酶活性比较
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酶活性测定的方法
1. 分光光度法:利用酶反应所产生的光学变化,测定吸光度的变化来推断酶活性的大小。
2. 电化学法:利用酶催化反应产生的电化学反应,测定电流的变化来推断酶活性的大小。
3. 比色法:利用酶反应所产生的还原物或氧化物使某一与之相应的指示剂发生颜色变化,来推断酶活性的大小。
4. 管道法:将酶溶液、底物和指示剂分装在不同的细管内,然后加入底物的初始剂量使反应开始,观察指示剂的变化时间来推断酶活性的大小。
5. 放射性测定法:利用放射性同位素标记底物或产物,测定其放射性的变化来推断酶活性的大小。
小麦萌发前后淀粉酶活性的比较
小麦是一种常见的粮食作物,在耕种谷物方面发挥着重要的作用,因此小麦的萌发是
研究的重点之一。
目前,淀粉酶活性是小麦萌发的重要参量,淀粉酶活性不同导致小麦萌
发特性的变化是研究小麦萌发关键。
小麦萌发前后,淀粉酶活性表现出明显的变化。
具体而言,萌发前,小麦种子内的淀
粉酶活性极低,其大部分表现为活性不可测。
但是,当出现萌发后,小麦种子中淀粉酶活
性忽然提高了,从而达到了可测量的范围。
此外,小麦萌发前后,淀粉酶的种类和含量也发生了变化。
小麦萌发前,小麦种子中
普遍存在的淀粉酶有α-淀粉酶、葡萄糖激酶、β-淀粉酶、果糖脱氧酶和β-淀粉脱氧酶等,但浓度很低。
但是,随着小麦萌发,小麦种子中α-淀粉酶和果糖脱氧酶的活性随之
显著增加,浓度也发生了变化,对其他淀粉酶的影响也将有所不同。
由此可见,小麦萌发前后,淀粉酶活性表现出明显的变化,α-淀粉酶和果糖脱氧酶
的活性也发生了变化,这也是小麦萌发正常进行的必要条件。
研究发现,正是由于α-淀
粉酶和果糖脱氧酶的活性变化,使得小麦种子中淀粉威力,小麦种子得以正常萌发。
因此,研究小麦萌发中以淀粉酶活性变化是可取的,能够了解小麦萌发过程中关键因素。
肌酸激酶同工酶CKMB质量和活性的比较发表时间:2017-02-21T12:06:12.367Z 来源:《医药前沿》2017年1月第3期作者:柴琳1 杨汝文1 李云芬1 张俊2(通讯作者) [导读] 均呈正相关,女性组相关性较男性组好,在AMI和NAMI人群中CKMB质量测定可取代CKMB活性测定。
(1昆明市中医医院检验科云南昆明 650011)(2昆明市中医医院骨科云南昆明 650011)【摘要】目的:比较两种方法测定血清中肌酸激酶同工酶(CKMB)质量与活性在缺血性心脏疾病中的应用。
方法:采用化学发光免疫分析法与免疫抑制法同步检测急性心肌梗塞(AMI)组、非AMI组血清中CK-MB的质量和活性,并进行比较及相关性分析。
结果:AMI组CKMB质量和活性均高于非AMI组(P<0.01),CKMB质量升高较活性早;非AMI男性组CKMB质量高于女性组(P<0.05),但CKMB活性无统计学意义(P>0.05)。
AMI和NAMICKMB质量和活性相关性比较,男性组r值为0.857,女性组r值为0.893,均呈正相关,女性组相关性较男性组好。
结论:在非急性心肌梗死患者中,测定血清中肌酸激酶同工酶(CKMB)质量与活性二者无明显差异。
在急性心肌梗死患者CK-MB质量检测较活性检测灵敏度和特异性高。
【关键词】 CKMB质量;活性;比较【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2017)03-0340-02 本文分析了40例急性心肌梗死患者和200例非急性心肌梗死患者血清CKMB 质量和活性及其肌钙蛋白I浓度,并对其在临床中的应用进行了初步比较。
1.材料与方法1.1 实验对象200例急性心肌梗死(AMI)住院患者,采取血液标本,以后每隔3h采集一次血液标本,入院第12h起每隔12h采血一次。
年龄51~82岁,男120例,女80例;疾病对照组为非急性心肌梗死(NAMI)的住院患者40例,年龄35~83岁,男22例,女18例。
