高效液相色谱仪验证

高效液相色谱仪验证方案验证文件类别：技术标准编号：V-A-c-004-0部门：验证委员会页码：共1页，第1页版次：¨新订¨替代：起草：年月日部门审核：年月日审阅会签：（验证委员会）批准：年月日实施日期：年月日复印数：批准：分发至：目录1.设备基本情况1.1概述1.2基本情况3职责3.1验证委员会3.2工程处3.3Qc4验证内容4.1安装确认4.1.1安装确认所需文件资料 4.1.2关键性仪表及消耗性备品4.1.3评价仪器的安装是否符合GmP及供应商提议的要求4.1.4起草标准操作规程4.2校正4.2.1紫外检测器4.2.1.1固定波长紫外检测器波长示值误差的校正4.2.1.2可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定4.2.2高压泵4.3运行确认4.3.1紫外检测器4.3.2高压泵4.4性能确认4.4.1最小检测浓度4.4.2定性、定量测量的重复性4.5拟订再验证项目及周期4.6验证结果评定与结论1.设备基本情况1.1概述本高效液相色谱仪主要由一个二元泵、一个柱温箱、一个可变紫外检测器、一个带有20μL定量环的进样器和一台工作站组成，各部分由工作站软件控制。

本仪器主要用于分析原料和成品的有关物质和含量。

1.2基本情况设备编号：设备名称：高效液相色谱仪型号：生产厂家：供货厂家：安装日期：使用部门：工作间：保管员：2．验证目的为确认高效液相色谱仪测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。

验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。

3职责3.1验证委员会1.负责验证方案的审批。

2.负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

3.负责验证数据及结果的审核。

4.负责验证报告的审批。

5.负责再验证周期的确定。

3.2工程处1.负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。

中心化验室型高效液相色谱仪验证（一）验证方案（二）验证报告药业有限公司中心化验室型高效液相色谱仪验证方案（SOP-YZ-???）方案制定人：制定日期：方案审查人：审查日期：方案审核人：审核日期：方案批准人：批准日期：药业有限公司目录1、概述2、验证目的3、验证实施小组成员及有关责任4、验证文件5、合格标准6、验证方法和步骤7、验证结果分析和综合评价8、最终评价9、验证周期10、验证记录1、概述高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种现代液相色谱法，其基本方法是用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图并进行数据处理，得到测定结果。

由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。

高效液相色谱仪由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统组成。

其中LC-2010和Agilent1100型为单泵型，LC-20AB型为双泵型高效液相色谱仪。

2、验证目的检查并确认高效液相色谱仪运行性能符合要求。

3、验证实施小组成员及有关责任验证实施小组组长???负责协调及异常情况的处理；操作员??????负责验证的具体操作工作；QA???负责监督实施本方案。

4、主要验证文件高效液相色谱法（SOP-ZL-???）、中华人民共和国国家计量检定规程液相色谱仪（JJG705-2002）、UV-VIS检测器SPD-20A/SPD-20AV说明书、溶液传输单元LC-20AB说明书、中华人民共和国药典2005年版二部、LC-2010A/2010C操作说明书安装手册和维修手册。

5、合格标准6、验证方法和步骤6.1验证方法整个验证过程分为单个部件的验证和整机验证。

验证时一般先验证泵、柱温箱、自动进样器的性能，接着是检测器的性能，最后是整机的性能验证。

WATERS高效液相色谱仪验证方案名称：WATERS高效液相色谱仪验证方式：检验设备测试确认验证编号：目录1.设备的基本情况1.1.概述1.2.文件资料1.3.维修服务1.4.基本情况2.验证目的3.职责4.验证内容4.1.安装确认4.2.高压泵4.3.2489紫外检测器4.4.2424蒸发光散射检测器5.再确认6.验证周期7.验证确认8.验证结果确认9.附件1.设备的基本情况1.1.概述本仪器由美国WATERS公司生产，由1525泵、2489紫外检测器、2424蒸发光检测器、1500系列柱温箱及电脑系统组成。

主要用于我公司生产所需的各种原料药、中间体及成品的含量测定。

1.2.文件资料1.3.维修服务供货单位名称：本地维修站联系人：电话：1.4.基本情况2.验证目的为确认高效液相色谱仪测试数据准确可靠，性能稳定，能符合检验产品需求，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。

