生理实验讲义

生理学讲义第一章绪论1.何谓内环境及其稳态？内环境为何必须维持相对稳定？机体如何维持内环境相对稳定？3.何谓正反馈和负反馈？试各举一例说明它们在生理功能调节中的作用及意义。

第二章细胞膜的基本功能1.细胞膜的物质转运主要有哪几种形式？各自的转运机制如何？5.神经纤维上的静息电位是怎样产生的？有何实验依据？7.何谓动作电位？神经纤维上的动作电位就是怎样产生的？如何在神经纤维上传导？8.如何通过实验去证明细胞动作电位的产生机制？12.骨骼肌神经-肌接头处的兴奋传递是如何进行的？如何加以证明？14.何谓激动-膨胀耦联？它包含哪些过程？其结构基础和耦联因子就是什么？第三章血液2、血浆晶体渗透压和胶体渗透压就是如何构成的？各存有什么生理意义？3、各类血细胞的正常值就是多少？9、血液凝固有哪几个基本步骤？凝血酶原激活物的形成有哪两条途径？12、何谓abo 血型系统？如何确定abo血型？第四章血液循环4、试述心脏泵血功能的各项评定指标。

5、试述影响心输血量的因素。

6、先行比较心肌工作细胞和骨骼肌细胞动作电位的优劣。

12、心肌细胞存有哪些生理特性？与骨骼肌较之有何相同？14、先行分析动脉血压构成机制及其影响因素。

21、试述心交感和心迷走神经对心肌电生理和收缩功能的作用机制。

24、在家兔实验中，阻断一侧颈总动脉血流后，血压有何变化？为什么？第五章体温3.试述肺、组织换气的过程及其影响因素。

5.试述氧离曲线的特征、成因、生理意义以及影响因素。

6.氧气和二氧化碳各自通过什么形式在血液中运输。

8.试述动脉血中的pco2升高、pco2降低和h+浓度升高对呼吸运动的影响和机制。

9.如何用实验证明动脉血中的pco2升高主要通过中枢化学感受器而影响呼吸运动？第六章消化与稀释3.试述胃液中的主要成分、生理作用和各自的分泌细胞。

4.消化期胃液的分泌是怎样调节的？7.为什么说道胰液就是消化食物最全面、消化力最强大的一种消化液？11.糖、蛋白质和脂肪在小肠内是如何被吸收的？第七章能量代谢与体温1.试述影响能量代谢的因素。

《生理药理学》实验指导课程编号：0741535048实验一水杨酸钠血浆半衰期的测定一、实验目的了解分光光度法测定水杨酸钠的血药浓度和计算半衰期的方法。

二、实验内容家兔静脉采血、静脉注射、离心、光电比色等。

三、实验要求集中授课形式。

四、实验准备预习药物代谢动力学，药动学参数的概念、意义、计算方法等理论知识。

五、实验原理、方法和手段在酸性条件下，水杨酸钠解离为水杨酸，后者与三氯化铁生成一种紫色络合物，该络合物在520nm波长处，其光密度与水杨酸的浓度成正比。

采用光电比色法，计算血药浓度，进一步计算药物的半衰期。

六、实验条件1. 动物家兔，2～3kg，雌雄均可。

2. 药品10% 及0.02% 水杨酸钠（sodium salicylic），10% 三氯化铁，10% 三氯醋酸（trichloroacetic acid），0.5% 肝素（heparin），蒸馏水。

3. 器材试管架、试管、离心管、吸管（10mL、2mL、1mL 0.5mL）、注射器（2mL、5mL）、针头、吸耳球、分光光度计、离心机、计算器等。

七、实验步骤1、取4支离心试管，编号后各加入10% 三氯醋酸5mL。

2、取家兔一只，称体重，使其耳部充血后，用经0.5% 肝素湿润过的注射器由耳缘静脉缓慢抽血2.5mL，分别置于1号管和2号管内各1 mL，余血弃掉，将试管摇匀静置。

