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第二十一章临床免疫检验的质量保证第一节概述1.质量保证为一产品或服务满足特定的质量要求提供充分可信性所要求的有计划的和系统的措施。
2.室内质量控制由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，并确定当批的测定结果是否可靠，可否发出检验报告。
3.室间质量评价为客观地比较某一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构，采取一定的方法，连续、客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。
4.准确度（accuracy）待测物的测定值与其真值的一致性程度。
准确度不能直接以数值表示，通常以不准确度来间接衡量。
对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不准确度。
5.偏倚（bias）待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。
偏倚又分批内偏倚和批间偏倚，批内偏倚反映的是该批测定的系统误差，如校准不准、非特异显色等。
批间偏倚所反映的问题要更大一些，如试剂或校准物变质所致的误差。
6.精密度（precision）在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。
与准确度一样，精密度同样也是以不精密度来间接表示。
测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和（或）变异系数（CV）具体表示。
SD或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。
7.重复性条件（repeatability conditions）是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。
8.批（run）在相同条件下所获得的一组测定。
9.均值（mean）一组测定值中所有值的平均值，亦称均数。
均值为计算值，在实际测定数据中可能会出现该数值，也可能没有。
10.标准差（standard deviation，SD或s）为表示一组测定数据的分布情况，即离散度，可用标准差来表示。
第一讲概述血液标本的采集、处理和血涂片的制备和细胞染色本讲主要内容讲数组目要点要求第一讲：概述第一部分：绪论临床检验、卫生技术职务考试的简介了解第二部分：血液标本的采集、处理1.血液生理概要、血液组成和生理功能、理化性质和特性掌握2.采血方法掌握3.抗凝剂选择掌握4.血涂片制备熟练掌握5.血液细胞染色掌握6.方法学评价了解内容讲解第一部分概述一、临床检验医学通过实验室技术和方法获取人体的信息，从而为临床疾病的诊断和治疗等服务的学科。
二、临床检验医学的应用1、诊断（确诊、辅助诊断、鉴别诊断）2、治疗（治疗方案、疗效观察、预后判断）3、预防4、科研三、临床基础检验学学科发展特点四、如何看待检验结果 1、了解实验前的影响因素空腹、采集时间、体位、运动、药物干扰、采血、标本采集和保存 2、能分析检验报告 1）参考范围与决定水平 2）如何分析检验报告标本是否合格，实验数据是否可靠，干扰因素，潜在疾病 五、如何实施全面质量管理严格执行室内质控，必须参与室间质控。
务必保证检测标本的生理性、完整性和样品代表性。
1.标本采集原则(质和量的恒定）2.避免非疾病因素影响：生理差异、饮食因素、药物因素。
第二部分 血液标本的采集、处理和血涂片的制备、细胞染色一血液生理概要 （一）血液组成（二）理化性质血液的理化性质血量指存在于血液循环系统中全部血液的总量，相当于血浆量与血细胞量的总和。
正常人血量约为70±10ml／kg体重，成人约4～5L，约占体重的6％～8％，其中血浆占55％，血细胞占45％。
小儿血量与体重之比略高于成人，男性比女性血量稍多，但女性妊娠期间血量可增加23％～25％。
颜色血液的红色来自红细胞内血红蛋白。
动脉血氧合血红蛋白含量较高，呈鲜红色；静脉血还原血红蛋白含量高，呈暗红色。
严重贫血者血液红色变浅。
严重CO中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色。
餐后，尤其是高脂膳食后，血浆呈乳白色。
溶血患者血浆呈红色。
临床医学检验基础知识讲座精品ppt课件目录•临床医学检验概述•样本采集与处理•常规生化分析项目介绍•免疫学检查项目介绍•微生物学检查项目介绍•血液学检查项目介绍01临床医学检验概述检验医学定义与重要性是临床医学的重要组成部分，为临床医生提供诊断、治疗、预防及健康评估的依据。