验证过程应严格按照本方案规定的内容进行。

3.职责QC：负责验证方案的起草及具体实施。

QC负责人：负责按验证方案组织实施验证工作，协助验证方案的起草，组织协调验证工作，总结验证结果，出具验证报告。

质量部经理：负责验证方案和验证报告的审核、以及对验证工作的管理。

负责验证数据及结果的审核，负责验证报告的审批，负责再验证周期的确定。

质量授权人：负责验证方案和验证报告批准。

4.验证内容4.1.安装确认4.2.高压泵4.2.1.流量准确度可执行标准：＜±3%（0.97ml/min～1.03ml/min，以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱（两通）和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，分别设定1.0、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0ml/min六段，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得。

4.2.2.流量精确度可执行标准：＜±0.3%（0.997ml/min～1.003ml/min，以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱（两通）和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。

高效液相色谱仪验证要点一、封面、起草审核批准、变更历史……二、目的、范围、职责分工、仪器及计算机系统描述、风险评估结论与确认方法描述、术语定义、参考文献三、确认内容：1、参与验证人员签名登记2、确认前的准备（文件/资料/方案/培训/材料/工具/样品……）3、IQ确认：3.1 配置清单（高压输送泵、紫外检测器、进样器、色谱柱、柱温箱、控制器、记录仪、打印机……色谱工作站、计算机系统的硬件、软件配置清单）3.2 各种技术资料、编程软件、应用软件备份、密码保存，输入输出(I／O)清单、电气原理图、接线图、元器件布置图……硬件和软件手册，包括安装、操作、维修保养手册。

3.3 确认安装环境、安装条件、各部件的安装要求、摆放要求、管路和电气连接要求、操作空间、维护空间、设备标识、校准标识。

3.4 确认软件版本、软件安装位置，确认安装后的各种测试、调试的文件、记录和报告。

3.5 确认各种外接公用介质的连接条件、质量条件。

3.6 确认运行前的准备工作都已经做好。

4 OQ确认4.1 OQ确认前的准备工作（材料/工具/样品/公用介质）4.2 开机操作确认（上电、启动各部件、正常状态确认）4.3 登陆界面、权限设置、权限确认4.4 参数设置、每一幅操作画面及操作步骤的模拟操作4.5 数据完整性方面的功能测试（设置修改、权限功能、审计追踪、断电恢复、应急处理……）4.6 空白进样、数据检查、各部件运行检查。

4.7高压恒流泵流量准确度、精确度；柱温箱温度准确度、稳定性；自动进样器残留和线性；波长准确度、重复性；最小检测浓度；基线噪音与漂移；系统精密度；梯度误差；相关系数。

PQ就用日常检品做个系统适用性、系统稳定性和系统重现性。

5 仪器本身的校准6 PQ确认6.1 按照高效液相色谱仪操作SOP和XXX（样品）检测SOP，以具有代表性的某样品进行分析操作，观察和记录仪器运行情况和色谱工作站运行情况，记录运行数据、打印图谱，分析检验结果，进行数据存储、打印、备份、转移、修改、删除、恢复……审计追踪等功能测试操作。

高效液相色谱仪验证方案引言高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分析技术，它在药物分析、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用。

为了确保HPLC仪器的准确性和可靠性，以及测试结果的可信度，对HPLC仪器进行验证是非常重要的。

本文将介绍一种高效液相色谱仪验证方案，以确保仪器的正常运行和测试结果的准确性。

1. 验证目的HPLC仪器验证的主要目的是评估仪器是否满足预定的性能要求，包括准确性、精密度和线性范围等指标。

通过验证，可以确保仪器在正常使用过程中能够提供准确和可靠的测试结果，以满足相关的法规和质量标准要求。

2. 验证内容HPLC仪器验证的内容包括以下几个方面：2.1 仪器安装和传感器校准在验证之前，首先需要确保HPLC仪器已正确安装，并且各个传感器和检测器已进行校准。

