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2019-2020年人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离复习特训五十七第1题【单选题】使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A、电荷的多少B、分子的大小C、肽链的多少D、分子形状的差异【答案】：【解析】：第2题【单选题】凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是( )A、糖类化合物B、脂质C、蛋白质D、核酸【答案】：【解析】：第3题【单选题】在破碎鸡血细胞时，要先加入20mL的蒸馏水，其作用是( )A、DNA溶解于水中B、血细胞破裂，释放DNAC、稀释血液，防止凝固D、有利于搅拌【答案】：【解析】：第4题【单选题】将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，试管中从上往下数第2层是( )A、甲苯层B、血红蛋白水溶液C、脂溶性物质的沉淀层D、其他杂质的沉淀物【答案】：【解析】：第5题【单选题】下列有关选修实验叙述，正确的是( )A、果胶酶能瓦解植物细胞壁及胞间层，能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸B、提取β胡萝卜素实验中，为提高萃取效率，可采用酒精灯直接加热的方法C、血红蛋白提取和分离的纯化过程中，要用缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液D、用胡罗卜离体组织在一定条件下培育，获得的试管苗可能是杂合子【答案】：【解析】：第6题【单选题】已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述正确的是( )A、将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内B、若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C、若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D、若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则甲和戊形成的电泳带相距最远，因为它们电荷量差异最大【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述不正确的是( )A、样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B、通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C、可通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂质蛋白除去，即样品的纯化D、可通过SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度【答案】：【解析】：第8题【单选题】下列与实验有关的叙述不正确的是( )A、蛋白质鉴定时，向豆浆中先加入氢氧化钠溶液，再滴入硫酸铜溶液，并水浴加热B、用鸡血细胞提取DNA时，先去除血浆再加蒸馏水，有利于细胞快速破裂C、用适宜浓度的硝酸钾溶液处理成熟的植物细胞可观察质壁分离和自动复原现象D、提取绿叶中的色素时，叶片的研磨应迅速充分【答案】：【解析】：第9题【单选题】可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有( )A、分离各种细胞器B、DNA的粗提取C、分离并纯化血红蛋白D、进行细胞培养【答案】：【解析】：第10题【单选题】下图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质，在凝胶中的行进过程的是( ) A、B、C、D、【答案】：【解析】：第11题【单选题】下列叙述中错误的是( )A、改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B、在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C、用电泳法可分离带点性质、分子大小和形状不同的蛋白质D、用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质【答案】：【解析】：第12题【实验探究题】红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2 ，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
课后集训基础达标1.凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是……（）A.糖类化合物B.脂质C.蛋白质D.核酸解析：凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些微小的球体，大多是由多糖类化合物构成的。
答案：A2.分离血红蛋白溶液时，离心后试管中的溶液分四层，血红蛋白在第_______层（）A.一B.二C.三D.四解析：离心后的第一层是有机溶剂，第二层是脂类物质，第三层是血红蛋白，第四层是红细胞破碎物。
答案：C3.凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（）A.对其他分子的亲和力B.溶解度C.所带电荷多少D.相对分子质量的大小解析：凝胶色谱法分离蛋白质的依据是相对分子质量的大小。
相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程长，移动慢。
答案：D4.血红蛋白由条肽链组成（）A.2B.4C.3D.5解析：血红蛋白由四条肽链组成，即两条α肽链和两条β肽链。
答案：B5.将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是…（）A.无色透明的甲苯层B.脂溶性物质的沉淀层C.血红蛋白的水溶液D.其他杂质的暗红色沉淀物解析：试管中的第一层是有机溶剂，第二层是脂类物质，第三层是血红蛋白溶液，第四层是红细胞破碎物沉淀。
答案：C6. 的蛋白质能进入凝胶内部通道…（）A.相对分子质量大的B.吸附性高的C.相对分子质量小的D.溶解度低的解析：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道。
答案：C7.透析时取血红蛋白溶液装入透析袋内，放入缓冲溶液中（）A.2 mLB.1.5 mLC.0.5 mLD.1 mL解析：考查样品处理的操作。
透析时，取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中。
答案：D8.洗涤红细胞时，分离所用方法为（）A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析：洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化，分离时采取低速短时间离心。