检验医学重要性检验医学定义：通过实验室技术和方法，对人体各种标本进行检测分析，为临床诊断和治疗提供客观依据的医学科学。
在疾病的早期发现、诊断、治疗及预后评估中发挥重要作用。
对于提高医疗质量、保障人民健康具有重要意义。
近代检验医学随着显微镜的发明和细菌学的建立，医学检验开始进入实验室阶段。
古代检验医学以经验医学为主，通过观察、闻味、尝味等方式进行疾病诊断。
现代检验医学随着生物化学、免疫学、分子生物学等学科的飞速发展，临床医学检验技术不断更新和完善，检验项目日益增多，检验精度和准确性不断提高。
临床医学检验发展历程自动化与智能化技术分子生物学技术免疫学技术生化分析技术现代临床医学检验技术进展自动化流水线作业、人工智能辅助诊断等技术的应用，提高了检验效率和准确性。
免疫荧光、免疫印迹等技术的应用，提高了自身免疫性疾病等疾病的诊断水平。
基因测序、蛋白质组学等技术的应用，为疾病的早期诊断和治疗提供了更多依据。
色谱分析、质谱分析等技术的应用，为代谢性疾病等疾病的诊断和治疗提供了更多手段。
02样本采集与处理选择合适的采血部位和采血针。
避免在输液同侧肢体或中心静脉管道处采血。
采集后轻轻颠倒混匀，避免剧烈震荡。
采集方法：静脉采血、毛细血管采血、动脉采血等。
注意事项严格无菌操作，防止污染。
01040205030601采集方法：自然排尿、导尿、膀胱穿刺等。
02注意事项03尽量采集清晨第一次尿，保证尿液在膀胱内停留6~8小时。
04采集前避免剧烈运动，减少尿液中生理性或功能性物质的排出。
05女性患者应避开月经期，防止阴道分泌物混入。
06保持尿道口清洁，避免污染。
临床检验基础知识课件CONTENTS •临床检验概述•临床检验常用技术•血液学检验•尿液学检验•粪便学检验•体液与分泌物检验临床检验概述01临床检验的定义与目的定义临床检验是指通过物理、化学和生物学等手段，对人体血液、体液、分泌物等样本进行检测和分析，以获取人体健康状况和疾病诊断信息的一门科学。
目的临床检验的目的是为疾病的预防、诊断和治疗提供准确、可靠的实验数据，帮助医生评估患者健康状况，制定治疗方案，监测治疗效果及预后。
临床检验的发展历程手工操作阶段早期的临床检验主要依赖手工操作，使用简单的化学试剂和比色法等方法进行检测，操作繁琐，误差较大。
半自动化阶段随着科技的发展，临床检验逐渐实现了半自动化，引入了分光光度计、离心机等设备，提高了检测效率和准确性。
自动化阶段近年来，随着全自动生化分析仪、免疫分析仪等设备的广泛应用，临床检验已经实现了高度自动化，大大提高了检测速度和精度。
临床检验的分类与特点分类临床检验可分为常规检验、生化检验、免疫检验、微生物检验等多个领域，每个领域都有其特定的检测项目和方法。
特点临床检验具有样本多样性、检测项目繁多、操作规范性强、结果准确性高等特点。
同时，临床检验也需要与临床医学紧密结合，为疾病的诊断和治疗提供及时、准确的信息。
临床检验常用技术02显微镜技术光学显微镜用于观察细胞、细菌等微生物的形态和结构。
电子显微镜分辨率更高，可观察更细微的结构，如病毒、细胞器等。
荧光显微镜利用荧光物质标记特定结构，便于观察和研究。
相差显微镜利用光的干涉原理，观察未染色标本的细微结构。
利用抗原与抗体的特异性结合，进行定性或定量检测。
抗原抗体反应将荧光素标记在抗体上，与抗原结合后，在荧光显微镜下观察。
免疫荧光技术将酶标记在抗体上，通过酶与底物的显色反应，检测抗原或抗体。
酶联免疫吸附试验（ELISA ）利用放射性同位素标记的抗原或抗体进行超微量测定。
放射免疫技术免疫学技术生化分析技术光谱分析利用物质对光的吸收、发射等性质进行定性或定量分析。
第二十一章临床免疫检验的质量保证第一节概述一、定义1.质量保证（QA）：为一产品或服务满足特定的质量要求提供充分可信性所要求的有计划的和系统的措施。
2.室内质量控制（IQC）：由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，并确定当批的测定结果是否可靠，可否发出检验报告。
3.室间质量评价（EQA）：采取一定的方法，连续、客观地评价实验室测定结果与靶值的差异，发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。
这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用来决定实时的测定结果的可接受性。
当EQA用来为实验室执业许可或实验室认证的目的而评价实验室操作时，常描述为实验室能力验证（PT）。
4.准确度：待测物的测定值与其真值的一致性程度。
准确度不以数值表示，通常以不准确度来间接衡量。
对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不准确度。