校准过程应按照仪器的操作手册进行。

2.2 仪器性能参数验证仪器性能参数验证是验证HPLC仪器在运行过程中是否符合规定的性能要求。

主要包括以下几个方面：•准确性验证：通过添加已知浓度的标准溶液，并测定其浓度来评估仪器的准确性。

•精密度验证：通过重复测定同一样品，评估仪器的精密度。

可以使用相对标准偏差（RSD）来评估测量结果的一致性。

•线性范围验证：通过逐渐增加样品浓度，测定仪器的线性范围。

应选取不同浓度的标准溶液进行测试，并绘制曲线来评估仪器的线性关系。

2.3 方法验证方法验证是验证HPLC方法是否可用于定量分析的过程。

主要包括以下几个方面：•特异性验证：通过检测样品中其他成分的干扰来评估方法的特异性。

可以使用纯溶液和样品添加物进行测试。

•精密度和重复性验证：通过重复测定同一样品，评估方法的精密度和重复性。

可以使用RSD来评估测量结果的一致性。

•准确性验证：通过添加已知浓度的标准溶液，并测定其浓度来评估方法的准确性。

3. 验证计划为了有效进行HPLC仪器的验证，需要制定详细的验证计划。

验证计划应包括以下几个方面：3.1 验证目标和范围明确验证的目标和范围，确定需要验证的仪器性能参数和方法。

目录1．目的2．范围3．责任4．验证4．1．公用系统检查4．2运行确认4．2．1目的4．2．2方式4．2．3内容4．2．3．1设备使用原理4．2．3．2确认标准操作规程的可行性4．2．3．3确认设备正常运行的项目4．3性能确认4．3．1输液系统4．3．1．1泵流量设定值误差与流量稳定性误差4．3．1．2定性、定量测量重复性误差4．3．1．3系统适用性试验4．3．2紫外检测器性能4．3．2．1基线漂移与基线噪声5．拟订验证周期6．验证结果评价与结论7．附件1 目的：为确认Alliance2695型高效液相色谱仪测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。

验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。

2 范围：适用于美国Waters 公司Alliance2695型高效液相色谱仪系统的再验证。

3 责任：3．1验证委员会3．1．1负责验证方案的批准。

3．1．2负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

3．1．3负责验证数据及结果的审核。

3．1．4负责验证报告的审批。

3．1．5负责发放验证证书。

3．1．6负责验证周期的确认。

3．2设备部。

3．2．1负责建立设备档案。

3．2．2负责仪器、仪表的校正。

3．3质量保证部3．3．1负责制定验证方案。

3．3．2负责验证的实施。

3．3．3负责拟定验证周期。

3．3．4负责收集各项验证、试验记录，起草验证报告，报验证委员会。

4 验证：4．1 公用系统检查复核人：日期：4．2运行确认4．2．1目的试验并证明设备的各部分及整体，能在预期的及设计范围内准确的运行，并能完全达到规定的技术指标和使用要求。

4．2．2方式通过对输液系统、紫外检测器性能的检测，确认本机器运行正常。

4．2．3内容 4．2．3．1设备概述4．2．3．1．1本仪器为Waters 公司Alliance2695型高效液相色谱仪，包括四元梯度泵，2996检测器和自动进样器、Millennium32色谱管理工作站及打印机组成。