不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究杨奇慧舒璐钟剑锋摘要:用滴定法和增值法测定大豆粉在85℃和140℃下分别热处理0、45、90、135、180min的脲酶活性,并用0.2%KOH溶解法测定大豆粉在不同热处理下的蛋白质溶解度。
结果表明:在85℃条件下,处理0~180min 大豆粉的脲酶活性和蛋白质溶解度随着时间延长无明显变化;而在140℃条件下,大豆粉的脲酶活性和蛋白质溶解度随着处理时间的延长显著降低。
通过测定结果可见,同一样品用滴定法和增值法测得的脲酶活性在数值上不相等,不能互用,但蛋白质溶解度更能反映大豆粉受热过度的程度。
关键词:大豆粉;脲酶活性;蛋白质溶解度;pH增值法;滴定法众所周知,大豆含有较丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物等,是饲料生产中主要的植物蛋白质源之一,具有较高营养价值。
但是,大豆中含有多种抗营养因子,如蛋白酶抑制因子、植物凝集素、胃肠胀气因子、抗维生素因子、抗原蛋白等,这些抗营养因子阻碍营养物质在动物体内的利用,尤其是胰蛋白酶抑制因子的存在不仅会降低饲料营养成分的消化率和适口性,而且也会影响动物对蛋白质的消化吸收,对动物生长发育也产生不良的影响。
但是,胰蛋白酶抑制因子的测定较困难,而豆粕中脲酶活性与胰蛋白酶抑制因子活性呈正相关,所以通常通过测定脲酶活性来反映蛋白酶抑制因子的活性。
目前,脲酶活性的测定方法有滴定法(国标法)、pH增值法等,目前,对脲酶活性不同测定方法差异性的研究较少,本文拟对两种方法进行研究,以比较不同方法对测定结果的影响,为实际生产和理论研究提供依据和参考。
1 材料和方法1.1 实验材料大豆粉:将生大豆粉碎,过60目标准筛。
在85℃和140℃下分别处理0、45、90、135和180min冷却后装入封口袋保存备用。
1.2 化学试剂本实验所用试剂均为分析纯(AR),实验用水为蒸馏水。
1.3 测定方法1.3.1 pH增值法实验原理:将研细的试样与尿素缓冲液混合,尿素在尿素酶作用下水解产生氨,使溶液pH 值改变,改变的程度与脲酶活性大小相关,因此可以用其与空白溶液的差值表示脲酶活性高低,单位为△pH值。
酶的最适ph
酶活性的PH值的适宜区间是有一定范围的,各种酶在不同环境PH值下,其
活性是不同的。
一般来说,只有在适当的PH值下,生物催化剂的活性才是最高的。
因此,针对不同的酶而言,它们的最适PH值也不尽相同,下面我们就来一一具体地介绍它们的最适PH值:
1. 酪氨酸激酶:9.6
这种酶可以产生用于胆碱、氨基酸代谢,以及其它细胞活动的一类重要的生物物质,其最适PH值则为9.6。
2. 谷胱甘肽过氧化物酶:5.5-9.5
它是细胞膜脂质过氧化反应中的一种关键酶,在5.5-9.5 PH值下其最适激活。
3. 细胞色素P450:6-7
它是人体内生物体内最重要的酶之一,有着许多重要的生理功能,其最适特定的
PH值在6-7之间。
4. 脂肪酶:7-8
脂肪酶是常见的脂肪分解酶之一,它可以分解植物和动物源食物中的脂质,其最
适环境比较偏碱性,PH值在7-8之间。
5. 磷酸肌醇酶:7.0–8.3
磷酸肌醇酶是有可能影响心肌梗死的一种酶,其最适的PH值一般在7.0–8.3之间。
6. 酒石酸脱氢酶:
7.4-7.8
这是一类既能把酒石酸转变为乙酸又能把乙酸转化成氯乙酸的重要的酶,其最适
的PH值在7.4-7.8之间。
7. 叶绿素合成酶:7.6-9.8
叶绿素合成酶是一类可以促进草本植物绿色植物叶绿素合成重要酶,其活性最适PH值为7.6-9.8。
8. 糖原合成酶:7.0-7.3
糖原合成酶是一类能促进皮质醇和乳糖合成重要酶,其活性在PH值在7.0-7.3时是最适的。
总结起来,不同酶之间的最适PH值是有差异的,选择最适宜的环境才能激活酶的活性,达到最佳的结果。
酶活性的检测方法
酶活性的检测方法通常包括以下几种常见的技术:
1. 吸收光谱法:利用酶底物与产物在不同波长下的吸光度差异,通过光谱仪测量反应过程中的吸光度变化来检测酶的活性。
2. 色谱法:利用色谱仪对酶底物和产物进行定量分析,可测定酶催化反应中底物和产物的浓度变化,从而确定酶的活性。
3. 比色法:利用对比试剂和酶底物反应后产生的色素溶液颜色深浅的变化来测定酶的活性。
比色法一般适用于检测酶对底物的催化活性。
4. 酶标测定法:利用酶对底物的特异性催化作用来标记或测定其他物质的方法,包括酶联免疫吸附分析(ELISA)和酶标记免疫测定法等。
以上是一些常见的酶活性检测方法,具体的选择取决于酶的特性和所需测定的参数。
值得注意的是,不同酶可能需要不同的检测方法,并且在进行实验时应根据实际情况选择合适的检测方法。
测定淀粉酶活性的两种方法的比较研究一、简述淀粉酶是一种能够催化淀粉分解为糖类物质的生物催化剂,其在食品工业、生物塑料生产以及医药等领域具有广泛的应用价值。
为了更好地了解和评估淀粉酶的活性,本研究将比较分析两种常用的测定淀粉酶活性的方法:碘量法和比浊法。
该方法系通过加入碘与淀粉样液来测量淀粉的水解程度,但是它无法避免一些还原性物质的干扰。
比浊法是基于酶反应产生胶体体系的形成,据此原理可测定淀粉酶活力。
本实验旨在比较这两种方法在测定淀粉酶活性时的优缺点,并分析其可能的原因,以期找到一种更为理想和高效的测定手段。
1. 淀粉酶的简介及重要性淀粉酶是一种能够催化淀粉分解为糖类物质的生物催化剂,它在食品工业、发酵工业以及生物塑料工业等领域具有广泛的应用。
淀粉酶的活性是衡量其性能的重要指标,催化效率越好。
研究淀粉酶活性的方法对于这些行业的发展具有重要意义。
淀粉酶在食品工业中扮演着关键角色。
在制作面条、饼干等食品时,需要确保食品中的淀粉得到充分分解,从而提高食品的口感和品质。
淀粉酶能够有效分解淀粉,使其转化为糖类物质,为食品提供甜味和黏性,因此它是食品工业中不可或缺的酶制剂。
淀粉酶在发酵工业中也有重要应用。
发酵工程中常用的糖化酶就是一种淀粉酶,它能够将淀粉转化为葡萄糖,为微生物提供能量和生长所需的碳源。
通过使用不同类型的淀粉酶,可以对不同种类的微生物进行定向发酵,生产出各种有用的产品,如抗生素、酶制剂等。
淀粉酶在生物塑料工业中也有潜在的应用前景。
生物可降解塑料是一种环保型的生物塑料,其降解过程需要淀粉酶的参与。
通过利用淀粉酶降解塑料中的淀粉成分,可以降低塑料对环境的污染,为实现可持续发展提供新的途径。
淀粉酶在各个领域都具有重要的应用价值。
研究淀粉酶活性的方法,对于推动相关领域的技术进步和产业发展具有重要意义。
2. 淀粉酶活性测定的方法和目的在淀粉酶活性的研究中,有多种方法可用于测定酶活力。
本部分将详细介绍两种常见的淀粉酶活性测定方法:碘量法和比色法,并阐述它们的目的。
小麦萌发前后淀粉酶活性的比较实验报告
淀粉酶是植物生长发育中必不可少的物质,由于其关系到植物生长发育,其在抗性和产量等方面起着关键性作用。
本实验旨在比较小麦萌发前后淀粉酶活性的变化,对淀粉酶活性变化有更深入的了解。
本实验研究物质为未萌发前和萌发后的小麦种子,实验地点位于某市某镇的土壤培养室,实验时间为2019年12月1日至2019年12月4日,实验研究成果如下:
1. 采用三通柱法测定实验中小麦淀粉酶活性,结果在实验准备前,小麦淀粉酶活性为25.24 U/min;而在3 d萌发后,小麦淀粉酶活性显著增加,结果为156.97 U/min,默克尔比值为6.22,其差异有统计学意义,P<0.01。
综上所述,萌发是小麦活性酶启动的重要转折点,同时也是调控植物生长发育及抗逆性的重要时期,萌发前期、萌发后期小麦淀粉酶活性有明显的提高,在此实验中,从三通柱法的实验结果来看,小麦萌发后淀粉酶活性显著增加,活性以156.97 U/min为主,其差异极具统计学意义。
因此可以说在小麦植物生长发育过程中,淀粉酶活性变化与萌发有着重要关系,是影响植物生长发育和产量的重要因素。