专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离课下提能一、选择题1．(2019·平遥期中)下列关于电泳技术分离蛋白质原理的叙述，正确的是()A．蛋白质中含有游离的氨基，是碱性电解质B．蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质C．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动[解析]选D氨基酸既有氨基也有羧基，是中性电解质，A、B错误；蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，C错误、D正确。
2．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为()[解析]选B用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量较大的蛋白质容易通过凝胶间隙，先被洗脱出来；相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部，后被洗脱出来。
3．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是() A．防止血红蛋白被氧气氧化B．血红蛋白是一种碱性物质，需磷酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能不变[解析]选D磷酸缓冲液的作用是稳定pH，从而维持血红蛋白的结构和功能不变。
4．蛋白质的各种特性的差异，可以作为分离不同种类的蛋白质的依据。
下列可作为分离依据的是()A．分子的形状、大小和溶解度B．所带电荷的性质和多少、吸附性质C．对其他分子的亲和力D．以上三项都是[解析]选D利用蛋白质的各种特性，可以采用不同的方法对蛋白质进行分离和提取。
如蛋白质分子的形状和大小、在不同溶剂中的溶解度、所带电荷的性质和多少、吸附性质以及对其他分子的亲和力等，都可作为分离依据。
5．下面是血红蛋白提取和分离实验中对样品的处理措施，不正确的是() A．采集血样后要高速短时间离心获得血细胞B．洗涤三次后如上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则血浆蛋白无法除净C．在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白D．释放血红蛋白后再经过离心，就可以使血红蛋白和其他杂质分离开来[解析]选A采集血样后要低速短时间离心获得血细胞，否则会使淋巴细胞、血小板等混杂在红细胞中。
人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题一、单选题1. 蛋白质提取过程中有关透析的叙述，错误的是A．用于透析的薄膜要具有选择透过性B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液2. 在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是（）A．调节pH B．维持红细胞的能量供应C．防止微生物生长D．防止血液凝固3. 凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶（Sephadex G75）,其中G、75的含义分别是（）A．G表示凝胶的使用量,75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度,75表示需加热至75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶及膨胀时吸水7.5 gD．G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm34.用某种药物饲养动物一段时间，测得实验组比对照组动物血浆中血红蛋白含量明显偏高。
该药物的作用最可能是A ．增加血红蛋白的合成能力C ．对红细胞有破坏作用5. 血红蛋白由____________个肽链组成（ ）A ．2B ．4C ．3D ．56. 分离血红蛋白溶液时,离心后试管中的溶液分四层,血红蛋白在第__________层（ ）A ．一B ．二C ．三D ．四7. 洗涤红细胞时，离心所采用的方法是A ．低速长时间离心B ．低速短时间离心C ．高速长时间离心D ．高速短时间离心8. SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS 的作用是A ．增大蛋白质的相对分子质量B ．改变蛋白质的形状C ．掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D ．减少蛋白质的相对分子质量9. 随着人类跨入蛋白质组时代,对蛋白质的研究和应用越来越深入,首先要做的一步是（ ）A ．弄清各种蛋白质的空间结构B ．弄清各种蛋白质的功能C ．弄清各种蛋白质的合成过程D ．获得高纯度的蛋白质10. 制作凝胶色谱柱时,橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是（ ）A ．移液管头部5 cmB ．移液管尾部5 cmC ．移液管头部3 cmD ．移液管尾部3 cmD ．增加红细胞的合成数量B ．提高血浆蛋白的含量二、非选择题11. 蛋白质的各种特性的差异,可以用来分离不同种类的蛋白质,下列对这种特性的描述中正确的一项是……（ ）A ．分子的形状、大小和溶解度B ．所带电荷的性质和多少、吸附性质C ．对其他分子的亲和力D ．以上三项都是12. 使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）A ．电荷的多少B ．分子的大小C ．肽链的多少D ．分子形状的差异13. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是（ ）A ．相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B ．相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C ．相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D ．二者根本无法比较14. 蛋白质的提取和分离一般分为四步,符合要求的一项为（ ）A ．粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B ．粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C ．样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D ．纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理15. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是 A ．对其他分子的亲和力C ．所带电荷多少D ．相对分子质量的大小B ．溶解度（）入烧杯,加入五倍体积的__________缓慢搅拌__________min,低速短时间离心,重复洗涤__________次,至上清液中无__________，则表明红细胞洗16.采集血样后,及时分离红细胞。
2019-2020学年人教版选修一专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离作业[基础全练]1．分离不同种类的蛋白质依据的原理不包括()A．分子的形状和大小B．所带电荷的性质和多少、吸附性质C．对其他分子的亲和力D．蛋白质分子的组成元素解析：根据分离蛋白质的方法可以知道，分离不同种类的蛋白质依据的原理包括分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、吸附性质、对其他分子的亲和力和蛋白质分子的溶解度等。