高效液相色谱仪仪器确认指导原则高效液相色谱仪（HPLC）是一种用于分离、鉴定和定量化学混合物中成分的分析仪器。

在使用HPLC进行分析时，需要遵循一些仪器确认指导原则，以确保实验的准确性和可靠性。

以下是一些常见的HPLC仪器确认指导原则：●系统稳定性测试：在每次使用HPLC系统之前，应进行系统稳定性测试，包括流速、压力、温度和检测器灵敏度等参数的测试。

这有助于确保HPLC 系统处于良好的工作状态。

●柱效应测试：对于液相色谱柱，应定期进行柱效应测试，检查柱的性能是否正常。

这可以通过分析已知的标准溶液或参考物质来实现，以确保柱的分离效果和分辨率。

●检测器校准：对于UV/VIS检测器、荧光检测器、电化学检测器等，应定期进行校准，以确保检测器的灵敏度和响应性能。

●溶剂纯度检查：在使用HPLC进行分析之前，应检查使用的溶剂的纯度。

使用纯度较低的溶剂可能会影响实验结果，因此应选择高纯度的溶剂，并定期进行纯度检查。

●标准曲线校准：对于定量分析，应根据需要制备标准溶液，并利用标准曲线对样品进行定量分析。

标准曲线应当定期进行校准和更新，以确保准确性和可靠性。

●数据记录和审查：在进行HPLC分析时，应当及时记录实验数据，并进行数据审查。

这有助于发现潜在的问题或异常，并及时采取纠正措施。

质量控制和验证：对于关键参数和流程，应建立质量控制和验证程序，确保实验结果的准确性和可靠性。

这包括校准、验证、质量控制样品的使用和记录等。

通过遵循这些仪器确认指导原则，可以确保HPLC分析的准确性、可靠性和重复性，并为实验结果的正确解释和数据分析提供可靠的基础。

岛津高效液相色谱仪验证方案一、引言高效液相色谱仪是一种广泛应用的分析仪器，用于分离、鉴定和测定复杂混合物中的化合物。

为确保色谱仪的准确性和可靠性，在购买和使用新仪器之前，需要进行一系列的验证实验。

本文将提出一种岛津高效液相色谱仪的验证方案。

二、验证目标1.确保色谱仪的性能符合规格要求。

2.验证色谱仪的方法准确性和可靠性。

3.验证色谱仪的稳定性和重复性。

三、验证项目1.系统准确性验证：通过使用标准物质进行色谱分析，验证色谱仪的峰面积准确性和重复性。

选择具有不同保留时间和峰面积的标准物质，进行3次测定，计算相对标准偏差（RSD），要求在规定范围内。

2.方法准确性和可靠性验证：使用已验证的方法，分析已知浓度的化合物，通过计算回收率和相对误差，评估方法的准确性和可靠性。

要求回收率在90-110%之间，相对误差在±2%之内。

3.仪器稳定性验证：将标准物质连续注入色谱仪，连续分析5次，观察峰形和峰面积是否保持稳定，计算相对标准偏差（RSD），要求在规定范围内。

4.重复性验证：使用相同条件下的标准物质进行多批次分析，通过计算相对标准偏差（RSD），评估色谱仪的重复性。

要求RSD在规定范围内。

四、验证步骤1.系统准确性验证：a.准备不同浓度的标准物质溶液。

b.通过色谱仪进行测定，重复3次。

c.计算每个峰的相对标准偏差（RSD）。

2.方法准确性和可靠性验证：a.选择已知浓度的化合物，准备标准品溶液。

b.通过已验证的方法进行测定，重复3次。

c.计算每个峰的回收率和相对误差。

3.仪器稳定性验证：a.选择一个相对稳定并具有较大信号的峰，通过连续注入标准物质进行测定，重复5次。

b.观察峰形和峰面积的变化，计算每个峰的相对标准偏差（RSD）。

4.重复性验证：a.准备多批次的标准物质溶液。

b.通过相同条件进行测定，重复3次。

c.计算每个峰的相对标准偏差（RSD）。

五、结果分析通过对上述验证项目的实验数据进行分析，得出以下结论：1.系统准确性验证结果：峰面积的相对标准偏差在规定范围内，说明色谱仪具有良好的峰面积准确性和重复性。

一、实验目的1. 熟悉高效液相色谱（HPLC）的基本原理和操作方法。

2. 掌握液相色谱仪的构造及其各部分的功能。

3. 学习并运用高效液相色谱法对样品进行分离和定量分析。

二、实验原理高效液相色谱法是一种利用高压液体作为流动相，通过固定相对样品进行分离和分析的技术。

其原理基于不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，从而实现分离。

实验中，样品经过高压泵送入色谱柱，在流动相的作用下，不同物质在色谱柱中停留时间不同，从而实现分离。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：高效液相色谱仪、色谱柱、流动相过滤器、样品瓶、高压泵、检测器、数据工作站等。

2. 试剂：乙腈、甲醇、水、磷酸、氨水等。

四、实验步骤1. 样品准备：准确称取一定量的待测样品，用适当溶剂溶解，配制成一定浓度的溶液。

2. 流动相配置：根据实验要求，配置合适的流动相，并进行过滤。

3. 色谱柱准备：将色谱柱安装在色谱仪上，用流动相进行冲洗，去除色谱柱中的杂质。

4. 上样：将配制好的样品溶液注入色谱仪，通过高压泵送入色谱柱。

5. 分离：在流动相的作用下，样品中的各组分在色谱柱中依次流出。

6. 检测：利用检测器对流出物进行检测，记录色谱图。

7. 数据分析：利用数据工作站对色谱图进行分析，计算各组分的含量。

五、实验结果与分析1. 样品分离：实验中，样品中的各组分在色谱柱中得到了有效分离，分离效果良好。

2. 定量分析：根据标准曲线，计算各组分的含量，结果如下：| 组分名称 | 含量（%） || -------- | -------- || 组分1 | 2.5 || 组分2 | 1.8 || 组分3 | 0.9 || 组分4 | 0.5 |3. 误差分析：实验过程中，可能存在以下误差：- 仪器误差：色谱仪、检测器等仪器本身的精度和稳定性对实验结果有一定影响。

- 试剂误差：试剂的纯度和浓度对实验结果有一定影响。

- 操作误差：实验操作不规范、样品处理不当等因素可能导致误差。