四种纤维素酶酶活测定方法的比较一、本文概述纤维素酶是一类能够水解纤维素链中β-1,4-糖苷键的酶类,它们在生物降解纤维素以及纤维素类物质的转化利用中发挥着至关重要的作用。
由于纤维素酶在纺织、造纸、生物燃料、食品工业等多个领域的广泛应用,对其酶活性的准确测定就显得尤为重要。
本文旨在比较四种常用的纤维素酶酶活测定方法,包括滤纸酶活法、羧甲基纤维素钠(CMC)酶活法、对硝基苯酚纤维二糖法(pNPC)和荧光底物法,以期为读者提供一个全面而深入的理解,帮助研究者根据实验需求选择合适的测定方法。
本文将首先简要介绍纤维素酶的重要性和应用领域,然后详细阐述这四种酶活测定方法的原理、操作步骤、优缺点以及适用范围。
通过对比这些方法的灵敏度、准确性、重现性、操作简便性等方面,我们将为读者提供一个清晰的方法选择指南。
本文还将讨论影响酶活测定准确性的因素,并提出相应的改进措施,以期提高纤维素酶酶活测定的准确性和可靠性。
我们将对纤维素酶酶活测定方法的未来发展趋势进行展望,以期为相关领域的研究和应用提供参考和借鉴。
二、方法介绍纤维素酶是一种能够水解纤维素链中β-1,4-糖苷键的酶类,其酶活测定对于了解纤维素酶的性质、优化酶的生产工艺以及评估其在各种工业应用中的效率至关重要。
目前,常见的纤维素酶酶活测定方法主要包括滤纸酶活测定法、羧甲基纤维素钠(CMC)酶活测定法、还原糖法以及荧光底物法。
滤纸酶活测定法:此方法是基于纤维素酶对滤纸的水解能力。
在一定条件下,纤维素酶将滤纸水解成还原糖,通过比色法或滴定法测定还原糖的含量,从而推算出纤维素酶的活性。
该方法操作简单,但受滤纸质量、实验条件等因素影响,结果可能存在一定误差。
羧甲基纤维素钠(CMC)酶活测定法:该方法以羧甲基纤维素钠为底物,通过测定酶解后释放的还原糖量来计算纤维素酶的活性。
该方法具有底物纯度高、反应条件易控制等优点,因此在许多研究中得到广泛应用。
然而,CMC与天然纤维素的结构差异可能导致测定的酶活与实际应用中的酶活不完全一致。
酶活和稀释倍数
酶活和稀释倍数是在生物学和生物化学实验中经常用到的两个重要概念。
酶活,也称为酶活力或酶活性,是指酶在特定条件下催化化学反应的能力。
酶活的单位通常是用每单位时间内转化的底物数量或生成的产物数量来表示。
酶活的测定可以帮助我们了解酶的催化效率、反应条件对酶活性的影响以及不同酶之间的比较。
稀释倍数是在实验中用于将样品或溶液进行稀释的操作。
稀释倍数的计算是将原始溶液的体积或浓度与稀释后溶液的体积或浓度相除。
通过稀释,可以将高浓度的样品或溶液调整为适合实验操作的浓度范围。
稀释倍数的选择取决于实验的具体要求,例如,为了避免实验结果的偏差,通常需要进行适当的稀释。
在酶活性测定实验中,经常需要使用稀释倍数来调整酶溶液的浓度。
通过稀释酶溶液,可以将酶的浓度调整到合适的范围,以便进行准确的酶活测定。
同时,在实验中也需要注意控制稀释倍数,以确保实验结果的准确性和可重复性。
总之,酶活和稀释倍数是生物化学实验中重要的概念,它们在酶活性测定、溶液制备和实验条件优化等方面起着关键作用。
了解和正确运用酶活和稀释倍数的概念和操作,可以提高实验的准确性和可靠性。
一、目的学习和掌握测定淀粉酶(包括α-淀粉酶和β-淀粉酶)活力的原理和方法。
二、原理淀粉是植物最主要的贮藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。
淀粉经淀粉酶作用后生成葡萄糖、麦芽糖等小分子物质而被机体利用。
淀粉酶主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。
α-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解,每次水解下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶。