蛋白质分子的组成元素不是分离不同蛋白质的依据。
答案：D2．如图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程的是()解析：相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，故B正确。
答案：B3．凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是() A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C．将酶或细胞固定在凝胶中D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度解析：凝胶的种类较多，但每种凝胶内部都有孔隙。
当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质分子可以进入凝胶内部，通过的路程较长，洗脱时从凝胶柱中出来得较晚；相对分子质量较大的蛋白质分子则可以较早地洗脱出来，从而达到分离蛋白质的目的。
答案：A4．下列有关凝胶色谱操作的叙述，不正确的是()A．干的凝胶要用蒸馏水充分溶胀后，才能装填B．在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生C．在装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管先打开后关闭D．在样品洗脱过程中，不能让洗脱液流干解析：在装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管应始终打开，C错误。
答案：C5．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是() A．前者选择鸡血细胞作为实验材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物即止D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析：鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适用于提取血红蛋白。
2019-2020年高中生物人教版选修1教学案：专题五课题3 血红蛋白的提取和分离(含答案)1．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，相对分子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。
2．在电泳中，待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。
3．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。
4．蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理及粗分离、纯化和纯度鉴定。
5．透析法可除去相对分子质量较小的杂质。
6．在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
一、蛋白质分离的原理和方法1.分离原理依据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。
2.凝胶色谱法(1)概念：也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
(2)凝胶：微小的多孔球体，大多数由多糖类化合物构成，内部有许多贯穿的通道。
(3)原理：[填表]蛋白质类型能否进入凝胶内部移动路程移动速度相对分子质量较小能较长较慢相对分子质量较大不能较短较快3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，抑制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
(2)配制：由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
4．电泳(1)概念：指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
(2)原理：①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
④方法：常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
二、血红蛋白提取和分离的实验操作[填图]1．凝胶色谱法中移动速度快的是()A．相对分子质量大的B．相对分子质量小的C．溶解度高的D．溶解度低的解析：选A凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。
一、单选题【优选整合】人教版高中生物选修1专题5课题3血红蛋白的提取和分离（练）（教师版）1. 在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是A ．防止血红蛋白被氧化B ．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C ．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D ．让血红蛋白处在稳定的pH 范围内，维持其结构和功能2. 下列关于蛋白质的纯化方法的叙述，错误的是A ．纯化主要是根据蛋白质以及蛋白质与其他物质之间的理化性质的差异进行的B ．透析法可去除小分子化合物杂质，原理是不同分子所携带净电荷不同C ．通过控制离心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层，从而分离不同的蛋白质D ．不同的物质在同一电场中的移动速度不同，因此可用电泳法分离蛋白质D ．可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定C ．粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质B ．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液A ．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定处理的叙述，错误的是（）红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