3、由耳缘静脉缓慢注射10% 水杨酸钠1.5 mL/kg，（150mg/kg），给药后5min 和35min，各采血1mL，分别置于3号管和4号管内，摇匀静置。

4、1，3，4号管内各加入蒸馏水1mL ，2号管内加入0.02%水杨酸钠1mL。

摇匀。

5、将4支离心管置于离心机内，以1500～3000rpm，离心5min，使血浆蛋白沉淀。

6、另取相应编号的试管4支，将离心后的上清液倒入相应编号的试管中，从中准确吸取3mL 分别置入相应编号的另外4支试管中，每管再加入10% 三氯化铁溶液0.5mL，摇匀显色。

植物生理学实验（第一版）目录实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势 (2)实验二植物体内硝态氮含量的测定 (4)实验三叶绿素a，b含量的测定 (5)实验四赤霉素对水稻α--淀粉酶的诱导形成 (6)实验五植物呼吸强度的测定 (7)实验六种子活力的快速测定—氯化三苯基四氮唑(TTC)法及红墨水法 (8)实验七丙二醛含量的测定 (11)实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势[实验目的]观看植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生进程及其用于测定植物组织渗透势的测定[实验原理]原生质层（细胞膜、原生质、液泡膜）具有选择透过性，近似于半透膜，一个成熟的植物细胞确实是一个完整的渗透装置：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液），细胞失水，发生质壁分离；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时（低渗溶液），细胞吸水；当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平稳状态，当外界溶液浓度等于细胞液浓度时（等渗溶液），植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。

细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。

将植物组织置于对其无迫害的一系列不同浓度的溶液里处置一按时刻，然后镜检发生质壁分离的情形，细胞的等渗浓度将界于方才引发初始质壁分离的浓度和不能引发质壁分离的浓度之间。

代入公式即可计算渗透势。

[材料、器材与试剂]1 实验材料洋葱表皮2 实验仪器显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培育皿，记号笔，滴管。

3 实验试剂别离配制、、、、、、、、L的蔗糖溶液，贮9个试剂瓶中。

称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L(母液)。

再配制成以下各类浓度：L：吸母液25ml+水25mlL：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水[方式与步骤]1. 取6套干净清洁的小培育皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培育皿中使成一薄层，盖好皿盖。

实验一 牛乳中酪蛋白的提取及其含量测定一、实验目的1、掌握等电点法提取蛋白的基本原理及基本操作；、掌握等电点法提取蛋白的基本原理及基本操作；2、掌握双缩脲法测定蛋白含量的基本原理及基本操作。

二、实验原理酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，约占乳蛋白的80~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。

它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。

它在牛乳中的含量约为35g/L ，比较稳定，利用这一性质，可以检测牛乳中是否掺假。

牛乳中是否掺假。

酪蛋白在其等电点时由于静电荷为零，同种电荷间的排斥作用消失，溶解度很低，利用这一性质，经牛乳调到pH4.6，酪蛋白就从牛乳中分离出来。

酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中将脂类杂质除去。

将脂类杂质除去。

在乳制品加工或成品中，酪蛋白含量是一个常需测定的指标。

常用于测定酪蛋白的方法是先将酪蛋白在等电点沉淀，再用凯氏定氮法测定。

本实验采用双缩脲法测定酪蛋白。

其原理为：蛋白质含肽键，肽键在碱性溶液中可与铜离子形成紫红色化合物，在540nm 波长处有最大吸收，其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸组成无关。

比，而与蛋白质分子量及氨基酸组成无关。

三、材料与试剂市售牛奶市售牛奶10mg/ml 酪蛋白标准溶液（用0.1MNaOH 配制）配制） 0.1M NaOH 溶液、0.2M pH4.6的HAc －NaAc 缓冲液缓冲液双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO 4·5H 2O ）1.5g ，加水100ml ，加热助溶；另称取酒石酸钾钠（NaKC 4H 4O 6·4H 2O ）6.0g 、碘化钾5g 溶于500ml 水中。

两液混匀后，在搅拌下加入10%NaOH 300ml ，后，后用水稀释至1000ml ，贮存于塑料瓶中。

此液可长期保存，若瓶底出现黑色沉淀则需重新配制。

实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验目的植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度，因此又称溶质势。

渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。

在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，在一定程度上保持膨压，保持细胞的生长和气孔的开放，这种现象称为渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。