5.偏倚：待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。
偏倚又分批内偏倚和批间偏倚，批内偏倚反映的是系统误差，如校准不准、非特异显色等。
批间偏倚问题要更大，如试剂或校准物变质所致的误差。
6.精密度：在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。
以不精密度来间接表示。
测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和（或）变异系数（CV）具体表示。
SD或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。
准确度好的实验，其精密度不一定好；准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。
7.重复性条件：是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。
8.批：在相同条件下所获得的一组测定。
9.均值：一组测定值中所有值的平均值，亦称均数。
均值为计算值，在实际测定数据中可能会出现该数值，也可能没有。
脑脊液检验
要点1：
标本采集与处理
1.检查时机
脑脊液穿刺的时机与疾病有关，化脓性脑膜炎于发病后1～2d、病毒性脑膜炎于发病后3～5d、结核性脑膜炎于发病后1～3周、疱疹性脑膜炎于流行性感冒前驱症状期开始后5～7d穿刺采集标本。
2.标本采集
腰椎穿刺成功后立即测定脑脊液压力，然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个试管1～2ml。
第一管作病原生物学检验，第二管作化学和免疫学检验，第三管作理学和细胞学检验。
标本采集后应立即送检，并于1h内检验完毕。
标本放置过久，可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等，影响检验结果；标本应尽量避免凝固或混入血液，若混入血液应注明。
要点2：
理学检查
1.颜色
正常脑脊液无色透明，新生儿胆红素较多可呈黄色。
当中枢神经系统有炎症、损伤、肿瘤或梗阻时，破坏了血-脑脊液屏障，使脑脊液成分发生改变，而导致其颜色发生变化。
脑脊液呈黄色称为黄变症。
2.透明度
正常脑脊液清晰透明。
脑脊液的透明度与其所含的细胞数量和细菌多少有关，当脑脊液白细胞超过300×106/L时，可呈浑浊；脑脊液中蛋白质明显增高或含有大量细菌、真菌时，也可使脑脊液浑浊。
结核性脑膜炎的脑脊液可呈毛玻璃样的浑浊，化脓性脑膜炎的脑脊液呈脓性或块样浑浊，穿刺损伤性脑脊液可呈轻微的红色浑浊。
3.凝固性
正常脑脊液放置12～24h后不会形成薄膜、凝块或沉淀。
脑脊液形成凝块或薄膜与其所含的蛋白质，特别是与纤维蛋白原的含量有关，当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时，可出现薄膜、凝块或沉淀。
化脓性脑膜炎的脑脊液在1～2h内呈块状凝固；结核性脑膜炎的脑脊液在12～24h内呈薄膜或纤细的凝块；神经梅毒的脑脊液可有小絮状凝块；蛛网膜下腔梗阻的脑脊液呈黄色胶样凝固。
脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离（蛋白质明显增高，细胞正常或轻度增高），称为Froin-Nonne综合征，这是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特点。
4.比密
脑脊液比密为：腰椎穿刺1.006～1.008，脑室穿刺1.002～1.004，小脑延髓池穿刺1.004～1.008，凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病，其比密均增高。
常见于中枢神经系统感染、神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒等。
要点3：
显微镜检查
质量控制
（1）细胞计数：
①标本采集后应在1h内进行细胞计数。
标本放置过久，细胞可能凝集成团或被破坏，影响计数结果。
②标本必须混匀后方可进行检查，否则会影响计数结果。
（2）校正与鉴别：
①因穿刺损伤血管，引起血性脑脊液，白细胞计数结果必须校正，以消除因出血带来的白细胞。
②细胞计数时，应注意红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别。
新生隐球菌不溶于乙酸，加优质墨汁后可见未染色的荚膜；白细胞也不溶于乙酸，加酸后细胞核和细胞质更加明显；红细胞加酸后溶解。
要点4：
化学与免疫学检查
蛋白质
脑脊液蛋白质含量增高是血-脑脊液屏障功能障碍的标志。
由于脑脊液清蛋白只来自血清，因此，RAlb 更能反映血-脑脊液屏障完整性。
