叶绿素提取实验
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一、实验目的1. 学习叶绿素的提取方法,掌握叶绿素提取纯化的基本原理和操作步骤。
2. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用,以及叶绿素提取纯化在科研、食品、医药等领域的应用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,存在于叶绿体的类囊体薄膜上。
叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b,两者结构相似,仅分子中的镁离子被铁离子取代。
叶绿素提取纯化主要通过以下步骤:1. 提取:利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)溶解叶绿素,使叶绿素从植物组织中分离出来。
2. 离心:通过离心分离叶绿素提取液中的杂质,得到较纯的叶绿素。
3. 分离:采用层析技术(如纸层析、薄层层析等)将叶绿素与其他色素分离。
4. 纯化:通过重结晶、吸附等方法进一步纯化叶绿素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、滤纸、层析板、滤液、层析溶剂等。
2. 实验仪器:研钵、剪刀、离心机、层析缸、紫外灯、比色计等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取(1)取新鲜菠菜叶片,洗净、擦干,去掉中脉剪碎。
(2)将剪碎的菠菜叶片放入研钵中,加入少量碳酸钙粉和丙酮,研磨至糊状。
(3)将研磨后的混合物转入离心管中,以3000r/min离心5分钟,取上清液。
2. 离心分离(1)将离心后的上清液转入另一离心管中,以4000r/min离心10分钟。
(2)取上清液,即为叶绿素提取液。
3. 叶绿素分离(1)取层析板,用铅笔标记起始线。
(2)用毛细管将叶绿素提取液点在起始线上,重复点样2-3次,待溶剂挥发后,再点样。
(3)将层析板放入层析缸中,加入适量层析溶剂,使溶剂面低于起始线。
(4)待层析溶剂上行至距离起始线约1cm时,取出层析板,晾干。
(5)用紫外灯照射层析板,观察叶绿素a和叶绿素b的分离情况。
4. 叶绿素纯化(1)将分离出的叶绿素a和叶绿素b分别用无水乙醇溶解。
(2)将溶液置于冰浴中,缓慢加入无水乙醇,使叶绿素沉淀。
(3)过滤沉淀,用无水乙醇洗涤沉淀,晾干。
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。
(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。
(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。
(5)过滤,得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。
(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。
(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。
(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。
(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。
(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。
(3)用滤纸过滤,收集滤液。
(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。
(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
提取叶绿素的实验报告探究叶绿素在光合作用中的重要性和功能。
实验材料:1. 叶绿体提取液:通过离心植物组织获得的液体。
2. 植物叶片:新鲜且健康的绿色植物叶片。
3. 75% 乙醇:用于提取叶绿素的有机溶剂。
4. 富含二氧化碳的水:提供光合作用所需的二氧化碳。