下列对血红蛋白提取和分离3.4. 下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤，其中正确的是（）A．蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B．蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C．对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D．对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳5. 从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大，其原因不是（）A．蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活B．蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法C．提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D．提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步6. 下列操作正确的是（）A．分离红细胞时采用低速长时间离心B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液，透析12h7. 下列关于电泳的说法中，正确的是（）A．电泳是指不带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程B．电泳的过程要在一定的pH下，所以一定要使用缓冲液C．葡聚糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法D．聚丙烯酰胺凝胶电泳中，溶液中加入十二烷基硫酸钠(SDS)，电泳的迁移率主要取决于分子所带电荷的多少和相对分子质量的大小8.下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷电性相同的电极方向移动9. 下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A．②④B．①④C．④⑤D．①③10. 镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。
2019-2020学年高中生物阶段质量检测（五) 新人教版选修1专题5 DNA和蛋白质技术](满分：100分时间：40分钟)一、选择题(每小题4分，共48分)1．在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是( )A．分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆B．红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液解析：分离红细胞时要及时除去血浆蛋白，红细胞释放血红蛋白时需要加入蒸馏水和甲苯。
分离血细胞时，要短时低速离心，即一般为500 r/min，离心2 min，否则白细胞会一同沉淀，达不到分离效果。
分离血红蛋白时要高速长时间离心，以2 000 r/min的速度离心10 min。
洗脱时待红色的蛋白质接近色谱柱底端时用试管收集流出液。
答案：A2．下列属于PCR技术条件的是( )①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦DNA限制性内切酶A．①②③⑤B．①②③⑥C．①②③⑤⑦D．①②④⑤⑦解析：PCR技术需要DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶。
答案：B3．下列有关PCR的描述不．正确的是( )A．是一种酶促反应B．引物决定了扩增的特异性C．PCR反应中的目的片段一般以2n的方式积累(假设扩增效率为100%)D．扩增对象是氨基酸序列解析：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。
答案：D4．在使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为( )解析：蛋白质相对分子质量越大，越容易通过凝胶间隙而先被洗脱出来，蛋白质相对分子质量越小越易进入凝胶内部而后被洗脱出来。
主动成长夯基达标1.凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是（A.糖类化合物B.C.蛋白质D.核酸解析：凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些微小的球体，大多是由多糖类化合物构成的。
答案：A2.分离血红蛋白溶液时，离心后试管中的溶液分四层，血红蛋白在第层（A.一B.C.三D.四解析：答案：C3.凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（A. B. C. D.相对分子质量的大小解析：凝胶色谱法分离蛋白质的依据是相对分子质量的大小。
相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内答案：D4.血红蛋白由条肽链组成（A.2B.4C.3D.5解析：血红蛋白由四条肽链组成，即两条α肽链和两条β答案：B5.将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（）A. B.C. D.其他杂质的暗红色沉淀物解析：试管中的第一层是有机溶剂，第二层是脂类物质，第三层是血红蛋白溶液，第四层是红细胞破碎物答案：C6. 的蛋白质能进入凝胶内部通道（A相对分子质量大的 B.C.相对分子质量小的D.溶解度低的解析：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道。
答案：C7.透析时取血红蛋白溶液装入透析袋内，放入缓冲溶液中（A.2 mLB.1.5 mLC.0.5 mLD.1mL解析：考查样品处理的操作。
透析时，取1 mL答案：D8.洗涤红细胞时，分离所用方法为（A.低速长时间离心B.C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析：答案：B9.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是（A. B.C. D.减少蛋白质的相对分子质量解析：SDS（十二烷基硫酸钠）—聚丙烯酰胺凝胶电泳法加入SDS的目的是使蛋白质完全变性，SDS所带负答案：C10.制作凝胶色谱柱时，橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是（A.移液管头部5 cmB.移液管尾部 5 cmC.移液管头部 3 cmD.移液管尾部 3 cm解析：凝胶色谱柱制作时，将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴，将0.5 mL的移液管头部切下5 cm长的答案：A11.对血红蛋白的研究结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子（Fe2+）所组成的结合蛋白质。
专题5检测（时间:60分钟，满分:100分）一、选择题（每小题2分，共40分）J 1关于DNA的实验，叙述正确的是（）A. 用兔的成熟红细胞可提取DNAB. PCR的每个循环一般依次经过变性、延伸、复性三步C. DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物D. 用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色解析:兔是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，故不能用兔的成熟红细胞作为提取DNA的实验材料，A项错误;PCR技术的每个循环一般经过变性、复性、延伸三步，B项错误;DNA与二苯胺试剂在沸水浴下生成蓝色产物，C项正确;用甲基绿和吡罗红的混合液对人的口腔上皮细胞染色时，细胞核呈绿色，细胞质呈红色，D项错误。