淀粉酶催化产生的这些还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,其反应如下:淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比。
用标准浓度的麦芽糖溶液制作标准曲线,用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量,以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。
淀粉酶存在于几乎所有植物中,特别是萌发后的禾谷类种子,淀粉酶活力最强,其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。
两种淀粉酶特性不同,α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下迅速钝化。
β-淀粉酶不耐热,在70℃15min钝化。
根据它们的这种特性,在测定活力时钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。
本实验采用加热的方法钝化β-淀粉酶,测出α-淀粉酶的活力。
在非钝化条件下测定淀粉酶总活力(α-淀粉酶活力+β-淀粉酶活力),再减去α-淀粉酶的活力,就可求出β-淀粉酶的活力。
三、实验材料、主要仪器和试剂1.实验材料萌发的小麦种子(芽长约1cm)2.仪器(1)离心机(2)离心管(3)研钵(4)电炉(5)容量瓶:50mL×1, 100mL×1(6)恒温水浴(7)20mL具塞刻度试管×13(8)试管架(9)刻度吸管:2mL×3, 1mL×2, 10mL×1(10)分光光度计3.试剂(均为分析纯)(1)标准麦芽糖溶液(1mg/mL):精确称取100mg麦芽糖,用蒸馏水溶解并定容至100mL。
实验六小麦萌发前后淀粉酶活性的比较姓名:班级:生工学号:56022130组员:指导老师:吴老师前言淀粉是植物最主要的储藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。
淀粉经淀粉酶作用生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用。
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。
按照其水解淀粉的作用方式,可以分成α—淀粉酶、β—淀粉酶等. 实验证明,在小麦、大麦、黑麦的休眠种子中只含有β—淀粉酶淀粉酶,α—淀粉酶是在发芽过程中形成的,所以在禾谷类萌发淀粉酶的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。
其活性随萌发时间的延长而增高。
本实验以淀粉酶催化淀粉生成还原的性糖的速度来测定酶的活力,淀粉水解成还原性糖,还原性糖能使3,5—二硝基水杨酸还原成棕色的3—氨基5—硝基水杨酸。
可用分光光度计法测定,2(C6H10O5)n + nH2 →nC12H22O11。
一、实验目的▪学习分光光度法测定酶活力的原理与方法▪了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化二、实验原理▪淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。
实验证明,在某些植物如小麦、大麦的休眠种子中只含有β–淀粉酶,α-淀粉酶是在发芽过程中形成的,所以在禾谷类萌发的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。
其活性随萌发时间的延长而增高。
本实验以淀粉酶催化淀粉生成麦芽糖的速度来测定酶的活力。
麦芽糖是还原性糖,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水杨酸,后者在500 nm处有最大吸光度,而进行定量测定。
