分析法芯片分析法是将多个基因座同时进行分析，从而提高鉴定效率。

该方法适用于大规模的DNA鉴定需求，但设备成本较高。

三、各类DNA鉴定方法的优缺点1.STR分析法：优点- 准确性高、检测速度快、成本较低；缺点- 对某些特殊案例的鉴定准确性略有不足。

2.SNP分析法：优点- 检测精度高、适用于复杂案例；缺点- 检测过程复杂、成本较高。

3.线粒体DNA分析法：优点- 适用于母系遗传纠纷；缺点- 仅能判断母系亲子关系，准确性相对较低。

4.芯片分析法：优点- 高效、高通量；缺点- 设备成本高、检测费用较高。