二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

带入公式即可计算出其渗透势。

三、实验材料、仪器设备和试剂1. 实验材料洋葱鳞茎（最好是紫色洋葱）2. 仪器设备光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。

3. 试剂（1）1 mol/L蔗糖溶液，（2）蔗糖系列标准液以1 mol/L蔗糖溶液作为母液，配置梯度溶液: 0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L的蔗糖溶液。

四、实验步骤1. 取10套干燥洁净的小培养皿，编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。

2. 用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块，用镊子将表皮小块轻轻撕下，依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，并立即盖好皿盖。

浸泡10～15分钟。

3. 从0.70 mol/L 蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上载玻片，于显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的表皮做制片，进行同样观察，并记录质壁分离的相对程度。

生理实验报告
实验目的，通过生理实验，探究人体生理机能的变化规律，加深对人体生理学
知识的理解。

实验材料，实验所需材料包括心率计、血压计、体温计等。

实验过程，首先，记录实验者的基础生理指标，包括血压、心率、体温等。

然后，进行一定强度的运动，如跑步、仰卧起坐等，记录运动后的生理指标变化。

最后，进行放松休息，观察生理指标的恢复情况。

实验结果，经过运动后，实验者的心率明显上升，血压也有所增加，体温略微
升高。

而在放松休息后，心率逐渐恢复正常，血压和体温也逐渐回落至基础水平。

实验结论，通过本次实验，我们可以得出结论，运动后，人体的心率、血压和
体温都会发生相应的变化，这是因为运动时身体需要更多的能量供应，心脏需要加快跳动来输送氧气和养分，血管收缩增加血压以维持血液循环，身体代谢产生的热量也会导致体温升高。