5. 无色试剂:用于检测叶绿素的存在。
实验步骤:1. 准备:将乙醇和富含二氧化碳的水分别倒入两个玻璃瓶中,并为每个瓶子准备一片植物叶片。
2. 反应前处理:将一片植物叶片放入乙醇玻璃瓶中,摇晃约1分钟,待叶绿素溶解入乙醇,使叶绿素变成绿色提取液。
3. 提取叶绿素:将叶绿体提取液缓慢倒入富含二氧化碳的水中,同时观察溶液颜色变化。
4. 观察结果:根据溶液颜色变化,可以得出叶绿素在光合作用中的功能。
实验结果:通过实验观察,溶液从橙黄色逐渐变成绿色,说明叶绿体提取液中的叶绿素受到光的作用后发生了变化。
这表明叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
实验讨论:叶绿素是一种存在于植物和某些浮游生物中的绿色色素,它是光合作用中的关键物质。
通过吸收光能,叶绿素能够将阳光转化为植物可用的化学能。
在光合作用中,叶绿素通过光合色素复合体吸收光能,并将其转化为电子能和激发态能。
这些能量在光合色素复合体中传递,最终用于合成葡萄糖等有机物质并释放出氧气。
实验中,通过将叶绿体提取液与富含二氧化碳的水混合,我们可以观察到溶液颜色的变化。
这一变化表明叶绿素受到光的激发后发生了变化。
光能激发了叶绿素分子中的电子,使其从基态跃迁到激发态。
随后,叶绿素分子中的电子通过光合色素复合体传递,最终用于光合作用的化学反应。
叶绿素的存在使植物能够进行光合作用,从而合成有机物质并释放出氧气。
光合作用是地球上生物圈中最重要的能量转换过程之一,它不仅为植物提供了能量,也为其他生物提供了能量来源。
叶绿素的作用不仅体现在能量转换上,还参与了光合作用的调节和保护等多个方面。
综上所述,叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。
因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。
弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。
装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
叶绿素的提取与分析测定叶绿素的提取与分析测定是一项重要的生物技术实验,主要用于研究植物光合作用中的重要色素——叶绿素。
下面将详细介绍实验的步骤、方法和数据分析。
一、实验目的本实验旨在提取和分析测定叶绿素,了解其在植物光合作用中的重要作用,并为进一步研究植物生长和发育提供基础数据。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,它能够吸收太阳光能,并将其转化为化学能,为植物的生长和发育提供能量。
叶绿素广泛存在于植物的绿色组织中,尤其在叶片中含量最为丰富。
本实验将采用有机溶剂(如乙醇、丙酮等)从植物组织中提取叶绿素。
提取后的叶绿素可通过分光光度法进行定量分析。
三、实验步骤1.样品准备:选取新鲜植物组织(如叶片),用蒸馏水冲洗干净,滤纸吸干表面水分,称取一定质量(m)的样品备用。
2.叶绿素提取:将样品放入研钵中,加入适量有机溶剂(如乙醇-丙酮混合液),研磨成匀浆。
将匀浆转入离心管中,于低温下离心(如4℃、10000 r/min),收集上清液备用。
3.叶绿素定量分析:取一定体积(V)的上清液,加入适量蒸馏水稀释,用分光光度计在663nm和646nm波长下测定吸光度(A)。
根据朗伯-比尔定律,叶绿素的浓度(C)可由吸光度计算得出。
公式如下:C = (11.77A663 -2.59A646) / m / V4.数据记录:记录每个样品在各波长下的吸光度,并计算出叶绿素浓度。
5.数据分析:对所得数据进行统计分析,比较不同样品间的叶绿素含量差异,并绘制柱状图或饼图等图形表示结果。
四、实验结果与数据分析假设我们选取了三种不同植物的叶片进行实验,以下是实验所得的数据:1.三种植物叶片中叶绿素的含量存在差异,其中样品1的叶绿素含量最高,样品3的含量最低。
这可能与不同植物的生物学特性有关。
2.根据所得数据绘制柱状图或饼图等图形,可以直观地展示不同样品间的叶绿素含量差异。
这有助于我们进一步了解植物间的差异以及叶绿素在植物生长和发育中的作用。
叶绿素的提取和分离实验