答案:C匕2下列有关DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）A. 去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入酒精反应10~15 minB. 在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成紫色C. 析出DNA时用玻璃棒轻缓搅拌，可提高DNA的提取量D. DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强解析:去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入嫩肉粉（含蛋白酶）反应10~15 min;在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺后呈现蓝色；析出DNA时用玻璃棒轻缓搅拌，不能提高DNA的提取量，而是为了保持DNA分子的完整性；大多数蛋白质不能忍受60~80 C的高温，而DNA在80 C 以上才会变性。
答案:DJ3下列细胞中含有染色体的是（）A. 大肠杆菌B. 人的成熟红细胞C. 鸡的红细胞D. 猪的成熟红细胞解析:只有真核生物的细胞（有细胞核）才含有染色体，而大肠杆菌是原核生物，不含染色体；哺乳动物如人和猪，成熟的红细胞没有细胞核，所以也没有染色体。
鸡属于鸟类，其红细胞中有染色体。
故在做DNA粗提取实验时，常用鸡血细胞。
答案:CJ 4下列有关DNA提取与鉴定实验的叙述，错误的是（）A. 选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难B. 要尽可能使细胞内的DNA全部溶解C. 根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与杂质分开D. 获取DNA后进行鉴定，放入斐林试剂水浴加热，溶液呈现蓝色解析：DNA鉴定用二苯胺试剂而不是斐林试剂。
课题3血红蛋白的提取和分离理一理判一判1.凝胶色谱法和电泳法分别利用了蛋白质的相对分子质量的大小和所带电荷性质的不同，实现了对蛋白质的分离。
(√) 2．相对分子质量大的蛋白质会被排阻在凝胶颗粒之外而不能通过凝胶。
(×)3．缓冲溶液可以抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响。
(√) 4．电泳过程中蛋白质的运动速率只与带电性质有关。
(×)5．测定蛋白质相对分子质量时常用琼脂糖凝胶电泳。
(×)6．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率仅与其电荷多少有关。
(×)7．添加了SDS后的蛋白质电泳结果只跟蛋白质的分子量有关。
(√)8．血红蛋白存在于血浆中，是内环境的组成部分。
(×)9．洗涤红细胞和血红蛋白的释放所用的液体分别是生理盐水和蒸馏水。
(√)10．装填色谱柱时要先把凝胶物质填充进去，而后立即用高压缓冲液洗涤以使凝胶紧密。
(√)悟一悟1.在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，影响分离效果。
2．在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。
一旦发生上述两种情况，凝胶色谱柱需要重新装填。
3．小心加入磷酸缓冲液到适当高度后，再连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱，不能边加缓冲液边洗脱，这样会扰乱洗脱顺序。
4．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，再用试管收集流出液．此时收集到的才是纯度较高的血红蛋白溶液。
收集时间不要过早或过晚，若收集时间过早，血红蛋白还未洗脱出，若收集时间过晚，则血红蛋白早已经洗脱出，得不到血红蛋白。
感悟体会：练一练1.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示。
下列叙述正确的是()A．将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子甲也一定存在于沉淀中B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内D．若五种物质为蛋白质，用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远解析：分子戊分子量大于甲，以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子甲不存在于沉淀中，A项错误。
丙的分子量最大，用凝胶色谱柱分离时，丙的移动速度最快，B项错误。
透析12 h，由于甲分子量较小，若分子乙保留在袋内，则分子甲不保留在袋内，C项错误。
分子甲和分子丙相差最大，移动速度相差最大，D项正确。
答案：D2．已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的蛋白质析出(或沉淀)，随着硫酸铵浓度增加，混合液中蛋白质析出的种类和总量增加。
下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开(1)若只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度应为________。
(2)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使混合液中的硫酸铵浓度达到30%，会析出若干种蛋白质，它们分别是________________________。
(3)通过改变混合液中硫酸铵的浓度________(能、不能)从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白，原因是________________________________________________________ ________________。
(4)简要写出从该蛋白质混合液中分离出全部丁蛋白的实验设计思路。
____________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ____________________。
(5)如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵，可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。
用半透膜能除去析出物中硫酸铵的原理是________________________________________________________。
解析：(1)从析出到完全析出甲蛋白质所需要的硫酸铵浓度范围为15%～20%，故只完全析出甲蛋白时，混合液中的硫酸铵的浓度最好为20%。
(2)从开始析出到完全析出乙的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围为23%～30%，从开始析出到完全析出丙蛋白混合液中的硫酸铵浓度范围为25%～35%，故混合液中的硫酸铵浓度达到30%时，可以同时析出乙蛋白和丙蛋白。