而在休息放松后，这些生理指标会逐渐恢复正常。

实验启示，生理实验是加深对人体生理机能理解的重要手段，通过实验，我们
可以更直观地了解人体在不同状态下的生理变化，为保持健康、科学锻炼提供依据。

结语，通过本次生理实验，我们不仅加深了对人体生理机能的认识，也对运动
后的生理变化有了更清晰的了解。

希望通过今后的实验学习，能够更全面地掌握生理学知识，为保持健康、科学运动提供更多的科学依据。

临床医学生理生态学课程讲义1、生态学：研究有机体及其周围环境相互关系的科学。

（环境包括非生物环境和生物环境。

强调的是相互作用。

）2、生态因子(ecological factor):环境要素中对生物起作用的因子，如光照、温度、水分、氧气，二氧化碳和其他生物。

3、生境(habitat)：所有生态因子构成生物的生态环境，特定生物体或群体的栖息地的生态环境称为生境。

4、耐受性定律：任何一个生态因子在数量上或质量上的不足或过多，即当其接近或达到某种生物的耐受限度时会使该种生物衰退或不能生存。

5、生态幅：每一种生物对任何一种生态因子都有一个耐受范围，即有一个生态上的最低点和最高点，在最低点和最高点（或称耐受下限和上限）之间范围，称为生态幅或生态价。

6、光补偿点：绿色植物光合作用吸收二氧化碳量与呼吸作用释放的二氧化碳量，处于动态平衡时的光照强度。

7、光饱和点：在一定的光强范围内，植物的光合强度随光照度的上升而增加，当光照度上升到某一数值之后，光合强度不再继续提高时的光照度值。

8、短日照植物：日照超过某一数值或黑夜小于某一数值时才能开花的植物。

这类植物在全年日照较长时间里开花。

起源和分布在温带和寒温带地区。

9、长日照植物：日照小于某一数值或黑夜长于某一数值时才能开花的植物。

这类植物通常在早春和深秋开花。

起源和分布在日带和亚热带地区，在中等纬度也有分布。

10、冷害：喜温动物在0℃以上的温度条件下受害或死亡，这可能是通过降低了生物的生理活动及破坏生理平衡造成的，它是喜温生物向北方引种和扩张分布区的主要障碍。

11、冻害：当温度低于-1℃时，很多物种被冻死，这是由于细胞内冰晶形成的损伤效应，使原生质膜发生破裂，蛋白质失活或变性。

12、驯化：如果一个种长期生活中最适范围的一侧，将逐渐导致该种耐性限度的改变，适宜生存的上下限会发生移动，并形成一个新的最适点，这一过程叫驯化。

应用：品种移植，实验室试验等1、什么是生态因子，其作用特点有哪些？生态因子(ecological factor):环境要素中对生物起作用的因子。

实验一神经干动作电位测定及兴奋传导速度和不应期测定一、实验目的：1、掌握坐骨神经标本的制备方法并按要求制备出完整的蟾蜍坐骨神经标本2、掌握神经干动作电位的引导、不应期及动作电位传导速度的测定方法二、实验内容：1、坐骨神经标本制备2、坐骨神经干动作电位测定3、坐骨神经干兴奋传导速度和不应期测定三、实验仪器设备和材料清单1、实验材料：蟾蜍或蛙、蛙类手术器械一套（包括探针、粗剪、手术剪、眼科剪、镊子、玻璃分针）、蛙板、滴管、培养皿、烧杯、棉线、棉球、滤纸片。

2、实验试剂：任氏液3、实验仪器：生物信号采集处理系统、打印机、、神经标本屏蔽盒四、实验要求1、学会用细胞外电刺激诱发神经干动作电位的方法；掌握生物电记录的一般原则和方法；熟悉生物信号采集处理系统的操作；2、要求学生了解科研过程，培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力；3、要求学生能独立操作每一个实验步骤，了解和掌握相关的原理，培养学生熟练操作。

五、实验原理：可兴奋组织如神经纤维在受刺激而兴奋时，细胞膜电位将发生一系列短暂的变化。

由安静状态下的膜外正膜内负的静息电位变为兴奋状态下的膜外负膜内正的去极化状态。

因此，在膜外兴奋区相对于未兴奋区来说电位为负。

这种电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴奋区的去极化，使兴奋沿细胞膜传向整个细胞，而原来的兴奋区的膜电位又恢复到膜外正膜内负的静息水平。

这种可传播的、短暂的膜电位变化称之为动作电位。

可兴奋组织在一次兴奋之后，其兴奋性要经历一个规律的时相变化，依次是绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后才恢复到正常的兴奋性水平。

六、实验方法：一）、实验步骤和观察指标1、仪器装置准备好生物信号采集处理系统及相关电极。

2、制备蟾蜍坐骨神经标本（1）破坏脊髓：左手握住蟾蜍，用食指下压蛙头使头前俯(图1-1)，右手持探针从枕骨大孔垂直刺入，再向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将针退至皮下，再将针尖向后刺入椎管捣毁脊髓。

植物生理学实验讲义吴恩岐内蒙古师范大学生命科学与技术学院2007.4实验1 植物组织水势的测定（小液流法）一、目的学会用小液流法测定植物组织的水势二、材料用具及仪器药品花生叶片、试管、移液管（10ml, 0.1ml）、吸球、镊子、小方块、钻孔器、牙签、玻棒、蔗糖、次甲基蓝三、原理当把植物组织或细胞放在溶液中时，两者便会发生水分交换。

如果植物组织（或细胞）的水势低于溶液的水势，组织（或细胞）则吸水，使外溶液浓度增大，比重也增大；若植物组织（或细胞）的水势高于溶液的水势时，组织（或细胞）则失水，使溶液的浓度变小，比重也变小；如果植物组织（或细胞）的水势与溶液的水势相等时，外溶液的浓度不变，其比重也不变，若把浸过组织的溶液慢慢滴回同一浓度而未浸过组织或细胞的溶液中。

比重小的液流便往上浮，比重大的则往下沉。

如果小液流停止不动，则说明溶液的浓度未有发生改变。

此溶液的渗透势（水势）即等于所测组织（或细胞）的水势。

根据溶液的浓度，可以用公式（ψs=-CiRT）, 计算出溶液的渗透势（ψw so1=ψs so1）ψs表示渗透势。

R表示气体常数：0.0083 MPa·l/mol·K。

T表示绝对温度，即273+实验时(℃)i表示解离系数。

四、方法步骤1．将1mol/L蔗糖溶液的母液分别配成0.1、0.2、0.3、 0 4、0.5、0.6mol/L的蔗糖溶液各10ml，分别注入6支大试管中，摇匀。

2．从上述的大试管中各取2ml溶液，分别放到另6支小试管中，各试管塞上软木塞。

3．用钻孔器钻取叶圆片（花生叶、菠菜均可），依次分别在小试管的蔗糖溶液中各放入叶圆片40片（钻孔器的直径为6mm），叶圆片要全部浸在溶液中，塞上塞子，每隔5分钟摇动一次。