叶绿素的提取:称取5 g的绿叶,剪碎,放入研钵中→加入少量二氧化硅、碳酸钙和10 mL无水乙醇→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试管口。
准备过滤纸条:将过滤纸条剪成略小于试管长度和直径的过滤纸条,将滤纸条的一端剪去两角,在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
画滤细线:用毛细管吸取少量滤液,并沿铅笔线均匀划出一条细线,待滤液干后再画1~2次。
叶绿素分离:在试管中倒入适量层析液。
得到滤纸上的四种颜色、不同宽度的色素带。
叶绿素提取注意事项:
准备滤纸时,要将滤纸的一端剪去两角,这样可使色素扩散到滤纸上,以便于观察实验结果。
过滤时不用滤纸过滤而用单层尼龙布过滤是因为滤纸对色素具有吸附作用,若用其过滤,会导致收集到的滤液色素含量少,使实验效果不明显或失败。
叶绿素萃取实验报告
一、实验目的
本实验旨在探究不同方法对叶绿素的萃取效果,并比较其差异,为今后更好地利用叶绿素提供参考与借鉴。
二、实验材料与方法
1. 实验材料:
叶绿素样品、丙酮、正己烷、醋酸乙酯、无水乙醇、玻璃研钵、滤纸、离心管等。
2. 实验步骤:
(1)选取新鲜植物叶片,洗净后取下叶片;
(2)将叶片放入研钵中,加入适量丙酮,用搅拌棒研磨均匀;
(3)过滤出研磨液,收集研究液;
(4)将研磨液分别用正己烷、醋酸乙酯、无水乙醇进行提取;
(5)通过实验数据比较,分析三种方法对叶绿素提取率的影响。
三、实验结果与分析
根据实验数据统计和分析,发现使用丙酮提取的叶绿素含量最高,其次是醋酸乙酯,再次是正己烷和无水乙醇。
这表明在叶绿素萃取实验中,丙酮的效果最好,能够较好地提取叶绿素。
同时,我们还得出
了不同方法提取叶绿素的最佳操作条件和步骤,为今后的实验提供了重要参考。
四、结论
通过本次实验,我们深入了解了叶绿素的特性以及不同方法对叶绿素提取的效果。
实验结果显示,丙酮提取效果最好,可为后续实验提供借鉴。
同时,我们也发现了提取叶绿素的最佳操作条件,为今后的研究提供了重要指导。
五、致谢
在此,我们感谢实验中给予我们支持和帮助的老师和同学们,没有他们的帮助,我们无法完成这次实验报告。
(以上为实验报告全文,若需要具体实验数据和结果分析,请参考实验记录和数据表。
)。
实验二、叶绿体色素的提取、分离与性质分析
一、实验目的
•掌握叶绿体色素的提取方法;掌握板层析法分离叶绿体色素的原理和步骤;掌握叶绿体色素的部分理化性质。
二、实验原理
(一)叶绿体色素:
1.叶绿素
叶绿素a:叶绿素b=3:1
2.类胡萝卜素
胡萝卜素:叶黄素=2:1
叶绿素:类胡萝卜素=3:1
(二)叶绿素的光学性质
叶绿素a在663nm有吸收峰;叶绿素b 在645nm有吸收峰。
但在蓝光区也有一个吸收峰。
胡萝卜素和叶黄素的吸收峰是在蓝光区(440nm)。
三、叶绿素含量测定:
1.取新鲜叶片,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉)混匀。
2.称取剪碎的新鲜样品1.0g ,放入研钵中,加少量石英砂及2-3ml (或80%丙酮)研成匀浆,继续研磨至组织变白,静置3-5分。
3.取滤纸1张,置漏斗中,用80%丙酮湿润,沿玻棒把提取液倒人漏斗中,过滤到25ml。
4.用滴管吸取80%丙酮,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。
直至滤纸和残渣中无绿色为止。
最后用80%丙酮定容至25ml,摇匀。
5.把叶绿体色素提取液倒入比色杯内。
以80%丙酮为空白,在波长663nm、645nm下测定吸光度。
6 计算:按下列公式:
Ca(mg/L)=12.7OD663-2.69 OD645
Cb (mg/L) =22.9OD645-4.68 OD663
C总(mg/L) = Ca+ Cb分别计算叶绿素a、b的浓度。
四、光合色素鉴定(板层析)
•支持物:硅胶层析板
•流动相:石油醚:丙酮:(v:v=65:35)
•步骤:1、取板划线
2、点样
3、配展开剂
4、展开
5、前沿到达2/3处时停止,取出凉干并观察各色素带计算Rf值
叶绿素a:蓝绿色;叶绿素b:黄绿色;胡萝卜素:桔黄色
叶黄素:黄色
六:叶绿素前驱物的荧光观察
七、作业
1、计算你的实验中植物叶片中叶绿素的含量。
2.研磨提取叶绿素时,为何要加入CaCO3?
3.画图说明叶绿体色素板层析结果,并解释原因。