脑脊液蛋白质增高可见于中枢神经系统的感染、梗阻和出血等多种疾病。
蛋白商反映了脑脊液球蛋白与清蛋白的比例变化。
①蛋白商增高：提示脑脊液球蛋白含量增高，见于多发性硬化症、神经梅毒、脑脊髓膜炎、亚急性硬化性全脑炎等。
②蛋白商减低：提示脑脊液清蛋白含量增高，见于化脓性脑膜炎急性期、脑肿瘤、脊髓压迫症等。
葡萄糖
1.检测原理
脑脊液葡萄糖含量大约为血糖的50%～80%（平均60%），其高低与血糖浓度、血-脑脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有关。
脑脊液葡萄糖检验多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法。
2.临床意义
（1）葡萄糖减低：
①细菌性脑膜炎和真菌性脑膜炎，以化脓性脑膜炎早期减低最明显；
②脑寄生虫病等；
③脑肿瘤；
④神经梅毒；
⑤低血糖昏迷、胰岛素过量所致的低血糖状态。
（2）葡萄糖增高：
①新生儿及早产儿；
②糖尿病或静脉注射葡萄糖；
③脑或蛛网膜下腔出血所致的血性脑脊液；
④病毒性脑膜炎或脑炎；
⑤急性颅脑外伤、中毒、缺氧、脑出血等所致丘脑下部损伤等。
氯化物
1.检测原理
由于脑脊液中蛋白质含量较少，为了维持脑脊液和血浆渗透压的平衡（Donnan平衡），氯化物含量约为血浆的1.2～1.3倍。
氯化物定量检验方法与血清氯化物检验方法相同，测定方法有硝酸汞滴定法、电量分析法、离子选择性电极法和硫氰酸汞比色法。
临床常用电极法。
2.临床意义
（1）氯化物减低：
①细菌或真菌感染，特别是化脓性、结核性和隐球菌性脑膜炎的急性期、慢性感染的急性发作期。
②细菌性脑膜炎的后期，由于脑膜有明显的炎症浸润或粘连，局部有氯化物附着，使脑脊液氯化物减低。
③呕吐、肾上腺皮质功能减退时，由于血氯减低，使脑脊液氯化物含量亦减低。
（2）氯化物增高：主要见于尿毒症、肾炎、心力衰竭、病毒性脑膜炎或脑炎。
要点5：
病原生物学检查
细菌学检查
1.显微镜检查
脑脊液涂片革兰染色或碱性亚甲蓝染色检查致病菌。
革兰染色用于检查肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链球菌、大肠埃希菌等；碱性亚甲蓝染色用于检查脑膜炎球菌。
显微镜检查对化脓性脑膜炎诊断的阳性率为60%～90%。
如果怀疑为结核性脑膜炎，可采用抗酸染色，油镜下寻找抗酸杆菌。
新生隐球菌检查常采用印度墨汁染色法，若呈假阳性，可采用苯胺墨染色法。
2.细菌培养
主要适用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌等。
同时，也要注意厌氧菌、真菌的培养。
寄生虫检查
1.脑脊液涂片检查
可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形虫、阿米巴滋养体等。
2.脑囊虫检查
脑囊虫补体结合试验诊断脑囊虫的阳性率可达88%；致敏乳胶颗粒玻片凝集试验诊断脑囊虫的符合率为90%；ELISA法对诊断脑囊虫病具有高度的特异性。
3.梅毒螺旋体检查
神经梅毒的诊断首选灵敏度、特异性均很高的螺旋体荧光抗体吸收试验（FTA-ABS）；其次选用性病研究实验室玻片试验（VDRL），其灵敏度为50%～60%，特异性为90%。
现多使用快速血清反应素试验（RPR）为筛检，梅毒螺旋体微粒凝集试验（TPPA）为梅毒确诊试验。
要点6：常见中枢系统疾病脑脊液检查结果
要点7：脑脊液检查对不同疾病诊断的灵敏度和特异度
颅内出血、病毒性脑炎、硬膜下血肿中中例题
脑脊液能在12～24h内呈薄膜或纤细的凝块的疾病是
A.病毒性脑膜炎
B.化脓性脑膜炎
C.结核性脑膜炎
D.神经梅毒
E.蛛网膜下腔梗阻
[答疑编号700816120101]
【正确答案】C
脑脊液葡萄糖减低最明显的疾病是
A.化脓性脑膜炎早期
B.病毒性脑膜炎
C.脑寄生虫病
D.急性颅脑外伤
E.脑出血
[答疑编号700816120102]
【正确答案】A
印度墨汁染色法常用于染色
A.肺炎链球菌
B.脑膜炎球菌
C.流感嗜血杆菌、葡萄球菌
D.铜绿假单胞菌
E.新生隐球菌
[答疑编号700816120103]
【正确答案】E
脑脊液葡萄糖含量大约为血糖的
A.30%～40%
B.40%～50%
C.50%～80%
D.60%～70%
E.70%～90%
[答疑编号700816120104]
【正确答案】C
关于红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别，错误的是
A.红细胞加酸后溶解
B.白细胞不溶于乙酸
C.白细胞加酸后细胞核和细胞质更加明显
D.新生隐球菌可溶于乙酸
E.新生隐球菌加优质墨汁后可见未染色的荚膜
[答疑编号700816120105]
【正确答案】D。