4．30分钟后，用牙签取次甲基蓝结晶少许，分别投入小试管中，摇匀。

5．用0.1ml的移液管从小试管中吸取溶液约0.1ml，然后将之插之相对应浓度的大试管中的中部，慢慢放出蓝色液，并观察记录小液流的流向，从中找出小液流停止不动的该溶液的浓度（每一浓度配备0.1ml移液管一支）。

生物化学实验讲义赵国芬2010年9月实验之前说明1.各班学习委员将成员分成10个大组,每个大组中2人一小组,大组采用循环实验的方法,同时开出不同的10个实验.2.共开出10个不同的实验实验一温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响实验二牛奶中蛋白质的提取与鉴定实验三血液葡萄糖的测定-福林（Folin）-吴宪氏法实验四双缩脲测定蛋白质的含量实验五血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验六植物组织中还原糖和总糖的含量测定实验七应用纸层析法鉴定动物组织中转氨基作用实验八植物组织中维生素C的定量测定实验九琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察实验十植物组织中DNA的提取和鉴定3.穿着要利索,做好实验记录4.注意实验室卫生和安全.一. 实验室规则:按照实验室的规则给学生讲解.二. 生物化学所用的实验技术1.样品: :血液、血浆、血清、组织植物样品：果实、花蕾、茎等无论用什么做材料，为了提取物质，需匀浆2．移液管的使用：移液管吸管移液管奥氏吸管读数时视线与凹面相平，取液时要用吸管嘴吸，放出液体时注意嘴部液体的残留问题。

3．离心机的使用：平衡（管平衡、机器平衡）缓起和慢停4．分光光度计机器原理和测定原理（比尔定律）5．水浴锅的使用三、实验报告的书写（用教务处统一印刷的报告纸写）目的、原理、仪器、药品、步骤、结果及结论、讨论实验一、温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响一、实验目的通过本实验了解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。

二、实验原理酶的化学本质是蛋白质。

凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性。

此外，温度、pH和抑制剂、激活剂对酶的活性都有显著的影响。

酶的活性通常是用测定酶作用底物在酶作用前后的变化来进行观察的。

本实验用唾液淀粉酶作用的底物—淀粉，被唾液淀粉酶分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物的变化来观察该酶在各种环境条件下的活性。

ABO血型的测定[实验目的]1．观察红细胞凝集现象．2．学习鉴定血型的方法，掌握ABO血型鉴定的原理．[实验原理]ABO血型以红细胞膜表面A、B凝集原的有无及种类来分型，在ABO血型系统中还包括血浆中的凝集素．当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时，将发生特异性红细胞凝集反应。

因此，可用已知标准血清中的凝集素(A型标准血清含抗B凝集素，B型标准血清含杭A疑集素)，来测定受检者红细胞膜上未知的凝集原，根据是否发生红细胞凝集反应来确定血型。

[实验对象]正常人．[实验器材]显微镜、采血针、A型和B型标准血清、双凹玻片、竹签、酒精棉球、干棉球、玻璃蜡笔。

[实验方法和步骤]1．取干净双凹玻片一块。

2．在两端凹面中央分别滴A型和B型标准血清各一滴。

3．消毒耳垂或指端后，用消毒采血针刺破皮肤，分别用竹签刮取l～2滴血，使其分别与A型和B型标准血清充分混匀。

放置l~2min后，用肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨者用低倍显微镜观察．4．根据有无凝集现象判定血型。