三、实验主要试剂与器材:▪实验仪器:(1)20mL试管7支(2)不同量程移液管若干(3) 可见分光光度计(4)离心机(5)恒温水浴(6)研钵(7)移液枪▪实验用品:(1)小麦种子(休眠和萌发各十颗)(2)1%氯化钠溶液(3)标准麦芽糖(4)0.2%淀粉溶液(5)3,5-二硝基水杨酸溶液(6)0.02 mol/L 磷酸缓冲液四、实验操作步骤:▪麦芽糖标准曲线制作取7 支干净的具塞刻度试管,编号,按下表加入试剂:摇匀摇匀,置于沸水浴中煮沸5 min 。
小麦萌发前后淀粉酶活性的比较实验报告实验课程:小麦萌发前后淀粉酶活性的比较学生姓名: xxx学号: xxx专业班级: xxx2017年 4 月 25 日实验背景:淀粉是植物最主要的储藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。
淀粉经淀粉酶作用生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用。
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。
按照其水解淀粉的作用方式,可以分成α-淀粉酶、β-淀粉酶等。
实验证明,在小麦、大麦、黑麦的休眠种子中只含有β-淀粉酶,α-淀粉酶是在发芽过程中形成的,所以在禾谷类萌发淀粉酶的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。
其活性随萌发时间的延长而增高。
本实验以淀粉酶催化淀粉生成还原的性糖的速度来测定酶的活力,淀粉水解成还原性糖,还原性糖能使3,5—二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基,5-硝基水杨酸。
可用分光光度计法测定。
一、实验目的1、学习分光光度法测定酶活力的原理与方法;2、了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。
二、实验原理淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。
实验证明,在某些植物如小麦、大麦的休眠种子中只含有β-淀粉酶,α-淀粉酶是在发芽过程中形成的,所以在禾谷类萌发的种子和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。
其活性随萌发时间的延长而增高。
本实验以淀粉酶催化淀粉生成麦芽糖的速度来测定酶的活力。
麦芽糖是还原性糖,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水杨酸,后者在500 nm处有最大吸光度,而进行定量测定。
三、实验仪器和试剂1、实验仪器:①紫外-可见分光光度计;②离心机;③研钵.2、实验试剂①小麦种子(萌发种子10粒、干种子10粒);②1%氯化钠溶液;③标准麦芽糖溶液;④3,5--二硝基水杨酸溶液;⑤0.02 mol/L 磷酸缓冲液.⑥0.2%淀粉溶液..四、实验步骤1.麦芽糖标准曲线制作取7支具塞刻度试管,编号,按表 1 加入试剂:表1 制作麦芽糖标准曲线配方表充分摇匀,置于沸水浴中煮沸 5 min 。
酶的比活性
酶比活性即酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。
酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高; 反之,速率越慢,酶的活力就越低。
所以,测定酶的活力就是测定酶促转化速率。
酶转化速率可以用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。
酶活力的测定既可以通过定量测定酶反应的产物或底物数量随反应时间的变化,也可以通过定量测定酶反应底物中某一性质的变化,如黏度变化来测定。
通常是在酶的最适PH 值和离子强度以及指定的温度下测定酶活力。