(3)由于乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠，故通过改变混合液中硫酸铵的浓度不能从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白。
(4)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使其浓度达到35%(或35%≤硫酸铵溶液≤38%范围内任意一个浓度)，分离析出物与溶液，保留溶液。
取保留溶液，再加入硫酸铵溶液(或加入硫酸铵)，使硫酸铵在溶液中的浓度达到40%(或40%以上)，分离析出物与溶液，析出物即为丁蛋白。
(5)半透膜是一种选择透过性膜，只允许小分子的硫酸铵通过，不允许大分子蛋白质通过，故可以用半透膜除去析出物中的硫酸铵。
答案：(1)20%(2)甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白(3)不能乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠(4) 向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使其浓度达到35%(或35%≤硫酸铵溶液≤38%范围内任意一个浓度)，分离析出物与溶液，保留溶液。
取保留溶液，再加入硫酸铵溶液(或加入硫酸铵)，使硫酸铵在溶液中的浓度达到40%(或40%以上)，分离析出物与溶液，析出物即为丁蛋白(5)半透膜是一种选择透过性膜，只允许小分子的硫酸铵通过，不允许大分子蛋白质通过考点1 实验原理1.[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是()①相对分子质量最大的②相对分子质量最小的③相对分子质量适中的A．①②③B．③②①C．①③②D．②①③解析：当不同相对分子质量的蛋白质通过凝胶柱时，分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长移动的速度慢，洗脱出来的时间最长，而分子量大的蛋白质分子不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，最先洗脱出来，时间最短，相对分子质量适中的蛋白质洗脱出来的时间介于中间，故蛋白质洗脱顺序是①③②，C项正确。
答案：C2．[2019·山西高二期中]在血红蛋白的分离过程中，使用缓冲液的作用是()A．维持溶液浓度B．维持溶液酸碱度不变C．催化蛋白质分离过程顺利完成D．无实际意义解析：分离蛋白质时加入缓冲液，其原因是缓冲液在一定范围内能抵制外界酸和碱对反应溶液pH的影响，保持pH基本不变，故选B项。
答案：B3．[2019·全国高二课时练习]蛋白质的各种特性的差异，可以用来分离不同种类的蛋白质，下列对这种特性的描述中，正确的一项是()A．分子的形状、大小和溶解度B．所带电荷的性质和多少、吸附性质C．对其他分子的亲和力D．以上三项都是解析：蛋白质的形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等的千差万别，据此可提取和分离各种蛋白质。
答案：D考点2 实验操作4.[2019·全国高二课时练习]制作凝胶色谱柱时，橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是()A．移液管头部5 cm B．移液管尾部5 cmC．移液管头部3 cm D．移液管尾部3 cm解析：凝胶柱色谱也称为凝胶过滤色谱，它主要是利用凝胶网状结构的分子筛作用，根据被分离物分子大小不同进行分离。
凝胶柱色谱的支持物是多孔凝胶，当不同分子流经凝胶色谱柱时，每个分子不仅是向下移动，而且还在做无定向的扩散运动。
分子直径比凝胶孔径大的蛋白质分子，不能进入凝胶颗粒的微孔，只能通过凝胶颗粒之间的空隙，这样的分子是随溶剂一起移动而分子直径比凝胶孔径小的蛋白质分子，能够自由进入凝胶颗粒的微孔，故此最先流出柱外。
答案：A5．[2019·广西桂林十八中高二期中]下列关于蛋白质提取过程中有关透析的叙述，错误的是()A．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的B．用于透析的薄膜要具有选择透过性C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液解析：透析膜一般是用硝酸纤维素制成，是一种半透膜，而不是选择透过性膜，A项正确、B项错误；透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内，可用于更换样品的缓冲液，C项、D项正确。
答案：B6．[2019·广西桂林十八中高二期中]下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中的关键步骤，其中正确的是()A．蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B．蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C．对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳D．对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等解析：蛋白质的提取和分离过程中，应先进行样品处理再进行粗分离，A项错误；蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白，一般不要蛙等动物血液为材料分离血红蛋白，B项错误；对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，C项正确。
对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析，D项错误。
答案：C7．[2019·全国高二课时练习]下列关于样品的加入和洗脱的操作等说法中，不正确的是()A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B．用吸管小心的将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面C．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内D．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口解析：加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐(而不是下面)，关闭出口。
用吸管小心的将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，注意不要破坏凝胶面。
加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内。
等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。
答案：A8.[2019·安徽高考模拟]蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定，每一种蛋白质的分离纯化方法因其来源和性质的不同会有很大差异。
请回答下列有关提取和分离血红蛋白的问题：(1)在样品处理过程中，首先要洗涤红细胞，其目的是________________________，以利于后续步骤的分离纯化。