[注意事项]1．采血针和采血过程必须严格消毒，以防感染。

2．滴标准血清的滴管和混匀用的竹签各两只(根)(必须专用)，两种标准血清绝对不能混淆。

3．注意区别疑集现象与红细胞叠连现象。

发生红细胞凝集时．肉眼观察呈朱红色颗粒，且液体变得清亮。

未发生红细胞凝集时．肉眼观察呈云雾状且液体略显混浊。

出血时间和凝血时间的测定[实验目的]学习出血时间、凝血时间的测定方法。

[实验原理]出血时间是指从小血管破损出血起，至自行停止出血所需的时间，实际是测量徽小血管口封闭所需时间。

出血时间的长短与小血管的收缩和血小板的粘着，聚集、释放以及血小板的功能等有关。

出血时测定，可检查生理上血过程是否正常及血小板的数量和功能状态。

凝血时间是指血液流出血管到出现纤维蛋白丝所需的时间。

测定凝血时间主要反映有无凝血因子缺乏或减少。

[实验对象]正常人。

[实验器材]采血针、酒精棉球、干棉球、秒表、滤纸条、玻片及大头针等。

《生理学实验》教学大纲生理学是一门实验性科学。

《生理学实验》是生理学理论教学的必要补充，它也是生理学学科的有机组成部分。

《生理学实验》教学时数为12学时。

由生理学科教师主讲。

课程性质必修适用专业生物医学工程和生物技术专业开设学期 3一、教学目的和要求教学目的：通过实验使学生初步掌握生理学实验的基本操作技术；了解获得生理学知识的科学方法，验证和巩固课堂理论。

在实验过程中培养对科学实验的严肃的态度，严格的要求，严密的工作方法。

通过实验逐步培养学生能够客观地对事物进行观察、比较、分析和综合的能力，以及独立思考解决实验问题的能力。

实验要求：1.实验前（1）仔细阅读实验指导，了解实验目的、要求和实验步骤。

（2）复习与实验有关的理论知识。

（3）预测该实验各个步骤应得的结果。

2.实验时（1）实验器材的安放要正确、整齐、稳当。

（2）按照实验步骤，以严肃认真的态度循序操作。

不得进行与实验无关的活动。

要注意保护实验动物和标本，节省实验材料和药品。

（3）仔细观察、认真思考实验过程中出现的现象，随时记录实验结果。

3.实验后（1）将实验用具整理归位，所用器械洗净擦干。

如有损坏或缺少，应报告负责教师。

实验完毕后，将所借用的器材或物品，点清并交给负责老师。

（2）整理实验记录，认真填写实验报告，按时交给负责老师评阅。

二、教学目的、教学内容、学时分配及其他实验一蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备（4课时）〖实验性质〗专业基础〖实验类型〗基本操作性实验〖目的要求〗1．掌握蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法。

2．掌握蛙类手术器械的使用方法。

〖实验内容〗1．制备蟾蜍坐骨神经干标本。

2．观察标本的兴奋收缩功能。

实验二神经干动作电位和传导速度的测定（4课时）〖实验性质〗专业基础〖实验类型〗综合性实验〖目的要求〗1．熟悉电生理仪器的使用方法。

2．了解测定蟾蜍坐骨神经干动作电位的基本原理和方法。

3．了解测定动作电位传导速度的基本原理和方法。

〖实验内容〗1．制备蟾蜍坐骨神经干标本。

生理学实验讲义实验三影响红细胞渗透脆性及血液凝固的因素一、影响红细胞渗透脆性的因素【实验目的】1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。

2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。

3、观察不同因素对红细胞渗透脆性的影响。

【实验原理】将红细胞悬浮于等渗NaCI液中，其形态不变。

若置于低渗NaCI溶液中则发生膨胀破裂，此现象称为红细胞渗透脆性。

但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCI溶液浓度的高低来表示。

将血液滴入不同浓度的低渗NaCI溶液中，开始出现溶血现象的NaCI溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力（正常为0.42-0.46%NaCI溶液）。

出现完全溶血现象时的NaCI溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力（正常为0.28-0.32%NaCI溶液）。

前者代表红细胞的最大脆性（最小抵抗力），后者代表红细胞最小脆性（最大抵抗力）。

生理学上将能使悬浮于其中的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液，不能跨过细胞膜的微粒所形成的力，但等渗溶液并不一定是等张溶液（如1.9%的尿素溶液）。