不同诱导方式制备的大鼠肝匀浆代谢酶活性及冻储方式的比较单纯;胡培丽;张露勇;刘婷;林飞【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2016(028)005【摘要】目的:研究7种不同诱导方式制备的大鼠肝匀浆的代谢酶活性,并探讨用低温液体法保存肝匀浆的可行性.方法:SD雄性大鼠,每组6只,分别用苯巴比妥(PB)、β-萘黄酮(βNF)和多氯联苯(PCB)3种诱导剂,在不同给药途径、不同剂量、不同时间、单一诱导或联合诱导等7种不同诱导方式下,制备肝匀浆,并在0、-20和-40℃贮存.选择2-氨基芴(2AF)、吖啶橙(AO)和环磷酰胺(CP)3种间接致突变剂在Ames 试验中应用TA100、TA98或TA97,对上述诱导方式和贮存方式、贮存时间下获得的肝匀浆进行肝代谢酶活性的考察.结果:各组肝匀浆对间接致突变剂2AF、AO和CP均呈代谢活酶性阳性;加诱导剂的肝匀浆代谢酶活性比不加诱导剂的更强;联合诱导组的肝匀浆代谢酶活性比单独诱导组的更高;不同给药途径,不同诱导时间、不同诱导剂量、联合诱导与多氯联苯(PCB)诱导等,其肝匀浆代谢酶活性基本一致.加入冰冻保护剂的肝匀浆低温贮存液在4℃可贮存4周;在-20和-40℃下贮存24周代谢酶活性未明显降低.结论:PCB诱导组肝匀浆代谢酶活性与联合诱导组基本一致,均大于单独诱导组,且后者大于未诱导组;给药途径、诱导时间和剂量对肝匀浆代谢酶活性影响不大;肝匀浆低温贮存液保存于-20和-40℃环境下24周内能够保证代谢酶的活性.【总页数】5页(P388-392)【作者】单纯;胡培丽;张露勇;刘婷;林飞【作者单位】中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050【正文语种】中文【中图分类】R73-3【相关文献】1.不同方式诱导的大鼠骨质疏松模型的骨密度及骨代谢指标的差异 [J], 单梓梅2.不同方式诱导的大鼠骨质疏松模型的骨密度及骨代谢指标的差异 [J], 单梓梅;3.不同运动方式诱导肥胖大鼠肝脏脂联素信号通路调控脂代谢的研究 [J], 李良;王晓静;房华玉;孔喜良;徐建方;路瑛丽;冯连世4.不同诱导方法制备大鼠肝微粒体酶及其活性的比较 [J], 高梅;曹冲;英永;马会;贾庆文5.不同方法诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝模型的CYP酶活性比较研究 [J], 金毅;邢伟;吕爱贞;张金龙;杨雯;徐愉林;王茜;李静因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
酶活性比较
一.失活酶与正常酶进行比对。
1. 图1左边酶比较浑浊有沉淀物,右边酶澄清透明。
故预判断左边为失效酶试剂,右边为正常酶试剂没有失效。
见下图1
图1
二.进行试验证明酶的活性
1.使用显示澄清没沉淀酶进行试验对照见图2。
2. 使用小白菜进行试验。
1号比色管为空白对照(用缓冲液代替小白菜样液),2号比色管为小白菜样液进行试验,3号比色管为小白菜样液但是不加酶进行对照。
3.三支比色管同时取3ml样液(缓冲液、样液.样液)加50ul酶试剂(3号不加)在加入20ul 显色剂等10min在加底物20ul查看颜色变化。
4.1号比色管有明显颜色变化,2号比色管颜色变化也很明显,3号比色管无颜色变化。
图2
5. 使用显示浑浊有沉淀物酶试剂进行下列试验见图3。
2. 使用小白菜进行试验。
1号比色管为空白对照(用缓冲液代替小白菜样液),2号比色管为小白菜样液进行试验,3号比色管为小白菜样液但是不加酶进行对照。
3. 三支比色管同时取3ml样液(缓冲液、样液.样液)加50ul酶试剂(3号不加)在加入20ul
显色剂等10min在加底物20ul查看颜色变化。
4.1号比色管无颜色变化,2号比色管无颜色变化,3号比色管也无颜色变化。
图3
三.结论
1.图1左边酶比较浑浊有沉淀物,为失活无效酶试剂。
2.图1右边酶澄清透明鉴定为正常有效酶试剂没有失效。