【材料与方法】一、实验对象家兔二、器械药品：试管架、小试管45支、载玻片、盖玻片、注射器、8号注射针头、棉签，1%NaCI 溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水，1.9%尿素溶液、地塞米松、皂甙。

三、方法与步骤（一）配制不同浓度的低渗NaCI溶液取口径相同的干洁小试管36支，分别编号排列在三个试管架上，按下表分别向各试管内加入1%NaCI溶液和蒸馏水混匀，配制从0.68-0.24%12种不同浓度的NaCI低渗溶液，每管总量均为2.5ml。

表7-1 不同浓度低渗氯化钠溶液的配制试剂试管编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6蒸溜水（ml） 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9NaCl浓度% 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24实验结果皂甙（ml）另取9支小试管，在三个试管架中分别编号13-15，分别加入0.85%NaCI溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml。

《生理学实验指导》讲义实验一坐骨神经-腓肠肌标本的制备【实验目的】掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的基本操作技术，掌握蛙类手术器械的使用方法。

【实验原理】蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。

因此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。

【实验器材和药品】蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。

【实验对象】蟾蜍。

【实验方法和步骤】1．破坏脑和脊髓（常用的有三种方法）(1) 俯式捣毁法：是最常用的方法。

以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔。

将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm，再向前刺入颅腔，左右搅动（可感觉到探针与颅骨壁的碰击），破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。

(2) 仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四周捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。

(3) 横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色的脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。

以上方法破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失禁现象。

2．剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下（或在骶髂关节以上1.5 ~ 2cm处）剪断脊柱，用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。

实验指导（节录自：哈尔滨医科大学生理学(高职高专类)实验讲义）实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备[目的] 学会制备神经肌肉标本的方法[原理] 蟾蜍或蛙的一些基本生命活与温血动物相近似，而且离体组织所需要的生活条件比较简单，容易控制，所以可用蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察神经冲动、兴奋性、兴奋过程及肌肉的收缩特点等等。

[用品]蛙或蟾蜍、蛙类实验用品。

[步骤]1、破坏脑和脊髓取蟾蜍（或蛙）一只，用水冲活干净。

用左手握住蟾蜍（背部朝上）食指压住头部前端，使头前倾。

可见头部背面正中线上有一凹陷处（即枕骨大孔所在部位）。

右手持探针尖在此处垂直刺入1—2mm，再将探针放平，针尖转向头部，经枕骨大孔将探针刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；而后将探针退出枕骨大孔，使针尖向后刺入椎管，捣毁脊髓。

如动物四肢松软，表明脑、脊髓已完全破坏。

2、切断脊柱 用左手捏住蛙腰部，右手持粗剪刀，在肩关节稍下方处将剪刀的一刃插入脊柱前方，剪断脊柱。

3、剪除上半身及内脏右手用粗剪刀沿腹壁左右侧向后剪去，此时蛙体上半身和大部分内脏便一同垂向下方）。

在耻骨联合处将腹壁和脏器一并去掉，只保留双腿和与之相连的腹后壁及脊柱，切勿切断。

4、去皮 左手捏住脊柱（不要触及神经），右手捏住其上的皮扶边缘，向下翻转剥掉全部后肢的皮肤。

将标本放在盛有任氏液的培养器中。

5、分离两腿 将手和用过的器械洗净后，捏住脊柱使背面朝上，使尾骨突出于背侧。

平放剪刀剪去尾骨（切勿损伤坐骨神经）。

然后从耻骨联合中央脊柱正中线用粗剪刀剪开，使左右两腿完全分开。

将标本浸入盛有任氏液的培养皿中（在制备过程中应随时滴加任氏液湿润标本）。

6、分离坐骨神经将标本用大头针固定于蛙板上，用玻璃分针将股骨背侧股二头肌和半腰肌拉开，暴露并分离坐骨神经。

用粗剪刀剪下一小段与坐骨神经相连的脊住，将此脊柱轻轻提起，逐一剪去坐骨神经的分支。

在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用刀将股骨刮干净，然后在股骨中部剪断，去上段，保留与膝关节相连的一段股骨备用。